第九章維生素類藥物的分析

第九章維生素類藥物的分析第一節(jié)概述維生素：是維持人體正常代謝機(jī)能所必需的微量營養(yǎng)物資。人體不能合成維生素。VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、葉酸、煙酸、煙酰胺VitMVitPP-H維生素A醇-COCH3維生素A醋酸酯-COC15H31維生素A棕櫚酸酯R:第二節(jié)維生素A為一個具有共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、具有UV吸收存在多種立體異構(gòu)化合物VitA2VitA3易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)鯨醇△或有金屬離子存在時(shí)氧化↑共軛多烯側(cè)鏈易被氧化（二）（三）與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)CHCl3溶解性（四）不溶于水易溶于有機(jī)溶劑和植物油等三氯化銻反應(yīng)（一）條件無水無醇CHCl3鑒別二、（BP（1998））λmax為326nm一個吸收峰UV法（二）λmax為350～390nm三個吸收峰USP顯色劑磷鉬酸規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值BP雜質(zhì)對照品法顯色劑三氯化銻TLC法（三）立體異構(gòu)體氧化產(chǎn)物及光照產(chǎn)物合成中間體去氫維生素A（VitA2）去水維生素A（VitA3）UV法（一）含量測定三、三點(diǎn)校正法1.條件：（1）雜質(zhì)的吸收在310~340nm波長范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長的增大吸收度減??；（2）物質(zhì)對光的吸收具有加和性。2.波長的選擇：（1）1

VitA的max（328nm）（2）23

分別在1的兩側(cè)各選一點(diǎn)測定對象VitA醋酸酯第一法等波長差法第二法等吸收度法(皂化法)測定對象VitA醇測定法（1）基本步驟:第一步A選擇選擇依據(jù)：所選A值中雜質(zhì)的干擾已基本消除注意：

C為混合樣品的濃度第二步求第三步求效價(jià)換算因數(shù)由純品計(jì)算而得：第四步：求標(biāo)示量％方法：（2）

第一法維生素A醋酸酯判斷是否在326～329nm之間在326～329nm之間改用第二法是否求算并與規(guī)定值比較

規(guī)定值差值

判斷差值是否超過規(guī)定值的有一個以上超過無超過

計(jì)算A328（校正）

用A328計(jì)算03%－15%－3%第二法第二法VitAD膠丸中VitA的含量測定

精密稱取本品(規(guī)格10000VitAIU/丸)裝量差異項(xiàng)下（平均裝量0.08262g/丸）的內(nèi)容物0.2399g至250ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻。以環(huán)己烷為空白，測定最大吸收波長為328nm，并在下列波長處測得吸收度為A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299求本品中維生素A的含量？A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.833A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====適用于維生素A醇（等吸收度法）第一法無法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法[皂化法、6/7A法]（3）第二法水溶性脂溶性判斷max是否在323～327nm之間取未皂化樣品采用色譜法純化后再測定計(jì)算是否判斷A300/A325是否大于0.73是否取未皂化樣品采用色譜法純化后再測定計(jì)算A325(校正)03%－3%三氯化銻比色法（二）優(yōu)點(diǎn)簡便快速λmax618nm～620nm標(biāo)準(zhǔn)曲線法缺點(diǎn)呈色不穩(wěn)定（5~10s內(nèi)）水分干擾與標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差≤1℃專屬性差三氯化銻有腐蝕性苯并－二氫吡喃醇第三節(jié)維生素E

名稱R1R2相對活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***生物效價(jià)右旋體：消旋體=1.4：10（天然品）（合成品）dl－α－生育酚醋酸酯結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、苯環(huán)+二氫吡喃環(huán)+飽和烴鏈1、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水2、UV3、酯鍵易水解△75℃15′（一）硝酸反應(yīng)橙紅色鑒別二、（橙紅色）生育紅生育酚HNO3強(qiáng)氧化劑取本品約30mg，加無水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，搖勻，在75℃加熱15分鐘，溶液應(yīng)顯橙紅色。三氯化鐵－聯(lián)吡啶反應(yīng)△[O]（二）=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%無水乙醇中UV法（三）薄層板硅膠G展開劑環(huán)己烷-乙醚（4：1）顯色劑硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7TLC法（四）游離生育酚硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黃→灰紫）利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰檢查

三、原理（一）試劑（二）（M生育酚=430.8）例取本品0.10g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸鈰液（0.01mol/L）不得過1.0ml。四、含量測定GC法（一）GC特點(diǎn)1、選擇性好靈敏度高速度快分離效能好載氣→N2固定液→硅酮（OV-17）擔(dān)體→硅藻土或高分子多孔小球柱溫→265℃檢測器→氫火焰離子化檢測器(FID)內(nèi)標(biāo)→正三十二烷n≥500R≥2VitE測定的色譜條件2、內(nèi)標(biāo)法加校正因子氨基嘧啶環(huán)－CH2－噻唑環(huán)(季銨堿)第四節(jié)維生素B1HClCl-（一）溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性（二）UV共軛雙鍵λmax=246nm結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、嘧啶環(huán)——伯氨噻唑環(huán)——季銨1、可與酸成鹽2、與生物堿↓→↓3、含量測定——非水堿量法（三）硫色素反應(yīng)（四）堿性ChP鑒別試驗(yàn)二、（一）硫色素反應(yīng)VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反應(yīng)S元素反應(yīng)Cl-反應(yīng)（三）其他反應(yīng)三、含量測定喹那啶紅－亞甲藍(lán)（紫紅→天藍(lán)）（一）非水溶液滴定法UV法（二）片劑、注射劑=421（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=A=ECLChPNaOH（三）硫色素?zé)晒夥ㄔ?、第五節(jié)維生素CL－抗壞血酸1、易溶于水2、水溶液呈酸性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、（一）溶解性二烯醇結(jié)構(gòu)二酮基結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)（二）強(qiáng)還原性△糖類的顯色反應(yīng)50℃結(jié)構(gòu)與糖類相似（三）具糖的性質(zhì)C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.57酸性（四）一元酸L(+)－抗壞血酸活性最強(qiáng)手性C（C4、C5）（五）光學(xué)活性**與堿反應(yīng)（六）水解反應(yīng)與氧化劑的反應(yīng)（一）鑒別試驗(yàn)二、1、與AgNO3反應(yīng)2、與2，6-二氯靛酚反應(yīng)(ChP2000)氧化型玫瑰紅色還原型藍(lán)色OHˉ(ChP2000)3、與堿性酒石酸銅反應(yīng)USP4、與KMnO4反應(yīng)糖類的反應(yīng)（二）或鹽酸50℃吡咯USPUV（三）BP0.01mol/LHCl指示劑淀粉指示液原理1、碘量法（一）含量測定三、H+取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6方法2、（1）酸性環(huán)境d.HCl（2）新沸冷H2O減慢VitC被O2氧化速度討論4、（3）立即滴定趕