第八章農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的應(yīng)用

第八章農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的應(yīng)用第一頁，共四十六頁，2022年，8月28日第一節(jié)殺蟲真菌殺蟲真菌資源和利用白僵菌白僵菌制劑的生產(chǎn)白僵菌制劑的應(yīng)用白僵菌致病性測定綠僵菌屬綠僵菌菌劑生產(chǎn)工藝綠僵菌劑的應(yīng)用綠僵菌屬種類真菌殺蟲劑的局限性第二頁，共四十六頁，2022年，8月28日一、殺蟲真菌資源和利用現(xiàn)已知昆蟲病原真菌500余種，分別對鱗翅目、同翅目、鞘翅目、膜翅目和雙翅目的許多昆蟲有致病作用。根據(jù)昆蟲的病理基礎(chǔ)，篩選制備真菌殺蟲劑，用于植物害蟲的防治，常用菌種有白僵菌、綠僵菌等。第三頁，共四十六頁，2022年，8月28日二、白僵菌(Beauveria)白僵菌屬于半知菌，鏈孢霉目，鏈孢霉科，寄生于多種昆蟲。

營養(yǎng)菌絲白色有隔膜，分生孢子生于“之”字形的分生孢子梗上，呈球狀到卵球狀。感染白僵菌的僵蟲白僵菌分生孢子第四頁，共四十六頁，2022年，8月28日白僵菌(Beauveria)大量應(yīng)用的有：球孢白僵菌(B.bassiana)和卵孢白僵菌(B.brongniartii)B.bassiana

最適生長溫度為25-28℃，生長溫度范圍5-30℃。固體培養(yǎng)基中深層的菌絲不產(chǎn)生分生孢子。液體培養(yǎng)在振蕩好氣條件下可先形成節(jié)孢子。不耐高溫，50℃可致死，直射太陽光也可殺死白僵菌。第五頁，共四十六頁，2022年，8月28日白僵菌制劑的生產(chǎn)固體發(fā)酵方法，曲盤淺層發(fā)酵和深層通風(fēng)發(fā)酵。培養(yǎng)基：麩皮(或米糠)、玉米粉各占一半，加入適量疏松透氣物料如谷殼、玉米軸粉等，料水比1∶0.8~1培養(yǎng)成的孢子菌塊在45-50℃下烘干，粉碎后加入填料(如高嶺土)，以每g制劑含50億個孢子為標準，保存期不超過8個月。第六頁，共四十六頁，2022年，8月28日白僵菌制劑的生產(chǎn)工藝流程：菌種斜面培養(yǎng)（25-28℃3-5d）——孢子

種子擴大培養(yǎng)（25-28℃3-5d）——接種固體發(fā)酵培養(yǎng)（30℃8-10d）——孢子成熟烘干(45℃)或晾干加填料包裝待用第七頁，共四十六頁，2022年，8月28日白僵菌制劑的應(yīng)用防治對象：黃刺蛾、棉鈴蟲、三化螟、水稻黑尾葉蟬、稻縱卷葉螟、甜菜蚜蟲。使用方法:噴霧、噴粉或作顆粒狀拌種，也可與化肥、農(nóng)藥等混合施用。防治松毛蟲——直接噴霧防治玉米螟——顆粒劑防治大豆食心蟲——在蟲入土化蛹前撒于土表，效果好注意事項：白僵菌可致蠶病，因此桑田及養(yǎng)蠶區(qū)嚴禁使用白僵菌制劑。第八頁，共四十六頁，2022年，8月28日白僵菌對昆蟲致病性測定白僵菌致病性測定一般程序：1、準備工作：幼蟲的飼養(yǎng)、孢子懸液配制；2、接種處理：采用噴霧法、浸菌法、涂抹法等接種；3、效果測定：觀察蟲子取食能力、幼蟲患病死亡情況。白僵菌致病性指具有感染害蟲并使之患病死亡的特性。白僵菌致病性與多種因素有關(guān)：菌種毒性、培養(yǎng)條件、pH值、通氣等。第九頁，共四十六頁，2022年，8月28日三、綠僵菌屬(Metarhizium)綠僵菌屬于半知菌亞門，絲孢菌綱，瘤座孢目，瘤座孢科，產(chǎn)孢子階段呈現(xiàn)不同程度綠色。感染綠僵菌的僵蟲綠僵菌的分生孢子第十頁，共四十六頁，2022年，8月28日綠僵菌屬(Metarhizium)可腐生，菌落初期白色，生長溫度范圍15-35℃，最適25℃，孢子在低于7℃高于40℃時不能萌發(fā)。濕度要求在90%以上。寄生范圍廣，可寄生于8個目30科200余種昆蟲和螨類。第十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日綠僵菌屬種類金龜子綠僵菌Metarhiziumanisopliae大孢綠僵菌M.majorosporae貴州綠僵菌M.guizhouense平沙綠僵菌M.pingshanese黃綠綠僵菌M.flavovieide黃綠綠僵菌小孢變種M.favovieidevar.minus柱孢綠僵菌M.Cylindropsorae翠綠綠僵菌M.iadini第十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日綠僵菌菌劑生產(chǎn)工藝液體深層培養(yǎng)：直接制備孢子懸液→離心收集加填充料后分裝，真空或氧氣中4℃保存8個月。固體培養(yǎng):1.塑料袋裝大米粒:培養(yǎng)后每1g壓碎大米粒中含1~2×109個分生孢子。2.淺盤培養(yǎng):斜面菌種(24-28℃7-10d)——二級固體種子生產(chǎn)(24-26℃7-12d)——室內(nèi)淺盤發(fā)酵→翻盤晾干(充分通風(fēng)處7-10d)菌劑烘干(30-35℃烘箱烘干)質(zhì)量檢查→產(chǎn)品包裝。第十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日綠僵菌劑的應(yīng)用使用方法——孢子噴灑劑量——每公頃1013-1014個分生孢子綠僵菌可侵害幼蚊蟲和家蠅防治白蟻第十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日四、擬青霉(Paecilomycessp.)菌劑我國應(yīng)用的淡紫擬青霉(p.lilacinus)不但具有較高的殺蟲活性，而且其發(fā)酵液具有類似生長素和細胞分裂素的作用。該菌主要用于防治大豆孢囊線蟲和煙草根結(jié)線蟲，還可促進作物生長，提高產(chǎn)量。用肉色擬青霉固體發(fā)酵孢子粉（含孢量80億/g），每畝1.5kg，摻25kg細土均勻施撒，防治稻褐飛虱12d后蟲口下降47.2%~81.6%。第十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日四、擬青霉(Paecilomycessp.)菌劑作用機理：寄生卵，侵染率與卵和真菌接觸的長短有關(guān)產(chǎn)生幾丁質(zhì)水解酶、蛋白水解酶（線蟲卵殼結(jié)構(gòu)：卵黃磷蛋白—幾丁質(zhì)—脂質(zhì)）第十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日五、萊氏野村菌Nomuraeasp.Nomuraearileyi（半知菌）第十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日五、萊氏野村菌Nomuraeasp.第十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日五、萊氏野村菌Nomuraeasp.第十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二十頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日五、萊氏野村菌Nomuraeasp.第二十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日六、真菌殺蟲劑的局限性作用慢，不及農(nóng)藥迅速。侵染與蟲齡等因素有關(guān)，需對蟲情有較好的預(yù)測預(yù)報受天氣等環(huán)境條件影響，如干燥、影響孢子萌發(fā)侵染的降雨、沖洗等。第二十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日第二節(jié)叢枝菌根(AM)菌在農(nóng)作物上的應(yīng)用AM資源和利用AM菌根菌菌根菌的生產(chǎn)VA菌根Vesicular-ArbuscularMycorrhiza第二十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日

AM菌資源和應(yīng)用AM真菌是共生在大多數(shù)植物根部的一類真菌大約90%的有花植物都具有AM第二十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日AM真菌AM真屬于接合菌綱，毛霉目，內(nèi)囊霉科AM是專性共生菌，還沒有能夠分離出純培養(yǎng)體。AM的寄主范圍很廣，由一種植物根上所得菌根菌可以使多種植物根受感染。第二十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日形成AM的真菌球囊霉屬（Glomus）無軸孢囊霉屬（Acaulospors）巨孢囊霉屬（Gigaspora）厚囊霉屬（Sclerocystis）內(nèi)養(yǎng)囊霉屬（Entrophgospora）第二十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日

AM真菌作用機制菌根具有龐大的菌絲體以及它形成的一些特有酶系統(tǒng)，因而能增加共生植物對養(yǎng)分的吸收利用，尤其在有效磷缺乏的土壤中，能明顯增加植物對磷的吸收，促進植物生長發(fā)育。提高植物的吸磷能力。對銅、鋅、鐵、鈣、鎂等營養(yǎng)元素的吸收也有很大作用。增加果樹對水分的吸收，提高抗旱能力。AMF能擴大根系吸收范圍，在一定程度上克服連作障礙。第二十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日

AM的形成過程孢子和孢子果萌發(fā)形成外生菌絲

菌絲與植物吸收根接觸時變細或形成膨大的附著孢產(chǎn)生菌絲楔侵入根表皮，形成內(nèi)生菌絲侵入到根表皮細胞內(nèi)形成叢枝狀結(jié)構(gòu)或泡囊

真菌菌絲的侵入是形成AM的前提。根系是形成菌根的基礎(chǔ)。AMF的孢子和孢子果是其侵染的主要繁殖體。第三十頁，共四十六頁，2022年，8月28日

AM真菌的應(yīng)用接種相應(yīng)AM真菌，有明顯的增產(chǎn)效果：在小麥、大麥、花生、綠豆、玉米、甘薯、西瓜、芹菜作物上使用AM，比對照分別增產(chǎn)16%，20%，25%，20.5%，19%，15%，40%，35%。接種AM可使小麥抗病力、抗寒力、抗旱力均顯著提高：在鹽堿地增產(chǎn)59--66%。第三十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日菌根菌的生產(chǎn)利用根系發(fā)達植物活體培養(yǎng)：采用須根多，生長較快的植物，以塑料板制成培養(yǎng)槽，內(nèi)填充顆粒性好松疏的土壤密植載體植物，接種AM真菌，待根系發(fā)達，菌根菌大量侵染生長后，去掉植物地上部分，將槽中土壤連同植物根系處理制成接種物，可大面積使用。與現(xiàn)代育苗移栽技術(shù)相聯(lián)合，制成帶菌苗。第三十二頁，共四十六頁，2022年，8月28日第三節(jié)真菌除草劑真菌除草劑的特性有效除草菌株的篩選對自然篩選菌株的改造第三十三頁，共四十六頁，2022年，8月28日全世界的雜草有30000種，每年有1800種對作物造成不同程度的危害，造成的作物減產(chǎn)9.7%。近百年來采用化學(xué)除草劑有效地控制了許多雜草?；瘜W(xué)除草劑的大量使用也引發(fā)了一系列的問題，如除草劑抗性雜草植株的出現(xiàn)、土壤污染、水質(zhì)的退化、以及對非雜草生物（特別是人、畜）的危害等?；瘜W(xué)除草劑加拿大一枝黃花、豚草、水花生、水葫蘆、菟絲子等第三十四頁，共四十六頁，2022年，8月28日微生物除草劑主要有三大類：細菌、真菌和病毒。微生物除草劑微生物除草劑的開發(fā)研究始于20世紀中葉，隨著人們對植物病原菌認識的深入而得以展開。近幾十年來，隨著植物病原菌的不斷分離和研究，尤其是從雜草病株中篩選出來的一些植物病原菌表現(xiàn)出了潛在的除草活性，有可能開發(fā)成為可替代化學(xué)除草劑的新型生物農(nóng)藥。第三十五頁，共四十六頁，2022年，8月28日微生物除草劑應(yīng)具備的特性①可以進行人工繁殖；在噴施處理后，其生長速度要迅速；否則不能在一定時間內(nèi)抑制雜草生長直至死亡；③適合工業(yè)化生產(chǎn)；④便于包裝、運輸和使用。第三十六頁，共四十六頁，2022年，8月28日真菌除草劑的特性可用來有效地控制雜草的人工選育的雜草病原真菌制劑，稱為真菌除草劑(Mycoherbicide)。真菌除草劑是活的菌體或孢子，其作用必須在感染植株后才顯示出來。第三十七頁，共四十六頁，2022年，8月28日真菌除草劑資源真菌類有除草潛力的主要類群：刺盤孢菌屬（Colletotrichum）鐮孢菌屬（Fusarium）鏈格孢菌屬（Alternaria）尾孢菌屬（Cercospora）疫霉屬（Phytophthora）柄銹菌屬（Puccinia）葉黑粉菌屬（Entyloma）殼單孢菌屬（Ascochyta）核盤菌屬（Sclerotinia）第三十八頁，共四十六頁，2022年，8月28日除草菌株的篩選程序確定適宜的目標雜草在目標雜草中的自然品系中尋找病原菌研究初選雜草病原菌的生態(tài)學(xué)特性評估雜草病原菌的寄主專一性將所選雜草病原菌人工接種目標雜草，評估對雜草群體防治的有效性第三十九頁，共四十六頁，2022年，8月28日對自然篩選菌株的改造提高安全性1.對非目標植物無潛在的致病能力2.具有新基因型的病原菌代替自然菌株不會引起不良結(jié)果3.新型病原菌不產(chǎn)生真菌毒素或潛在的危險改進真菌對目標雜草的致病能力

1.在保證安全的基礎(chǔ)上有效擴大雜草寄主范圍擴大真菌除草劑的使用范圍2.提高對雜草的感病能力和傳播能力提高菌株的競爭力自然界存在許多植物寄生真菌，在侵染植物方面有一定的競爭性，因此應(yīng)提高所選菌株的競爭力第四十頁，共四十六頁，2022年，8月28日研究和使用的除草劑菟絲子盤長孢狀刺盤孢（C.gloeosporoidesf.sp.cuscutae）

防治大豆田菟絲子。

胡椒瘟疫菌（Phytophthorapalmivora）

用于控制柑橘園中的雜草絞死藤

銹菌（Pucciniacanaliculata）用于控制雜草油莎豆等橙刺盤孢菌錦葵小種，用于控制圓葉錦葵芹菜炭疽真菌（Colletotrichumtruncatum）控制雜草大麻田青第四十一頁，共四十六頁，2022年，8月28日微生物源除草劑微生物源除草劑是利用微生物所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，即植物毒素，進行雜草防治的一種新型的微生物除草劑。這類植物毒素：1）具有種的特異性；2）化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，難以人工合成；3）大多對哺乳動物無毒或低毒；4）相對于化學(xué)除草劑而言更易降解，不會引起生物災(zāi)害Fusariumoxysporum產(chǎn)生的真菌蛋白Nep1就能殺死闊葉雜草而對單子葉植物安全。