生物安全柜的選擇、使用及維護1

生物安全柜和相關(guān)安全設(shè)備的介紹及使用

尤平濤201307目的掌握生物安全柜的使用和維護熟悉生物安全柜的檢測方法需要解決的六個問題為什么選擇生物安全柜？選擇什么樣的生物安全柜？怎樣放置生物安全柜？怎樣使用生物安全柜？怎樣維護生物安全柜？怎樣檢測生物安全柜？選擇生物安全柜的理由工作對象具有生物危害原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標本等-------具有潛在感染性的實驗材料屬于《人間傳染的病原微生物名錄》中第一、二、三和四類微生物人間傳染的病原微生物名錄類與級對應表------GB19489-2004《實驗室生物安全通用要求》第一類第二類第三類第四類選擇生物安全柜的理由容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為對液體或半流體進行搖動、傾注或攪拌操作時，將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時，在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細胞培養(yǎng)瓶，采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，對感染性物質(zhì)進行勻漿及渦旋振蕩，對感染性液體進行離心，進行動物操作時。選擇生物安全柜的理由生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對外環(huán)境或者操作者本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。生物安全柜基本工作原理定向氣流：風幕HEPA濾器：

一種一次性使用，框架內(nèi)有多重褶迭的干性過濾材料的過濾器，對0.3微米氣溶膠的過濾效能達到99.97%。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無菌狀態(tài)。生物安全柜的選擇要素：樣品的生物危害第一、二、三和四類病原微生物保護樣品I級生物安全柜不保護樣品其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學品生物安全柜的選擇（一）生物安全柜進風面速率（m/s）氣流百分數(shù)排風系統(tǒng)重新循環(huán)部分排出部分I級0.360100硬管Ⅱ級A1型0.38～0.517030排到房間或套管連接處外排風型Ⅱ級A2型0.517030套管連接處Ⅱ級B1型0.513070硬管Ⅱ級B2型0.510100硬管III級不適用0100硬管生物安全柜的選擇（二）生物安全柜保護類型保護對象I級第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學品操作者，環(huán)境Ⅱ級A1型第二、三和四類病原微生物操作者，環(huán)境和樣品外排風型Ⅱ級A2型第二、三和四類病原微生物；痕量揮發(fā)放射性核素/化學品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級B1型第二、三和四類病原微生物；少量揮發(fā)放射性核素/化學品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級B2型第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學品操作者，環(huán)境和樣品III級第一、二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學品操作者，環(huán)境和樣品II級A2型生物安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA濾過的空氣正壓污染空氣生物安全柜的選擇（三）生物安全柜的寬度：工作需要；空間費用：安全柜本身；運輸費用；附件費用（支架，紫外燈，椅子等）；排風和送風系統(tǒng)：風機和管道（II級B2）認證：

NSF49美國

EN12469歐洲

YY0569－2005中國生物安全柜放置五個遠離點（氣流）門風扇空調(diào)開著的窗戶人員活動頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺設(shè)備視頻反面教材生物安全柜的使用要求個人防護要求柜內(nèi)物品的擺放紫外燈明火工作前準備工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后處理生物安全柜的使用個人防護要求：在使用生物安全柜時必須穿個人防護服，戴手套（手套應套在隔離衣的外面）最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護眼罩或者面罩。視頻生物安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放原則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放所有物品盡可能放在工作臺后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)前進氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋生物安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)生物安全柜的使用對紫外燈的三點要求：每周進行清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認證，要檢查紫外線強度，以確保有適當?shù)墓獍l(fā)射量房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，以保護眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害生物安全柜的使用工作前需要準備的內(nèi)容：

首先紫外燈照射30分鐘關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風機，用消毒劑對生物安全柜的內(nèi)表面進行消毒擦拭將實驗中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺面相應位置上（切記勿阻擋風口?。┑却?min，凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻生物安全柜的使用工作時操作規(guī)范：雙臂垂直緩慢進入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對物品進行處理。所有操作應在離前窗10cm以外的工作區(qū)進行。廢棄物應丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中視頻生物安全柜的使用操作時注意事項：避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁進出。盡量避免污染的物品進入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進行操作時，不能進行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動。視頻生物安全柜的使用溢出處理：

GB19489—2007《實驗室生物安全通用要求》中生物安全柜內(nèi)溢出時的處理方法滴狀溢出或體積不足1mL的，可簡單地用消毒劑擦洗。生物安全柜的使用大量溢出，則要做特殊的處理：1、使生物安全柜保持開啟狀態(tài)。2、在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作用。3、在安全柜內(nèi)對污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進一步的清潔工作。生物安全柜的使用4、用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20min后，擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、如果溢出情況需要浸泡接液槽，則不得現(xiàn)場清理接液槽。應報告實驗室主管后采用適當?shù)臍怏w消毒方式。生物安全柜的使用6、將所有清理用物品以及防護服進行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。7、立即通知實驗室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對安全柜進行更為廣泛的消毒處理。視頻生物安全柜的使用工作結(jié)束后的要求：將安全柜繼續(xù)運行至少3min來完成“凈化”過程。將柜內(nèi)物品移出前，應使用有效的消毒劑擦拭每天實驗結(jié)束后，對生物安全柜的內(nèi)壁和臺面進行擦拭。等待5分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)風機，紫外燈照射30分鐘。視頻生物安全柜的維護保持生物安全柜表面清潔和無污染狀態(tài)用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺面；如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，需要用無菌水再次進行擦拭除去殘余的消毒劑；定期抬起工作臺面對其下面的區(qū)域進行清潔；消毒后，用玻璃清潔器對前窗玻璃和紫外燈進行清潔。生物安全柜的維護定期保養(yǎng)：用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺面；每年按需要更換紫外燈和日光燈；每年至少認證一次

——《醫(yī)學實驗室—安全要求》——YY0569-2005生物安全柜

——《實驗室生物安全手冊》（第三版，2004）視頻生物安全柜的維護生物安全柜的污染清除甲醛、過氧化氫熏蒸等方法應由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行在以下情況下需要進行熏蒸：①在檢查和維修之前

②在更換HEPA濾器之前③在移動安全柜之前

④安全柜被嚴重地污染⑤變換使用目的

⑥長時間未用⑦需要熏蒸的其它時間生物安全柜的檢測什么情況下需要檢測？應該由什么人來進行檢測？需要進行哪些內(nèi)容的檢測？生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測的情況發(fā)生在：最初的購買安裝完畢年檢移動修理生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測應由有資質(zhì)的單位檢測在美國必須有美國NSF授權(quán)的單位；沒有NSF授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的：有過檢測經(jīng)驗；參加過技術(shù)課程或者廠商培訓會；參加過象CETA水平的商業(yè)會議；檢測設(shè)備擁有的校準證書在我國有檢測資質(zhì)的單位：國家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心和軍事醫(yī)學科學院生物安全柜的檢測安全柜防護效果的評估涉及到以下內(nèi)容：①安全柜的完整性②人員、產(chǎn)品及交叉污染保護③HEPA過濾器的泄漏④向下氣流的速度⑤正面氣流的速度⑥負壓／換氣次數(shù)⑦氣流的煙霧模式⑧警報和互鎖系統(tǒng)⑨電氣安全⑩光照度還包括紫外線強度、噪聲水平、震動性、集液槽泄漏、柜體穩(wěn)定性（包括柜體抗翻倒、柜體抗變形、工作臺面抗變形、柜體抗向前傾倒）、溫升、電機與風機等性能的測試。生物安全柜的檢測①人員、產(chǎn)品和交叉污染保護測試②下降氣流流速測試③流入氣流流速測試④工作舒適度有關(guān)標準：噪音、照度和震動測試⑤高效過濾器完整性測試⑥柜體泄漏的測試⑦氣流煙霧模式測試⑧排溢槽泄露⑨柜體穩(wěn)定性⑩其他各類測試：電機和風機性能測試、工作區(qū)溫升測試、壓差測試。生物安全柜的檢測出廠檢驗型式檢驗安裝檢驗：安全柜安裝完成、位置移動后常規(guī)維護檢驗：至少每年一次更換過濾器和內(nèi)部部件維修后Thanks！二級生物安全防護實驗室操作要點實驗室人口須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序；禁止非工作人員進人實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責人批準后方可進入；禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸；制定尖銳器具的安全操作規(guī)程；按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒；9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應接受必要的免疫接種(如卡介苗等