套式病毒目的學習資料

套式病毒目的學習資料第1頁/共109頁一、本科病毒主要特性冠狀病毒屬病毒顆粒具有多形性，略呈球形，直徑80-220nm

。具有囊膜和12-24nm的棒狀纖突，纖突頂端膨大呈球狀，纖突間有較寬的間隙，由于囊膜纖突排列呈皇冠狀，故而得名。核衣殼螺旋對稱。基因組為單分子線狀正股單股RNA，大小27-32Kb，是已知的RNA病毒中基因組最大的，具有傳染性。

第一節(jié)冠狀病毒科第2頁/共109頁第3頁/共109頁胞漿內(nèi)復制，通過出芽進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，胞吐釋放。冠狀病毒能在多種細胞上增殖。一、本科病毒主要特性第4頁/共109頁二、分類SARS冠狀病毒第5頁/共109頁1.分類地位：

屬于冠狀病毒科、冠狀病毒屬。三、常見的冠狀病毒豬傳染性胃腸炎病毒第6頁/共109頁2.病毒特點

呈圓形、橢圓形或多邊形；單分子線狀、單股正鏈RNA;螺旋對稱核衣殼；有囊膜，有18～24nm長的冠狀纖突。豬傳染性胃腸炎病毒第7頁/共109頁3.抵抗力：病毒對脂溶劑敏感，在低溫下極為穩(wěn)定，豬腸組織中的病毒，在-20℃可保存半年以上，室溫下可以存活3天，56℃作用45min可滅活病毒，0.5mol的MgCl2可以增強其對熱的抵抗力，對光敏感，糞便暴露于日光下6h，其內(nèi)所含病毒即被滅活。0.05%福爾馬林在37℃下20min可滅活病毒，0.5%的石炭酸在37℃下30min可滅活病毒。豬傳染性胃腸炎病毒第8頁/共109頁4.致病性TGEV在世界各地均有發(fā)現(xiàn)，是引起仔豬腹瀉的一種病原，對其他動物無傳染性。臨床癥狀是仔豬腹瀉、嘔吐，不同年齡和品種的豬均易感，3周齡以下的仔豬具有較高的死亡率，5周齡以后，發(fā)病豬的死亡率小于3周齡以內(nèi)豬（很少死亡），即隨著日齡增長，死亡率下降。豬傳染性胃腸炎病毒第9頁/共109頁第10頁/共109頁第11頁/共109頁5.致病機理TGEV的靶器官為小腸，病毒可存在于病豬的各個器官、體液、和排泄物中。但以空場、十二指腸、腸系膜淋巴結(jié)內(nèi)含毒量最高。滴度為每克組織含106個豬感染劑量?？山?jīng)呼吸道感染，病毒先在鼻粘膜和肺中復制，而后經(jīng)血液進入小腸。亦可經(jīng)（口、眼、食管、胃）消化道進入小腸。進入小腸的TGEV，感染小腸絨毛上皮細胞，導致絨毛縮短（影響消化吸收），絨毛受損后，絨毛上皮細胞分泌的乳糖酶及其他雙糖酶減少，導致腸內(nèi)容物的滲透壓增高，水從組織進入腸腔，導致腹瀉。豬傳染性胃腸炎病毒第12頁/共109頁6.免疫一般認為給母豬作口、鼻同時接種或乳腺內(nèi)接種，能給哺乳仔豬提供較好的乳汁免疫。乳汁抗體含有IgA、IgG、IgM，IgA主要為分泌型IgA，僅有通過粘膜免疫才能產(chǎn)生母源保護，非經(jīng)腸免疫不能產(chǎn)生母源保護。仔豬可通過初乳及乳汁獲得母源IgA抗體，獲得被動免疫，但血清中的IgG抗體不能提供保護。豬傳染性胃腸炎病毒第13頁/共109頁7.微生物學診斷①取疾病早期階段的仔豬腸粘膜作涂片或冰凍切片，通過熒光抗體或ELISA可快速檢出病毒。豬傳染性胃腸炎病毒第14頁/共109頁②RT-PCR檢測。

豬傳染性胃腸炎病毒第15頁/共109頁③病毒的分離鑒定豬甲狀腺原代細胞，較為敏感。初代分離可見微弱的CPE，原代豬腎、豬睪丸細胞盲傳多代可見CPE，傳代細胞對新分離株不敏感。④血清學實驗包熒光抗體、間接血凝、環(huán)狀沉淀試驗、瓊擴及中和試驗等，其中中和試驗應用最多，檢出率最高，特異性最強。⑤電鏡及免疫電鏡觀察豬傳染性胃腸炎病毒第16頁/共109頁8.預防與控制用弱毒疫苗免疫并不太有效，用強毒株接種懷孕母豬可使仔豬通過母源抗體獲得最佳保護。此外，改善衛(wèi)生條件，加強管理，對預防疫病有一定作用。豬傳染性胃腸炎病毒第17頁/共109頁冠狀病毒科\冠狀病毒屬。病毒粒子呈球形，大小為100-200nm，具有囊膜，核酸類型為正股單股RNA。（一）、病毒特點禽傳染性支氣管炎病毒IBV第18頁/共109頁（二）血凝性

本病毒含有血凝素，但未經(jīng)胰酶處理的含毒尿囊液，不能凝集雞的紅細胞。

若經(jīng)1%胰酶在37℃下作用3h，或56℃加熱30min，則會出現(xiàn)血凝性。經(jīng)胰酶處理的病毒，在-65℃可保存3周而不失去活性。（已經(jīng)適應雞胚的毒株缺乏血凝性）

第19頁/共109頁IBV能在雞胚以及雞胚氣管以及來自雞胚的多種細胞上生長；初次分離最好尿囊腔接種9～11日齡雞胚；感染組織內(nèi)不形成包涵體。（三）病毒的培養(yǎng)第20頁/共109頁傳染性支氣管炎是雞的一種急性、高度接觸性傳染的呼吸道疾病。本病僅發(fā)生于雞，雞不分年齡、性別和品種，均易感。但主要侵害1-4周齡的幼雞?；茧u主要（特征）表現(xiàn)為：氣喘、咳嗽、噴嚏和氣管出現(xiàn)鑼音。在雛雞還出現(xiàn)流鼻涕。產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋量和質(zhì)量下降，或停止產(chǎn)蛋。目前，還出現(xiàn)了以腎臟、腸道或腺胃病變?yōu)橹鞯闹虏⌒汀ＤI型傳支的病雞腎臟腫大、蒼白、有尿酸鹽沉積。（四）病毒的致病性第21頁/共109頁第22頁/共109頁病毒通過汽霧以及攝入污染糞便的食物，而在雞群中迅速傳播。在環(huán)境中，病毒可存活數(shù)天，在低溫下存活數(shù)周，因此，雞群中往往存在持續(xù)感染的帶毒者。病毒首先在呼吸道纖毛上皮細胞或腸道復制，可達很高滴度。在感染1-2天后，出現(xiàn)病毒血癥，將病毒散布到許多器官，最終導致生殖系統(tǒng)及腎臟的嚴重損傷。。由于病毒感染后，可進入各個器官，某些毒株對未成熟輸卵管可產(chǎn)生永久性的結(jié)構(gòu)損傷。（五）病毒的致病機理第23頁/共109頁本病可經(jīng)呼吸道、消化道傳播。從分泌物排毒長達2周，糞便排毒達3周。病毒也可存于感染雞的精液和急性期病雞所產(chǎn)的蛋中，康復雞可帶毒49天，35天具有傳染性。（六）雞群的帶毒情況第24頁/共109頁從病雞呼吸道分泌物、肺、腎臟、腺胃、輸卵管等處取病料。①病毒的分離培養(yǎng)：雞胚尿囊腔種。雞胚發(fā)育遲緩。出現(xiàn)侏儒胚。

（七）病毒的微生物學診斷第25頁/共109頁②病毒鑒定：易感雛雞接種；病毒中和實驗；血清學實驗（如熒光抗體、瓊脂擴散、間接血凝等）、核酸探針、PCR等。（八）病毒的微生物學診斷第26頁/共109頁該科只有1個屬，即：動脈炎病毒屬。

一、動脈炎病毒科的成員第二節(jié)動脈炎病毒科第27頁/共109頁為單鏈RNA病毒、衣殼呈二十面體對稱，核衣殼直徑40-45nm，病毒粒子直徑為60-70nm，具有囊膜、5nm的突起，對乙醚、氯仿敏感。PRRSV無血凝特性。豬呼吸與繁殖綜合癥病毒PRRSV（一）病毒特點第28頁/共109頁符合該科病毒的特性，該病毒無血凝性.（一）病毒特點豬呼吸與繁殖綜合癥病毒PRRSV第29頁/共109頁根據(jù)核苷酸序列可分為兩個基因型：①歐洲基因型（A群）：代表株LV；②美洲基因型（B群）：代表株ATCCVR-2332。在中國尚未見有歐洲型的報道。（二）病毒的基因型第30頁/共109頁病毒能在豬肺巨噬細胞(PAM)和傳代細胞MarC-145或Vero及MA104培養(yǎng)復制。（三）病毒的培養(yǎng)第31頁/共109頁具有高度的傳播性，主要侵害母豬和仔豬。通過空氣經(jīng)呼吸道感染，亦可經(jīng)精液由交配感染。

母豬流產(chǎn)、不育癥為特征，出生死胎，弱仔；仔豬呼吸困難（彌漫性間質(zhì)性肺炎），死亡率高；育肥豬的癥狀類似豬流感——流涕。部分病豬耳部和軀體末端皮膚發(fā)紺，故稱“藍耳病”。

（四）病毒的致病性第32頁/共109頁病理變化：通常感染豬子宮、胎盤、胎兒乃至新生仔豬無肉眼可見的變化。剖檢死產(chǎn)、弱仔和發(fā)病仔豬常能觀察到肺炎病變?；疾〔溉樽胸i肺臟出現(xiàn)重度多灶性乃至彌漫性黃褐色或褐色的肝變；脾臟腫大，淋巴結(jié)腫脹；胸腺萎縮、心包積液等。第33頁/共109頁第34頁/共109頁第35頁/共109頁第36頁/共109頁感染豬在若干星期內(nèi)抗體存在的同時出現(xiàn)病毒血癥，已經(jīng)證實抗體可以增強病毒感染。病毒可以通過胎盤感染胎兒，導致臍帶出血性病變。病毒感染單核細胞及巨噬細胞，造成免疫抑制。（五）病毒的致病機理第37頁/共109頁病毒分離與鑒定：應用豬肺巨噬細胞（PAM）或傳代細胞（MarC-145、VeroMA104）分離病毒。用免疫金、銀染色或過氧化酶染色進行鑒定；分子生物學方法（如RT-PCR）具有特異敏感快速等優(yōu)點。（六）病毒的微生物學診斷第38頁/共109頁國內(nèi)外己經(jīng)推廣應用滅活苗或弱毒苗。但因病毒的變異性以及致病與免疫機理的復雜性，滅活苗的免疫效果不確實，弱毒苗的安全性仍存在隱患。對本病尚無有效的治療或預防藥物。（七）防治第39頁/共109頁本章小結(jié)冠狀病毒科的基因組結(jié)構(gòu)和特點決定其易發(fā)生變異和進化，致使致病性和抗原性復雜多變，豬的冠狀病毒、禽傳染性支氣管炎病毒及貓傳染性腹膜炎病毒是典型。SARS冠狀病毒是2003年發(fā)現(xiàn)的對人有高致病性的冠狀病毒。多種冠狀病毒均可引起腹瀉。動脈炎病毒科的豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒對豬具有致病性，其檢測和預防均具有重要意義。第40頁/共109頁本章復習題1．比較冠狀病毒科與動脈炎病毒科的異同并說明設立套式病毒目的依據(jù)。2．以禽傳染性支氣管炎病毒為例，試述冠狀病毒變異的復雜性。3．闡述豬呼吸與繁殖綜合征病毒的致病特點。第41頁/共109頁第34章其他正鏈RNA病毒第42頁/共109頁該科的病毒在人醫(yī)和獸醫(yī)中均具有重要性。其中口蹄疫病毒是人類發(fā)現(xiàn)的第一個動物病毒；而且是目前研究最為廣泛、深入的病毒之一。人類的脊髓灰質(zhì)炎病毒也是該科的成員。第一節(jié)微RNA病毒科第43頁/共109頁微RNA病毒科分6個屬：口蹄疫病毒屬、腸病毒屬、心病毒屬、鼻病毒屬、肝病毒屬及副腸孤病毒屬。這6個屬的重要區(qū)別是：口蹄疫ph7以下不穩(wěn)定1.

在低溫下穩(wěn)定鼻病毒屬ph5以下失活其他幾個屬在pH3均穩(wěn)定2.5’端非編碼區(qū)：心病毒屬及口蹄疫有一個長的聚C尾，其他幾個屬則無。3.

心病毒屬與口蹄疫病毒屬編碼衣殼蛋白的先導蛋白又有區(qū)別。一、分類第44頁/共109頁病毒顆粒無囊膜，直徑20-30nm，20面體對稱，外表光滑呈球形。每個衣殼單體都由4蛋白組成：VP1、VP2、VP3、VP4?；蚪M為單分子線狀正股單股RNA，基因組RNA具有傳染性。二、本科病毒主要特征第45頁/共109頁屬于微RNA病毒科、口蹄疫病毒屬。病毒粒子20-25nm，呈圓形或六角形，二十面體對稱，無囊膜。在負染標本中，可見由32個殼粒組成的衣殼口蹄疫病毒FMDV一、病毒形態(tài)特征第46頁/共109頁實驗動物中，豚鼠、小鼠、乳鼠均易感。

FMDV可在多種細胞中增值，且增值速度快。二、病毒培養(yǎng)第47頁/共109頁4℃較為穩(wěn)定，-20∽-70℃可保存數(shù)年之久，畜舍、墻壁、或地板上的干燥分泌物中的病毒，夏天可存活1個月，冬天2個月。pH7.4-7.6最適。對酸堿敏感，酸堿條件下迅速滅活（pH3或1%NaOH下1min即可滅活）；乳品中的口蹄疫病毒于70℃10min即可滅活，肉品(或尸體)中的FMDV，由于尸僵后迅速產(chǎn)生乳酸，故肌肉中的病毒可迅速滅活，腺體、淋巴結(jié)和骨髓中的病毒由于不易產(chǎn)酸，病毒可活數(shù)月。常用消毒劑如：酚類、乙醚、氯仿及一些去污劑對病毒作用不大。但3-5%的福爾馬林、0.2-0.5%的過氧乙酸、5%的氨水、5%的次氯酸鈉均為口蹄疫病毒的良好消毒劑。由于1%NaOH可在1min內(nèi)滅活病毒，故畜舍、運輸車和飼槽等常用其消毒。三、抵抗力第48頁/共109頁口蹄疫病毒具有7個血清型：A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3及亞洲1型。每一個血清型又可進一步劃分為若干亞型，共有亞型65個。各型之間臨床表現(xiàn)沒有什么區(qū)別，但各型之間交叉免疫微弱，幾乎無交叉免疫。且本病毒具有較大的變異性，病毒在保存或流行過程中常發(fā)生抗原漂移，這給本病的預防帶來一定的困難。四、血清型第49頁/共109頁五、致病性口蹄疫病毒是全球性最重要的動物健康問題之一，世界大部分地區(qū)時有發(fā)生。僅1973年，就有73個國家和地區(qū)爆發(fā)?？谔阋卟《局饕趾ε继惬F，偶爾見于人和其他動物。人特別是兒童，可得心肌炎引起死亡。家畜中以牛最易感，其次是豬，再次是綿羊、山羊和駱駝。馬不感染。本病常在豬群和牛群中大范圍流行。國際獸醫(yī)局（OIE）一直將本病列為發(fā)病后必須報告的A類疫病名單之首。第50頁/共109頁本病的主要癥狀：口、鼻、蹄及乳房等部位發(fā)生水泡和潰爛為特征。（在咽喉、氣管、支氣管有時有爛斑和潰瘍，心包膜有彌散狀及點狀出血），并有可能出現(xiàn)跛行。不同動物癥狀稍有不同。懷孕母牛可能流產(chǎn)，而后導致繁殖能力下降；犢牛常不表現(xiàn)臨床癥狀即死亡，主要是心肌炎；豬則以跛蹄為最主要的癥狀。該病死亡率不高，但感染率很高。五、致病性第51頁/共109頁五、致病性第52頁/共109頁病毒在水泡及淋巴結(jié)中含毒量最高。在水泡發(fā)展的過程中，病毒進入血流，則可分布于全身各部分組織和體液。實驗動物中，豚鼠、小鼠、乳鼠均易感。FMDV可在多種細胞中增值，且增值速度快。五、致病性第53頁/共109頁反芻動物感染的主要途徑是通過吸入感染，但亦可通過采食或接觸污染物而感染。病毒經(jīng)呼吸道而感染時，最初在咽部復制，而后傳播到其他組織，在臨床癥狀出現(xiàn)前的24h，患畜排出病毒，奶中也帶有大量的病毒，并持續(xù)數(shù)天，感染豬噴出的飛沫中含有大量的病毒。六、致病機理第54頁/共109頁上皮細胞是FMDV的易感靶細胞，病毒侵入機體后，首先在侵入部位的上皮細胞內(nèi)增值，引起漿液性滲出物而形成原發(fā)性水泡。1-3天后，病毒進入血流，引起動物體溫升高和全身癥狀，病毒隨著血流到達所嗜好的部位（如：口腔粘膜、蹄部、以及乳房皮膚的表層組織）繼續(xù)增值，形成繼發(fā)性水泡，隨著水皰的發(fā)展，融合而破裂時，體溫即下降至正常，病毒從血流中逐漸減少直至消失，此時病畜即進入恢復期，多數(shù)病例逐漸好轉(zhuǎn)。病毒可在某些康復動物的咽部長時間存在，牛在感染后可長達2年，綿羊可達6個月，豬未發(fā)現(xiàn)病毒的持續(xù)感染?？祻团ν筒《靖腥镜拿庖吡删S持1年或稍長。六、致病機理第55頁/共109頁七、微生物學診斷口蹄疫幾乎是世界各國都被列為必須上報的疫病，診斷只能在指定的實驗室進行，一般是檢測抗體。送檢的樣品包括：水泡液、剝落的水泡、抗凝血或血清等，死亡動物則可采淋巴結(jié)、扁桃體及心等。樣品應冷凍保存，或置于pH7.6的甘油緩沖液中。檢測有多種方法：可用補體結(jié)合試驗、病毒中和試驗、ELISA、瓊擴等方法檢測。第56頁/共109頁第57頁/共109頁八、預防與控制弱毒疫苗可能散毒，并對其他動物不安全，故發(fā)病時一般不用弱毒疫苗，而推薦使用濃縮的滅活疫苗。即封殺消免。第58頁/共109頁第五節(jié)黃病毒科黃病毒可分為3個屬：黃病毒屬、瘟病毒屬、丙肝病毒屬。其中瘟病毒屬的豬瘟病毒為獸醫(yī)學研究的重要對象。第59頁/共109頁SFV屬黃病毒科、瘟病毒屬成員。病毒粒子呈球形，直徑40-50nm，二十面體對稱，有囊膜，囊膜上有許多6-8m長的纖突，基因組為單股線狀RNA，具有傳染性。豬瘟病毒CSFV一、病毒特征豬瘟病毒（超薄切片）第60頁/共109頁本病毒只有一個血清型，但不同毒株間存在抗原差異性。（即：有毒力大小之分）本病毒無血凝性。一、病毒特征第61頁/共109頁本病毒對氯仿、乙醚敏感，對胰酶有中度敏感性。在pH5-10之間，病毒毒力穩(wěn)定，超出此范圍迅速失去感染性。病毒與甘油混合后在低溫可保存良好。對腐敗敏感，在腐敗尸體中，病毒經(jīng)3-4d失去感染性，但骨髓可保持其感染性達15d。5%苯酚15min、5%氫氧化鈉lh可使其滅活。常用氫氧化鈉進行豬場環(huán)境消毒。2%的NaOH為最合適的消毒藥。二、病毒抵抗力第62頁/共109頁SFV可在豬腎、脾、骨髓、睪丸、淋巴結(jié)、肺、白細胞等原代細胞或傳代細胞系上生長，也可在犢牛睪丸細胞或羔羊腎細胞上生長，一般不產(chǎn)生CPE。本病毒一般不能在雞胚或除豬以外的動物中生長。將SFV交替通過豬體和兔體數(shù)代用經(jīng)兔體連續(xù)傳代后能適應兔，此適應株稱為兔化弱毒株，對豬的致病力顯著減弱，但可致家兔體溫升高，現(xiàn)已廣泛用于疫苗生產(chǎn)。三、病毒的培養(yǎng)第63頁/共109頁豬瘟病毒只感染豬，各種年齡、性別和品種的豬均易感。發(fā)病率和死亡率均可高達90%以上。本病通過直接或間接接觸傳播，病豬是本病的主要傳染源。通常經(jīng)呼吸道或消化道攝人被病豬的新鮮分泌物或排泄物污染的食物或水而造成易感豬發(fā)病，一般認為尿液及鼻眼分泌物最具傳染性。病毒感染懷孕母豬導致死胎、流產(chǎn)、木乃伊胎或死產(chǎn)，所產(chǎn)仔豬不死者產(chǎn)生免疫耐受，不產(chǎn)生抗豬瘟病毒的抗體，表現(xiàn)為：顫抖、矮小并終身排毒，多在數(shù)月內(nèi)死亡。四、致病性及致病機理第64頁/共109頁病毒在易感動物吞入污染物時經(jīng)口腔侵入宿主體內(nèi)后，在扁桃體內(nèi)復制增值，然后經(jīng)淋巴管進入淋巴結(jié)，繼續(xù)增值，隨即到達外周血，在脾臟、骨髓、內(nèi)臟淋巴結(jié)等組織繁殖達高滴度，導致高水平病毒血癥、白細胞及血小板減少。豬瘟病毒對造血和血管組織具有特殊的親和力，這些組織發(fā)生損傷，即是淋巴腫大和廣泛性出血的原因，另外，豬瘟病毒感染引起的白細胞及血小板減少，亦是出血性病變的重要原因。四、致病性及致病機理第65頁/共109頁急性豬瘟典型的病變?yōu)椋盒⊙茏冃?，導致腎、膀胱、皮膚及淋巴結(jié)出血，脾臟包膜下、皮膚消化道粘膜出現(xiàn)梗死，淋巴組織壞死。消化道內(nèi)的淋巴組織壞死常發(fā)生繼發(fā)感染。特征病變?yōu)椋耗I臟呈麻雀蛋樣出血點；淋巴結(jié)出血、水腫、呈現(xiàn)大理石樣或紅至黑色外觀；脾臟有梗死。在慢性豬瘟，可形成圓形或卵圓形隆起的紐扣樣腫。四、致病性及致病機理第66頁/共109頁豬瘟野毒人工感染豬第67頁/共109頁豬瘟感染引起的流產(chǎn)第68頁/共109頁豬瘟病毒感染引起的“麻雀蛋樣腎”第69頁/共109頁第70頁/共109頁第71頁/共109頁本病的診斷方法很多，除兔體交互試驗外，還有IFA、ELISA、間接血凝、反向間接血凝、反向凝集試驗、協(xié)同凝集試驗、瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳、火箭免疫電泳、ELISA等血清學方法，其中有些方法已有試劑盒供應。五、微生物學診斷第72頁/共109頁(一)病料采集

采集病毒血癥高熱期病豬血液、淋巴結(jié)、扁桃體和脾臟。慢性豬瘟可采集流產(chǎn)胎兒和死產(chǎn)豬臟器。(二)分離培養(yǎng)

將待檢病料處理后接種于豬腎、睪丸原代細胞或豬腎傳代細胞PK一l5中培養(yǎng)。五、微生物學診斷第73頁/共109頁(三)血清學試驗1·熒光抗體技術(shù)

取病豬扁桃體、淋巴結(jié)或脾作觸片或冰凍切片，本法簡易快速，能直接檢出感染細胞中的病毒抗原。五、微生物學診斷豬瘟病毒感染細胞熒光染色第74頁/共109頁五、微生物學診斷(三)血清學試驗2·酶標抗體技術(shù)1)組化法此法應用最廣。取病豬扁桃體、淋巴結(jié)、脾、腎觸片或冰凍切片，或病豬白細胞涂片，丙酮固定10min，加已知豬瘟酶標抗體染色，光鏡檢查。2)ELISA

可檢測抗原或抗體。第75頁/共109頁(三)血清學試驗3.瓊擴試驗以病豬肝、淋巴結(jié)等制備待檢抗原，在1%瓊脂板上與已知抗豬瘟病毒陽性血清作雙向雙擴散。本病簡便易行。4·對流免疫電泳按常規(guī)操作進行。五、微生物學診斷第76頁/共109頁(四)動物試驗1·接種易感豬此法最敏感，但耗費大，多用于最后診斷。2·兔體交互免疫試驗取健康易感兔測定體溫后，接種待檢病料，每天測溫，5-7d后再接種豬瘟兔化弱毒株并連續(xù)測溫3d，如果兔體溫不升高或升高不到lT，則證明待檢病料中含有CSFV。同時設不接種病料的對照組，它們在接種兔化弱苗后體溫應升高。此外，單克隆抗體技術(shù)、核酸探針技術(shù)、PCR技術(shù)等也己用于本病毒檢測。五、微生物學診斷第77頁/共109頁一般配種前免疫接種，一般1年免疫2次即可預防。六、防治第78頁/共109頁本章小結(jié)微RNA病毒科是獸醫(yī)病毒學的重要研究對象。分為9個屬，其中最重要的是口蹄疫病毒屬和腸病毒屬。口蹄疫病毒是全球性重要的動物病毒之一，有7個血清型，并不斷發(fā)生抗原性漂移，對牛、豬等多種動物有高度的感染性。黃病毒科中最重要的是瘟病毒屬的豬瘟病毒及牛病毒性腹瀉病毒。二者均可引起持續(xù)性感染，牛病毒性腹瀉病毒目前分為2個種。第79頁/共109頁本章參考復習題1．試述微RNA病毒科的主要特點及分類。2．口蹄疫病毒有哪些血清型？3．如何鑒別口蹄疫病毒野毒感染與疫苗接種？4．黃病毒科如何分類？各有何特點？5．牛病毒性腹瀉病毒有哪些生物型？其致病性及基因結(jié)構(gòu)有何差異？6．試述豬瘟病毒的傳播特點及檢測手段。第80頁/共109頁朊病毒是動物與人類傳染性海綿狀腦病的病原。它沒有核酸，只有傳染性的蛋白質(zhì)顆粒，因此有建議將其譯為“朊?！薄?5世紀發(fā)現(xiàn)的綿羊“癢病”由朊病毒引起。1986年，英國發(fā)現(xiàn)的“瘋牛病”（牛海綿狀腦?。?，嚴重打擊了養(yǎng)牛業(yè)，并危及人類健康，震驚全世界，其病原亦為朊病毒。第35章阮病毒第81頁/共109頁朊病毒是細胞正常蛋白經(jīng)變構(gòu)后獲得致病性。這種正常的細胞蛋白命名為PrPC。大多數(shù)哺乳動物的基因組均編碼，并在許多組織尤其是神經(jīng)元及淋巴內(nèi)皮細胞中表達。PrPC的同源異構(gòu)體為PrPSC，在同一宿主，二者的氨基酸序列相同，但PrPSC的構(gòu)象改變，由以α螺旋為主變?yōu)橐驭抡鄣鼮橹?，人和哺乳動物的PrPSC具有單克隆抗體識別共同的表位。一、朊病毒特征第82頁/共109頁PrPSC抵抗內(nèi)切酶的消化，內(nèi)切酶可導致PrPSC凝聚，形成螺旋形桿狀纖維，即所謂的癢病相關(guān)纖維（SAF）。SAF在腦組織內(nèi)形成神經(jīng)元空斑（亦即PrP斑），引致海綿狀損害及喪失神經(jīng)元功能。一、朊病毒特征第83頁/共109頁許多足以殺死其他微生物的化學藥物或環(huán)境以及物理因素（紫外線或射線）對PrPSC無效。高壓2h滅活，5-25%的次氯酸鈉浸泡可殺死。二、朊病毒的抵抗力第84頁/共109頁朊病毒在倉鼠、小鼠腦內(nèi)增值時間為5.2天，在人和動物的潛伏期長達數(shù)月至數(shù)十年。感染引致腦組織空泡變性、淀粉樣蛋白斑塊、神經(jīng)膠質(zhì)細胞增生等。不引起炎癥反應、不引起宿主的免疫反應（即不誘導干擾素的產(chǎn)生、不破壞B、T細胞的功能）。三、朊病毒生物學特性第85頁/共109頁將綿羊、?；蛉说碾貌《驹谛∈蠡騻}鼠接種傳代，其受體動物的PrPSC氨基酸序列與受體動物的PrPC的相同，而不是與供體動物的相同。在某個宿主甚至產(chǎn)生PrP基因的不同變異，每個變異株具有不同的病變、潛伏期及死亡率。三、朊病毒生物學特性第86頁/共109頁1.癢?。鹤畛踉谟?，后蔓延到世界各地，已有200年的歷史。是羊的一種慢性致死性疾?。河捎诓⊙蚓哂兄袠猩窠?jīng)系統(tǒng)變性、劇癢、共濟失調(diào)、高死亡率等特點，故命名為綿羊癢病。

2.瘋牛病1985.4在英國阿什福德一農(nóng)場首次發(fā)現(xiàn)；隨后英國國家獸醫(yī)中心發(fā)現(xiàn)病牛的大腦組織呈海綿狀變性，據(jù)此于1986.11將該病定為牛海綿狀腦病

由于病牛臨床表現(xiàn)為步態(tài)不穩(wěn)、共濟失調(diào)、搔癢、煩躁不安等神經(jīng)癥狀，故俗稱瘋牛病。

BSE的病程一般為14-90天，潛伏期長達4-6年。這種病多發(fā)生在4歲左右的成年牛身上。四、常見的朊病毒疾病第87頁/共109頁3.人類的阮病毒病克-雅氏?。夯颊叽蠖酁?0歲以上，是由自身PrP蛋白發(fā)生變異引起變異型克-雅氏?。夯颊邽槭畮讱q至三十歲的年輕人，由于取食病牛產(chǎn)品而感染。患者首先出現(xiàn)憂郁癥的病狀，繼而不能行走，并呈現(xiàn)精神障礙等癡呆癥狀，最后死亡。

庫魯?。喊l(fā)現(xiàn)于新幾內(nèi)亞一個叫Fore的部落，當?shù)厝朔Q作kuru，意即顫抖。病人多數(shù)是婦女及小孩，病癥有言語含糊及無意識地狂笑，最后不省人事并死亡。美國醫(yī)生D.C.Gajdusek發(fā)現(xiàn)當?shù)貗D女及小孩具有吃死者尸體的習慣，結(jié)果受到感染。致死性家族性失眠癥：也是一種遺傳性疾病，PrP蛋白178位的天冬酰胺被天冬氨酸取代?；颊叩闹饕Y狀是失眠，并有CJD的癥狀。四、常見的朊病毒疾病第88頁/共109頁本章小結(jié)朊病毒是動物和人類傳染性腦病的病原，本質(zhì)為具有傳染性的蛋白質(zhì)。朊病毒的基本組成單位為PrPsc,它與正常細胞的PrPc的區(qū)別在于構(gòu)象的改變。PrPsc凝聚成電鏡下可見的SAF，后者導致腦組織神經(jīng)元空斑，出現(xiàn)海綿樣病損。朊病毒對理化因素的抵抗力很強，朊病毒的復制以PrPsc為模板，使PrPc變構(gòu)與之形成二聚體，進而形成PrPsc分子。第89頁/共109頁本章參考復習題1．朊病毒有哪些主要的生物學特性？2．比較并分析PrPc及PrPsc的主要異同3．朊病毒如何復制？基因起何作用？4．試述牛海綿狀腦病的成因、特點及與人類健康的關(guān)系。5．提出癢病的控制措施并分析其依據(jù)及可行性。6．朊病毒的發(fā)現(xiàn)對你有何啟示？第90頁/共109頁噬菌體是寄生于細菌、支原體、螺旋體、放線菌以及藍細菌等(即；具有細胞結(jié)構(gòu)形態(tài)的微生物)的一類病毒，亦稱“細菌病毒”。

第36章噬菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)噬菌體的種類及與宿主的關(guān)系噬菌體復制過程噬菌體的應用第91頁/共109頁從外形看有4種：即蝌蚪形、微球形、細桿形、檸