• 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-12-31 頒布
  • 2022-07-01 實(shí)施
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GB/T 38485-2021微生物痕量基因殘留測(cè)定微滴數(shù)字PCR法_第1頁(yè)
GB/T 38485-2021微生物痕量基因殘留測(cè)定微滴數(shù)字PCR法_第2頁(yè)
GB/T 38485-2021微生物痕量基因殘留測(cè)定微滴數(shù)字PCR法_第3頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS07080

CCSA.21

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38485—2021

微生物痕量基因殘留測(cè)定

微滴數(shù)字PCR法

Determinationfortracegeneresiduesofmicroorganisms—

MicrodropletdigitalPCR

2021-12-31發(fā)布2022-07-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T38485—2021

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任

。。

本文件由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口

。

本文件起草單位清華大學(xué)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所河北省食品檢驗(yàn)研究院中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研

:、、、

究院

。

本文件主要起草人張翀邢新會(huì)杜文斌周巍郭永剪興金汪海燕鄭蒙蔡?hào)|洋馬愛(ài)進(jìn)

:、、、、、、、、、。

GB/T38485—2021

微生物痕量基因殘留測(cè)定

微滴數(shù)字PCR法

1范圍

本文件規(guī)定了用微滴數(shù)字法測(cè)定微生物痕量基因殘留以下的方法

PCR(100pg/mL)。

本文件適用于加工產(chǎn)品中釀酒酵母和植物乳桿菌痕量特征基因殘留以下的測(cè)定

(100pg/mL)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

31

.

痕量基因殘留tracegeneresidue

微生物加工產(chǎn)品在后續(xù)分離純化中很難去除的痕量含量在以下核酸

(100pg/mL)。

4原理

利用液滴微流控技術(shù)將待測(cè)生物樣品所殘留的目標(biāo)核酸擴(kuò)增體系分割成幾十份到幾萬(wàn)份包

,PCR

含一個(gè)拷貝的核酸分子微升級(jí)油包水微滴按照常規(guī)體系對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增通過(guò)熒光探針實(shí)現(xiàn)信號(hào)

。PCR,

讀出所產(chǎn)生微滴陽(yáng)性信號(hào)的數(shù)目即代表了原始樣本中目標(biāo)核酸分子的拷貝數(shù)從而直接數(shù)出目標(biāo)核

。,

酸分子的個(gè)數(shù)對(duì)起始樣品的痕量基因殘留進(jìn)行定量

,。

5試劑或材料

除非另有規(guī)定僅使用分析純?cè)噭?/p>

,。

51水為規(guī)定的一級(jí)水將一級(jí)水在下高壓加熱滅菌制備得到無(wú)菌水

.GB/T6682。121℃15min。

52提取試劑盒

.DNA。

53微滴數(shù)字反應(yīng)試劑盒

.PCR。

54引物和探針

.

541釀酒酵母引物和探針

..:

SC-F:5'-GGACTCTGGACA

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