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文檔簡介
所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)
植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段
植物組織培養(yǎng)
植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性克隆羊“多利”動物細(xì)胞工程2.2常用的技術(shù)手段動物細(xì)胞培養(yǎng)(基礎(chǔ))動物細(xì)胞核移植動物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體
2、概念從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。胚胎或幼齡動物的組織器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞株細(xì)胞懸浮液剪碎加培養(yǎng)液制成胰蛋白酶轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液分瓶轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程胰蛋白酶4、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件無菌、無毒的環(huán)境:無菌處理、加抗生素、定期更換培養(yǎng)液營養(yǎng):特別加入血清或血漿溫度和PH:36.5度左右\PH為7.2~7.4氣體環(huán)境:O2—細(xì)胞呼吸必需;C2O—維持PH值植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖固體營養(yǎng)物質(zhì)植物激素液體營養(yǎng)物質(zhì)動物血清培養(yǎng)成植株培養(yǎng)成細(xì)胞群快速繁殖培養(yǎng)無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1997年英國生物學(xué)家首次用成年羊的(乳腺細(xì)胞)體細(xì)胞,成功地克隆出一只小母羊“多莉”。
克隆即無性繁殖系,是指從一個共同的祖先,通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個體。
克隆動物一般是指通過無性繁殖形成動物后代??寺游锟寺游锸侨绾螌崿F(xiàn)的呢?目前動物體細(xì)胞克隆是通過核移植技術(shù)實現(xiàn)的.
動物核移植:是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。過程供體體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞卵巢卵母細(xì)胞MII期卵母細(xì)胞去核無核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體遺傳物質(zhì)相同的個體多莉的誕生多莉羊的培育過程1、誰是“多莉”的母親?2、“多莉羊”是雄還是雌?
問題卵細(xì)胞C母綿羊子宮A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細(xì)胞妊娠2異種器官移植
可移植器官短缺豬的器官大小、結(jié)構(gòu)和功能上與人體器官相近
急性免疫排斥反應(yīng)基因敲除半乳糖基轉(zhuǎn)移酶核移植基因敲除SPF克隆豬器官移植三核移植技術(shù)的應(yīng)用3、生產(chǎn)藥用蛋白三核移植技術(shù)的應(yīng)用4保護瀕危物種細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞核移植重構(gòu)胚三核移植技術(shù)的應(yīng)用展望
雖然核移植技術(shù)有著廣闊的應(yīng)用前景,并且已取得了一些進展如體細(xì)胞核移植等,但也存在著一些問題。主要包括核移植效率低,動物畸形。這要求研究人員進一步了解核質(zhì)作用機理,改進培養(yǎng)方式。目前存在的問題1、核移植效率低2、克隆動物異常
胎兒或新生兒死亡率極高,
極少數(shù)能全程發(fā)育的個體也表現(xiàn)為超重、呼吸系統(tǒng)疾病等異常表型,個別表型正常者也存在有免疫缺陷、關(guān)節(jié)炎或腎、腦畸形等問題,導(dǎo)致克隆動物后期死亡
細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉⑴寫出a、b所指的細(xì)胞工程各稱:ab。⑵實施細(xì)胞工程a時,所需的受體細(xì)胞大多采用動物卵細(xì)胞的原因是:。⑶多莉面部的毛色是
,判斷依據(jù):
。⑷繼植物組織培養(yǎng)之后,克隆綿羊培育成功,證明動物細(xì)胞也具有
。⑸請舉例說明克隆綿羊培育成功的實際意義:。(1999上海高考)世界上第一只克隆綿羊“多莉”的培育等程序如圖所示。請仔細(xì)看圖后回答問題:黑面綿羊去核卵細(xì)胞白面綿羊卵腺細(xì)胞核重組細(xì)胞早期胚胎另一頭母綿羊子宮克隆綿羊多莉ab電脈沖處理妊娠、出生細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉羊答案1⑴細(xì)胞核移植、胚胎移植細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉羊答案2⑵有利于細(xì)胞融合;卵細(xì)胞體積大,易操作,最主要的是卵細(xì)胞中具有啟動核基因表達(dá)的信息蛋白質(zhì)分子,能夠使已經(jīng)高度分化的細(xì)胞核脫分化。細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉羊答案3⑶白色、多莉羊的全部核基因來自白色綿羊。細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉羊答案4⑷全能性細(xì)胞工程應(yīng)用例1、多莉羊答案5⑸保護瀕危物種,繁育優(yōu)育品種,醫(yī)學(xué)上克隆器官等。胚胎發(fā)育:指受精卵發(fā)育成為幼體.受精卵八細(xì)胞胚卵裂囊胚原腸胚幼體.原腸胚具有原腸腔具備三胚層外胚層內(nèi)胚層中胚層表皮及其附屬結(jié)構(gòu)神經(jīng)系統(tǒng)和感覺器官脊索、真皮、肌肉內(nèi)臟器官的外膜循環(huán)、排泄和生殖系統(tǒng)消化道上皮呼吸道上皮腺體(如肝和胰)生殖的類型無性生殖不經(jīng)過生殖細(xì)胞的結(jié)合,由母體直接產(chǎn)生出新個體的生殖方式叫無性生殖。有性生殖由親本產(chǎn)生有性生殖細(xì)胞(也叫配子),經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞(如卵細(xì)胞和精子)的結(jié)合,成為合子(如受精卵),再由合子發(fā)育成為新個體的生殖方式,叫做有性生殖。草莓的營養(yǎng)生殖水螅的出芽生殖胚胎干細(xì)胞
當(dāng)受精卵分裂發(fā)育成囊胚時,內(nèi)層細(xì)胞團
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