氣相色譜分析應(yīng)用培訓培訓班李言

氣相色譜分析應(yīng)用培訓培訓班李言第1頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五色譜法是一種分離技術(shù)。而且是分離技術(shù)中效能最高、應(yīng)用最廣的一種技術(shù)。色譜法的創(chuàng)始人是俄國植物學家茨維特。因于1903年用于分離植物色素而得名。固定相：靜止不動的一相（固體或液體）；流動相：載著樣品運動的一相（一般是氣體或液體）；色譜柱：裝有固定相的管子（玻璃管或不銹鋼管）。

當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時就會與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中流出。與適當?shù)臋z測方法結(jié)合，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。一、色譜法概述

第2頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

氣相色譜：流動相為氣體（稱為載氣）按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細管柱色譜二、色譜法分類第3頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五按色譜過程分離機制分類吸附色譜法分配色譜法第4頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、氣相色譜法特點及應(yīng)用（1）分離效率高：復雜混合物，有機同系物、異構(gòu)體、手性異構(gòu)體。（2）選擇性高：可分離化學結(jié)構(gòu)極為相近的化合物。（3）靈敏度高：可以檢測出μg.g-1(10-6)級甚至ng.g-1(10-9)級的物質(zhì)量。（4）分析速度快：一般在幾分鐘或十幾分鐘內(nèi)可以完成一個試樣的分析。（5）應(yīng)用范圍廣：適用于沸點低于400℃的各種有機或無機試樣的分析。第5頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五一、氣相色譜分離過程及流出曲線二、常用名詞術(shù)語及定義三、塔板理論四、速率理論第二節(jié)氣相色譜基本理論第6頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五一、氣相色譜分離過程及流出曲線第7頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五從色譜流出曲線上，可以得到許多重要信息:

（l）根據(jù)色譜峰的個數(shù)，可以判斷樣品中所合組份的最少個數(shù)。（2）根據(jù)色譜峰的保留值(或位置)，可以進行定性分析。（3）根據(jù)色譜峰下的面積或峰高，可以進行定量分析。（4）色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾?，是評價色譜柱分離效能的依據(jù)。（5）色譜峰兩峰間的距離，是評價固定相(和流動相)選擇是否合適的依據(jù)。第8頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、常用名詞術(shù)語及定義

1、色譜圖相關(guān)名詞（1）色譜峰（2）基線：無試樣通過檢測器時，檢測到的信號即為基線。（3）峰高（h）：從峰頂點到基線間的距離。（4）峰拐點：流出曲線上二階導數(shù)為零的兩點。0.607h（5）峰寬(Wb)：峰兩側(cè)拐點0.607h所作切線與基線相交兩點間的距離。（6）半峰寬(Y1/2)：色譜峰高一半處的寬度。（7）峰面積(A)：色譜流出曲線與基線之間的面積。

第9頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五死時間保留時間調(diào)整保留時間死體積Vm=Fc×tm保留體積Vr=Fc×tr調(diào)整保留體積Vr’=Vr-Vm基線2、常用保留值

（1）時間與體積表示的保留值第10頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（3）分離因子

在定性分析中，通常固定一個色譜峰作為標準（s），然后再求其它峰（i）對這個峰的調(diào)整保留值之比。在多元混合物分析中，通常選擇一對最難分離的物質(zhì)對，將它們的相對保留值作為重要參數(shù)。在這種情況下，可用符號α表示：

式中tR2′為后出峰的調(diào)整保留時間，所以這時α總是大于1的。

分離因子只與柱溫及固定相的性質(zhì)有關(guān)，而與柱徑、柱長、填充情況及流動相流速無關(guān)。一般用于表征柱子的選擇性。

第11頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五3、平衡分配中的基本概念

（1）分配系數(shù)K

如前所述，分配色譜的分離是基于樣品組分在固定相和流動相之間反復多次地分配過程，而吸附色譜的分離是基于反復多次地吸附、脫附過程。這種分離過程經(jīng)常用樣品分子在兩相間的分配來描述，而描述這種分配的參數(shù)稱為分配系數(shù)。它是指在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動相之間分配達平衡時的濃度之比值，即

分配系數(shù)K與柱中固定相和流動相的體積無關(guān)，而取決于組分及兩相的性質(zhì)，并隨柱溫、柱壓變化而變化。第12頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（2）分配比（容量因子）k

分配比又稱容量因子，它是指在一定溫度和壓力下，組分在兩相間分配達平衡時，分配在固定相和流動相中的質(zhì)量比,即

式中Cs，Cm分別為組分在固定相和流動相的濃度；Vm為柱中流動相的體積，近似等于死體積。Vs為柱中固定相的體積，在各種不同的類型的色譜中有不同的含義。例如：在分配色譜中，Vs表示固定液的體積；在尺寸排阻色譜中，則表示固定相的孔體積。第13頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五相比：β=VM/VS反映各種色譜柱柱型及其結(jié)構(gòu)特征填充柱:6~35毛細管柱:50~1500k值越大，說明組分在固定相中的量越多，相當于柱的容量大，因此又稱容量因子。它是衡量色譜柱對被分離組分保留能力的重要參數(shù)。k值也決定于組分及固定相熱力學性質(zhì)，它不僅隨柱溫、柱壓變化而變化，而且還與流動相及固定相的體積有關(guān)。第14頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（3）分配系數(shù)K及分配比k與選擇因子α的關(guān)系

該式表明：通過選擇因子α把實驗測量值k與熱力學性質(zhì)的分配系數(shù)K直接聯(lián)系起來，α對固定相的選擇具有實際意義。如果兩組分的K或k值相等，則α=1，兩個組分的色譜峰必將重合，說明分不開。兩組分的K或k值相差越大，則分離得越好。因此兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜分離的先決條件。第15頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、塔板理論

最早由Martin等人提出塔板理論，把色譜柱比作一個精餾塔，沿用精餾塔中塔板的概念來描述組分在兩相間的分配行為，同時引人理論塔板數(shù)作為衡量柱效率的指標。

通過概率理論得到流出曲線方程：為標準偏差第16頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五對色譜流出曲線方程的討論當t=tR時，C=Cmax，峰高正比于進樣量C0，是峰高定量的理論基礎(chǔ)。當n越大，柱效越大，Cmax/C0越大。即保留時間一定時，塔板數(shù)越多，峰越高。Cmax反比于tR，tR小，Cmax大，保留時間小的組分峰高且窄。tR大，Cmax小，保留時間大的組分峰低且寬。第17頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五色譜柱長：L，虛擬的塔板間距離：H，色譜柱的理論塔板數(shù)：n，則三者的關(guān)系為：n=L/H，理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：2023/4/1118第18頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五有效塔板數(shù)和有效塔板高度

單位柱長的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。用不同物質(zhì)計算可得到不同的理論塔板數(shù)。組分在tM時間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配，需引入有效塔板數(shù)和有效塔板高度：

塔板理論用熱力學觀點形象地描述了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡和分離過程，導出流出曲線的數(shù)學模型，并成功地解釋了流出曲線的形狀及濃度極大值的位置，還提出了計算和評價柱效的參數(shù)。但由于它的某些基本假設(shè)并不完全符合柱內(nèi)實際發(fā)生的分離過程，例如，縱向擴散造成譜帶擴張的原因和影響板高的各種因素，也不能說明為什么在不同流速下可以測得不同的理論塔板數(shù)，這就限制了它的應(yīng)用。

第19頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五四、速率理論H=A+B/u+C·u

H：理論塔板高度，A項為渦流擴散項；B/u項為分子擴散項；Cu為傳質(zhì)項；u為載氣線速度，單位為cm/s。

1956年荷蘭學者VanDeemter等在研究氣液色譜時，提出了色譜過程動力學理論——速率理論。他們吸收了塔板理論中板高的概念，并充分考慮了組分在兩相間的擴散和傳質(zhì)過程，從而在動力學基礎(chǔ)上較好地解釋了影響板高的各種因素。該理論模型對氣相、液相色譜都適用。速率理論為色譜分離和操作條件的選擇提供了理論指導。闡明了流速和柱溫對柱效及分離的影響。VanDeemter方程的數(shù)學簡化式為：第20頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五渦流擴散項A=2λdp渦流擴散項粒徑均勻性因子第21頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五渦流擴散項A：由不等路徑造成的色譜峰擴展。由于柱填料粒徑大小不同，粒度分布范圍不一致及填充的不均勻，形成寬窄、長短不同的路徑，因此流動相沿柱內(nèi)各路徑形成紊亂的渦流運動，有些溶質(zhì)分子沿較窄且直的路徑運行，以較快的速度通過色譜柱，發(fā)生分子超前，反之，有些分子發(fā)生滯后，從而使色譜峰產(chǎn)生擴散。使用適當細粒度和顆粒均勻的擔體，并盡量填充均勻，是減少渦流擴散，提高柱效的有效途徑。

第22頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五分子擴散項B/uB=2γDg分子擴散項：由于分子的縱向擴散造成的色譜峰擴展。即由于試樣組分被載氣帶入色譜柱后，是以塞子的形式存在于色譜柱的很小一段空間中，由于在塞子前后存在濃度梯度，因此使運動著的分子產(chǎn)生縱向擴散，引起色譜峰擴展

分子擴散項與

D

g

的大小成正比，而

D

g

與組分及載氣的性質(zhì)有關(guān)：相對分子質(zhì)量大的組分，其

D

g

小,反比于載氣密度的平方根或載氣相對分子質(zhì)量的平方根，所以采用相對分子質(zhì)量較大的載氣

(如氮氣

)

，可使B項降低，

D

g

隨柱溫增高而增加，但反比于柱壓。彎曲因子

r

為與填充物有關(guān)的因素。

彎曲因子擴散系數(shù)2023/4/1123第23頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五氣相傳質(zhì)阻力項氣相傳質(zhì)阻力項Cg：試樣組分從氣相移動到固定相表面的過程中，由于質(zhì)量交換過程需要一定時間（即傳質(zhì)阻力）而使分子有滯留傾向。在此過程中，部分組分分子隨流動相向前運動，發(fā)生分子超前，引起色譜峰擴展。

第24頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五液相傳質(zhì)阻力項液相傳質(zhì)阻力項CL：試樣組分從固定相表面移動到固定相內(nèi)部的過程中，由于質(zhì)量交換過程需要一定時間（即傳質(zhì)阻力）而使分子有滯留傾向。在此過程中，部分組分分子先離開固定相表面，發(fā)生分子超前，引起色譜峰擴展。第25頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五氣相色譜速率方程為柱型的研究和發(fā)展提供理論依據(jù)為操作條件的選擇提供理論指導為色譜柱的填充提供理論指導第26頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第三節(jié)氣相色譜填充柱一、氣固色譜填充柱二、氣液色譜填充柱三、填充柱的制備第27頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五 氣相色譜填充柱，在實際分析工作中的應(yīng)用非常普遍。填充柱在分離效能和分析速度方面比毛細管柱差，但填充柱的制備方法比較簡單，定量分析的準確度較高，特別是在某些分析領(lǐng)域（例如氣體分析、痕量水分析）具有獨特用途。從發(fā)展上看，雖然毛細管柱有逐步取代填充柱的趨勢（例如已有一些日常分析使用PLOT柱代替過去常用的氣固色譜填充柱），但至少在目前一段時期內(nèi)，填充柱在日常分析中仍是一種十分有價值的分析分離手段。填充柱主要有氣固色譜填充柱和氣液色譜填充柱兩種類型。第28頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五一、氣固色譜填充柱

我們知道,色譜分離的基本原理是試樣組分通過色譜柱時與填料之間發(fā)生相互作用，這種相互作用大小的差異使各組分互相分離而按先后次序從色譜柱流出。我們把色譜柱內(nèi)不移動、起分離作用的填料稱為固定相。氣固色譜填充柱常采用固體物質(zhì)作固定相。這些固體固定相主要包括無機吸附劑和高分子多孔微球（一）無機吸附劑這一類吸附劑包括具有強極性的硅膠、中等極性的氧化鋁、非極性的炭素及有特殊吸附作用的分子篩。它們大多數(shù)能在高溫下使用，吸附容量大，熱穩(wěn)定性好，是分析永久性氣體及氣態(tài)烴類混合物理想的固定相。.(1)硅膠硅膠是一種氫鍵型的強極性固體吸附劑，氣相色譜使用較多的是粗孔硅膠，其孔徑為80~100nm，比表面積近300m2/g，可用于分析N2O、SO2、H2S、SF6、CF2Cl2以及C1~C4烷烴等物質(zhì)。(2)氧化鋁氧化鋁有五種不同的晶型，氣相色譜常用的主要是γ型，具有中等極性，主要用于分析C1~C4烴類及其異構(gòu)體，在低溫下也能用于分離氫的同位素。第29頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五(3)碳素碳素是一類非極性的固體吸附劑，主要有活性碳、石墨化碳黑和碳分子篩等品種。活性碳是無定形碳，具有微孔結(jié)構(gòu)，比表面積大(800~1000m2/g)，可用于分析永久性氣體和低沸點烴類。若涂少量固定液，可用來分析空氣、一氧化碳、甲烷、二氧化碳、乙炔、乙烯等混合物。石墨化碳黑是碳黑在惰性氣體保護下經(jīng)高溫(2500~3000℃)煅燒而成的石墨狀細晶，特別適用于分離空間和結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，也可用于分析硫化氫、二氧化硫、低級醇類、短鏈脂肪酸、酚、胺類。碳分子篩又稱為炭多孔小球，是聚偏二氯乙烯小球經(jīng)高溫熱解處理后的殘留物，比表面積800~1000m2/g，孔徑約1.5~2nm，主要用于稀有氣體、空氣、二氧化碳、氧化亞氮、C1~C3烷類分析。

多孔炭黑國內(nèi)外都有商品出售，如由中國科學院化學所研制、天津化學試劑二廠生產(chǎn)的TDX-01和TDX-02，國外的產(chǎn)品CarbonSieveB等即屬于這類。使用前通常在180℃通氮氣活化3~4h，降溫后存于干燥器內(nèi)備用。

第30頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五(4)分子篩

分子篩是一類人工合成的硅鋁酸鹽，具有均勻分布的孔穴，分子篩的性能主要取決于孔徑的大小和表面特性。當試樣分子經(jīng)過分子篩時，比孔徑小的分子可進入孔內(nèi)，比孔徑大的分子則被排除于孔外。氣相色譜分析中應(yīng)用的分子篩通常有4A、5A和13X等三種類型。在氣相色譜中主要用于分離H2、O2、N2、CO、CH4以及低溫下分析惰性氣體等。

分子篩極易因吸水而失去活性。此外使用時還應(yīng)注意，某些物質(zhì)如氨、甲酸、二氧化碳等會被分子篩不可逆吸附。分子篩是否失效通?？蓮牡?、氧的分離情況來判斷。13X：Na2O·Al2O3·2.45SIO2·6H2O

5A：

3/4CaO·1/4Na2O·Al2O3·2SiO2·9/2H2O2023/4/1131第31頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（二）高分子多孔小球 高分子多孔小球（GDX）是以苯乙烯等為單體與交聯(lián)劑二乙烯苯交聯(lián)共聚的小球。它本身既可以作為吸附劑在氣固色譜中直接使用，也可以作為載體涂上固定液后用于分離。在烷烴、芳烴、鹵代烷、醇、酮、醛、醚、脂、酸、胺、腈以及各種氣體的氣相色譜分析中已得到廣泛應(yīng)用。 其優(yōu)點主要有:⑴吸附活性低。無論對非極性物質(zhì)還是極性物質(zhì)，使用這種固定相通常都可以獲得對稱色譜峰；⑵對含羥基的化合物具有相對低的親和力。羥基作用力越強，親和力越弱。在非極性固定相上出峰次序基本上按分子量大小分離，故特別適合有機物中痕量水的快速測定;⑶可選擇的范圍大。不僅可以依據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的孔徑大小和表面性質(zhì)的產(chǎn)品直接使用，還可以涂上固定液，使親油性化合物的保留時間縮短，極性組分的保留時間適當延長，從而增加色譜柱的選擇性。此外，高分子小球在高溫時不流失，機械強度好，圓球均勻，較易獲得重現(xiàn)性好的填充柱。由中國科學院化學研究所研制、天津化學試劑二廠生產(chǎn)的GDX-系列高分子小球產(chǎn)品即屬于此類。

第32頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五高分子多孔微球可分為兩類：

非極性：苯乙烯+二乙烯苯共聚：GDX-1和2型（國產(chǎn)）；Chromosorb系列（國外）； 極性：苯乙烯+二乙烯苯共聚物中引入極性基團：GDX-3和4型（國產(chǎn)）；PorapakN等（國外）。

高分子多孔微球有一個缺點是小球經(jīng)常帶有“靜電”，易貼附于儀器和器皿上而難以清理，通?？捎脻櫇襁^丙酮的紗布擦拭來消除。第33頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第34頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五氣固色譜固定相的特點（1）性能與制備和活化條件有很大關(guān)系；（2）同一種固定相，不同廠家或不同活化條件，分離效果差異較大；（3）種類有限，能分離的對象不多；（4）使用方便。第35頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、氣液色譜填充柱氣液色譜填充柱中所用的填料是液體固定相。它是由惰性的固體支持物和其表面上涂漬的高沸點有機物液膜所構(gòu)成。通常把惰性的固體支持物稱為“載體”,把涂漬的高沸點有機物稱為“固定液”。氣液色譜固定相：固定液+擔體（載體）固定液在常溫下不一定為液體，但在使用溫度下一定呈液體狀態(tài)。固定液的種類繁多，選擇余地大，應(yīng)用范圍不斷擴大。1、擔體：化學惰性的多孔性固體顆粒。化學惰性，表面無吸附性或吸附性很弱，與被分離組分不起反應(yīng)多孔性，即比表面積大，孔徑分布均勻；具有較高的熱穩(wěn)定性和機械強度，不易破碎；顆粒大小均勻、適度。第36頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五常用擔體有：1.紅色擔體（6201型擔體）

：表面孔穴密集，孔徑較小，比表面積較大，機械強度好。適宜分離非極性或弱極性組分的試樣。缺點是表面存有活性吸附中心點。2.白色擔體（101型擔體）

：煅燒前原料中加入了少量助溶劑(碳酸鈉)。顆粒疏松，孔徑較大。表面積較小，機械強度較差。但吸附性顯著減小，適宜分離極性組分的試樣。3.非硅藻土型擔體：聚合氟塑料擔體、玻璃微球擔體、高分子微球擔體等。

特點是：表面空隙適中、比表面積適中、機械強度較強、耐高溫、耐強腐蝕、價格偏高。硅藻土型擔體用前要預(yù)處理：酸洗、堿洗、硅烷化。第37頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第38頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2、固定液：高沸點難揮發(fā)有機化合物，種類繁多。（1）對固定液的要求：揮發(fā)性?。惠^好的熱穩(wěn)定性；對被分離試樣中的各組分具有不同的溶解能力；高選擇性；化學穩(wěn)定性好，不與被分離組分發(fā)生不可逆的化學反應(yīng)。（2）固定液分類

如按化學結(jié)構(gòu)、極性、應(yīng)用等的分類方法。在各種色譜手冊中，一般將固定液按有機化合物的分類方法分為：脂肪烴、芳烴、醇、酯、聚酯、胺、聚硅氧烷等。第39頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第40頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第41頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（3）固定液與組分的作用力：a)色散力——非極性分子之間（瞬時偶極之間靜電吸引）；b)誘導力——極性與非極性分子之間（偶極與瞬時偶極之間靜電吸引）；c)取向力——極性與極性分子之間（偶極與偶極之間靜電吸引）d)氫鍵力——強度介于化學鍵力和范德華力之間的靜電吸引，亦屬取向力。第42頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五（4）固定液的極性：固定相極性用相對極性P表示規(guī)定非極性固定液角鯊烷的極性為0，強極性固定液,-氧二丙腈的極性為100，其余物質(zhì)的P在0～100之間，每20單位為一級，即將極性分為5級：

0~20

為0~+1，稱非極性固定液；

20~40

為+1~+2，稱弱極性固定液；

40~60

為+2~+3，稱中極性固定液；

80~100

為+4~+5,稱強極性固定液；

第43頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第44頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、填充柱制備1、柱管的清洗2、固定相的制備3、固定相的填充4、填充柱的老化與評價第45頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五色譜柱的老化須老化的色譜柱：新柱出現(xiàn)峰形變化，基線不穩(wěn)定，出現(xiàn)異常鼓包等現(xiàn)象長時間未使用色譜柱標牌內(nèi)容固定相名稱、長度、內(nèi)徑、老化溫度、最高使用溫度色譜柱的保存填充柱用膠帽將其兩端封??；毛細柱用進樣墊將其兩端封住，放入原包裝內(nèi)。第46頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五注意事項載氣：用氮氣，不能用氫氣老化溫度：比最高使用溫度低20-30度（色譜柱標牌上有相應(yīng)的老化溫度）老化時間：根據(jù)柱子長度，大約在4-8小時新色譜柱老化時必須將色譜柱與檢測器斷開；老化時注意柱箱中的其他色譜柱，如果老化溫度高于某根色譜柱的最高使用溫度，則必須把這根色譜柱拆掉。毛細管柱推薦使用程序升溫。第47頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第四節(jié)毛細管色譜法一、毛細管色譜的優(yōu)點（1）分離效率高：比填充柱高10～100倍；（2）分析速度快：用毛細管色譜分析比用填充柱色譜速度（3）色譜峰窄、峰形對稱。較多采用程序升溫方式；（4）靈敏度高，一般采用氫焰檢測器。（5）渦流擴散為零。第48頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、毛細管柱的種類涂壁開管柱（wallcoatedopentubular，WCOT柱）：將固定液直接涂敷在管內(nèi)壁上。柱制作相對簡單，但柱制備的重現(xiàn)性差、壽命短。多孔層開管柱（porouslayeropentubular，PLOT柱）：在管壁上涂敷一層多孔性吸附劑固體微粒。構(gòu)成毛細管氣固色譜。載體涂漬開管柱（supportcoatedopentubular，SCOT柱）：將非常細的擔體微粒粘接在管壁上，再涂固定液。柱效較WCOT柱高?；瘜W鍵合或交聯(lián)柱：將固定液通過化學反應(yīng)鍵合在管壁上或交聯(lián)在一起。使柱效和柱壽命進一步提高。第49頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、毛細管色譜的分流與尾吹毛細管柱內(nèi)徑很細，因而帶來三個問題：（1）允許通過的載氣流量很小。（2）柱容量很小，允許的進樣量小。需采用分流技術(shù)。（3）分流后，柱后流出的試樣組分量少、流速慢。解決方法：靈敏度高的氫焰檢測器，采用尾吹技術(shù)。2023/4/1150第50頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五分流：把進入注樣器中的樣品大部分分到儀器外面，只有小部分流經(jīng)色譜柱。作用：減小柱負荷，減小柱污染。分流比＝（柱流量＋分流流量）/柱流量分流比越大出峰越小，峰之間的分離度明顯改善，柱污染小，但含量低的組分會不出峰。補充氣（尾吹）：增加柱出口到檢測器的載氣速度，以減小這段死體積的影響，使儀器的靈敏度與峰形有所改善。補充氣越大，樣品進入檢測器速度加快，峰變尖銳，靈敏度提高，但點火困難。第51頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五四、毛細管柱的規(guī)格（1）固定液名稱非極性：SE-30,OV-1，OV-101，SE-54，OV-1701中等極性：XE-60，OV-17極性：FFAP，PEG-20M（2）毛細管柱長度5—12m短柱：分離少于10個組份（不包含難分離物質(zhì)對）的簡單樣品。25—30m中長柱：分離10—50個組份的樣品。50m長柱：分離大于50個組份或含有難分離物質(zhì)對的復雜樣品。（3）毛細管柱內(nèi)徑0.53mm具有近似填充柱的負荷量，分析時間快,可采用柱上進樣或直接進樣技術(shù)，適合于分析不太復雜的樣品，是填充柱理想的替代柱。第52頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

0.32mm柱效稍低于0.25mm常規(guī)柱，負荷量大于常規(guī)柱的60%，用特制注射針可做柱上進樣。 0.25mm最常用的內(nèi)徑規(guī)格。有較高的柱效，負荷量較低，必須分流進樣或無分流進樣。用于復雜多組份樣品分析. 0.20mm柱效高,負荷量低，流失較小，適合與質(zhì)譜等靈敏檢測器聯(lián)用。（4）膜厚 0.1—0.2um薄液膜低負荷量，高溫下流失較小，適合于高沸點化合物的分析，適于配高靈敏檢測器。 0.25—0.33um標準液厚一般商品柱的標準液膜。 0.5—5.0um厚液膜較高的樣品負荷量，在高溫下流失較大，適于分析低沸點樣品。第53頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五填充柱和毛細管柱的比較

色譜參數(shù)填充柱WCOTSCOT柱長度，m1~510~10010~50滲透性×10-7，cm1~1050~800200~1000柱內(nèi)徑，mm2~40.1~0.80.5~0.8液膜厚度，m100.1~10.8~2相比4~200100~150050~300每個峰的容量，ng10~10E6<10050~300柱效，N/m500~10001000~4000600~1200最小板高，mm0.5~20.1~20.2~2分離能力低高中等相對壓力高低低最佳線速，cm/s5~2010~10020~160第54頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第五節(jié)氣相色譜分離條件的選擇一、分離度（分辨率）二、色譜柱的選擇三、載氣及流速的選擇四、操作溫度的選擇五、進樣技術(shù)第55頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五一、分離度（分辨率）相鄰兩色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬度平均值之比，用R表示。分離度可以用來作為衡量色譜峰分離效能的指標。R=0.8：兩峰的分離程度可達89%；R=1.0：分離程度98%；R=1.5：達99.7%（相鄰兩峰完全分離的標準）。第56頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五68.3%95.4%99.7%第57頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、色譜柱的選擇1、固定相的選擇氣－液色譜，應(yīng)根據(jù)“相似相溶”的原則：①分離非極性組分時，通常選用非極性固定相。各組分按沸點順序出峰，低沸點組分先出峰。②分離極性組分時，一般選用極性固定液。各組分按極性大小順序流出色譜柱，極性小的先出峰。③分離非極性和極性的（或易被極化的）混合物，一般選用極性固定液。此時，非極性組分先出峰，極性的（或易被極化的）組分后出峰。第58頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2、固定液配比（涂漬量）的選擇④醇、胺、水等強極性和能形成氫鍵的化合物的分離，通常選擇極性或氫鍵性的固定液。⑤組成復雜、較難分離的試樣，通常使用特殊固定液，或混合固定相。

配比：固定液在擔體上的涂漬量，一般指的是固定液與擔體的百分比，配比通常在5%～25%之間。配比越低，擔體上形成的液膜越薄，傳質(zhì)阻力越小，柱效越高，分析速度也越快。配比較低時，固定相的負載量低，允許的進樣量較小。分析工作中通常傾向于使用較低的配比。第59頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五3、柱長和柱內(nèi)徑的選擇

增加柱長可使理論塔板數(shù)增大，對提高分離度有利（分離度R2正比于柱長L），但組分的保留時間tR↑，且柱阻力↑，不便操作。柱長的選用原則是在能滿足分離目的的前提下，盡可能選用較短的柱，有利于縮短分析時間。

填充色譜柱的柱長通常為1～10m，內(nèi)徑2～3mm。第60頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、載氣及流速的選擇1、載氣種類的選擇

載氣種類的選擇應(yīng)考慮三個方面：載氣對柱效的影響、載氣性質(zhì)及檢測器要求。（1）載氣摩爾質(zhì)量大，可抑制試樣的縱向擴散，提高柱效。（2）載氣流速較大時，傳質(zhì)阻力項起主要作用，采用較小摩爾質(zhì)量的載氣（如H2，He），可減小傳質(zhì)阻力，提高柱效。（3）熱導檢測器需要使用熱導系數(shù)較大的氫氣有利于提高檢測靈敏度。在氫焰檢測器中，氮氣仍是首選目標。（4）在載氣選擇時，還應(yīng)綜合考慮載氣的安全性、經(jīng)濟性及來源是否廣泛等因素。第61頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2、載氣流速的選擇對vanDeemter方程求導得到最佳流速為實際工作中，為了縮短分析時間，常使流速稍高與最佳流速。第62頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五四、操作溫度的選擇1、柱溫的選擇（1）柱溫對柱效和分離度的影響（2）柱溫對檢測器的影響（3）柱溫與樣品性質(zhì)的關(guān)系：柱溫一般選擇在接近或略低于組分平均沸點時的溫度。組分復雜，沸程寬的試樣，采用程序升溫。（4）柱溫對峰高、峰面積的影響第63頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五程序升溫恒溫：45oC程序升溫：30~180oC恒溫：145oC溫度低，分離效果較好，但分析時間長程序升溫，分離效果好，且分析時間短溫度高，分析時間短，但分離效果差第64頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2、氣化溫度、檢測器溫度色譜儀進樣口下端有一氣化器，液體試樣進樣后，在此瞬間氣化；氣化溫度一般較柱溫高5～10℃；防止氣化溫度太高造成試樣分解；檢測器溫度：高于柱溫20～50℃。第65頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

五、進樣技術(shù)1、進樣方式和進樣時間液體試