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血清鈣磷鎂和微量元素檢驗(yàn)本章教學(xué)要求:掌握鈣、磷測(cè)定的推薦方法。熟悉血清鐵及總鐵結(jié)合力的測(cè)定方法。了解鎂、銅、鋅的測(cè)定種類(lèi),鈣、磷、鎂代謝及其平衡紊亂,微量元素與疾病的關(guān)系。鈣、磷、鎂鈣、磷在體內(nèi)的含量?jī)H次于氧、碳、氫、氮而居第五、六位,鎂含量約居第十一位。微量元素(traceelements)指含量占體重0.01%以下元素。第一節(jié)概述鈣、磷代謝和調(diào)節(jié)鎂代謝和生理功能微量元素與疾病一、鈣、磷代謝和調(diào)節(jié)(一)鈣代謝1.鈣的含量、分布和血鈣含量:約1~1.25kg,正常人血鈣水平為2.25~2.75mmol/L

分布:99%的鈣分布在骨組織,其余分布于體液和其它組織中。血鈣可擴(kuò)散鈣:60%非擴(kuò)散鈣:40%鈣離子結(jié)合鈣血漿中[Ca2+]、[H+]、[HCO3-]的關(guān)系可用下式表示:2.鈣的吸收和排泄部位:在pH較低的小腸上段進(jìn)行的,以十二指腸上部吸收能力最強(qiáng)。

影響食物中鈣吸收的因素:活性維生素D3年齡鈣鹽在腸道的溶解狀態(tài)乳糖、乳酸和一些氨基酸食物中的植酸、草酸食物中鈣磷比例吸收:排泄:腸道:食物中未吸收的鈣和腸道分泌的鈣,占人體每日攝入鈣總量的80%。

腎臟:經(jīng)腎排泄的鈣占體內(nèi)總排鈣量的20%,但尿中鈣的排泄量隨血液中鈣濃度的變化而增減,在調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣平衡方面發(fā)揮主要作用。途經(jīng)(二)磷代謝1.磷的含量、分布和血磷含量:正常成人含磷600g左右。每kg無(wú)脂肪的組織約含磷12g。

分布:體內(nèi)磷的86%分布于骨,其余分布于全身各組織及體液中。血磷:指血漿中無(wú)機(jī)磷酸鹽所含的磷,正常人僅有0.6~1.6mmol/L,兒童稍高。

血磷濃度沒(méi)有血鈣穩(wěn)定,它不但隨年齡的增長(zhǎng)而變化,

在同一天也會(huì)有較大的生理變化。2.磷的吸收和排泄部位:主要在小腸上段,磷的吸收較鈣容易。

吸收:影響食物中磷吸收的因素:食物中有過(guò)多的鈣、鎂離子存在時(shí)

排泄:主要是通過(guò)腎臟排泄,排泄量與血液中磷酸鹽濃度呈正比。對(duì)磷排泄的調(diào)節(jié)是通過(guò)腎小管的重吸收來(lái)完成的。(三)鈣、磷代謝的調(diào)節(jié)主要通過(guò)神經(jīng)體液進(jìn)行調(diào)節(jié)1.甲狀旁腺素(PTH):

2.降鈣素:多肽類(lèi)激素

3.1,25-(OH)2-D3:PTH的靶組織是腎臟、骨和小腸

是維生素D在體內(nèi)的活性形式,是維生素D在肝腎經(jīng)羥化作用轉(zhuǎn)變而成的。它的靶器官是小腸、骨和腎。依賴(lài)于激素的調(diào)節(jié)三種激素對(duì)鈣、磷代謝的調(diào)節(jié)激素成骨溶骨腸鈣吸收腎排鈣腎排磷血鈣血磷1,25-(OH)2-D3PTHCT↑↓↑↑↑↑↑↓↑↑↑↓(生理劑量)↓↓↑↓↑↑↑↑↓↑↓↓↑:升高,↑↑:顯著升高,↓:降低(四)鈣、磷的生理功能1.Ca2+的作用:①作為凝血因子之一②增強(qiáng)心肌收縮,降低神經(jīng)肌肉興奮性。③降低毛細(xì)血管的通透性,減少滲出。④是許多酶(脂肪酶,ATP酶等)的激活劑,也是其它一些酶(維生素D3-1α-羥化酶)的抑制劑。⑤激素的“第二信使”.2.磷的作用:①參與體內(nèi)核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白等重要生物分子的組成。②在物質(zhì)代謝中參與高能磷酸化合物的合成及多種磷酸化的中間產(chǎn)物的生成。③某些重要酶的共價(jià)修飾調(diào)節(jié)作用是通過(guò)其蛋白質(zhì)的磷酸化和脫磷酸化的方式進(jìn)行的④血中磷酸鹽(HPO42-/H2PO4-)是血液緩沖體系的重要組成成分(五)鈣和磷代謝紊亂◆鈣代謝異常表現(xiàn)為血漿總鈣和/或游離鈣水平下降或升高

1.低鈣血癥血漿蛋白濃度正常時(shí),血鈣低于2.10mmol/L,或血漿Ca2+低于1.12mmol/L時(shí),稱(chēng)為低鈣血癥。

存在低清蛋白血癥時(shí),評(píng)價(jià)低鈣血癥時(shí)一定要考慮血漿清蛋白水平,使用經(jīng)血漿清蛋白校正后的校正鈣濃度,即:校正鈣(mmol/L)=總鈣(mmol/L)+0.02×(47-清蛋白濃度g/L)原因:甲狀旁腺功能減退、維生素D代謝障礙、慢性腎功能衰竭等。低鈣血癥對(duì)機(jī)體的影響:對(duì)于神經(jīng)肌肉,表現(xiàn)為興奮性增高。對(duì)于骨骼,兒童表現(xiàn)為佝僂病,成人則表現(xiàn)為骨軟化、骨質(zhì)疏松等。對(duì)于心血管系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致傳導(dǎo)阻滯。2.高鈣血癥當(dāng)血鈣濃度大于2.75mmol/L時(shí),稱(chēng)為高鈣血癥原因:

惡性腫瘤、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)和1,25-(OH)2-D3作用過(guò)強(qiáng)高鈣血癥對(duì)機(jī)體的影響:對(duì)于神經(jīng)肌肉,表現(xiàn)為神經(jīng)肌肉興奮性下降對(duì)于消化系統(tǒng),常有食欲減退、便秘等現(xiàn)象對(duì)于腎臟,早期表現(xiàn)為濃縮功能受損對(duì)于心血管系統(tǒng),可使心肌興奮性增加◆磷代謝異常磷代謝異常表現(xiàn)為血漿中無(wú)機(jī)磷水平下降或升高1.低磷血癥血磷濃度低于0.97mmol/L時(shí)為低磷血癥病因:腸道吸收減少、磷向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移、腎臟丟失臨床癥狀:細(xì)胞內(nèi)ATP生成減少,紅細(xì)胞內(nèi)2,3-二磷酸甘油含量降低所引起2.高磷血癥血磷濃度成人高于1.62mmol/L,兒童高于2.10mmol/L時(shí)為高磷血癥。病因:腎臟排磷減少、攝入過(guò)多、磷向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移二、鎂代謝和生理功能(一)鎂的代謝含量:

血漿中的鎂濃度約0.67~1.23mmol/L約占體重的0.03%正常成人含鎂約20~28g.分布:

約60%以磷酸鎂及碳酸鎂的形式存在于骨組織中骨骼肌中含鎂約占體內(nèi)總鎂量的20%~30%,其余約10%分布在其它組織中;從體液中鎂的分布看,細(xì)胞內(nèi)液的鎂的含量約占總量的39%,是細(xì)胞內(nèi)僅次于鉀的主要陽(yáng)離子。僅有約1%的鎂存在于細(xì)胞外液中。

部位:小腸上段吸收,吸收率只有30~40%。

吸收:天然食物中很豐富,很少發(fā)生鎂缺乏。排泄:腎是體內(nèi)鎂的主要排泄途徑,也是血漿鎂水平調(diào)節(jié)的主要器官。

(二)鎂的生理功能鎂是參與正常生命活動(dòng)及代謝過(guò)程必需的元素。1.作為酶的輔助因子2.對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性的作用三、微量元素與疾病微量元素必需的無(wú)害的有害的人體必需的:有鐵(Fe)、鋅(Zn)、銅(Cu)、錳(Mn)、鈷(Co)、鉻(Cr)、鉬(Mo)、鎳(Ni)、硒(Se)、碘(I)、釩(V)錫(Sn)、氟(F)、硅(Si)等14種;有害的:鉍(Bi)、鈹(Be)、鎘(Cd)、汞(Hg)、鉛(Pb)、鋁(Al)等。

(一)必需微量元素的共同特征1、多數(shù)為金屬元素2、多數(shù)在元素周期表中居于前部位置3、且有高度生物活性及催化生物化學(xué)反應(yīng)的能力

4、各種微量元素間有相互影響、拮抗或協(xié)同作用(二)必需微量元素的含量、分布及生理功用微量元素體內(nèi)含量主要分布每日需要量鐵3-5g紅細(xì)胞、肝、脾1-1.5mg鋅2-2.5g骨、肌肉、皮膚、男性生殖道10-15mg銅100-200mg血液、骨、肌肉、肝、腎、心、腦0.05-2mg錳12-20mg肝、腎、骨、松果體、垂體、乳腺2.5-7mg鈷1.1-1.5mg肝、心、腎、骨、脾、胰、小腸150-450μg鉻6mg肝、心、脾10-60μg鉬10mg肝、肺、骨、皮膚50-100μg鎳10mg皮膚、骨、肝、肌肉、淋巴結(jié)、毛發(fā)、汗腺0.3-0.6mg硒14-21mg肝、脾、牙釉、指(趾)甲、心、紅細(xì)胞60-300μg碘25-36mg甲狀腺、胃粘膜、唾液腺、脈絡(luò)膜、乳腺100-300μg釩25mg牙、骨3μg錫17mg肝、脾3mg氟2.6g骨、牙、甲狀腺、皮膚0.5-1mg硅18g皮膚、肌腱、骨骺、血管壁、淋巴結(jié)、結(jié)締組織3mg含量、分布生理功用酶需要微量元素參加組成其活性中心或激活其活性構(gòu)成體內(nèi)重要的載體及電子傳遞系統(tǒng)參與激素和維生素的合成,影響內(nèi)分泌系統(tǒng)(三)微量元素對(duì)人體各種生命活動(dòng)的影響1.促進(jìn)機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育2.對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的影響3.內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響4.對(duì)免疫系統(tǒng)的影響5.對(duì)心血管疾病及創(chuàng)傷的影響。6.對(duì)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的影響。7.對(duì)胚胎及胎兒發(fā)育的影響(四)必須微量元素與疾病的關(guān)系當(dāng)必需微量元素缺乏或過(guò)多,或者有害微量元素接觸、吸收、貯積過(guò)多或干擾了必需的微量元素的生理功能和營(yíng)養(yǎng)作用,都會(huì)引起一定的生理及生物化學(xué)過(guò)程紊亂而發(fā)生疾病。反之,當(dāng)各種代謝過(guò)程失常,病變也會(huì)對(duì)微量元素的吸收、運(yùn)輸、利用、貯存和排泄等各個(gè)環(huán)節(jié)產(chǎn)生影響。微量元素的功能與缺乏癥微量元素功能缺乏癥鐵造血原料,構(gòu)成細(xì)胞色素類(lèi)缺鐵性貧血鋅細(xì)胞分裂,核酸代謝,生長(zhǎng),輔助因子伊朗鄉(xiāng)村病,腸原性肢端皮炎銅Hb合成,結(jié)締組織代謝貧血,毛發(fā)異常,腦功能障礙鉻構(gòu)成葡萄糖耐量因子耐糖能力↓,糖尿病,動(dòng)脈硬化碘構(gòu)成T3、T4,促進(jìn)生長(zhǎng)、發(fā)育地方性甲狀腺腫,呆小病鈷構(gòu)成維生素B12,造血惡性貧血,甲基丙二酸尿癥硒抗氧化克山病,大骨節(jié)病錳多種酶的激活劑生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,中樞神經(jīng)系異常氟骨、牙齒形成齲齒1、微量元素的缺乏癥與過(guò)多癥缺鐵性貧血地方性甲狀腺腫,呆小病克山病,大骨節(jié)病齲齒血色沉著病Wilson2、微量元素與地方?。旱胤叫约谞钕倌[

3、微量元素與職業(yè)?。航佑|砷過(guò)多引起砷性皮膚癌第二節(jié)鈣、磷、鎂和微量元素測(cè)定血清鈣、磷、鎂的測(cè)定尿液鈣、鎂、磷的測(cè)定鐵、銅和鋅測(cè)定一、血清鈣、磷、鎂的測(cè)定(一)血清鈣的測(cè)定臨床應(yīng)用的方法:離子選擇性電極法為主。1.離子鈣的測(cè)定影響因素:標(biāo)本pH值的改變,添加劑,標(biāo)本類(lèi)型。

迅速、簡(jiǎn)便、敏感性高,重復(fù)性好【參考范圍】1.15~1.42mmol/L2.總鈣測(cè)定方法:滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法、酶法等決定性方法:ID-MS

參考方法:原子吸收分光光度法常規(guī)方法:鄰甲酚酞絡(luò)合酮法(o-CPC)o-CPC是一種金屬絡(luò)合染料,也是酸堿指示劑。在堿性條件下可與鈣螯合生成紫紅色螯合物,與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液比色,可求得血清鈣的含量?!緟⒖挤秶?.25~2.75mmol/L(二)血清磷的測(cè)定人體內(nèi)的磷元素尚不能直接測(cè)定。在臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的無(wú)機(jī)磷測(cè)定實(shí)際上只是直接分析磷酸鹽陰離子(H2PO4-,HPO42-)。1.磷鉬酸還原法2.磷鉬酸非還原法標(biāo)本中的磷酸鹽與鉬酸生成無(wú)色的磷鉬酸,用還原劑將磷鉬酸還原成藍(lán)色復(fù)合雜聚物鉬藍(lán),620nm進(jìn)行比色分析。臨床實(shí)驗(yàn)室較多采用。

血清中無(wú)機(jī)磷在酸性溶液中與鉬酸銨作用形成的磷鉬酸銨雜聚化合物,在340nm或325nm波長(zhǎng)的吸光度值與無(wú)機(jī)磷含量成正比,與標(biāo)準(zhǔn)品比較可計(jì)算出標(biāo)本無(wú)機(jī)磷含量。適用于微量無(wú)機(jī)磷的測(cè)定。

3.酶法嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和黃嘌呤氧化酶(XOD)偶聯(lián)并以過(guò)氧化物酶(POD)為指示劑的方法,可用于常規(guī)標(biāo)本的自動(dòng)分析?!緟⒖挤秶?.6~1.6mmol/L(三)血清鎂的測(cè)定1、原子吸收分光光度法2、甲基麝香草酚藍(lán)比色法:金屬絡(luò)合指示法3、Calmagite比色法(鈣鎂試劑法)4、達(dá)旦黃比色法:染料結(jié)合法二、尿液鈣、鎂、磷的測(cè)定尿液中鈣、鎂、磷濃度的波動(dòng)范圍很大,影響因素較多,一般測(cè)定時(shí)不取隨機(jī)尿,而采取24小時(shí)混合尿測(cè)定。(一)尿液鈣的測(cè)定一般采用鄰甲酚酞絡(luò)合酮法或甲基麝香草酚藍(lán)法(二)尿液鎂的測(cè)定測(cè)定血清鎂的方法均可用于尿鎂的測(cè)定以上標(biāo)本需酸化,從而溶解鈣鹽、鎂鹽或磷酸鹽

。(三)尿液磷的測(cè)定尿磷測(cè)定方法與血磷相同,應(yīng)取24小時(shí)混合尿三、鐵、銅和鋅測(cè)定(一)鐵的測(cè)定血清中鐵的含量很低,均以Fe3+形式與運(yùn)鐵蛋白結(jié)合。血樣中的鐵常用血清鐵和血清總鐵結(jié)合力(totaliron-bindingcapacity,TIBC)表示。

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