增光片中五味子醇甲的含量測定

增光片中五味子醇甲的含量測定［摘要］目的建立反相高效液相法測定增光片中五味子醇甲含量的方法。方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，流動相為甲醇-乙腈-水〔60∶5∶32〕；檢測波長為250n。結(jié)果五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系;平均回收率為97.64%，RSD=1.21%。結(jié)論該方法不僅操作簡單、準(zhǔn)確，且重復(fù)性好，可用于增光片的質(zhì)量控制。［關(guān)鍵詞］反相高效液相法；增光片；五味子醇甲；含量測定ntentdeterinatinfshizandrlAinZengguangtablets［Abstrat］bjetiveTstudyRP-HPLethdsthatdeterinedtheshizandrlAntentinZengguangtablets.ethdsShizandrlAasseparatedpletelynan18lun，usingaixturefethanl，aetnitrileandater〔60∶5∶32〕asbilephase，ithUVdetetinat250n.ResultsShizandrlAhasbetterlinearrrelatinbeteen0.0672μgand0.672μg，theresultsalshaveshnthereveryrateas97.64%，RSD1.21%.nlusinTheethdsisverystableandaurate，andhasgdreappearane.ItanbeusedfrqualityntrlfZengguangtablets.［Keyrds］RP-HPL;Zengguangtablets;shizandrlA;ntentdeterinatin增光片是由枸杞子、當(dāng)歸、黨參、茯苓、五味子等10味中藥組成的中藥復(fù)方制劑。具有補(bǔ)益氣血、滋養(yǎng)肝腎、明目安神、增加視力的成效，臨床上用于治療近視眼［1］。本品收載于?衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)?中藥成方制劑第十一冊，原標(biāo)準(zhǔn)中只有顯微鑒別和通用的理化鑒別，無含量測定工程，為了更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，本文建立反相高效液相色譜法〔RP-HPL〕測定增光片中五味子醇甲的含量，抑制增光片的質(zhì)量，以確保臨床療效［2～5］。1儀器與試劑1.1儀器日本島津L-10A高效液相色譜儀，SPD-10AV紫外檢測器；T-100恒溫箱。L2002數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。上海必能信Q-250型超聲波清洗器。BP211DAG電子天平〔德國Sartrius〕。1.2試劑甲醇為色譜醇；甲醇、天水乙醇、乙腈均為分析純；水為重蒸水。五味子醇甲〔中國藥品生物制品檢定所，批號：110857-202204〕；增光片〔湖南德海制藥，批號：030426〕。2方法與結(jié)果2.1色譜條件〔1〕色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱Diansil〔T〕18〔250×4.6〕，5μ〔迪馬公司〕；〔2〕流動相：甲醇-乙腈-水〔60∶5∶32〕；〔3〕檢測波長：254n；〔4〕流速：1.0l/in；〔5〕柱溫：40℃。2.2對照品溶液的制備精細(xì)稱取經(jīng)五氧化二磷枯燥12h的五味子醇甲對照品，加甲醇制成每1l含0.0336g的溶液，即得。2.3供試品溶液的制備取增光片20片，除去糖衣，精細(xì)稱定，研細(xì)，取細(xì)粉約2g，精細(xì)稱定，置錐形瓶中，精細(xì)參加甲醇25l，稱定重量，超聲處理45in，放冷，再稱定重量，以甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，即得。2.4陰性對照溶液的制備按處方比例稱取除五味子的其他藥材適量，按照增光片的制備工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。2.5線性關(guān)系的考察分別精細(xì)汲取五味子醇甲對照品溶液〔濃度0.0336g/l〕2μl、4μl、8μl、12μl、20μl，注入液相色譜儀，測定，以五味子醇甲的進(jìn)樣量〔μg〕為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為Y=8E+06X+23682〔r=0.9997〕。結(jié)果說明五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。2.6精細(xì)度試驗精細(xì)汲取五味子醇甲對照品溶液〔0.0336g/l〕10μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，峰面積積分值分別為2395570、2440616、2396849、2394535、2467203、2425933，RSD=1.24%。說明本方法精細(xì)度良好。2.7重復(fù)性試驗取同一批增光片〔批號：030426〕，除去糖衣，研細(xì)，取細(xì)粉5份，每份約2g，精細(xì)稱定，按2.3項下的方法制備樣品，進(jìn)展含量測定。結(jié)果分別為0.1026g/片、0.0999g/片、0.0992g/片、0.0986g/片、0.0982g/片，平均為0.0997g/片，RSD為1.75%。說明本方法具有較好的重復(fù)性。2.8穩(wěn)定性試驗取重復(fù)性試驗項下試驗號4的供試品溶液，每2h進(jìn)樣1次，每次10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果說明在10h內(nèi)峰面積積分值根本穩(wěn)定，RSD為1.58%。結(jié)果平均回收率為97.64%，RSD為1.21%。見表1。2.9回收率試驗貯備溶液：精細(xì)稱取五味子醇甲對照品3.7g，置10l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成每1l中含五味子醇甲0.37g的溶液。取含量〔批號：030426，含量為0.0997g/片〕的增光片，除去糖衣，研細(xì)，取1.0g〔6份〕，精細(xì)稱定，置錐形瓶中，分別精細(xì)參加貯備溶液0.8l、1l、1.2l，置水浴上揮發(fā)至干，按供試品溶液制備方法進(jìn)展制備并測定含量，計算回收率，結(jié)果平均回收率為97.64%，RSD為1.21%。見表1。表1回收率試驗結(jié)果〔略〕2.10樣品測定按擬定的含量測定方法測定10批增光片中五味醇甲的含量，結(jié)果見表2。表2含量測定結(jié)果〔略〕3討論筆者曾對提取溶媒、提取時間進(jìn)展了考察，結(jié)果以參加甲醇、超聲處理45in為佳。干擾試驗結(jié)果說明：五味子的陰性對照樣品無干擾。方法學(xué)考察結(jié)果說明：五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系；該方法精細(xì)度良好，具有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，平均回收率為97.64%。因此該方法可用于增光片的質(zhì)量控制。根據(jù)測定的結(jié)果，并考慮到藥材的產(chǎn)地、采收、加工等因素，暫定每片增光片含五味子以五味子醇甲〔24H327〕計，不得少于0.05g。［參考文獻(xiàn)］1中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1996，207.2趙陸華.高效液相色譜法分析中藥成分手冊.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，19