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- 正在執(zhí)行有效
- 2017-11-01 頒布
- 2018-05-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介
ICS07080
A40.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T34777—2017
中國倉鼠卵巢CHO細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品
()
殘留DNA檢測(cè)熒光定量PCR法
DetectionofresidualDNAinbiologicalproductwhichexpressedfrom
ChinesehamsterovarCHOcell—
y()
Fluorescentquantitativepolymerasechainreactionassay
2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
中華人民共和國
國家標(biāo)準(zhǔn)
中國倉鼠卵巢CHO細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品
()
殘留DNA檢測(cè)熒光定量PCR法
GB/T34777—2017
*
中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行
北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號(hào)
2(100029)
北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)
16(100045)
網(wǎng)址
:
服務(wù)熱線
:400-168-0010
年月第一版
201711
*
書號(hào)
:155066·1-58352
版權(quán)專有侵權(quán)必究
GB/T34777—2017
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口
(SAC/TC387)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位信達(dá)生物制藥蘇州有限公司中國測(cè)試技術(shù)研究院生物研究所
:()、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人孫左宇周李華李雪峰黃曉剛袁志軍郭燕紅
:、、、、、。
Ⅰ
GB/T34777—2017
中國倉鼠卵巢CHO細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品
()
殘留DNA檢測(cè)熒光定量PCR法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了檢測(cè)殘留宿主的熒光定量法
DNAPCR。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于中國倉鼠卵巢細(xì)胞宿主細(xì)胞系表達(dá)的生物制品的殘留宿主的檢測(cè)
CHO()DNA。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
GB/T6682
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件
。
31
.
Ct值cyclethreshold
每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)
。
4縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
中國倉鼠卵巢
CHO:(ChineseHamsterOvary)
5原理
以真核細(xì)胞基因組中具有高拷貝數(shù)的為目的基因設(shè)計(jì)特異性擴(kuò)增該基因的引
16SrRNA,PCR
物包括正向引物和反向引物
,:ForwardPrimer(5'-CCAGGCATTGGTGGCAC-3'):ReversePrimer
(5'-AGACAGGGTTTCTCTGT-3')。
采用熒光定量法采集熒光繪制出的擴(kuò)增曲線值與擴(kuò)增體系中起
SYBRPCR(FQ-PCR),PCRCt,
始目的基因模板的對(duì)數(shù)值呈反比以起始模板對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)值為橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
,DNA,Ct,。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品的殘留量從而達(dá)到定量檢測(cè)樣品殘留的含量目的
DNA,DNA。
6儀器設(shè)備
61熒光定量儀含有熒光染料檢測(cè)通道
.PCR:SYBR。
62紫外可見分
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