檢測原理詳解演示文稿

檢測原理詳解演示文稿當(dāng)前1頁，總共60頁。優(yōu)選檢測原理當(dāng)前2頁，總共60頁。XE-SERIES血液分析儀器基本性能機(jī)型XE-2100XT-1800iXS-800iSF-3000速度150t/h80t/h60t/h80t/h閉蓋全血200ul150ul------270ul開蓋全血130ul85ul20ul170ul預(yù)稀釋40ul40ul20ul40ulCBC全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋全血/預(yù)稀釋DIFF全血全血全血/預(yù)稀釋全血IMI全血---------------NRBC全血---------------RET全血/預(yù)稀釋(113t/h)---------------當(dāng)前3頁，總共60頁。檢測原理---標(biāo)本檢測流程WBC/BASO:流式原理；NRBC、4DIFF、RET：

流式細(xì)胞技術(shù)和核酸熒光染色技術(shù)；IMI：使用射頻/直流電技術(shù)和流式細(xì)胞技術(shù)；RBC/PLT利用液流聚焦電阻抗技術(shù)；HGB：SLS原理。當(dāng)前4頁，總共60頁。核酸熒光染色技術(shù)：SYSMEX公司采用聚次甲基和堊嗪作為核酸熒光染料，細(xì)胞經(jīng)過特殊溶血素的處理，熒光染料可以快速進(jìn)入胞漿和胞核對核酸染色，細(xì)胞內(nèi)的熒光染料在633nm激光的激發(fā)下產(chǎn)生一定的熒光強(qiáng)度，這種熒光強(qiáng)度與細(xì)胞的核酸含量成正相關(guān)，熒光染色后，熒光強(qiáng)度大小依次排列順序?yàn)椋寒愋土馨图?xì)胞>原始細(xì)胞/幼稚粒細(xì)胞>單核細(xì)胞>淋巴細(xì)胞>粒細(xì)胞/晚幼紅細(xì)胞>網(wǎng)織紅細(xì)胞/網(wǎng)織血小板/聚集血小板>成熟紅細(xì)胞/成熟血小板。當(dāng)前5頁，總共60頁。流式細(xì)胞技術(shù)

待測血樣稀釋成單個細(xì)胞懸液，細(xì)胞經(jīng)過快速特異性核酸熒光染色，在鞘液的約束下，排成單列由流動室的噴嘴噴出，通過測量區(qū)的細(xì)胞在垂直入射的激光束照射和激發(fā)下，產(chǎn)生前向散射光（FSC）、側(cè)向散射光（SSC）、側(cè)向熒光（SFL）。FSC主要反映細(xì)胞的大小，SSC主要反映細(xì)胞內(nèi)顆粒物質(zhì)的大小和多少，SFL主要反映細(xì)胞的核酸含量的多少。當(dāng)前6頁，總共60頁。射頻（RF）/直流（DC）電技術(shù)RF/DC檢測技術(shù)，通過直流電阻的變化測定血細(xì)胞的大小，并通過射頻電阻測定血細(xì)胞內(nèi)的密度。圖四顯示的是一個白細(xì)胞的RF/DC信號。在IMI通道中，RF/DC技術(shù)主要用來檢測幼稚髓細(xì)胞，越幼稚的細(xì)胞密度越小。

RF信號大小依次順序是：桿狀核粒細(xì)胞>幼稚粒細(xì)胞>原始髓細(xì)胞>造血干祖細(xì)胞（包括HPC）。當(dāng)前7頁，總共60頁。液流聚焦電阻抗技術(shù)液流聚焦技術(shù)是流式細(xì)胞術(shù)中的一種技術(shù)，利用液體層流將使細(xì)胞排成單列通過檢測孔，圖五中，前鞘流保證細(xì)胞單個通過檢測孔，避免細(xì)胞與細(xì)胞重疊通過檢測孔；后鞘流避免液體返流，避免細(xì)胞隨著返流液體再次通過檢測孔。利用液流聚焦技術(shù)可以使細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果更加準(zhǔn)確，重復(fù)性更好。在檢測孔，細(xì)胞將得到阻抗信號，由于細(xì)胞是一個不良導(dǎo)體，細(xì)胞越大，阻抗信號越大，阻抗信號反映細(xì)胞的大小信息。當(dāng)前8頁，總共60頁。SLS（十二烷基磺酸鈉）法原理：1，紅細(xì)胞溶解釋放血紅蛋白；2，改變血紅蛋白結(jié)構(gòu)；3，氧化二價鐵為三價鐵；4，形成SLS-Hb化合物。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰，根據(jù)朗伯比爾定律將535nm處SLS-Hb的吸光度換算成血紅蛋白濃度。SLS法具有無毒的優(yōu)點(diǎn)，而且與國際參考方法氰化高鐵血紅蛋白法具有很好的相關(guān)性。當(dāng)前9頁，總共60頁。XE系列試劑英文名稱中文名稱作用CELLPACK稀釋液RBC/PLT/HGB檢測CELLSHEATH鞘流液前鞘流、后鞘流STROMATOLYSER-FB嗜堿通道溶血素溶解出嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞為裸核STROMATOLYSER-4DL白細(xì)胞分類溶血素溶解紅細(xì)；在白細(xì)胞膜上打孔STROMATOLYSER-4DS白細(xì)胞分類染液核酸染色STROMATOLYSER-NR（溶血素）有核紅細(xì)胞通道溶血素溶解有核紅細(xì)胞為裸核STROMATOLYSER-NR（染液）有核紅細(xì)胞通道染液核酸染色SULFOLYSER紅細(xì)胞溶血素HGB檢測STROMATOLYSER-IMIMI通道溶血素溶解成熟白細(xì)胞RETSEARCH（II）（稀釋劑）網(wǎng)織紅細(xì)胞通道稀釋液RET檢測RETSEARCH（II）（染液）網(wǎng)織紅細(xì)胞通道染液核酸染色當(dāng)前10頁，總共60頁。白細(xì)胞檢測原理DIFF通道WBC/BASO通道IMI通道NRBC通道當(dāng)前11頁，總共60頁。DIFF通道4DL

完全溶解紅細(xì)胞血小板在白細(xì)胞膜上打孔4DS

對核酸染色縱坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度當(dāng)前12頁，總共60頁。試劑反應(yīng)（Ⅰ）當(dāng)前13頁，總共60頁。試劑反應(yīng)（Ⅱ）當(dāng)前14頁，總共60頁。試劑反應(yīng)（Ⅲ）當(dāng)前15頁，總共60頁。當(dāng)前16頁，總共60頁。DIFF通道的重要信息異常細(xì)胞：幼稚粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、瘧原蟲抗干擾能力強(qiáng)，WBC更加準(zhǔn)確：難溶紅細(xì)胞、聚集血小板、脂質(zhì)顆粒當(dāng)前17頁，總共60頁。異型淋巴細(xì)胞，原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞：病毒、原蟲等刺激下，胞體體增大、胞質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng)，細(xì)胞核母細(xì)胞化。散點(diǎn)圖上熒光強(qiáng)度最強(qiáng)幼稚粒細(xì)胞：RNA的合成隨著細(xì)胞的程度而逐漸減少，即細(xì)胞越幼稚，RNA越多，散點(diǎn)圖上熒光強(qiáng)度越高原始細(xì)胞：一般情況下，五種白細(xì)胞不能正常分類，時OTHER區(qū)域一般為原始細(xì)胞幼稚粒細(xì)胞異常淋巴嗜酸中性單核淋巴嗜堿當(dāng)前18頁，總共60頁。瘧原蟲散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖特征：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏當(dāng)前19頁，總共60頁。有核紅細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞核固縮，細(xì)胞簡單，因此在淋巴細(xì)胞的正下方。當(dāng)前20頁，總共60頁。難溶紅細(xì)胞和脂質(zhì)顆粒、血小板聚集難溶紅細(xì)胞表現(xiàn)為白細(xì)胞群下方有大量散點(diǎn)出現(xiàn)，并且部分顯示為淡蘭色（和白細(xì)胞相同的顏色）脂質(zhì)顆粒在散點(diǎn)圖上表現(xiàn)為胡須狀當(dāng)出現(xiàn)難溶紅細(xì)胞和脂質(zhì)顆粒的時候，WBC-BASO受到干擾，不準(zhǔn)確。此時WBC-DIFF利用核酸熒光染色技術(shù)可以排除這些干擾，因此比較準(zhǔn)確聚集的血小板在兩個通道內(nèi)都顯示在GOHST區(qū)域，不會影響WBC當(dāng)前21頁，總共60頁。WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB

完全溶解紅細(xì)胞血小板除嗜堿細(xì)胞以外的白細(xì)胞溶解為裸核嗜堿細(xì)胞保持原狀縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度嗜堿其他白細(xì)胞當(dāng)前22頁，總共60頁。IMI(Theimmaturemyeloidinformation)通道STROMATOLYSER-IM

溶解紅細(xì)胞血小板、成熟白細(xì)胞粒系幼稚細(xì)胞保持原狀縱坐標(biāo)：射頻（RF）反映細(xì)胞密度橫坐標(biāo)：直流電（DC）反映細(xì)胞大小中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前23頁，總共60頁。紅細(xì)胞檢測原理RBC/PLT通道RET通道NRBC通道當(dāng)前24頁，總共60頁。RBC/PLT通道雙鞘流阻抗法浮動界標(biāo)RDW-SD

假設(shè)峰值高度為100%，在20%頻率水平上的分布寬度即為RDW-SD。單位用fL表示。RDW-CV

點(diǎn)L1和L2在總分布區(qū)域中的出現(xiàn)頻率為68.26%，使用下列方程計(jì)算

RDW-CV=（L2-L1）/（L2+L1）當(dāng)前25頁，總共60頁。RET/PLT-O通道RETSEARCH（II）稀釋劑稀釋標(biāo)本RETSEARCH（II）染液對核酸染色縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量LFRMFRHFRWBCRBCPLT當(dāng)前26頁，總共60頁。瘧原蟲核酸含量略少于低熒光強(qiáng)度的網(wǎng)織紅細(xì)胞當(dāng)前27頁，總共60頁。NRBC通道NR溶血素完全溶解紅細(xì)胞血小板白細(xì)胞保持原狀有核紅細(xì)胞溶解為裸核NR染液對核酸染色縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量NRBCWBC當(dāng)前28頁，總共60頁。修正WBCEoBaMoNeLyNRBCNRBC扣除扣除修正WBC修正分類扣除當(dāng)前29頁，總共60頁。血小板檢測原理RBC/PLT通道RET通道當(dāng)前30頁，總共60頁。RBC/PLT通道雙鞘流阻抗法浮動界標(biāo)PDW

假設(shè)峰值高度為100%，在20%頻率水平上的分布寬度即為PDW。單位用fL表示。P-LCR

由12fL界標(biāo)得到的巨型血小板的比值。計(jì)算時，將固定界標(biāo)與高界標(biāo)之間的粒子數(shù)，同低界標(biāo)與高界標(biāo)之間的粒子數(shù)相比而得到一個比值。當(dāng)前31頁，總共60頁。RET/PLT-O通道PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT計(jì)數(shù)無效PLT-I報告PLT-O報告NoNoYesYes當(dāng)前32頁，總共60頁。PLT-I向PLT-O轉(zhuǎn)換規(guī)則PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT計(jì)數(shù)無效PLT-I報告PLT-O報告NoNoYesYesPLT-I由PLT直方圖獲得PLT-O由RET散點(diǎn)圖獲得當(dāng)前33頁，總共60頁。(2)PL(%)>9%(3)PU(%)>39%(4)PU<23fLandPU>20%(1)RL(%)>10%當(dāng)前34頁，總共60頁。(5)出現(xiàn)“Fragments?”報警(6)出現(xiàn)“RBCAgglutination?”報警(7)PU%>13%andPLT35fL>45%andPLT-I#>=80x109/L(8)PLT-I<50x109/L(9)PLT-I/PLT-O>115%如果WBC碎片在PLT-O計(jì)數(shù)中出現(xiàn),PLT計(jì)數(shù)無效:PLT“----”當(dāng)前35頁，總共60頁。報警原理復(fù)檢規(guī)則Suspectabnormal當(dāng)前36頁，總共60頁。IP信息的來源散點(diǎn)圖直方圖SFLSSCFSCSSCRFDCFSCSFLFSCSFL當(dāng)前37頁，總共60頁。DIFFWBC/BAIMINRBCWBC報警懷疑/異常RETRBC_DCRBC/RET報警懷疑/異常DIFFPLT_DCRBC_DCIMIRET(Plt-O)PLT報警懷疑/異常當(dāng)前38頁，總共60頁。IP信息解釋白細(xì)胞<Abnormal>報警項(xiàng)目中文信息來源WBCAbnScattergramNRBCAbnScattergramNeutropeniaNeutrophiliaLymphopeniaLymphocytosisMonocytosisEosinophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytosisNRBCpresent白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常有核紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常中性粒細(xì)胞減少中性粒細(xì)胞增多淋巴細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞增多單核細(xì)胞增多嗜酸細(xì)胞增多嗜堿細(xì)胞增多白細(xì)胞總數(shù)減少白細(xì)胞總數(shù)增多出現(xiàn)有核紅細(xì)胞DIFF/BASO散點(diǎn)圖NRBC散點(diǎn)圖NEUT#<1.00x109/L(or%setting)NEUT#>11.00x109/L(or%setting)LYMPH#<0.80x109/L(or%setting)LYMPH#>4.00x109/L(or%setting)MONO#>1.00x109/L(or%setting)EO#>0.70x109/L(or%setting)BASO#>0.20x109/L(or%setting)WBC<2.50x109/LWBC>18.00x109/LNRBC%>2%當(dāng)前39頁，總共60頁。Ne/EoLy/Ne2Lym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常細(xì)胞族群之間邊界不清邊界顆粒達(dá)到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則Gst/NLMEBas/NLMENLME:不包括BASO當(dāng)前40頁，總共60頁。有核紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常NRBCWBCGOST1Pltclumps細(xì)胞族群之間邊界不清邊界顆粒達(dá)到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則當(dāng)前41頁，總共60頁。IP信息解釋白細(xì)胞<Suspect>報警項(xiàng)目中文信息來源Blasts?ImmatureGran?LeftShift?AtypicalLympho?AbnLympho/L-Blasts?NRBC?RBCLyseresistance?原始細(xì)胞？幼稚粒細(xì)胞？核左移？異型淋巴細(xì)胞？異常淋巴/原始淋巴細(xì)胞？有核紅細(xì)胞？紅細(xì)胞溶解不全？DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF,IMI散點(diǎn)圖DIFF散點(diǎn)圖DIFF,WBC/BASO散點(diǎn)圖當(dāng)前42頁，總共60頁。原始細(xì)胞？觸發(fā)規(guī)則：在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量。原始細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前43頁，總共60頁。幼稚粒細(xì)胞？觸發(fā)規(guī)則：在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量。幼稚粒細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前44頁，總共60頁。核左移？觸發(fā)規(guī)則：在散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量桿核中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前45頁，總共60頁。異型淋巴細(xì)胞？觸發(fā)規(guī)則：在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量and

在IMI通道IG和BLAST區(qū)域無散點(diǎn)異型淋巴細(xì)胞中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前46頁，總共60頁。異常淋巴/原始淋巴細(xì)胞？觸發(fā)規(guī)則：在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量and在IMI通道IG和BLAST區(qū)域無散點(diǎn)異常淋巴中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞原始細(xì)胞桿核當(dāng)前47頁，總共60頁。有核紅細(xì)胞？觸發(fā)規(guī)則：在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量有核紅細(xì)胞當(dāng)前48頁，總共60頁。紅細(xì)胞溶解不全？觸發(fā)規(guī)則：在DIFF散點(diǎn)圖上特定的區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量orWBC-BASO/WBC-DIFF比例大于閾值難溶紅細(xì)胞WBC-BASOWBC-DIFF當(dāng)前49頁，總共60頁。IP信息解釋紅細(xì)胞<Abnormal>報警項(xiàng)目中文信息來源RBCAbnDistributionDimorphicPopulationRETAbnScattergramReticulocytosisAnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis紅細(xì)胞分布異常雙峰網(wǎng)織紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常網(wǎng)織紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞大小不均小紅細(xì)胞癥巨紅細(xì)胞癥血紅蛋白減少貧血紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞直方圖紅細(xì)胞直方圖RET散點(diǎn)圖RET%>0.05orRET#>200x109/LRDW-SD>65fLorRDW-CV>0.20MCV<70fLMCV>110fLMCHC<290g/LHGB<100g/LRBC>6.50x1012/L當(dāng)前50頁，總共60頁。紅細(xì)胞分布異常觸發(fā)規(guī)則：

RL(%)>10%orRU(%)>5%orRDW-SD無法計(jì)算or多峰or

RU<225fl或WBC#>50x109/L雙峰觸發(fā)規(guī)則：紅細(xì)胞直方圖不止出現(xiàn)一個峰

RBC100200250fl100%5%RLRU100200250fl100%20%RLRUSL當(dāng)前51頁，總共60頁。網(wǎng)織紅細(xì)胞散點(diǎn)圖異常觸發(fā)規(guī)則：

RET_UPP區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量orRET_THR-H區(qū)域，散點(diǎn)達(dá)到一定數(shù)量UPP交界區(qū)域有核紅細(xì)胞當(dāng)前52頁，總共60頁。IP信息解釋

紅細(xì)胞<Suspect>報警項(xiàng)目中文信息來源RBCAgglutination?Turbidity/HGBInterference?IronDeficiency?HGBDefect?Fragments?紅細(xì)胞聚集?脂血干擾血紅蛋白?缺鐵?血紅蛋白減低?紅細(xì)胞碎片?MCHC、MCH、RBC直方圖MCHC>365g/LMCHC,MCV,RDW-CVRDW-CV<15%&MCV<75flRET散點(diǎn)圖、血小板紅細(xì)胞直方圖當(dāng)前53頁，總共60頁。紅細(xì)胞聚集?觸發(fā)規(guī)則：MCHC>40.0g/dL&

MCH>40pg&RBC<3.50x1012/LorMCHC>40.0g/dL&MCH>40pg&RU%>4%當(dāng)前54頁，總共60頁。缺鐵?觸發(fā)規(guī)則：MCHC<