基因工程細胞工程胚胎工程復習

專題一基因工程1、基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達載體的構建將目的基因導入受體細胞目的基因的檢測和鑒定（核心）（三個方法）（三種受體）（三個步驟P14）2、目的基因獲取方法從基因文庫中獲取利用PCR技術擴增目的基因人工合成目的基因3、基因工程用到的工具酶限制酶和DNA連接酶E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶5、基因表達載體的組成啟動子、終止子、目的基因和標記基因4、基因工程用到的運載體質粒（最常用）、λ噬菌體的衍生物和動植物病毒6、導入受體細胞的方法(1)植物細胞雙子葉植物單子葉植物農桿菌轉化法基因槍法(2)動物細胞顯微注射法受體細胞常用：受精卵(3)微生物細胞用Ca2+處理細胞，成為感受態(tài)細胞。基因工程細胞工程（核移植技術）7、成功表達的結果：轉基因小牛合成人的血清白蛋白。專題二細胞工程一、植物細胞工程1、去壁：酶解法（纖維素酶和果膠酶）2、原生質體融合：物理法：電激、振動、離心化學法：聚乙二醇3、融合完成的標志：產生新的細胞壁4、理論基礎：細胞膜的流動性植物細胞的全能性5、意義：克服不同物種間的遠緣雜交不親和障礙。植物組織培養(yǎng)技術脫分化再分化若生產人工種子，則培養(yǎng)到

階段；若提取細胞產品（如紫草素），則一般培養(yǎng)到

階段；如培育新個體，則應該培養(yǎng)到

階段。6、關于植物組織培養(yǎng)技術：植物組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)階段也就不同：胚狀體愈傷組織試管苗下圖為植物體細胞雜交過程示意圖。下列說法不正確的是（

）A.植物體細胞雜交的最大優(yōu)點是可以克服遠緣雜交不親和的障礙B.雜種細胞經過④和⑤過程可以培育成雜種植株說明雜種細胞具有全能性C.盡管愈傷組織可以進行光合作用，但其培養(yǎng)基中仍需要糖類、氨基酸等有機營養(yǎng)D.若A的基因型為Rr，B的基因型為Yy，則最終形成的雜種植株的基因型為RrYyC二、動物細胞工程技術手段動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合動物細胞核移植生產單克隆抗體（基礎）動物細胞培養(yǎng)1、取材：3、組織處理：4、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、接觸抑制剪碎胰蛋白酶或膠原蛋白酶幼齡的動物組織5、培養(yǎng)條件無菌無毒、動物血清、CO22、理論基礎：細胞增殖動物體細胞核移植技術1、取材：卵母細胞原因：卵母細胞體積大，易于操作；含有促使細胞核全能性表達的物質.2、去核方法：顯微操作去核法動物體細胞核移植技術3、理論基礎：動物細胞核的全能性4、生殖方式：無性生殖5、用核移植得到的動物成為克隆動物。1、該過程中使用到了哪些生物技術手段？2、通過該過程可得出什么結論？3、克隆羊的性別與哪只羊相同？為什么？4、克隆羊的性狀主要與哪只羊相同？5、在操作過程中為什么要用去核的卵細胞做受體細胞？6、克隆羊的繁殖過程應屬于哪種方式?轉基因克隆動物動物細胞融合技術（制備單克隆抗體）1、誘導方法：物理方法化學方法生物方法:與植物同滅活的病毒注射抗原B淋巴細胞2、理論基礎：細胞膜的流動性、細胞增殖3、兩次篩選的目的第一次：篩選出雜交瘤細胞第二次：篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞4、雜交瘤細胞的特點既能無限繁殖，又能產生特異性抗體。5、的特點特異性強、靈敏度高，能大量生產（制備）。比較項目

植物細胞工程

動物細胞工程

原理①植物組織培養(yǎng)──細胞全能性

②植物體細胞雜交──細胞的全能性、細胞膜流動性①動物細胞培養(yǎng)──細胞增殖

②體細胞核移植──動物細胞核的全能性

③單克隆抗體的制備──細胞膜的流動性、細胞增殖

④動物細胞融合──細胞膜流動性工具酶纖維素酶、果膠酶胰蛋白酶、膠原蛋白酶動、植物細胞工程技術手段的原理和工具酶如圖表示單克隆抗體的制備過程，請回答下列

問題：（1）細胞A具有產生

的功能。細胞B的突出特點是

。誘導細胞A和B融合的誘導劑通常是

或聚乙二醇。

（2）若細胞A的基因型為AA，細胞B的基因型為BB，生產的目標應該是基因型為

的細胞?？赏ㄟ^特定的

培養(yǎng)基將所需的融合細胞篩選出來。特異性抗體能夠無限增殖滅活的病毒AABB選擇（3）動物細胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，與植物細胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有

。細胞培養(yǎng)應在含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是

。

（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有

等特點。單克隆抗體與抗癌藥物結合制成“生物導彈”，可明顯減少用藥量和副作用，原因是

。

動物血清維持培養(yǎng)液的pH特異性強、靈敏度高，并可大量生產單克隆抗體能夠和癌細胞特異性結合胚胎移植專題三胚胎工程1、卵母細胞的采集注射促性腺激素超數排卵屠宰場卵巢獲取借助儀器從活體卵巢直接吸取需要體外培養(yǎng)不需要體外培養(yǎng)減數第二次分裂中期2、供體和受體的處理供體兩次激素處理超數排卵處理