植物細(xì)胞有絲分裂的制片和觀察

植物細(xì)胞有絲分裂的制片和觀察2023/4/11第1頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五一、實驗?zāi)康?.掌握植物根尖細(xì)胞有絲分裂制片技術(shù)2.觀察植物細(xì)胞有絲分裂過程中染色體的形態(tài)特征第2頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五二、實驗原理1.植物根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂2.在有絲分裂過程中，染色體發(fā)生規(guī)律性動態(tài)變化3.染色體可被堿性染料著色，便于觀察4.根據(jù)顯微鏡下觀察到的染色體特點可識別有絲分裂不同時期第3頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五三、實驗儀器和藥品1.儀器：顯微鏡、恒溫箱、水浴鍋、計時器、燒杯、載玻片、蓋玻片、剪刀、鑷子、滴管、刀片、玻璃皿2.材料：大蒜3.藥品：諾卡氏固定液1mol/L的HCl作為解離液、卡寶品紅作為染色液第4頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定：實驗前3-4d，將大蒜掰成蒜瓣擺在鋪有四層紗布的托盤里放入溫度為25℃，一定濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天換水兩次待根長到1~2cm將根剪下用吸水紙吸干水分,將其放入諾卡氏固定液（乙醇:冰醋酸=3:1）固定4~24小時。固定的作用：殺死細(xì)胞，固定細(xì)胞形態(tài)，維持染色體的完整性，提高染色效果第5頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作（1）解離目的：使組織中的細(xì)胞分離開操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中60℃水浴5min左右（c）解離時，細(xì)胞已死亡（a）解離充分是實驗成功的必備條件注意：（b）解離過度，細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞解離液：1mol/L的HCl第6頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作漂洗液：清水（先置于清水中浸泡2min左右）目的：洗去解離液，便于染色次數(shù)：2-3次注意：若不漂洗解離過度（HCl作用）影響染色（HCl與堿性染料反應(yīng)）（1）解離（2）漂洗備注:將漂洗好的根尖放入盛有清水的培養(yǎng)皿中第7頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作（1）解離（2）漂洗（3）取材部位：根尖2-3mm注意：要去除根尖乳白色根冠（根尖分生區(qū)）第8頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五成熟區(qū)伸長區(qū)分生區(qū)根冠根尖的結(jié)構(gòu)第9頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第10頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第11頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第12頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第13頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第14頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作（1）解離（3）取材（2）漂洗（4）染色操作：用鑷子尖把大蒜根尖弄碎（或者將根尖均勻切成三份）,用卡寶品紅染色,6～8分鐘后，蓋上蓋玻片,再蓋上一個載玻片，用拇指輕壓載玻片,隨即用一次性筷子進(jìn)行敲片。目的：使細(xì)胞分散開，有利于觀察注意：染色時敲片的力度要適中染色劑：卡寶品紅染液時間：6-8min（使染色體（質(zhì)）著色）染色時間過長—細(xì)胞全被染色，

無法觀察染色時間過短—染色體顏色過淺，

影響觀察第15頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第16頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第17頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五第18頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作解離→漂洗→取材→染色

3.觀察（1）低倍鏡觀察：找到分生區(qū)細(xì)胞特點：細(xì)胞呈矩形，排列緊密，有分裂細(xì)胞（2）高倍鏡觀察：在低倍鏡的基礎(chǔ)上換用高倍鏡（3）仔細(xì)觀察：先找中期，再找其余各時期，注意染色體特點（4）移動觀察：慢慢移動裝片，完整觀察各個時期第19頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五四、實驗流程

1.大蒜根尖培養(yǎng)及固定

2.裝片制作解離→漂洗→取材→染色

3.觀察低倍鏡觀察→高倍鏡觀察→仔細(xì)觀察→移動觀察注意：a.觀察時應(yīng)先找到呈矩形的分生區(qū)細(xì)胞，在一個視野里觀察時，要注意邊觀察邊移動裝片，觀察有絲分裂各個時期。b.顯微鏡下觀察到的都是死細(xì)胞，不能看到細(xì)胞分裂的動態(tài)變化。c.在顯微鏡下觀察到間期細(xì)胞的數(shù)目最多第20頁，共23頁，2023年，2月20日，星期五操作要點1.解離：培養(yǎng)好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol/L的HCl中60℃水浴5min左右2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解離液2-3次，最后置于盛有清水的培養(yǎng)皿中3.取材：用刀片切取根尖2-3mm處的分生區(qū)，并切去乳白色的根冠4.染色：用鑷子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片將根尖均勻切成三份）,用卡寶品紅染色,6～8min后，蓋上蓋玻片,再蓋上一個載玻片，用拇指輕壓載玻片隨即用一次性筷子進(jìn)行敲片。5.觀察：首先在低倍鏡進(jìn)行觀察,再到高倍鏡下觀察。第21頁，共