圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)介紹課件

圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)介紹2012-03-09在藥物開發(fā)的過(guò)程中，生殖毒性研究的目的是通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)反映受試物對(duì)哺乳動(dòng)物生殖功能和發(fā)育過(guò)程的影響預(yù)測(cè)其可能產(chǎn)生的對(duì)生殖細(xì)胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等親代生殖機(jī)能的不良影響對(duì)子代胚胎-胎兒發(fā)育、出生后發(fā)育的不良影響生殖毒性研究在限定臨床研究受試者范圍、降低臨床研究受試者和藥品上市后使用人群的用藥風(fēng)險(xiǎn)方面發(fā)揮重要作用為方便試驗(yàn)，可將一個(gè)完整生命周期過(guò)程分成以下幾個(gè)階段：A.從交配前到受孕（成年雄性和雌性生殖功能、配子的發(fā)育和成熟、交配行為、受精）。B.從受孕到著床（成年雌性生殖功能、著床前發(fā)育、著床）。E.從出生到離乳（成年雌性生殖功能、幼仔對(duì)宮外生活的適應(yīng)性、離乳前發(fā)育和生長(zhǎng)）。F.從離乳到性成熟（離乳后發(fā)育和生長(zhǎng)、獨(dú)立生活的適應(yīng)能力、達(dá)到性成熟的情況）。常用的試驗(yàn)方案相當(dāng)于對(duì)下述各階段影響的聯(lián)合研究：生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)(A~B階段)胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗(yàn)(C~D階段)圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)(C~F階段)圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)（III段）包括上述生命周期中的C階段至F階段檢測(cè)從胚胎著床到幼仔離乳，給藥對(duì)妊娠/哺乳的雌性動(dòng)物以及胚胎和子代發(fā)育的不良影響由于對(duì)此段所造成的影響可能延遲，試驗(yàn)應(yīng)持續(xù)觀察至子代性成熟階段。

給藥期雌性動(dòng)物給藥期應(yīng)從胚胎硬腭閉合至哺乳結(jié)束(即上述生命周期中的C階段至E階段)，通常，大鼠為妊娠第15天至離乳（出生后第21天）。

該段試驗(yàn)并不完全包括由離乳期至青春期階段給藥，也不研究育齡期縮短的可能性。為了檢測(cè)可能用于嬰幼兒和兒童期藥物的不良影響，應(yīng)考慮具體情況，選擇特定年齡段子代直接給藥，進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)研究。

動(dòng)物處理雌性動(dòng)物分娩并飼養(yǎng)其子代至離乳，每窩選擇雌、雄子代各1只，飼養(yǎng)至成年，然后進(jìn)行交配檢測(cè)其生殖能力。

觀察指標(biāo)試驗(yàn)期間(母體動(dòng)物)：-體征和死亡情況，至少1次/天-體重及體重變化，分娩前至少2次/周-攝食量，分娩前至少1次/周-其他毒理研究中已證明有意義的指標(biāo)-妊娠期-分娩子代出生時(shí)體重離乳前后的存活率和生長(zhǎng)/體重性成熟程度和生育力，應(yīng)說(shuō)明是否進(jìn)行了窩仔動(dòng)物剔除體格發(fā)育感覺功能和反射行為SD大鼠灌胃速效救心丸圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)

速效救心丸說(shuō)明書【藥品名稱】通用名稱：速效救心丸漢語(yǔ)拼音：SuxiaoJiuxinWan【成份】川芎、冰片?！拘誀睢勘酒窞樽攸S色的滴丸；氣涼，味微苦。【功能主治】行氣活血，祛瘀止痛，增加冠脈血流量，緩解心絞痛。用于氣滯血瘀型冠心病、心絞痛?！疽?guī)格】每粒重40mg。【用法用量】含服，一次4-6粒，一日3次；急性發(fā)作時(shí)，一次10-15粒。給藥方法雌鼠的給藥時(shí)間為妊娠第15天至出生后第21天給藥途徑為灌胃每天給藥1次給藥容積為1ml/100g

體重及攝食量測(cè)定攝食量：每周稱1次；體重：分娩前每3天體重一次，分娩后每周稱體重一次。臨床癥狀觀察

每天1次產(chǎn)仔數(shù)：記錄每只孕鼠的產(chǎn)仔數(shù)。孕鼠出產(chǎn)率，按下式計(jì)算出各組妊娠母鼠的出產(chǎn)率。

出產(chǎn)率＝（分娩孕鼠數(shù)/妊娠孕鼠數(shù)）×100％孕鼠死亡率：統(tǒng)計(jì)各組孕鼠的死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。解剖檢查：哺乳結(jié)束后，應(yīng)在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間處死母鼠作解剖檢查，對(duì)主要器官和組織作肉眼觀察，必要時(shí)可進(jìn)行病理學(xué)檢查。仔鼠觀察項(xiàng)目仔鼠的一般生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)自然分娩的仔鼠應(yīng)檢查有無(wú)外觀畸形、鑒別性別、稱體重仔鼠的頭部檢查：有無(wú)露腦（無(wú)頭蓋骨），腦膜膨出，頭部大小，眼睛的有無(wú)，眼所在部位，大小，突眼或開眼等。兩耳、鼻和嘴外表是否正常和對(duì)稱，有無(wú)唇裂。四肢的檢查：四肢有無(wú)多趾、并趾、少趾、無(wú)趾、足內(nèi)外翻、短肢等。軀干的檢查：有無(wú)臍疝、腹裂（內(nèi)臟膨出），脊髓膨出、脊柱裂、脊柱側(cè)突等。尾部檢查：有無(wú)短尾、卷尾、無(wú)尾和尾分叉等，有無(wú)肛門閉鎖等。出生存活數(shù)：計(jì)數(shù)出生后24小時(shí)內(nèi)活仔數(shù)。四日存活數(shù)：計(jì)數(shù)出生后4天內(nèi)活仔數(shù)。離乳率：在分娩后21天計(jì)算出各組仔鼠的離乳率。仔鼠剔除：出生后4天，剔除多余仔鼠，使每窩仔鼠保留8只，最好雌雄各半。不足8只者，可用同組同日齡幼仔補(bǔ)齊。上述仔鼠哺乳至斷乳。離乳率=（離乳時(shí)仔鼠數(shù)/4日時(shí)仔鼠數(shù)或剔除后的仔鼠數(shù)）×100％定期測(cè)定仔鼠重量：仔鼠出生記為第0天，分別在第0、4、7、14、21天稱仔鼠窩重，計(jì)算仔鼠平均體重。斷乳后處死部分仔鼠，檢查內(nèi)臟。睜眼時(shí)間：在生后第10天開始每天觀察，以同窩內(nèi)所有仔鼠睜眼的時(shí)間作為觀察指標(biāo)。睪丸下降：檢查雄性仔鼠陰囊內(nèi)睪丸，在生后第20天開始每天觀察，觀察指標(biāo)確定同上。陰道開口：檢查雌鼠陰道張開時(shí)間，在生后第23天開始每天觀察，觀察指標(biāo)確定同上。仔鼠的功能與行為檢查仔鼠運(yùn)動(dòng)與協(xié)調(diào)能力測(cè)試斷乳后，每組隨機(jī)取相同日齡仔鼠20只（雌雄各半），進(jìn)行轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)。使用大小鼠轉(zhuǎn)棒儀記錄仔鼠從轉(zhuǎn)棒上掉下的時(shí)間。仔鼠自主活動(dòng)測(cè)定斷乳后，每組隨機(jī)取相同日齡仔鼠20只（雌雄各半）進(jìn)行測(cè)定。使用小鼠自主活動(dòng)程序自動(dòng)控制儀記錄5min（300s）動(dòng)物活動(dòng)次數(shù)。仔鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的檢測(cè):斷乳后，每組隨機(jī)取日鈴相同的仔鼠20只（雌雄各半）進(jìn)行水迷宮試驗(yàn)。使用水迷宮自動(dòng)實(shí)驗(yàn)記錄儀記錄仔鼠每組動(dòng)物平均錯(cuò)誤次數(shù)和平均潛伏期。仔鼠大體檢查及臟器系數(shù)統(tǒng)計(jì)仔鼠出生后40天，每組剖殺20只仔鼠，雌雄各半，檢查心、肝、脾、肺、腎、睪丸、子宮、腦，并稱重計(jì)算臟器系數(shù)。子代生殖功能子代每組隨機(jī)抽取70日齡性成熟仔鼠20只，雌雄各半，1：1同籠交配，發(fā)現(xiàn)陰栓之日定為妊娠期第零天(D0)，妊娠第15天時(shí)處死母鼠。切開腹部，將左右兩側(cè)子宮從母體切下，計(jì)數(shù)黃體數(shù)，縱向切開子宮，分離出胎仔、記錄死胎、活胎和吸收胎，計(jì)數(shù)總著床數(shù)，并記錄活胎的重量，計(jì)算交配率、交配天數(shù)及受孕率。生理發(fā)育指標(biāo)出生后時(shí)間（天）反射發(fā)育時(shí)間（天）出生后時(shí)間（天）耳廓分離時(shí)間3~正面翻正時(shí)間4~出毛6~負(fù)向趨地性反射5~門齒萌出6~聽覺驚愕反射