生物安全柜的選擇、使用及維護(hù)1

生物安全柜和相關(guān)安全設(shè)備的介紹及使用

尤平濤201307目的掌握生物安全柜的使用和維護(hù)熟悉生物安全柜的檢測(cè)方法需要解決的六個(gè)問(wèn)題為什么選擇生物安全柜？選擇什么樣的生物安全柜？怎樣放置生物安全柜？怎樣使用生物安全柜？怎樣維護(hù)生物安全柜？怎樣檢測(cè)生物安全柜？選擇生物安全柜的理由工作對(duì)象具有生物危害原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標(biāo)本等-------具有潛在感染性的實(shí)驗(yàn)材料屬于《人間傳染的病原微生物名錄》中第一、二、三和四類微生物人間傳染的病原微生物名錄類與級(jí)對(duì)應(yīng)表------GB19489-2004《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》第一類第二類第三類第四類選擇生物安全柜的理由容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為對(duì)液體或半流體進(jìn)行搖動(dòng)、傾注或攪拌操作時(shí)，將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時(shí)，在對(duì)瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶，采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，對(duì)感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩，對(duì)感染性液體進(jìn)行離心，進(jìn)行動(dòng)物操作時(shí)。選擇生物安全柜的理由生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對(duì)外環(huán)境或者操作者本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。生物安全柜基本工作原理定向氣流：風(fēng)幕HEPA濾器：

一種一次性使用，框架內(nèi)有多重褶迭的干性過(guò)濾材料的過(guò)濾器，對(duì)0.3微米氣溶膠的過(guò)濾效能達(dá)到99.97%。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無(wú)菌狀態(tài)。生物安全柜的選擇要素：樣品的生物危害第一、二、三和四類病原微生物保護(hù)樣品I級(jí)生物安全柜不保護(hù)樣品其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學(xué)品生物安全柜的選擇（一）生物安全柜進(jìn)風(fēng)面速率（m/s）氣流百分?jǐn)?shù)排風(fēng)系統(tǒng)重新循環(huán)部分排出部分I級(jí)0.360100硬管Ⅱ級(jí)A1型0.38～0.517030排到房間或套管連接處外排風(fēng)型Ⅱ級(jí)A2型0.517030套管連接處Ⅱ級(jí)B1型0.513070硬管Ⅱ級(jí)B2型0.510100硬管III級(jí)不適用0100硬管生物安全柜的選擇（二）生物安全柜保護(hù)類型保護(hù)對(duì)象I級(jí)第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境Ⅱ級(jí)A1型第二、三和四類病原微生物操作者，環(huán)境和樣品外排風(fēng)型Ⅱ級(jí)A2型第二、三和四類病原微生物；痕量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級(jí)B1型第二、三和四類病原微生物；少量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級(jí)B2型第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品III級(jí)第一、二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品II級(jí)A2型生物安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA濾過(guò)的空氣正壓污染空氣生物安全柜的選擇（三）生物安全柜的寬度：工作需要；空間費(fèi)用：安全柜本身；運(yùn)輸費(fèi)用；附件費(fèi)用（支架，紫外燈，椅子等）；排風(fēng)和送風(fēng)系統(tǒng)：風(fēng)機(jī)和管道（II級(jí)B2）認(rèn)證：

NSF49美國(guó)

EN12469歐洲

YY0569－2005中國(guó)生物安全柜放置五個(gè)遠(yuǎn)離點(diǎn)（氣流）門風(fēng)扇空調(diào)開著的窗戶人員活動(dòng)頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺(tái)或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺(tái)設(shè)備視頻反面教材生物安全柜的使用要求個(gè)人防護(hù)要求柜內(nèi)物品的擺放紫外燈明火工作前準(zhǔn)備工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后處理生物安全柜的使用個(gè)人防護(hù)要求：在使用生物安全柜時(shí)必須穿個(gè)人防護(hù)服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護(hù)眼罩或者面罩。視頻生物安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放原則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放所有物品盡可能放在工作臺(tái)后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)前進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋生物安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)生物安全柜的使用對(duì)紫外燈的三點(diǎn)要求：每周進(jìn)行清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認(rèn)證，要檢查紫外線強(qiáng)度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量房間中有人時(shí)一定要關(guān)閉紫外燈，以保護(hù)眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害生物安全柜的使用工作前需要準(zhǔn)備的內(nèi)容：

首先紫外燈照射30分鐘關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風(fēng)機(jī)，用消毒劑對(duì)生物安全柜的內(nèi)表面進(jìn)行消毒擦拭將實(shí)驗(yàn)中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺(tái)面相應(yīng)位置上（切記勿阻擋風(fēng)口！）等待5min，凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻生物安全柜的使用工作時(shí)操作規(guī)范：雙臂垂直緩慢進(jìn)入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對(duì)物品進(jìn)行處理。所有操作應(yīng)在離前窗10cm以外的工作區(qū)進(jìn)行。廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中視頻生物安全柜的使用操作時(shí)注意事項(xiàng)：避免胳膊在前開口處快速移動(dòng)和頻繁進(jìn)出。盡量避免污染的物品進(jìn)入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。視頻生物安全柜的使用溢出處理：

GB19489—2007《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中生物安全柜內(nèi)溢出時(shí)的處理方法滴狀溢出或體積不足1mL的，可簡(jiǎn)單地用消毒劑擦洗。生物安全柜的使用大量溢出，則要做特殊的處理：1、使生物安全柜保持開啟狀態(tài)。2、在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作用。3、在安全柜內(nèi)對(duì)污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進(jìn)一步的清潔工作。生物安全柜的使用4、用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20min后，擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、如果溢出情況需要浸泡接液槽，則不得現(xiàn)場(chǎng)清理接液槽。應(yīng)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主管后采用適當(dāng)?shù)臍怏w消毒方式。生物安全柜的使用6、將所有清理用物品以及防護(hù)服進(jìn)行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。7、立即通知實(shí)驗(yàn)室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對(duì)安全柜進(jìn)行更為廣泛的消毒處理。視頻生物安全柜的使用工作結(jié)束后的要求：將安全柜繼續(xù)運(yùn)行至少3min來(lái)完成“凈化”過(guò)程。將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用有效的消毒劑擦拭每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)生物安全柜的內(nèi)壁和臺(tái)面進(jìn)行擦拭。等待5分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)風(fēng)機(jī)，紫外燈照射30分鐘。視頻生物安全柜的維護(hù)保持生物安全柜表面清潔和無(wú)污染狀態(tài)用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺(tái)面；如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，需要用無(wú)菌水再次進(jìn)行擦拭除去殘余的消毒劑；定期抬起工作臺(tái)面對(duì)其下面的區(qū)域進(jìn)行清潔；消毒后，用玻璃清潔器對(duì)前窗玻璃和紫外燈進(jìn)行清潔。生物安全柜的維護(hù)定期保養(yǎng)：用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺(tái)面；每年按需要更換紫外燈和日光燈；每年至少認(rèn)證一次

——《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—安全要求》——YY0569-2005生物安全柜

——《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》（第三版，2004）視頻生物安全柜的維護(hù)生物安全柜的污染清除甲醛、過(guò)氧化氫熏蒸等方法應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來(lái)進(jìn)行在以下情況下需要進(jìn)行熏蒸：①在檢查和維修之前

②在更換HEPA濾器之前③在移動(dòng)安全柜之前

④安全柜被嚴(yán)重地污染⑤變換使用目的

⑥長(zhǎng)時(shí)間未用⑦需要熏蒸的其它時(shí)間生物安全柜的檢測(cè)什么情況下需要檢測(cè)？應(yīng)該由什么人來(lái)進(jìn)行檢測(cè)？需要進(jìn)行哪些內(nèi)容的檢測(cè)？生物安全柜的檢測(cè)生物安全柜的檢測(cè)的情況發(fā)生在：最初的購(gòu)買安裝完畢年檢移動(dòng)修理生物安全柜的檢測(cè)生物安全柜的檢測(cè)應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測(cè)在美國(guó)必須有美國(guó)NSF授權(quán)的單位；沒有NSF授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的：有過(guò)檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)；參加過(guò)技術(shù)課程或者廠商培訓(xùn)會(huì)；參加過(guò)象CETA水平的商業(yè)會(huì)議；檢測(cè)設(shè)備擁有的校準(zhǔn)證書在我國(guó)有檢測(cè)資質(zhì)的單位：國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物安全柜的檢測(cè)安全柜防護(hù)效果的評(píng)估涉及到以下內(nèi)容：①安全柜的完整性②人員、產(chǎn)品及交叉污染保護(hù)③HEPA過(guò)濾器的泄漏④向下氣流的速度⑤正面氣流的速度⑥負(fù)壓／換氣次數(shù)⑦氣流的煙霧模式⑧警報(bào)和互鎖系統(tǒng)⑨電氣安全⑩光照度還包括紫外線強(qiáng)度、噪聲水平、震動(dòng)性、集液槽泄漏、柜體穩(wěn)定性（包括柜體抗翻倒、柜體抗變形、工作臺(tái)面抗變形、柜體抗向前傾倒）、溫升、電機(jī)與風(fēng)機(jī)等性能的測(cè)試。生物安全柜的檢測(cè)①人員、產(chǎn)品和交叉污染保護(hù)測(cè)試②下降氣流流速測(cè)試③流入氣流流速測(cè)試④工作舒適度有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)：噪音、照度和震動(dòng)測(cè)試⑤高效過(guò)濾器完整性測(cè)試⑥柜體泄漏的測(cè)試⑦氣流煙霧模式測(cè)試⑧排溢槽泄露⑨柜體穩(wěn)定性⑩其他各類測(cè)試：電機(jī)和風(fēng)機(jī)性能測(cè)試、工作區(qū)溫升測(cè)試、壓差測(cè)試。生物安全柜的檢測(cè)出廠檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)安裝檢驗(yàn)：安全柜安裝完成、位置移動(dòng)后常規(guī)維護(hù)檢驗(yàn)：至少每年一次更換過(guò)濾器和內(nèi)部部件維修后Thanks！二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室操作要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室人口須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序；禁止非工作人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室。參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入；禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸；制定尖銳器具的安全操作規(guī)程；按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；每天至少消毒一次工作臺(tái)面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒；9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活，如高壓滅活。需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲(chǔ)存、運(yùn)輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種(如卡介苗等