功能性食品第二篇

功能食品

——研究與開(kāi)發(fā)崔同2014.121第一篇功能性食品概論第二章功能性食品的工程技術(shù)研究第三章功能食品的評(píng)價(jià)第五章常見(jiàn)的功能性食品第四章功能性食品申報(bào)程序目錄第二篇功能性食品的研究與開(kāi)發(fā)第一章功能食品的基礎(chǔ)研究2第一章功能食品的基礎(chǔ)研究§1.文獻(xiàn)情報(bào)檢索、選題立項(xiàng)§2.保健功能因子解析研究§3.保健功能因子的體內(nèi)研究（invivo）3§1.文獻(xiàn)情報(bào)檢索、選題立項(xiàng)文獻(xiàn)檢索選題原則：創(chuàng)新性、科學(xué)性、可行性立項(xiàng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)整理基礎(chǔ)研究4§2.保健功能因子解析研究

免疫調(diào)節(jié)因子活性氧消除功能因子胰島素分泌功能調(diào)節(jié)因子血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶抑制因子食物抗癌因子抗炎癥作用因子抗菌抗病毒作用因子小腸上皮脂肪細(xì)胞的增值、分化調(diào)控因子腸道蠕動(dòng)因子促進(jìn)鈣吸收與保存因子改善睡眠功能因子1.保健功能因子的種類基礎(chǔ)研究52.功能因子的invitro檢索什么是invitro試驗(yàn)這種方法的過(guò)程

1）發(fā)現(xiàn)生理活動(dòng)的關(guān)鍵點(diǎn)2）建立可行的評(píng)價(jià)方法這種方法的特點(diǎn)基礎(chǔ)研究6實(shí)例1超氧自由基清除活性評(píng)價(jià)O2―·尿酸XOD（黃嘌呤氧化酶）O2XO（黃嘌呤）細(xì)胞色素C細(xì)胞色素C（Fe3+，氧化型）（Fe3+，還原型）H2O2SOD基礎(chǔ)研究7實(shí)例2酪氨酸氧化酶抑制劑活性評(píng)價(jià)酪氨酸中間產(chǎn)物（λmax=475nm）黑色素（美拉寧）酪氨酸氧化酶+O2

基礎(chǔ)研究8實(shí)例3脯氨酰肽內(nèi)切酶抑制劑活性評(píng)價(jià)

脯氨酰肽內(nèi)切酶(EC3.4.21.26Prolylendo-peptidase縮寫PEP)，存在于心臟、肝臟、腦等器官中，是一種特異性蛋白（肽）酶，專門催化肽鏈中脯氨酰羧基側(cè)的水解反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，在老年性癡呆癥患者腦的海馬區(qū)，PEP活性異常高，因此有人推測(cè)PEP參與水解大腦信息活性肽（如P物質(zhì)、加壓素、催產(chǎn)素等）進(jìn)而導(dǎo)致記憶物質(zhì)合成受阻，最終導(dǎo)致老年性癡呆。因此，近年來(lái)發(fā)達(dá)國(guó)家在PEP抑制劑的研究方面開(kāi)展了大量研究工作，其中尤以日本最有代表性，一些實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)的PEP抑制劑已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段?；A(chǔ)研究9PEP抑制活性評(píng)價(jià)方法Z-Gly-Pro-pNA

pNA（對(duì)硝基苯胺）

（λmax=410nm）PEP

基礎(chǔ)研究10PEP抑制活性分析步驟*表中溶液體積為ml.

S=樣品；Sc

=樣品對(duì)照；B=試劑空白抑制率（%）＝

1-(S-Sc)/B(1)抑制率（%）

＝

a

lgC＋b

(2)S1.61.7BSc底物1.85min0.10.2緩沖液0.10.1樣品30℃溫浴PEP0.25min5min0.10.1檢測(cè)410nmΔA/minΔA/minΔA/min基礎(chǔ)研究11山楂提取物濃度與PEP

抑制活性的相關(guān)性基礎(chǔ)研究12山楂提取物及相關(guān)化合物

對(duì)PEP的抑制活性成分IC50(μg/ml)山楂前花青素59.7山楂黃酮29.2山楂醇提取物240山楂濃縮汁244蘆丁271表兒茶素1730綠原酸5110抗壞血酸3960基礎(chǔ)研究133、功能因子的分離純化

分離純化的目的是為了得到足夠數(shù)量的未知活性成分純品以供結(jié)構(gòu)鑒定。常用的分離步驟與方法：溶劑提取溶劑萃取柱層析(包括中壓液相色譜)TLC制備HPLC制備基礎(chǔ)研究144、活性成分的結(jié)構(gòu)鑒定常用的結(jié)構(gòu)分析手段：元素分析法UV光譜法紅外光譜法（InfraredAbsorptionSpectrum,IR）質(zhì)譜法（MassSpectrometry,MS）核磁共振波譜法（NuclearMagneticResonanceSpectroscopy,NMR）基礎(chǔ)研究155、功能因子的存在規(guī)律研究定量分析檢測(cè)活性成分的存在規(guī)律活性成分分析方法的建立活性成分的分布與含量變化基礎(chǔ)研究16§3.保健功能因子的體內(nèi)研究

（invivo）

invitro和invivo評(píng)價(jià)都屬于藥理學(xué)（pharmacology）的范疇。它是一門為臨床合理用藥防治疾病提供基本理論的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)科學(xué)。它研究藥物與機(jī)體間相互作用的規(guī)律及其原理。其中，藥物對(duì)機(jī)體的作用規(guī)律屬于藥效學(xué)（pharmacodynamics）的范疇，而機(jī)體對(duì)藥物的影響屬藥物代謝動(dòng)力學(xué)（pharmacokinetics）?；A(chǔ)研究171、藥效學(xué)的研究

活性成分（藥物）的效應(yīng)（effect）實(shí)際上是機(jī)體器官原有功能的改變功能的提高稱為興奮（excitation）功能的降低稱為抑制（inhibitition）基礎(chǔ)研究18量效曲線

活性成分對(duì)人體的作用可分為保健作用和毒副作用兩方面，我們一般希望其保健作用較強(qiáng)，毒副作用較弱，這就需要對(duì)作用強(qiáng)度給出一個(gè)客觀評(píng)價(jià)。通?；钚猿煞值乃幚硇?yīng)會(huì)隨著劑量或濃度的增加而增加，這一規(guī)律可用量效關(guān)系曲線描述，其縱坐標(biāo)表示效應(yīng)量，橫坐標(biāo)表示劑量。在量效曲線上可以找到最小有效劑量（minimaleffectivedose）及最大效應(yīng)（maximaleffect）?；A(chǔ)研究19活性強(qiáng)度的評(píng)價(jià)指標(biāo)不同活性成分的活性強(qiáng)度不同，其量效曲線的形狀也不同。為便于比較，常采用在一群動(dòng)物中引起半數(shù)（50%）動(dòng)物陽(yáng)性反應(yīng)的劑量，或效應(yīng)值為50%時(shí)的劑量即半數(shù)有效劑量（ED50）作為指標(biāo)，ED50值越低則活性越強(qiáng)。活性成分的毒性常用引起半數(shù)動(dòng)物死亡的劑量，即半數(shù)致死量（LD50）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，LD50值越低則毒性越強(qiáng)?；A(chǔ)研究20治療指數(shù)

藥物的安全性常用治療指數(shù)（therapeuticindex，TI）表示，治療指數(shù)即LD50/ED50，此指數(shù)越大說(shuō)明此活性成分的安全性越好?；A(chǔ)研究212、藥代動(dòng)力學(xué)研究活性成分的吸收活性成分的分布活性成分的生物轉(zhuǎn)化活性成分的排泄活性成分的時(shí)效關(guān)系與時(shí)量關(guān)系

基礎(chǔ)研究223、毒理學(xué)研究第一階段(急性毒性試驗(yàn))：測(cè)定經(jīng)口LD50。第二階段（蓄積毒性和致突變?cè)囼?yàn)）：20天，雌、雄大小鼠各20只，20天第三階段（亞慢性和代謝試驗(yàn)）：90天第四階段(慢性毒性包括致癌試驗(yàn))：2年基礎(chǔ)研究23毒理評(píng)價(jià)的有關(guān)規(guī)定

一般按照GB/T15193—94《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序》中的具體規(guī)定進(jìn)行。藥食兼用品種可按一般食品對(duì)待，免做毒理試驗(yàn)。雖是藥品，但為地方性食用品種的，可只做一、二階段試驗(yàn)；仿制國(guó)外保健食品，資料齊全的也可同樣對(duì)待。以前只做藥用，現(xiàn)在要作為保健食品的，按新資源對(duì)待，必須做一、二階段試驗(yàn)；負(fù)責(zé)安全評(píng)價(jià)的單位和人員，必須經(jīng)有關(guān)部門審批同意，或符合有關(guān)規(guī)定。基礎(chǔ)研究24第二章功能性食品的工程技術(shù)研究

§1.功能性食品素材的分離精制技術(shù)§2.功能性食品的配方設(shè)計(jì)及生產(chǎn)工藝§3.制劑工藝研究§4.保健食品良好生產(chǎn)規(guī)范§5.功能性食品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

25§1.功能性食品素材的分離精制技術(shù)生物工程技術(shù)：基因工程、酶解工程超低溫冷凍粉碎技術(shù)溶劑提取與萃取技術(shù)超臨界流體萃取技術(shù)膜分離技術(shù)分子蒸餾技術(shù)真空濃縮與冷凍干燥吸附分離技術(shù)層析技術(shù)沉淀與重結(jié)晶技術(shù)工程技術(shù)26§2.功能性食品的配方設(shè)計(jì)及生產(chǎn)工藝配方設(shè)計(jì)借鑒古代中醫(yī)藥專著；查閱中外科技資料；仔細(xì)研究閱讀專利文獻(xiàn)資料；以單方為基礎(chǔ)，按功能目標(biāo)和劑型的要求適當(dāng)添加輔助成分。工程技術(shù)27§3.制劑工藝研究片劑工藝流程：主料整粒干燥成品

混合制軟材加輔料過(guò)篩包裝壓片

包衣

過(guò)篩：規(guī)定6級(jí)輔料包括：淀粉、糖類、纖維素類、無(wú)機(jī)物（如碳酸鈣）、水、醇及膠漿類、其它工程技術(shù)28膠囊劑工藝流程：原輔料檢驗(yàn)制空膠囊包裝裝填混合粉碎過(guò)篩0—5號(hào)（大小）工程技術(shù)29口服液工藝流程：原料預(yù)處理分裝過(guò)濾配制提取精制封口滅菌檢查印字包裝工程技術(shù)30§4.保健食品良好生產(chǎn)規(guī)范

（GB17405—1998）人員設(shè)計(jì)與設(shè)施原料生產(chǎn)過(guò)程品質(zhì)管理衛(wèi)生管理

工程技術(shù)31GMP審查申請(qǐng)資料

1、申請(qǐng)報(bào)告；2、保健食品生產(chǎn)管理和自查情況；3、企業(yè)的管理結(jié)構(gòu)圖；4、營(yíng)業(yè)執(zhí)照、保健食品批準(zhǔn)證書的復(fù)印件（新建廠無(wú)需提供）；5、各劑型主要產(chǎn)品的配方、生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，工藝流程圖；6、企業(yè)專職技術(shù)人員情況介紹；7、企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品及生產(chǎn)設(shè)備目錄；8、企業(yè)總平面圖及各生產(chǎn)車間布局平面圖（包括人流、物流圖，

潔凈區(qū)域劃分圖，凈化空氣流程圖等）；9、檢驗(yàn)室人員、設(shè)施、設(shè)備情況介紹；10、質(zhì)量保證體系（包括企業(yè)生產(chǎn)管理、質(zhì)量管理文件目錄）；11、潔凈區(qū)域技術(shù)參數(shù)報(bào)告（潔凈度、壓差、溫濕度等）；12、其他相關(guān)資料。工程技術(shù)32§5.功能性食品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)名稱；漢語(yǔ)拼音；處方；制法；性狀；鑒別；檢查；含量測(cè)定；說(shuō)明含量測(cè)定對(duì)象和測(cè)定成分選擇的依據(jù)，實(shí)驗(yàn)條件的選擇（如提取、純化、測(cè)定條件的比較）和各項(xiàng)方法學(xué)考察依據(jù)（如標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍，測(cè)定方法的重現(xiàn)性試驗(yàn)，回收率等）?；厥章实闹噩F(xiàn)性應(yīng)有5份以上數(shù)據(jù)，并統(tǒng)計(jì)變異系數(shù)，一般不大于2%。功能與主治；用法與用量；禁忌；注意；規(guī)格；貯藏；使用期限

工程技術(shù)33第三章功能食品的評(píng)價(jià)

§1.功能性食品活性成分分析§2.功能性食品安全性評(píng)價(jià)§3.功能性食品的功效評(píng)價(jià)§4.功能性食品的衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)§5.功能性食品穩(wěn)定性試驗(yàn)34§1.功能性食品活性成分分析1、提取條件的選定2、分離純化3、測(cè)定條件的選擇4、線性關(guān)系的考察5、穩(wěn)定性6、重復(fù)性7、回收率8、樣品測(cè)定功能評(píng)價(jià)35§2.功能性食品安全性評(píng)價(jià)

1994年衛(wèi)生部頒發(fā)的《食品安全毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》標(biāo)準(zhǔn)（GB15193.1~15193.19-94），規(guī)定我國(guó)食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序包括四個(gè)階段：1）急性毒性試驗(yàn)2）遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)3）亞慢性毒性試驗(yàn)4）慢性毒性試驗(yàn)按“程序”規(guī)定，凡屬我國(guó)新創(chuàng)的物質(zhì)，特別是其化學(xué)結(jié)構(gòu)提示有慢性毒性、遺傳毒性或致癌性可能的，或產(chǎn)量大、使用面廣、攝入機(jī)會(huì)多的，必須進(jìn)行全部四個(gè)階段的毒性試驗(yàn)。凡屬于已知物質(zhì)（指經(jīng)過(guò)安全性評(píng)價(jià)并允許使用者）的化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物或類似物，則可進(jìn)行前三階段試驗(yàn)，并按結(jié)果判斷是否需要進(jìn)行第四階段試驗(yàn)。凡屬已知的化學(xué)物質(zhì)，WHO對(duì)其已公布ADI者，同時(shí)有資料證明我國(guó)產(chǎn)品的質(zhì)量規(guī)格與國(guó)外產(chǎn)品一致，則可先進(jìn)行第一階段試驗(yàn)。如果與國(guó)外資料一致，一般不要求進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)，否則應(yīng)進(jìn)行第三階段試驗(yàn)。功能評(píng)價(jià)36§3.功能性食品的功效評(píng)價(jià)1．免疫調(diào)節(jié)13．調(diào)節(jié)血糖2．延緩衰老14．改善胃腸道功能3．改善記憶15．改善睡眠4．促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育16．改善營(yíng)養(yǎng)性貧血5．抗疲勞17．對(duì)化學(xué)性肝損傷有保護(hù)作用6．減肥18．促進(jìn)泌乳7．耐缺氧19．美容8．抗輻射20．改善視力9．抗突變21．促進(jìn)排鉛10．抑制腫瘤22．清咽潤(rùn)喉11．調(diào)節(jié)血脂23．調(diào)節(jié)血壓12．改善性功能24．改善骨質(zhì)疏松衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司批準(zhǔn)的保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)檢測(cè)項(xiàng)目：

功能評(píng)價(jià)37§4.功能性食品的衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)微生物檢驗(yàn)

細(xì)菌總數(shù)大腸桿菌致病菌有害物質(zhì)檢驗(yàn)

砷、鉛、銅、錫、汞、黃曲霉毒素、農(nóng)藥殘留等。功能評(píng)價(jià)38§5.功能性食品穩(wěn)定性試驗(yàn)初步穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：臨床試驗(yàn)用包裝條件下，常溫，當(dāng)月考核一次，每月1次，不少于3個(gè)月；也可在37~40度和相對(duì)濕度75%的條件下保存，每月考核一次，如果穩(wěn)定，相當(dāng)樣品可保存2年。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：上市包裝條件下，常溫，三個(gè)月考核一次后，每半年一次。穩(wěn)定性試驗(yàn)項(xiàng)目：劑型穩(wěn)定性考核項(xiàng)目正常室溫考核時(shí)間膠囊性狀、鑒別、水分、溶散時(shí)限、含量測(cè)定、衛(wèi)生學(xué)檢查1.5年片劑性狀、鑒別、硬度、崩解時(shí)限、含量測(cè)定、衛(wèi)生學(xué)檢查2年流浸膏性狀、鑒別、pH值、乙醇含量、總固體、衛(wèi)生學(xué)檢查1.5年功能評(píng)價(jià)39第四章功能性食品申報(bào)程序

研制者向所在地省級(jí)衛(wèi)生行政部門提出申請(qǐng)，經(jīng)初審?fù)夂螅瑘?bào)衛(wèi)生部審批。衛(wèi)生部和省級(jí)衛(wèi)生行政部門分別成立評(píng)審委員會(huì)承擔(dān)技術(shù)評(píng)審工作，委員會(huì)由食品衛(wèi)生、營(yíng)養(yǎng)、毒理、醫(yī)學(xué)及其它相關(guān)專業(yè)的專家組成。衛(wèi)生部評(píng)審委員會(huì)每年