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文檔簡介
酶類藥物的提取制藥酶類藥物
一、原料選擇選用原料應(yīng)注意以下幾點(diǎn):(1)不同酶的用料選擇:哪里有,含量高,選哪。(2)注意不同生長發(fā)育情況及營養(yǎng)狀況,用微生物制酶,故需測其活力來決定取酶階段。用動物器官提取酶,則與動物年齡及飼養(yǎng)條件有關(guān)。(3)從原料來源是否豐富考慮;(4)從簡化提純步驟著手(5)如用動物組織作原料,則此動物宰殺后應(yīng)立即取材。從動物或植物中提取酶受到原料的限制,隨著酶應(yīng)用日益廣泛和需求量的增加,工業(yè)生產(chǎn)的重點(diǎn)已逐漸轉(zhuǎn)向微生物。用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)藥用酶,不受季節(jié)、氣候和地域的限制,生產(chǎn)周期短,產(chǎn)量高,成本低,能大規(guī)模生產(chǎn)。二、酶類藥物的分類臨床用途消化酶類消炎酶類與治療心腦血管疾病有關(guān)的酶類抗腫瘤的酶類三、藥用酶的制備方法1、直接提取法2、微生物發(fā)酵法3、動植物細(xì)胞培養(yǎng)法四、酶的提取純化方法1、水溶液法常用稀鹽溶液或緩沖液提取。一般在低溫下操作。在酸性條件下穩(wěn)定的酶要在酸性條件下提取。一般來說,堿性蛋白酶用酸性溶液提取,酸性蛋白酶用堿性溶液提取。鹽濃度一般以等滲為好,相當(dāng)于0.15mol/LNaCl的離子強(qiáng)度是最適宜于酶的提取。丙酮粉:組織經(jīng)丙酮迅速脫水干燥制成丙酮粉,不僅可減少酶的變性,同時因細(xì)胞結(jié)構(gòu)成份的破碎使蛋白質(zhì)與脂質(zhì)結(jié)合的某些化學(xué)鍵打開,促使某些結(jié)合酶釋放到溶液中。常用的方法是將組織糜或勻漿懸浮于0.0lmol/L,pH6.5的磷酸緩沖液中,在0℃下一邊攪拌,一邊徐徐倒入10倍體積的-15℃無水丙酮內(nèi),10分鐘后,離心過濾取其沉淀物,反復(fù)用冷丙酮洗幾次,真空干燥即得丙酮粉。丙酮粉在低溫下可保存數(shù)年。2、有機(jī)溶劑法某些結(jié)合酶如微粒體和線粒體膜的酶,由于和脂質(zhì)牢固結(jié)合,為此必須除去結(jié)合的脂質(zhì),且不能使酶變性,最常用的有機(jī)溶劑是丁醇。3、表面活性劑法表面活性劑能與蛋白質(zhì)結(jié)含而分散在溶液中,故可用于提取結(jié)合酶。四、酶的純化方法
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