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(優(yōu)選)第四章病毒與亞病毒當(dāng)前1頁,總共66頁。非細(xì)胞生物分成病毒和亞病毒當(dāng)前2頁,總共66頁。第一節(jié)病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能一、病毒的一般特性病毒(Virus)是一類比細(xì)菌更小,能通過細(xì)菌過濾器,僅含一種類型核酸(或DNA或RNA),只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖的非細(xì)胞形態(tài)的微生物。當(dāng)前3頁,總共66頁。病毒的基本特點(diǎn)個(gè)體極小,能通過濾菌器,形態(tài)多樣,有球狀、桿狀、復(fù)合型。無細(xì)胞結(jié)構(gòu),主要由蛋白質(zhì)、核酸構(gòu)成,一個(gè)病毒體內(nèi)僅含一種核酸,核酸以單鏈或雙鏈形式存在。生活方式為專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,病毒酶系不全,離開活體后無生命特征。病毒以復(fù)制的方式增殖,包括核酸復(fù)制、核酸蛋白質(zhì)裝配。對(duì)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感。當(dāng)前4頁,總共66頁。二、病毒的形態(tài)構(gòu)造及化學(xué)組成1、形態(tài)病毒粒子:成熟的、完整的、具有感染性的病毒顆粒。當(dāng)前5頁,總共66頁。衣殼核酸包膜刺突核衣殼2、病毒的基本結(jié)構(gòu):當(dāng)前6頁,總共66頁。當(dāng)前7頁,總共66頁。3

病毒

對(duì)稱

三類典型形態(tài)的病毒:廿面體對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(球狀)

螺旋對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(桿狀)復(fù)合對(duì)稱的結(jié)構(gòu)(蝌蚪狀)大腸桿菌的T偶數(shù)噬菌體是由橢圓形的二十面體頭部和螺旋對(duì)稱的尾部組合而成,是病毒中復(fù)合對(duì)稱的代表。當(dāng)前8頁,總共66頁。①螺旋對(duì)稱的病毒粒子TobaccoMosaicVirus當(dāng)前9頁,總共66頁。②二十面體對(duì)稱病毒粒子當(dāng)前10頁,總共66頁。當(dāng)前11頁,總共66頁。③復(fù)合對(duì)稱的病毒粒子T4Bacteriophage當(dāng)前12頁,總共66頁。三、噬菌體病毒種類很多,根據(jù)病毒寄生的對(duì)象來分,有植物病毒、動(dòng)物病毒和微生物病毒。噬菌體:是病毒中的一種,一般把侵染細(xì)菌、放線菌的病毒叫噬菌體。(把侵染真菌的病毒叫噬真菌體)據(jù)Bradley(1967)歸納,噬菌體共有六類形態(tài)。當(dāng)前13頁,總共66頁。1、組成:主要由蛋白質(zhì)和核酸組成。2、基本形態(tài):蝌蚪形、微球形和纖絲形。(一)噬菌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與組成當(dāng)前14頁,總共66頁。以大腸桿菌T4噬菌體為例頭部:廿面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),由蛋白質(zhì)衣殼構(gòu)成,內(nèi)含一條DNA。頸部:薄盤狀,附頸須。尾鞘:長(zhǎng)95nm,衣殼粒螺旋對(duì)稱;可伸縮。尾髓:中空,DNA可由此進(jìn)入細(xì)胞?;?

六角形盤狀物,其上有刺突、尾絲。刺突:有吸附功能。尾絲:有識(shí)別吸附功能。大腸桿菌T4噬菌體構(gòu)造蝌蚪形噬菌體的構(gòu)造當(dāng)前15頁,總共66頁。(二)、噬菌體(phage)的繁殖感染細(xì)胞后,能在寄主細(xì)胞內(nèi)增殖,產(chǎn)生大量子代噬菌體并引起細(xì)菌裂解的噬菌體。烈性噬菌體(virulentphage)噬菌體感染細(xì)胞后,將其核酸整合(插入)到宿主的核DNA上,并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制,在一般情況下,不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。溫和噬菌體(temperatephrage)當(dāng)前16頁,總共66頁。1.烈性噬菌體的繁殖當(dāng)前17頁,總共66頁。Fig.2:Penetration

Fig.1:Adsorption

當(dāng)前18頁,總共66頁。Fig.4:LateReplication

Fig.3:EarlyReplication

當(dāng)前19頁,總共66頁。Fig.6:ReleaseFig.5:Maturation

當(dāng)前20頁,總共66頁。AnimationoftheLyticLifeCycleofaBacteriophage當(dāng)前21頁,總共66頁。當(dāng)前22頁,總共66頁。PhageT4infectingitshostE.colicell

當(dāng)前23頁,總共66頁。噬菌斑與噬菌體效價(jià)當(dāng)前24頁,總共66頁。噬菌斑將少量噬菌體與大量敏感菌混合培養(yǎng)在營(yíng)養(yǎng)瓊脂中,在平板表面布滿宿主細(xì)胞的菌苔上,可以用肉眼看到一個(gè)個(gè)透明的不長(zhǎng)菌的小圓斑,稱為噬菌斑。(每個(gè)噬菌斑一般由一個(gè)噬菌體粒子形成的。)噬菌體效價(jià)的測(cè)定效價(jià)表示每毫升試樣中所含有的侵染性的噬菌體粒子數(shù),也即噬菌斑形成單位(pfu)數(shù)或感染中心數(shù)。效價(jià)當(dāng)前25頁,總共66頁。單層平板法雙層平板法電鏡計(jì)數(shù)當(dāng)前26頁,總共66頁。噬菌體一步生長(zhǎng)曲線

one-stepgrowthcurve定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線,觀察一群噬菌體感染一群細(xì)胞所發(fā)生的變化。測(cè)定一步生長(zhǎng)曲線的步驟①用噬菌體的稀懸液去感染高濃度的宿主細(xì)胞,以保證每個(gè)細(xì)胞至多不超過一個(gè)噬菌體吸附。②混合液中加入定量的噬菌體的抗血清,中和尚未吸附的噬菌體。③用培養(yǎng)液稀釋混合液,中止抗血清的作用,適溫培養(yǎng)。④間斷樣進(jìn)行效價(jià)測(cè)定,得一曲線。當(dāng)前27頁,總共66頁。一步生長(zhǎng)曲線當(dāng)前28頁,總共66頁。2、溫和噬菌體與溶源性細(xì)菌溫和噬菌體:噬菌體感染細(xì)胞后,將其核酸整合(附著)到宿主的核DNA上,并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制,在一般情況下,不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。原噬菌體(或前噬菌體):即整合在宿主核DNA上的噬菌體的核酸。溶原性細(xì)菌:指在核染色體上整合有原噬菌體的細(xì)菌。可進(jìn)行正常生長(zhǎng)繁殖,而不被裂解。當(dāng)前29頁,總共66頁。溫和噬菌體的繁殖當(dāng)前30頁,總共66頁。當(dāng)前31頁,總共66頁。檢驗(yàn)溶源菌的方法當(dāng)前32頁,總共66頁。當(dāng)前33頁,總共66頁。四、植物病毒當(dāng)前34頁,總共66頁。病毒引起的植物病害特征1、因葉綠體被破壞或不能合成葉綠素,而使葉片發(fā)生花葉、黃化或紅化癥狀。2、植株發(fā)生矮化、叢植或畸形。3、形成枯斑或壞死。當(dāng)前35頁,總共66頁。Tulipmania郁金香狂潮

Tulipmania

or

tulipomania

wasaperiodinthe

DutchGoldenAge

duringwhichcontractpricesfor

bulbs

oftherecentlyintroduced

tulip

reachedextraordinarilyhighlevelsandthensuddenlycollapsed.AtthepeakoftulipmaniainFebruary1637,tulipcontractssoldformorethan10timestheannualincomeofaskilledcraftsman.Itisgenerallyconsideredthefirstrecordedspeculativebubble(or

economicbubble).Theterm"tulipmania"isnowoftenused

metaphorically

torefertoanylargeeconomicbubble(whenassetpricesdeviatefrom

intrinsicvalues).當(dāng)前36頁,總共66頁。Atulip,knownas"theViceroy",displayedina1637Dutchcatalog.Itsbulbcostbetween3000and4200florins

dependingonsize.Askilledcraftsmanatthetimeearnedabout300florinsayear當(dāng)前37頁,總共66頁。Anonymous17th-centurywatercolor

ofthe

SemperAugustus,famousforbeingthemostexpensivetulipsoldduringtulipmania.當(dāng)前38頁,總共66頁。五、人類和脊椎動(dòng)物病毒狂犬病病毒當(dāng)前39頁,總共66頁。TheInfluenzaVirus當(dāng)前40頁,總共66頁。甲型流感病毒(InfluenzaAvirus),又稱A型流感病毒乙型流感病毒(InfluenzaBvirus),又稱B型流感病毒丙型流感病毒(InfluenzaCvirus),又稱C型流感病毒當(dāng)前41頁,總共66頁。甲型流感病毒抗原變異情況亞型名稱抗原結(jié)構(gòu)流行年代代表病毒株原甲型(A0)H0N11930~1946A/PR/8/34(HoN1)亞甲型(A1)H1N11946~1957A/FM/1/4/(H1N1)亞洲甲型(A2)H2N21957~1968A/Singapore/1/57(H2N2)香港亞型(A3)H3N21968~1977A/Hongkong/1/68(H3N2)新A1與A3交替型H3N2H1N11977~至今A/USSR/90/77(H1N1)

A/BeiJing/32/92(H3N2)當(dāng)前42頁,總共66頁。流感病毒根據(jù)血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA的抗原性分為不同的亞型當(dāng)前43頁,總共66頁。當(dāng)前44頁,總共66頁。乙型肝炎病毒當(dāng)前45頁,總共66頁。顯微鏡下的天花病毒圖像SARS病毒圖像當(dāng)前46頁,總共66頁。艾滋病病毒模式圖當(dāng)前47頁,總共66頁。當(dāng)前48頁,總共66頁。當(dāng)前49頁,總共66頁。昆蟲病毒昆蟲病毒大體經(jīng)歷了3個(gè)主要階段:①證明病毒是許多昆蟲疾病的致病因子;②認(rèn)識(shí)昆蟲病毒的性質(zhì);③研究病毒與宿主之間的相互關(guān)系。

當(dāng)前50頁,總共66頁。核型多角體病毒(NPV),如家蠶NPV,棉鈴蟲NPV,松毛蟲NPV,春尺蠖NPV,舞毒蛾NPV,斜紋夜蛾NPV,粘蟲NPV當(dāng)前51頁,總共66頁。質(zhì)型多角體質(zhì)型多角體病毒,簡(jiǎn)稱CPV。我國(guó)對(duì)昆蟲質(zhì)型多角體病毒的研究是從家蠶病害的研究開始的,現(xiàn)已在30多種昆蟲中發(fā)現(xiàn)了質(zhì)型多角體病毒。

當(dāng)前52頁,總共66頁。顆粒體病毒(GV),如黃地老虎GV,菜粉蝶GV,茶小卷葉蛾GV等當(dāng)前53頁,總共66頁。第二節(jié)亞病毒凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中,只含其中之一的分子病原體。類病毒擬病毒朊病毒當(dāng)前54頁,總共66頁。一、類病毒viroidElectronmicroscopicpictureofpotatospindletuberviroid(PSTVd)Theysolelyconsistofasmall,single-stranded,circularRNA,whichisnotencapsidatedinaproteincoat.Potatospindletuberviroidgetsitsnamebecauseoftheoblongtubersproducedfrominfectedplants.當(dāng)前55頁,總共66頁。SymptomsofviroiddiseasesA:番茄矮化病,

B:鱷梨日斑病,

C:菊矮化病,

D:菊花褪綠斑駁這些裸露的RNA分子可以導(dǎo)致許多谷物,水果,觀賞植物,嚴(yán)重的病變,例如:馬鈴薯,番茄,黃瓜,菊花,鱷梨,椰子等當(dāng)前56頁,總共66頁。二、擬病毒virusoid當(dāng)前57頁,總共66頁。三朊病毒瘋牛病朊病毒當(dāng)前58頁,總共66頁。第三節(jié)病毒與實(shí)踐一、噬菌體與發(fā)酵工業(yè)二、昆蟲病毒用于生物防治三、病毒在基因工程中的應(yīng)用當(dāng)前59頁,總共66頁。一、噬菌體與發(fā)酵工業(yè)發(fā)酵周期明顯延長(zhǎng)碳源消耗緩慢發(fā)酵液清淡發(fā)酵產(chǎn)物形成緩慢或根本不形成噬菌體檢測(cè)會(huì)發(fā)現(xiàn)大量噬菌斑電鏡可看到噬菌體后果:①減產(chǎn)

②倒罐

當(dāng)前60頁,總共66頁。補(bǔ)救方法:①盡快提取產(chǎn)品②加藥抑制③及時(shí)更換菌種發(fā)酵生產(chǎn)時(shí)預(yù)防措施決不使用可疑菌種嚴(yán)格環(huán)境衛(wèi)生活菌液嚴(yán)禁排放通氣加料嚴(yán)控輪換使用生產(chǎn)菌株;設(shè)備滅菌使用抗噬菌體菌株當(dāng)前61頁,總共66頁。噬菌體的應(yīng)用1.用于鑒定細(xì)菌的分型;2.分子生物學(xué)領(lǐng)域的重要實(shí)驗(yàn)工具和最理想的材料;3.用于預(yù)防和治療傳染性疾??;4.用于篩選抗癌物質(zhì)和檢測(cè)致癌物質(zhì);5.測(cè)定輻射劑量;當(dāng)前62頁,總共66頁。三、病毒在基因工程中的應(yīng)用噬菌體作為原核生物基因工程的載體植物DNA病毒作為植物基因工程的載體動(dòng)物DNA病毒作為動(dòng)物基因工程的載體昆蟲DNA病毒作為真核生物基因工程的載體當(dāng)前63頁,總共66頁。三、病毒在基因工程中的應(yīng)用噬菌體可作為原核生物基因工程的優(yōu)良載體

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