衛(wèi)生及微生物知識(shí)培訓(xùn)_第1頁(yè)
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衛(wèi)生及微生物知識(shí)培訓(xùn)根本要求制藥廠的所有工作人員,特別是干凈區(qū)域內(nèi)的工作人員〔包括維修、輔助人員〕都應(yīng)定期進(jìn)展衛(wèi)生和微生物學(xué)根底知識(shí)、干凈作業(yè)等方面的培訓(xùn)及考核;對(duì)于需要進(jìn)入干凈室〔區(qū)〕的臨時(shí)外來(lái)人員也應(yīng)進(jìn)展指導(dǎo)和監(jiān)視。微生物的定義微生物的定義: 存在于自然界中的一群體型細(xì)小、構(gòu)造簡(jiǎn)單、肉眼看不見(jiàn),必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物。微生物的定義 按其構(gòu)造、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為以下幾大類:原核類: 僅有原始核質(zhì),無(wú)核仁或核膜,細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體。微生物的定義真核類: 細(xì)胞核的分化程度較高,有核膜、核仁和染色體,細(xì)胞器完整。如真菌〔酵母菌和霉菌〕、原生動(dòng)物、藻類。非細(xì)胞類: 體積微小,能通過(guò)除菌過(guò)濾器。如病毒和朊病毒等。微生物的定義按微生物對(duì)人類的致病性,可以分為兩類:病原性微生物:

病原微生物是指可以侵犯人體,引起感染甚至傳染病的微生物,或稱病原體,以細(xì)菌和病毒的危害性最大。微生物的定義按微生物對(duì)人類的致病性,可以分為兩類:非病原性微生物:

非病原性微生物指不會(huì)侵犯人體,不會(huì)引起感染等疾病的微生物。在我們體內(nèi)其實(shí)存在著很多微生物,我們?nèi)祟惢ダ采H缒c道中很多微生物,它們幫助我們消化食物,而我們給它們提供生活環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)等。微生物的特點(diǎn)個(gè)體?。何⑸镆话阈∮?.1mm,肉眼不可見(jiàn)。分布廣,種類多〔目前的超過(guò)10萬(wàn)種〕: 在自然界中到處都有,如水、空氣、土壤等,其中在土壤中的數(shù)量最多。代謝強(qiáng),轉(zhuǎn)化快: 發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時(shí)內(nèi)可分解其自重1000~10000倍的乳糖。微生物的特點(diǎn)生長(zhǎng)旺,繁殖快:

微生物有驚人的繁殖速度,大多數(shù)微生物幾分鐘到幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代。適應(yīng)性強(qiáng),易變異:

由于細(xì)菌的適應(yīng)性極強(qiáng),并且能產(chǎn)生變異,原有的抗生素就不能發(fā)揮作用,這就是人們常說(shuō)的細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性的原因。微生物的特點(diǎn)葡萄球菌

酵母菌〔芽痕〕棒狀桿菌大腸桿菌弧狀菌鏈球菌一些常見(jiàn)的微生物的形態(tài)微生物的分布土壤:

在土壤中,由于溫度與濕度適中,富含微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),是微生物生活最適宜的環(huán)境,在土壤中微生物的種類與數(shù)量最多。水:

是僅次于土壤的微生物分布、定居場(chǎng)所。微生物的分布空氣:

空氣中的微生物主要來(lái)源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵,這類微生物大多數(shù)是腐生性的,還來(lái)源于人和動(dòng)物,它們大多數(shù)是通過(guò)呼吸道排出的,其中也包含有病原微生物,懸浮在大氣中。微生物的分布 由于空氣中的微生物不是以微生物的獨(dú)立形態(tài)存在,而是由微生物菌體及孢子與灰塵抱團(tuán),懸浮在大氣中,這也就是為什么在藥品生產(chǎn)過(guò)程中,我們需要建立干凈房間的原因,當(dāng)空氣的干凈度〔塵埃粒子數(shù)〕符合要求時(shí),也就控制了微生物數(shù)量,就能保證產(chǎn)品的質(zhì)量。微生物的分布人體中的微生物 人在出生以后,自然界中的微生物就逐漸進(jìn)入人體。在正常人體皮膚、粘膜及與外界相通的各種腔道〔如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道〕等部位,存在著對(duì)人體無(wú)害的微生物群,包括細(xì)菌、真菌、螺旋體等,這些都稱為正常菌群,這些菌群保證了人類的生存。微生物的分布人體中的微生物 能使宿主〔人或動(dòng)物〕感染致病的細(xì)菌稱為致病菌或病原菌,不能造成宿主感染致病的為非致病菌或非病原菌。有些細(xì)菌在正常情況下并不使宿主致病,但當(dāng)在某些條件改變的特殊情況下可以致病,這類菌稱為條件致病菌或時(shí)機(jī)致病菌。微生物的作用及危害微生物的作用

絕大多數(shù)微生物對(duì)人和動(dòng)物是有益的,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè),發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。例如與我們?nèi)粘I蠲芮邢嚓P(guān)的如生產(chǎn)酸奶、酒類,在制藥工業(yè)中生產(chǎn)抗生素、疫苗等。微生物的作用及危害微生物的危害 微生物中也有一局部能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害,這些具有致病性的微生物,稱為病原微生物。 如人類的許多傳染病〔感冒、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等〕,都是由病原微生物引起的。微生物的作用及危害微生物的危害

從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)要求而言,微生物對(duì)藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染,往往是造成生產(chǎn)失敗、產(chǎn)品不合格的重要因素。

微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、構(gòu)造簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌,以二分裂〔一分為二,二分為四,以此類推〕方式無(wú)性繁殖的原核微生物,分布非常廣泛;細(xì)菌的體型非常小,一般需要借助于高倍顯微鏡或電子顯微鏡才能觀察到。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造細(xì)菌的形態(tài)與構(gòu)造:球菌: 多數(shù)球菌直徑在1微米左右,外觀呈球形或近似球形,由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式,分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造葡萄球菌微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造四聯(lián)球菌微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造桿菌:

桿菌的形態(tài)多數(shù)呈直桿狀,也有的菌體稍彎,多數(shù)呈分散存在,也有的呈鏈狀排列,分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。

微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造與球菌不同,桿菌的大小、長(zhǎng)短、粗細(xì)很不一致。炭疽芽胞桿菌3~10μm大中大腸埃希菌2~3μm小布魯菌0.6~1.5μm微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造兩端齊平炭疽芽胞桿菌兩端尖細(xì)白喉棒狀桿菌桿菌的形態(tài)多樣微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造分枝桿菌雙歧桿菌桿菌的形態(tài)多樣微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造螺形菌:

螺形菌的菌體彎曲,呈弧形或螺旋形,如幽門(mén)螺桿菌。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造螺形菌弧菌螺菌螺桿菌微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造細(xì)菌雖然很小,仍然具有一定的細(xì)胞構(gòu)造和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種都有,是細(xì)菌的根本構(gòu)造。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造 真菌是一類有細(xì)胞壁,無(wú)葉綠素,以寄生或腐生方式生存,能進(jìn)展無(wú)性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類:

單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形,這一類被稱為酵母菌;

多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成,并交織成團(tuán),稱絲狀菌或霉菌。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造 真菌最適宜的生長(zhǎng)溫度為22~28℃,最適宜的pH值為4~6。其繁殖能力強(qiáng),但生長(zhǎng)速度比細(xì)菌慢,常需1~4周才形成菌落。真菌對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng),一般加熱至60~70℃,1小時(shí)即被殺死,但對(duì)枯燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力,但對(duì)2.5%碘酒、10%甲醛那么較敏感。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造3.病毒

病毒屬非細(xì)胞型微生物,在自然界分布非常廣泛,可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造 病毒是體積最小、構(gòu)造最簡(jiǎn)單的一類微生物,往往需要借助于電子顯微鏡才能觀察到,它僅有一種核酸〔DNA-脫氧核糖核酸或RNA-核糖核酸〕作為其遺傳物質(zhì)。 病毒必須在宿主活的細(xì)胞內(nèi)寄生,依靠宿主的細(xì)胞提供的能量、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制,完成病毒的復(fù)制過(guò)程。微生物的類群和形態(tài)構(gòu)造 病毒與人類的關(guān)系極為密切,人類的傳染病大約有75%是由病毒所引起的。有些病毒傳染性強(qiáng),可引起世界大流行〔如流感、艾滋病等〕,并且病毒的變異極快。熱原與內(nèi)毒素 “熱原〞系指由微生物產(chǎn)生的能引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的致熱物質(zhì)。它包括細(xì)菌性熱原、內(nèi)源性高分子熱原、內(nèi)源性低分子熱原及化學(xué)熱原等。 對(duì)于制藥公司生產(chǎn)產(chǎn)品所指的“熱原〞,主要是指細(xì)菌性熱原,它是由某些細(xì)菌的代謝產(chǎn)物、細(xì)菌尸體及內(nèi)毒素所構(gòu)成。熱原與內(nèi)毒素 “熱源〞致熱能力最強(qiáng)的是革蘭氏陰性桿菌的代謝產(chǎn)物,其次是革蘭陽(yáng)性桿菌類,革蘭陽(yáng)性球菌那么較弱,霉菌、酵母菌、甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。熱原與內(nèi)毒素 細(xì)菌內(nèi)毒素一般指革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造成分,主要是脂多糖。 從以上的描述可見(jiàn)我們可以看出熱源與內(nèi)毒素的區(qū)別,熱原包含內(nèi)毒素,所以熱原的范圍更大。 細(xì)菌內(nèi)毒素生物學(xué)活性可分為兩類:一是致病作用,一是保護(hù)性反響。細(xì)菌內(nèi)毒素的特點(diǎn)1.耐熱性:120℃加熱4h,可以破壞98%,180℃加熱2h或250℃加熱30min,才可以徹底破壞。2.濾過(guò)性:由于其體積小,約在1~5nm之間,所以能通過(guò)各種過(guò)濾器進(jìn)入濾液中。熱原與內(nèi)毒素細(xì)菌內(nèi)毒素的特點(diǎn)3.具有水溶性及不揮發(fā)性。4.能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和氧化劑破壞。

由于細(xì)菌內(nèi)毒素具有上述特點(diǎn),在藥品生產(chǎn)過(guò)程中,需要特別注意細(xì)菌內(nèi)毒素對(duì)產(chǎn)品的污染,一旦產(chǎn)品被污染,細(xì)菌內(nèi)毒素將很難除去。熱原與內(nèi)毒素?zé)嵩础布?xì)菌內(nèi)毒素〕引入的途徑: 從溶劑中帶進(jìn)〔主要是水,在水中往往存在細(xì)菌和細(xì)菌內(nèi)毒素,在一般情況下,有機(jī)溶劑中細(xì)菌無(wú)法生存,也就不會(huì)產(chǎn)生熱源〕; 從原料中帶進(jìn); 沉著器、用具、管道和設(shè)備設(shè)施等帶進(jìn); 制備過(guò)程中的污染。熱原與內(nèi)毒素?zé)嵩c內(nèi)毒素消除細(xì)菌內(nèi)毒素的方法:

高溫破壞法:可用180℃干烤3~4h或250℃干烤30min;

吸附法:一般選用活性炭;

蒸餾法:此法僅限于制備蒸餾水;

化學(xué)酸堿和氧化法;

離子交換法;

熱原與內(nèi)毒素消除細(xì)菌內(nèi)毒素的方法: 反滲透法; 凝膠過(guò)濾法; 超濾法。 在生產(chǎn)實(shí)踐活動(dòng)中,采用比較多的方法是高溫破壞法、吸附法、蒸餾法、化學(xué)酸堿法和氧化法。熱原與內(nèi)毒素 在藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)〔GMP〕條件下,藥品生產(chǎn)的質(zhì)量控制一般可以承受的觀點(diǎn)是:不存在細(xì)菌內(nèi)毒素意味著不存在熱原,所有在實(shí)際制定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量檢驗(yàn)中,往往檢測(cè)產(chǎn)品的細(xì)菌內(nèi)毒素。消毒與滅菌我們平時(shí)都習(xí)慣所消毒滅菌,實(shí)際上消毒與滅菌是兩個(gè)不同的概念。以下術(shù)語(yǔ)常用于表示物理或化學(xué)方法對(duì)微生物的殺滅程度:消毒: 殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌的芽胞,消毒所用的試劑稱為消毒劑。消毒與滅菌抑菌:

抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖,常用的抑菌劑為各種抗生素,可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。滅菌:

殺滅物體上所有微生物的方法;滅菌比消毒要求高,包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。消毒與滅菌芽孢:

芽孢是細(xì)菌的休眠體,在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營(yíng)養(yǎng)態(tài)細(xì)胞;

一般的芽孢在普通的條件下可保存幾年至幾十年的生存能力;目前世界上發(fā)現(xiàn)的最古老的芽孢至今已有億年。消毒與滅菌 芽孢對(duì)熱力、枯燥、輻射、化學(xué)消毒等常規(guī)理化因素有極為強(qiáng)大的抵抗力;殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。消毒與滅菌防腐:

防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法,而細(xì)菌一般不死亡;同一種化學(xué)試劑在高濃度時(shí)是消毒劑,低濃度時(shí)一般可以作為防腐劑。無(wú)菌:

即不存在活的細(xì)菌;防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù),稱為無(wú)菌操作。消毒與滅菌無(wú)菌: 不存在活的生物〔GMP指南〕 “無(wú)菌〞從定義上來(lái)說(shuō)應(yīng)該是一個(gè)絕對(duì)的概念,但遺憾的是,在科學(xué)和技術(shù)高度開(kāi)展的今天,要做到絕對(duì)無(wú)菌是不可能的,也無(wú)法加以證實(shí)。因此,從藥品的平安性出發(fā)要求人們?cè)O(shè)定無(wú)菌的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。消毒與滅菌美國(guó)FDA、歐洲制藥工業(yè)界曾將百萬(wàn)分之一微生物污染率作為滅菌產(chǎn)品“無(wú)菌〞的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn),它和蒸汽滅菌后產(chǎn)品中微生物存活的概率為10-6相符,這一標(biāo)準(zhǔn)如今已為世界各國(guó)普遍承受和采用。消毒與滅菌1.物理滅菌方法 熱力滅菌法; 輻射殺菌法; 濾過(guò)除菌法; 超聲波殺菌法; 枯燥與低溫抑菌法。消毒與滅菌熱力滅菌法:

使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán),細(xì)胞膜溶解,導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。干熱滅菌法:

采用灼燒或干熱空氣滅菌,使用方便,適用于玻璃器皿和瓷器等可以耐高溫的固體物的滅菌。消毒與滅菌濕熱滅菌法: 利用熱蒸汽殺死微生物的方法。 高壓蒸汽滅菌:利用高溫高壓蒸汽進(jìn)展滅菌的方法,蒸汽的穿透力較熱空氣強(qiáng),可以殺死一切微生物,包括細(xì)菌的芽孢,真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個(gè)體,是一種最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。消毒與滅菌輻射滅菌法紫外線:

波長(zhǎng)190~300nm的紫外線具有殺菌作用。但穿透物質(zhì)的能力很差,一般要求紫外燈距離照射物不超過(guò)米為宜。電離輻射:

高速電子、X射線、γ射線。消毒與滅菌微波〔電磁輻射〕: 波長(zhǎng)1mm~1m的電磁波。濾過(guò)除菌法 用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以到達(dá)除菌目的。

消毒與滅菌 濾菌器中含有細(xì)微的小孔,孔徑≤0.22微米,只允許液體或氣體通過(guò),而大于該孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過(guò)〔細(xì)菌的直徑一般均大于0.22微米〕; 濾過(guò)除菌法適用范圍:血清、毒素、抗生素、溶液以及空氣等的除菌。消毒與滅菌2.化學(xué)滅菌方法 許多化學(xué)藥物能夠影響微生物體內(nèi)的化學(xué)組成、物理構(gòu)造和生理活性,從而發(fā)揮防腐、消毒及滅菌的作用。 在干凈室〔區(qū)〕內(nèi)應(yīng)定期消毒,使用的消毒劑不得對(duì)設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換,防止產(chǎn)生耐藥菌株。微生物的控制 微生物的種類繁多,有的對(duì)人有益,有的對(duì)人有害,有的無(wú)益也無(wú)害。但是在藥品生產(chǎn)過(guò)程中,不可能對(duì)環(huán)境中的各種微生物加以區(qū)別對(duì)待,為保證產(chǎn)品的平安有效,就需要對(duì)所有的微生物進(jìn)展控制。 許多以前被人們認(rèn)為是極端條件下〔高溫、高壓、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、低溫等〕,甚至是致死的環(huán)境,現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在這些極端仍然條件下生活著各種類型的微生物〔我們稱為極端微生物〕。事實(shí)說(shuō)明,微生物有特別頑強(qiáng)的生存、繁殖和變異能力來(lái)適應(yīng)環(huán)境。微生物的控制

當(dāng)飲用水經(jīng)水塔或貯水池貯存后,短期內(nèi)微生物就可能繁殖到105~106個(gè)/ml。

人的頭皮上有140萬(wàn)個(gè)/cm2,兩手上約有4~40萬(wàn)個(gè),1g指甲污垢就有38億個(gè),1g糞便可達(dá)10~1000億個(gè)??梢哉f(shuō)微生物是無(wú)處不在,無(wú)處不有。微生物的控制微生物的控制干凈室〔區(qū)〕內(nèi)微生物的來(lái)源1.空氣。2.水。3.人員〔在干凈室內(nèi),人是第一污染源〕。4.室內(nèi)的外表和設(shè)備、工器具的外表。 針對(duì)以上4點(diǎn),就能有目的的對(duì)干凈室內(nèi)的微生物進(jìn)展控制,保證產(chǎn)品質(zhì)量。

微生物的控制1.對(duì)空氣的控制

利用空氣過(guò)濾技術(shù)將每升空氣中含有的以十萬(wàn)計(jì)甚至百萬(wàn)計(jì)的灰塵顆粒,降低到每升空氣中只含有幾粒,幾百粒,幾千粒的不同凈化等級(jí),以控制空間的含塵數(shù)量,控制了整個(gè)空間的含塵數(shù)量,也就是控制了微生物的數(shù)量。微生物的控制 微生物不是憑空存在的,99%的微生物都是附著在灰塵顆粒上的,或以芽孢形式懸浮于空氣中,控制了空氣中的顆粒數(shù)量,就控制了微生物的數(shù)量,1μm以下者處于懸浮狀態(tài),10μm以上者會(huì)逐漸沉下來(lái)而形成含菌的灰塵,所以我們需要對(duì)灰塵顆粒進(jìn)展嚴(yán)格控制。微生物的控制2021版GMP對(duì)干凈區(qū)域的規(guī)定如下:潔凈度級(jí)別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米靜態(tài)動(dòng)態(tài)≥0.5μm≥5.0μm≥0.5μm≥5.0μmA級(jí)352020352020B級(jí)3520293520002900C級(jí)3520002900352000029000D級(jí)352000029000不作規(guī)定不作規(guī)定微生物的控制2.對(duì)水的控制

水是微生物的樂(lè)園,水體是微生物廣泛分布的第二個(gè)天然環(huán)境;

水中的微生物來(lái)自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。微生物的控制2021版GMP明確規(guī)定: 純化水、注射用水的制備、貯存和分配應(yīng)當(dāng)能夠防止微生物的滋生; 純化水、注射用水儲(chǔ)罐和輸送管道所用材料應(yīng)當(dāng)無(wú)毒、耐腐蝕; 儲(chǔ)罐的通氣口應(yīng)當(dāng)安裝不脫落纖維的疏水性除菌濾器;微生物的控制 純化水、注射用水輸送管道的設(shè)計(jì)和安裝應(yīng)當(dāng)防止死角、盲管,應(yīng)當(dāng)按照操作規(guī)程定期對(duì)純化水、注射用水管道進(jìn)展清洗和消毒,并有相關(guān)記錄。 嚴(yán)

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