家兔小腸平滑肌實(shí)驗(yàn)小腸運(yùn)動形式

家兔小腸平滑肌實(shí)驗(yàn)小腸運(yùn)動形式離體組織灌流方法(了解)保證離體器官存活的條件：

1.2.營養(yǎng)3.PH4.酸堿度5.滲透壓…..目前的離體灌流組織應(yīng)用：

1.家兔離體小腸

2.大鼠、小鼠離體子宮

3.大鼠離體動脈條

4.豚鼠離體氣管條

5.蟾蜍、蛙、大鼠離體心臟

………...實(shí)驗(yàn)原理消化道平滑肌的一般生理特性：收縮遲緩：舒縮運(yùn)動≥20S/次。富有伸展性：伸長可達(dá)原來長度2—3倍。緊張性：常保持一種微弱的持續(xù)收縮狀態(tài)。節(jié)律性收縮：離體后于合適環(huán)境中仍能節(jié)律性收縮。對電刺激不敏感，對化學(xué)、機(jī)械等刺激敏感。小腸平滑肌也具有上述生理特性。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室4實(shí)驗(yàn)原理和背景知識小腸運(yùn)動受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)小腸的運(yùn)動形式緊張性收縮分節(jié)運(yùn)動蠕動移行性復(fù)合運(yùn)動（MMC）體液調(diào)節(jié):胃腸激素如胃泌素、縮膽囊素、促胰液素等神經(jīng)調(diào)節(jié):2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室5實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)哺乳動物類離體小腸平滑肌的制備方法。觀察某些因素（溫度、pH值、藥物）對小腸平滑肌舒縮活動的影響。觀察哺乳動物小腸的運(yùn)動形式以及神經(jīng)和某些藥物對其運(yùn)動的影響。掌握消化道平滑肌的一般生理特性。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室6實(shí)驗(yàn)材料動物：家兔藥品：25%氨基甲酸乙酯、臺氏液、1mol/L鹽酸溶液、1mol/LNaOH溶液、0.001%乙酰膽堿溶液、0.001%去甲腎上腺素溶液、1%氯化鈣溶液器材：恒溫平滑肌實(shí)驗(yàn)裝置、生物信號采集系統(tǒng)、張力換

能器、計(jì)算機(jī)、兔臺及手術(shù)器械2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室72023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室8實(shí)驗(yàn)步驟在體實(shí)驗(yàn)麻醉和固定：稱重，計(jì)算麻藥計(jì)量（4ml/kg的25%氨基甲酸乙酯），耳緣靜脈麻醉，鑒別后固定于兔臺上。腹部手術(shù)：腹部剪毛、自劍突下沿腹部正中線切開腹壁（10cm）。打開腹腔，暴露胃腸道并尋找小腸。用皮鉗夾住兩側(cè)腹壁并提起形成皮兜。觀察：①正常小腸的運(yùn)動形式；②局部滴加乙酰膽堿后小腸的運(yùn)動形式；③局部滴加去甲腎上腺素后小腸的運(yùn)動形式。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室92023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室102023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室11實(shí)驗(yàn)方法離體實(shí)驗(yàn)家兔一只，處死后迅速行腹部手術(shù)。找出胃幽門與十二指腸交界處，由此取長20—30cm的腸管，不留腸系膜。取出腸段置于室溫臺氏液中輕輕漂洗，去除當(dāng)腸內(nèi)容物，將腸管分成數(shù)段，每段長2-3cm，兩端各用系好線的蛙心夾夾住。將離體平滑肌連接于設(shè)定溫度好溫度（38℃）恒溫平滑肌槽、張立換能器（書圖7-1,p121）上。打開電腦和生物信號采集系統(tǒng)。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室12張力換能器蛙心夾浴槽小腸段13離體小腸收縮曲線代表意義收縮曲線：---上升支舒張曲線：---下降支基線上移：緊張性升高基線下降：緊張性下降幅度增加：收縮力增強(qiáng)幅度減低：收縮力減弱波峰間距：代表收縮頻率2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室14實(shí)驗(yàn)步驟離體實(shí)驗(yàn)：觀察離體小腸平滑肌的正常波形觀察pH值對小腸平滑肌的作用：浴槽內(nèi)加1mol/LHCI溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應(yīng)（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。

2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室15觀察項(xiàng)目離體實(shí)驗(yàn)：乙酰膽堿的作用：浴槽內(nèi)加入0.001%的乙酰膽堿溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應(yīng)（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。去甲腎上腺素的作用：浴槽內(nèi)加入0.001%的去甲腎上腺素溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應(yīng)（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。觀察溫度的影響：分別加入室溫臺式液、25℃臺式液，觀察平滑肌的反應(yīng)。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室16注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)過程中必須保證標(biāo)本的供氧(通氣)及浴槽內(nèi)臺氏液的恒溫(38℃)。2.灌流浴槽內(nèi)的液面高度應(yīng)保持恒定。3.放大器零點(diǎn)調(diào)好后不要再移動旋鈕，以免影響基線。上述各藥液加入的量系參考數(shù)據(jù)，效果不明顯者可以添加。4.每次實(shí)驗(yàn)效果明顯后立即放掉含藥液的臺氏液，并沖洗多次，以免平滑肌出現(xiàn)不可逆反應(yīng)。5.每項(xiàng)處理必須有處理標(biāo)記。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室17思考題胃腸平滑肌有哪些運(yùn)動形式以及生理特性本實(shí)驗(yàn)藥品對小腸平滑肌的作用效果及其機(jī)制。取腸時(shí)為什么采用擊昏家兔而不用在麻醉下進(jìn)行?要保持小腸平滑肌較好的活性，實(shí)驗(yàn)過程中要注意什么？制備小腸平滑肌標(biāo)本時(shí)，為什么要取小腸上段，尤其是十二指腸段的平滑?。?023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室18實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析正常NaOHHClAchNA氯化鈣25℃2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室19實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析加入乙酰膽堿，可見收縮的幅度上升，基線抬高，頻率加快。

消化道平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生動作電位的離子基礎(chǔ)是鈣內(nèi)流，ACh--M受體結(jié)合，使鈣通道開放，使肌漿中的鈣升高，進(jìn)而激活肌纖蛋白-肌凝蛋白-ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。故乙酰膽堿對小腸運(yùn)動有加強(qiáng)作用。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室20實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析加入去甲腎上腺素可見收縮的幅度小，基線下移，頻率較慢。消化道平滑肌細(xì)胞上有αβ兩種受體，NA可作用于α受體，使肌膜及肌質(zhì)網(wǎng)上的鉀離子通道開放，鉀的外流增加，使膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性下降，肌張力下降。同時(shí)，NA還作用于β受體，使腸肌膜細(xì)胞中的cAMP合成增加，肌膜及肌質(zhì)網(wǎng)上鈣外流增加，也使肌張力下降。2023/1/12遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理機(jī)能教研室21實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析加入氯化鈣溶液可見小腸平滑肌收縮的幅度增加，基線抬高，頻率加快。

細(xì)胞外液中存在較多的鈣離子