20 生物化學(xué)實驗-磷鎢酸-鎂沉淀法測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量_第1頁
20 生物化學(xué)實驗-磷鎢酸-鎂沉淀法測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量_第2頁
20 生物化學(xué)實驗-磷鎢酸-鎂沉淀法測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量_第3頁
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文檔簡介

磷鎢酸-鎂沉淀法測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量【目的】作方法。．了解測定血清高密度脂蛋白膽固醇含量的臨床意義。【原理】成的難易程度與脂蛋白分子中蛋白質(zhì)/脂類的比例有關(guān)，比值愈小、脂類含量CM、VLDLLDLHDL顯色法與同樣處理過膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比色后，求得血清中HDL-ch的含量?！酒鞑摹浚?22型分光光度計．離心機(jī)和離心管．中號試管．刻度吸量管．微量移液器【試劑】．磷鎢酸鈉-鎂溶液4g溶于50ml1mol/LNaOH16ml100ml，調(diào)至pH為7.6。取此液40ml2mol/LMgCl210ml100ml。．鄰苯二甲醛溶液（1）（0.1g/dl稱取鄰苯二甲醛100mg溶于100ml置棕色瓶內(nèi)保存。（2）（5mg/dl取儲存液50ml20ml1000ml。置棕色瓶內(nèi)。．濃硫酸（A·R）．生理鹽水．膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液（40mg/dl）稱取膽固醇40mg溶于100ml冰乙酸中?！静僮鳌浚瓾DL的分離1支（9×70mm），加入0.2ml0.05ml磷鎢酸鈉-鎂溶102500r/min離心10CMLDLVLDLHDL。．HDL-ch含量的測定取試管3支，標(biāo)明空白管、標(biāo)準(zhǔn)管及測定管，按下表操作。試劑（ml）空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管含HDL的上清液--0.05膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液-0．05-生理鹽水0．05--鄰苯二甲醛溶液2．52．52．5濃硫酸1．51．51．5將各管液混勻后，于550nm波長處，以空白管調(diào)0，進(jìn)行比色，分別讀取并記錄各管吸光度值?！居嬎恪垦錒DL-ch（mg/dl）＝血清HDL-ch（mmol/L）＝正常值：45～90mg/dl或1.17～2.33mmol/L【注意事項】．加濃硫酸時需將試管斜置，沿管壁加入，注意安全。145～90mg/dl或1.17～2.33mmol/L。【思考題】1．磷鎢酸-

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