第八章對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析wydps

本章內(nèi)容第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第二節(jié)鑒別試驗第三節(jié)特殊雜質(zhì)的檢查第四節(jié)含量測定第五節(jié)體內(nèi)藥物分析（自學(xué)）中間連接功能基親水性胺基酯鍵——對氨基苯甲酸酯類它是一類能在用藥部位局部可逆性地阻斷感覺神經(jīng)沖動發(fā)生與傳導(dǎo)的藥物。局麻藥物局麻藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)親脂性芳香環(huán)概述酰胺鍵——酰苯胺類第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、對氨基苯甲酸酯類藥物的結(jié)構(gòu)與典型藥物芳胺類藥物分為兩類芳伯氨基被?；疾被幢蝗〈?、基本結(jié)構(gòu)與典型藥物對氨基苯甲酸酯母體2.典型藥物苯佐卡因(benzocaine)鹽酸普魯卡因(procainehydrochloride)鹽酸氯普魯卡因(chloroprocainehydrochloride)苯環(huán)沒有羥基取代，中樞作用加強α位有烴基，

α-C為手性C鹽酸丁卡因(tetracainehydrochloride).鹽酸普魯卡因胺與鹽酸普魯卡因的化學(xué)結(jié)構(gòu)僅存在羧酸酯與酰胺的差異,化學(xué)性質(zhì)與本類藥物很相似,因此一并討論酰胺類二、酰苯胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與典型藥物（一）本類藥物均系苯胺的?；苌?，其結(jié)構(gòu)共性是具有芳酰氨基，結(jié)構(gòu)通式為：NHCO?；}酸布比卡因鹽酸利多卡因鹽酸羅哌卡因鹽酸妥卡尼對乙酰氨基酚（撲熱息痛）醋氨苯砜三、理化性質(zhì)1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反應(yīng)；芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等。鹽酸丁卡因無此特性。2.水解特性：分子結(jié)構(gòu)中的酯鍵或酰胺鍵易水解，除鹽酸丁卡因外水產(chǎn)物為對丁基苯甲酸外，上述均為對氨基苯甲酸。3.弱堿性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的側(cè)鏈，故具有弱堿性。4.與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可與Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。5.吸收光譜特性：對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物分子結(jié)構(gòu)中均含有苯環(huán)及相應(yīng)的取代基與脂肪胺側(cè)鏈，具有特征的紫外吸收光譜和紅外光譜行為。6.其它特性：因結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基或同時具有脂烴胺側(cè)鏈，其游離堿多為堿型油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽則易溶于水，難溶于有機溶劑。第二節(jié)鑒別試驗(identification)一、重氮-偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應(yīng)。Ar-NH2HClNaNO2重氮鹽OH--萘酚橙黃~猩紅色生成偶氮染料

直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺、對氨基水楊酸鈉等間接反應(yīng)：對乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯

但鹽酸利多卡因、鹽酸布比卡因由于它們的空間位阻效應(yīng)，很難發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。1.苯佐卡因和鹽酸普魯卡因ChP（2010）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

丁卡因雖無芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液中可與NaNO2反應(yīng)生成N－亞硝基化合物的乳白色沉淀。

1.與銅和鈷離子反應(yīng)：（芳酰氨的特征）

利多卡因與硫酸銅生成藍紫色配位化合物，該有色物質(zhì)溶入氯仿顯黃色；與氯化鈷生成亮綠色細小鈷鹽沉淀。二、與金屬離子反應(yīng)2.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)基于普魯卡因胺分子中的

芳酰胺結(jié)構(gòu)。芳酰胺羥肟酸3.與汞離子反應(yīng)鹽酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黃色對氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2紅色或橙黃色三、水解反應(yīng)1.鹽酸普魯卡因的鑒別

鹽酸普魯卡因+NaOH普魯卡因油狀物對氨基苯甲酸鈉+二乙氨基乙醇（使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變蘭色）對氨基苯甲酸鈉+HCl對氨基苯甲酸（白色）（白色沉淀）2.苯佐卡因的鑒別

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭氣，黃色沉淀）四、制備衍生物測定熔點

1.三硝基苯酚衍生物的制備：鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因黃色沉淀黃色沉淀

2.硫氰酸鹽衍生物的制備：鹽酸丁卡因

強酸制弱酸五、與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)(Rimini試驗)

重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基重酒石酸間羥胺水溶解亞硝基鐵氰化鈉試液丙酮(無甲醛)數(shù)滴，碳酸氫鈉少量△紅紫色Rimini反應(yīng)例子六、UV1.在λmax處測定供試液的吸光度。

例如：鹽酸布比卡因在0.01mol/L%鹽酸中于λmax=263nm和λmax=271nm測定最大吸收，其吸光度分別為0.53～0.58與0.43～0.48

2.在規(guī)定的濃度測定λmax

例如：醋氨苯砜5μg/ml;在λmax=256nm;284nm處有最大吸收。

鹽酸普魯卡因ChP（2010）

鹽酸普魯卡因胺[鑒別]（3）本品的紅外光吸收圖譜與對照的圖譜一致。見書P244七、IR第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

(Detectionofspecificimpurities)一、鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查怎樣檢查？采用HPLC進行檢查。雜質(zhì)來源：水解產(chǎn)生、脫羧、氧化流動相：磷酸二氫鉀-甲醇=68:32檢測波長：279nm二、鹽酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺的檢查采用HPLC進行檢查。三、鹽酸羅哌卡因光學(xué)純度的檢查鹽酸羅哌卡因有兩種對映體，一個是R構(gòu)型，一個是S構(gòu)型。其中R-鹽酸羅哌卡因?qū)π呐K毒性大，要限制其含量，其限量是0.5%。采用CE進行檢查。毛細管電泳系統(tǒng)組成單元1.分離通道毛細管；2.分離驅(qū)動力高壓直流電源；3.毛細管控溫裝置；4.檢測器及工作站。毛細管電泳分離原理

對于帶同類電荷的分離對象，因其具有不同荷質(zhì)比而被分離?？梢杂孟聢D進行說明（電滲流反向的動態(tài)圖）：毛細管電泳分離原理在本藥品中因為左旋和右旋的遷移時間不一樣而被分離采用了手性固定性第四節(jié)含量測定(Assay)一、亞硝酸鈉滴定法Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法。即：具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定。

Ch.P2010中的苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。還原1.原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的藥物，在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氨鹽。用永停滴定法指示終點。Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O測定主要條件：(1)加KBr增加反應(yīng)速度重氮化的反應(yīng)歷程為：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl氯化亞硝酰Ar-NH2Ar-NH-NONO+Cl-慢快Ar-N=N-NO快Ar-N2+Cl-加入KBr后：KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反應(yīng)速度溴化亞硝酰若供試溶液中僅有鹽酸，則生成NOClHNO2+HClNOCl+H2O氯化亞硝酰KHCl

(2)加過量HCl加速反應(yīng)：

①重氮化速度加快；

②重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-ArAr-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩爾比為Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。(3)室溫條件下滴定:

溫度高反應(yīng)速度快；每升高10℃加快2.5倍但太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定3.指示終點的方法(實驗裝置見書P250)

(1)永停滴定法溶液檢流計

終點前：無過量無電流HNO2

終點時：有過量有電流（使指針偏離零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示劑法用KI-淀粉指示劑指示終點的原理：2NaO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OVV（3）內(nèi)指示劑法

中性紅不可逆指示劑（3）內(nèi)指示劑法

中性紅不可逆指示劑(4)電位法何所謂永停滴定法

永停滴定法又稱死停滴定法（dead-stoptitration）(死停終點法)，是把兩個相同的鉑電極（或者其他金屬電極）插入滴定溶液中，在兩個電極之間外加一小電壓,觀察滴定過程中通過兩個電極間的電流突變，根據(jù)電流的變化情況確定滴定終點。

它是氧化還原滴定和電位分析的完美結(jié)合。永停滴定法裝置簡單，準確度高，確定終點方法簡便。價錢便宜、量又足，我們一直都用它永停滴定法的特點永停滴定法的原理

若溶液中同時存在某氧化還原對的氧化型及其對應(yīng)的還原型物質(zhì)，在此溶液中插入鉑電極，按照Nernst方程式，鉑電極將反映出I2/I-電對的電極電位。CompanyLogo鉑鉑（10~200mV）I2I-鉑鉑

像I2/I-這樣的電對，于雙鉑電極構(gòu)成電池，給一很小的外加電壓時就能發(fā)生電解反應(yīng)，稱為可逆電對。若溶液的電對是S4O62-/S2O32-

,同樣插入兩支鉑電極，同樣給一很小的外加電壓，但并沒有電解反應(yīng)發(fā)生，這種電對叫做不可逆電對。只有當(dāng)兩個鉑電極之間的外加電壓很大時，由于發(fā)生其他電極反應(yīng)才發(fā)生電解。電對的分類1.不可逆滴定可逆2.可逆滴定不可逆3.不可逆滴定不可逆CompanyLogo鉑鉑（10~15mV）鉑鉑Na2S2O3

I2

在等當(dāng)點前溶液中存在I2及I-離子，有電流通過兩極，等當(dāng)點后溶液中只有S4O62-/S2O32-及I-，無電解反應(yīng)發(fā)生，電流降到最低點并停滯不動。滴定過程中的電流變化如圖所示。不可逆滴定可逆不可逆滴定可逆(1)、（2）發(fā)生電解，則有電流通過。電流的大小取決于濃度低的那個形態(tài)，當(dāng)氧化型和還原型的濃度相等時，電流最大。CompanyLogo鉑鉑Na2S2O3鉑鉑I2在等當(dāng)點前溶液中只有S4O62-/S2O32-不可逆電對,雖然有外加電壓，電極上也不能發(fā)生電解反應(yīng)。達到等當(dāng)點并稍過量一點I2后，因溶液中存在I2/I-可逆電對的兩者，電極上發(fā)生電解反應(yīng)，有電流通過電極，電流計發(fā)生偏轉(zhuǎn)，說明達到終點。過等當(dāng)點后隨著I2濃度的逐漸增加，電解點列也逐漸增大。滴定過程中的電流變化情況如圖所示。（10~15mV）可逆滴定不可逆CompanyLogo鉑鉑Fe2+鉑鉑

繼續(xù)加入Ge4+離子，F(xiàn)e2+離子濃度逐漸下降；電流也逐漸下降；達到終點時電流降至最低點。加入過量的Ge4+離子時，由于溶液中共存有Ge4+和Ge3+這一可逆電對，電流又開始上升。Ge4+（10~15mV）不可逆滴定不可逆開始滴定前溶液中只有Fe2+離子，因無Fe3+離子存在，陰極上不可能有還原反應(yīng)發(fā)生，所以無電解反應(yīng)發(fā)生，無電流通過。當(dāng)Ge4+離子不斷滴入時，F(xiàn)e3+離子不斷增加，因Fe3+/Fe2+可逆，電流不斷增加；當(dāng)[Fe2+]=[Fe3+]時，電流達最大值；二、非水滴定法(non-aqueoustitrimetry)弱堿性高氯酸非水滴定注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氫鹵酸的干擾指示劑：結(jié)晶紫指示劑：萘酚苯甲醇鹽酸丁卡因鹽酸利多卡因側(cè)鏈烴胺的叔胺氮側(cè)鏈哌啶環(huán)的叔胺氮鹽酸布比卡因鹽酸丁卡因－加醋酐以突出終點鹽酸布比卡因的含量測定：取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸20ml與醋酐20ml溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于32.49mg的C18H28N2O.HCl.滴定時反應(yīng)過程如下：含量計算公式：三、紫外分光光度法1.對鹽酸丁卡因的含量測定

根據(jù)朗伯比爾定律計算其含量。（P250-251,鹽酸丁卡因的含量測定）四、HPLC此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測定。因該注射液中常含有降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸；可以苯甲酸為內(nèi)標同時測定兩者的含量，該法簡單準確。色譜條件：色譜柱為μBondapakC18300mm×4mm

流動相為甲醇－1％HAc(40:60);UV檢測器250nm.掌握苯乙胺類藥物的結(jié)構(gòu)性質(zhì)；主要苯乙胺類藥物的鑒別、檢查和含量測定的原理和特點。熟悉主要苯乙胺類藥物雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法與含量限度。課后小結(jié)541.ChP（2010）亞硝酸鈉滴定法測定對氨基水楊酸鈉的含量時，指示滴定終點的方法為（）A.自身指示終點法B.電位法指示終點C.永停滴定法D.氧化還原指示劑法E.酸堿指示劑法

552.以下那種藥物中應(yīng)檢查對氨基苯甲酸（）A.鹽酸普魯卡因B.鹽酸普魯卡因胺C.注射用鹽酸普魯卡因D.鹽酸普魯卡因胺片E.鹽酸普魯卡因注射液

563．下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量者（）A.乙酰水楊酸B.對氨基水楊酸鈉C.對乙酰氨基酚D.普魯卡因E.苯佐卡因

574.亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+·Br

C.生成HBrD.生成Br2E.抑制反應(yīng)進行

5．中國藥典所收載的亞硝酸鈉滴定法中指示終點的方法為（）A.電位法B.永停法C.外指示劑法D.內(nèi)指示劑法E.自身指示劑法

596.鹽酸普魯卡因胺常用的鑒別反應(yīng)有（）A.重氮化—偶合反應(yīng)B.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)C.氧化反應(yīng)D.磺化反應(yīng)E.碘化反應(yīng)

607．采用亞硝酸鈉法測定含量的藥物有（）A.苯巴比妥B.鹽酸丁卡因C.苯佐卡因D.鹽酸普魯卡因E.鹽酸去氧腎上腺素

618．亞硝酸鈉滴定法中，可用于指示終點的方法有（）A.自身指示劑法B.內(nèi)指示劑法C.永停法D.外指示劑法E.電位法

629.鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測定含量時的反應(yīng)條件是（）A.強酸B.加入適量溴化鉀C.室溫（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示終點

練習(xí)與思考[A型題]1．鹽酸普魯卡因注射液中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.間氨基酚C.水楊酸D.對氨基苯甲酸E.氨基酚2．對乙酰氨基酚中檢查的特殊雜質(zhì)是A.水楊醛B.