GB/T 17999.4-2008SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測第4部分：SPF雞血清平板凝集試驗(yàn)

犐犆犛１１．２２０

犅４１

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１７９９９．４—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．３—１９９９

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測

第４部分：犛犘犉雞血清平板凝集試驗(yàn)

犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀—犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾狊狌狉狏犲犻犾犾犪狀犮犲—

犘犪狉狋４：犛犲狉狌犿狆犾犪狋犲犪犵犵犾狌狋犻狀犪狋犻狅狀狋犲狊狋犳狅狉犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀

２００８１２３１發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

犌犅／犜１７９９９．４—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１７９９９《ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測》分為１０個部分：

———第１部分：ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測總則；

———第２部分：ＳＰＦ雞紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)；

———第３部分：ＳＰＦ雞血清中和試驗(yàn)；

———第４部分：ＳＰＦ雞血清平板凝集試驗(yàn)；

———第５部分：ＳＰＦ雞瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)；

———第６部分：ＳＰＦ雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；

———第７部分：ＳＰＦ雞胚敏感試驗(yàn)；

———第８部分：ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)；

———第９部分：ＳＰＦ雞試管凝集試驗(yàn)；

———第１０部分：ＳＰＦ雞間接免疫熒光試驗(yàn)。

本部分為ＧＢ／Ｔ１７９９９的第４部分。

本部分修訂參照了ＮＹ／Ｔ５５３—２００２《禽支原體病診斷技術(shù)》和ＮＹ／Ｔ５３６—２００２《雞傷寒和雞白痢

診斷技術(shù)》中的有關(guān)規(guī)定。

本部分代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．３—１９９９《ＳＰＦ雞血清平板凝集試驗(yàn)》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１７９９９．３—１９９９相比主要變化如下：

———增加了生理鹽水作為陰性對照。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。

本部分由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ１８１）歸口。

本部分起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心、濟(jì)南斯帕法

斯家禽有限公司。

本部分主要起草人：曲連東、姜騫、韓凌霞、邵衛(wèi)星、朱果、單忠芳、劉家森、司昌德、郭東春、于海波、

孟慶文。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１７９９９．３—１９９９。

Ⅰ

書

犌犅／犜１７９９９．４—２００８

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測

第４部分：犛犘犉雞血清平板凝集試驗(yàn)

１范圍

ＧＢ／Ｔ１７９９９的本部分規(guī)定了雞血清平板凝集試驗(yàn)的技術(shù)要求。

本部分適用于對ＳＰＦ雞進(jìn)行以下病原微生物的血清抗體檢測：雞白痢沙門氏菌（犛犪犾犿狅狀犲犾犾犪

狆狌犾犾狅狉狌犿）、雞毒支原體（犕狔犮狅狆犾犪狊犿犪犵犪犾犾犻狊犲狆狋犻犮狌犿）、滑液囊支原體（犕狔犮狅狆犾犪狊犿犪狊狔狀狅狏犻犪犲）、副雞嗜

血桿菌（犎犪犲犿狅狆犺犻犾狌狊狆犪狉犪犵犪狌犻狀犪狉狌犿）。

２原理

血清平板凝集試驗(yàn)是細(xì)菌性抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后，在適量的電解質(zhì)參與下，經(jīng)過一段時間出現(xiàn)

肉眼可見的凝集現(xiàn)象，常采用已知的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌性抗原液檢測相應(yīng)的凝集抗體。

３試劑和材料

３．１試劑

３．１．１凝集抗原。

３．１．２陰性血清、陽性血清。

３．１．３被檢血清。

３．２材料

玻璃板，移液器（ＴＤ１０μＬ～２００μＬ）及吸頭。

４操作程序

４．１使用前１０ｍｉｎ～２０ｍｉｎ自冰箱取出抗原、陰性標(biāo)準(zhǔn)血清、陽性標(biāo)準(zhǔn)血清及被檢血清，使其達(dá)到

室溫。

４．２用移液器吸取充分混勻的診斷抗原一滴（０．０２５ｍＬ～０．０５ｍＬ），垂直滴于玻璃板上，然后迅速在

抗原旁邊滴加同量的被檢血清一滴（０．０２５ｍＬ～０．０５ｍＬ）。

４．３用牙簽使血清與抗原混合均勻，涂布成直徑為１ｃｍ～２ｃｍ的片狀，不斷搖動玻璃板，２ｍｉｎ內(nèi)觀

察結(jié)果。

４．４試驗(yàn)應(yīng)在２０℃～２５℃條件下進(jìn)行。

４．５每批