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文檔簡介
副溶血性弧菌的檢驗一、實驗?zāi)康睦斫飧比苎曰【鷮嶒炇覚z驗的意義。掌握副溶血性弧菌的分離培養(yǎng)及生化鑒定方法。試劑氯化鈉瓊脂平板、嗜鹽性瓊脂平板、三糖鐵培養(yǎng)基、鹽胨水培養(yǎng)基、各種生化試驗管器具乳缽、剪刀、鑷子、小鐵銼、酒精燈等二、實驗材料三、實驗步驟分離培養(yǎng)
稱取樣品25g,加225mL3.5%滅菌鹽水,用均質(zhì)器打碎或用乳缽磨碎,接種氯化鈉瓊脂平板和嗜鹽性瓊脂平板各一個,同時取10mL加入100mL增菌液中,放37℃8~16h培養(yǎng)后,涂上述平板進行分離,37℃培養(yǎng)18~24h取出觀察。挑取可疑菌落,轉(zhuǎn)種3.5%氯化鈉三糖鐵斜面,37℃、24h觀察結(jié)果。三、實驗步驟涂片鏡檢將三糖鐵培養(yǎng)基上反應(yīng)可疑者即底層變黃(葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣)、上層斜面不變(乳糖、蔗糖不分解)、有動力、不產(chǎn)生硫化氫,進行革蘭氏染色鏡檢形態(tài)。三、實驗步驟嗜鹽性試驗將上述可疑培養(yǎng)物分別接種不同含量的鹽胨水(0%,3%,7%,10%)于37℃24h培養(yǎng)后觀察生長情況,在無鹽和10%鹽的胨水中不生長,在3%和7%鹽的胨水中生長良好者,繼續(xù)進行下列有關(guān)試驗。三、實驗步驟生化試驗分別接種下列各類生化培養(yǎng)基,葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基紅、靛基質(zhì)、V-P,賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸、硫化氫及溶血性試驗,放37℃培養(yǎng),除V-P、靛基質(zhì)和甲基紅試驗培養(yǎng)48h后加試劑觀察外,其他均在24h觀察結(jié)果。四、結(jié)果判定判定依據(jù):
副溶血性弧菌的生長特性在無鹽的條件下不生長,在含2%~3%氯化鈉的培養(yǎng)基中生長最旺盛,氯化鈉溶液濃度到達10%以上時不繁殖。
四、結(jié)果判定判定依據(jù):染色鏡檢革蘭氏陰性無芽胞桿菌,易呈多形態(tài)有動力;多數(shù)散在,偶而有成對排列運動活潑;兩端濃染,在固體培養(yǎng)條件下能生長周鞭毛。四、結(jié)果判定判定依據(jù):主要生化特性項目結(jié)果項目結(jié)果耐鹽性0%-甲基紅+
7%+靛基質(zhì)+
10%-賴氨酸+葡萄糖產(chǎn)酸+鳥氨酸+/-葡萄糖產(chǎn)氣-精氨酸-蔗糖-溶血性+/-甘露醇+
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