第三章抗生素發(fā)酵生產(chǎn)工藝

第十一章

抗生素發(fā)酵生產(chǎn)工藝主講教師：生科院洪軍1現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一制藥微生物生產(chǎn)菌種如何選育？發(fā)酵過(guò)程中主要檢測(cè)的參數(shù)有哪些？發(fā)酵工藝過(guò)程如何控制？知識(shí)回顧2現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一主要內(nèi)容抗生素的概述：（1）抗生素的定義（2）抗生素的命名（3）抗生素的分類(lèi)青霉素的發(fā)酵生產(chǎn)工藝：（重點(diǎn)）（1）青霉素的概述

（2）生產(chǎn)菌的生物學(xué)特性

（3）發(fā)酵工藝過(guò)程

3現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一1抗生素的定義和命名（1）抗生素的定義

早期：一般認(rèn)為來(lái)源于微生物，且主要作用于細(xì)菌感染。故認(rèn)為抗生素(antibiotics)是微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)的，在低濃度下就能抑制它種微生物生長(zhǎng)和活動(dòng)，甚至殺死他種微生物的化學(xué)物質(zhì)。由于抗生素的這種殺菌能力，我們?cè)?jīng)把這類(lèi)物質(zhì)叫做抗菌素。4現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一現(xiàn)在：來(lái)源：隨著抗生素研究和生產(chǎn)的發(fā)展，新的抗生素的來(lái)源正在擴(kuò)大?？梢允俏⑸?、植物（如蒜素、常山堿、黃連素、長(zhǎng)春花堿、魚(yú)腥草素等）、動(dòng)物（如魚(yú)素、紅血球素等）。但抗生素的工業(yè)化生產(chǎn)主要是來(lái)自微生物的大量發(fā)酵法，微生物是抗生素舞臺(tái)上的主角。作用對(duì)象：病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物、寄生蟲(chóng)、藻類(lèi)、腫瘤細(xì)胞等。因此不能把抗生素僅僅作為抗菌藥物。

5現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一定義：雖然抗生素已被廣泛使用，但是由于抗生素的多樣性，關(guān)于抗生素的定義在專(zhuān)家中一直存在著分歧。目前，一個(gè)大多數(shù)專(zhuān)家所接受的定義是：抗生素是由生物（包括某些微生物、植物和動(dòng)物在內(nèi)）在其生命活動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生的或（化學(xué)合成獲得的），能在低濃度下有選擇地抑制他種生物機(jī)能的低分子量的有機(jī)物質(zhì)。狹義的定義是：抗生素是低分子量的微生物代謝產(chǎn)物，能在很低的濃度下抑制其他微生物的生長(zhǎng)。6現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

按生物的來(lái)源：凡是在動(dòng)、植物或微生物產(chǎn)生的，可按來(lái)源命名。如青霉素、赤霉素、蒜素按化學(xué)結(jié)構(gòu)命名：化學(xué)結(jié)構(gòu)性質(zhì)清楚的，如四環(huán)素（含有四并苯的基本母核），氯四環(huán)素（金霉素），氧四環(huán)素（土霉素）。名稱R1R2微生物來(lái)源四環(huán)素HH金色鏈霉菌金霉素HOH金色鏈霉菌土霉素ClH龜裂鏈霉菌其它：紀(jì)念意義、產(chǎn)地、俗名如正定霉素、井岡霉素、金霉素和土霉素等。（2）抗生素的命名（一般分為三類(lèi)）7現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

HNONSCH3CH3HCOO-H-lactamringβ-內(nèi)酰胺環(huán)RnaturalpenicillinR=CH2-CO-8現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一β-內(nèi)酰胺環(huán)苯甲異噁唑青霉素氨芐青霉素羧芐青霉素苯氧甲基青霉素9現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一2抗生素的發(fā)展簡(jiǎn)史2.1治療和發(fā)展我國(guó)的發(fā)展：

1953年5月1日，建立了第一個(gè)生產(chǎn)青霉素的抗生素工廠（上海第三制藥廠）；1958年6月3日，最大的抗生素聯(lián)合企業(yè)建成投產(chǎn)（華北制藥廠,石家莊），也是青霉素發(fā)酵總?cè)莘e居世界首位。目前，多為原料藥基地。但在半合成及成品藥的劑型方面與國(guó)外相比差距很大。10現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一抗生素濫用的重災(zāi)區(qū)中國(guó)是抗生素使用大國(guó)，也是抗生素生產(chǎn)大國(guó)：年產(chǎn)抗生素原料大約21萬(wàn)噸，出口3萬(wàn)噸，其余自用（包括醫(yī)療與農(nóng)業(yè)使用)，人均年消費(fèi)量138克左右(美國(guó)僅13克)。2011年4月7日是世界衛(wèi)生日，首屆合理用藥大會(huì)在這一天召開(kāi)，恰好契合了世界衛(wèi)生日的主題——“抵御耐藥性：今天不采取行動(dòng)，明天就無(wú)藥可用”。11現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一“后抗生素時(shí)代”如果不再控制抗生素的濫用狀態(tài)，二十一世紀(jì)人類(lèi)有可能失去抗生素這個(gè)有利的治療武器，重新回到?jīng)]有抗生素的時(shí)代，所謂“后抗生素時(shí)代”。后抗生素時(shí)代是倒退，我們可能回到?jīng)]有藥物可使用的狀態(tài)，大量的傳染性疾病將危害人類(lèi)的身體健康和生命。雖然這是一種悲觀的想法，但悲觀的很有道理，細(xì)菌產(chǎn)生耐藥速度比新藥物開(kāi)發(fā)的速度快得多，這是一個(gè)確實(shí)的現(xiàn)象。12現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一3抗生素的分類(lèi)可根據(jù)生物來(lái)源、作用對(duì)象、化學(xué)結(jié)構(gòu)、作用機(jī)制、生物合成途徑等方面對(duì)抗生素進(jìn)行分類(lèi)。3.1根據(jù)抗生素的生物來(lái)源分類(lèi)(生物學(xué)家)（1）放線菌產(chǎn)生的抗生素：如鏈霉素、四環(huán)類(lèi)（如四環(huán)素）、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)（如紅霉素）、多烯類(lèi)（如制霉菌素）

、放線菌素類(lèi)（如放線菌素D）等。（其中鏈霉菌屬最多，諾卡氏菌屬、小單孢菌次之）（2）真菌產(chǎn)生的抗生素：如青霉菌屬和頭孢菌屬等分別產(chǎn)生一些很重要的抗生素（青霉素、灰黃霉素、頭孢菌素）。13現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一（3）細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素：如多粘桿菌、枯草桿菌、芽孢桿菌等。如多粘菌素。（4）植物或動(dòng)物產(chǎn)生的抗生素：從被子植物蒜中制得的蒜素；從動(dòng)物臟器中制得的魚(yú)素等。3.2根據(jù)抗生素的作用對(duì)象分類(lèi)（醫(yī)生、病理學(xué)家）（1）廣譜抗生素：如氨卞青霉素既抑制G+，又抑制G-（2）抗G+的抗生素：如青霉素，（3）抗G-的抗生素：如鏈霉素（3）抗真菌的抗生素：如制霉菌素（4）抗病毒的抗生素：如四環(huán)類(lèi)抗生素對(duì)立克次氏體及較大病毒有一定作用。（5）抗癌的抗生素：如阿霉素14現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一3.3根據(jù)抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類(lèi)（化學(xué)家）較復(fù)雜，目前已確定結(jié)構(gòu)的抗生素習(xí)慣如下分類(lèi)：（1）β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素：包括青霉素類(lèi)，頭孢菌素類(lèi)等（2）氨基糖苷類(lèi)抗生素：包括鏈霉素、慶大霉素等（3）大環(huán)內(nèi)脂類(lèi)抗生素：如紅霉素、麥迪加霉素（4）四環(huán)類(lèi)抗生素：如四環(huán)素、土霉素（5）多肽類(lèi)抗生素：如多粘菌素、桿菌肽（6）蒽環(huán)類(lèi)抗生素：如阿霉素、柔紅霉素（7）喹諾酮類(lèi)抗生素：如環(huán)丙沙星、諾氟沙星15現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一3.4根據(jù)作用機(jī)制分類(lèi)此種分類(lèi)的優(yōu)點(diǎn)：便于進(jìn)行理論研究，有助于了解抗生素影響病原體新陳代謝的哪些環(huán)節(jié)，從而找出治療的規(guī)律，使抗生素的使用更為合理。（1）抑制細(xì)胞壁合成的抗生素：如青霉素。（2）影響細(xì)胞膜功能的抗生素：多烯類(lèi)抗生素。（3）抑制病原菌蛋白質(zhì)合成的抗生素：四環(huán)素。（4）抑制核酸合成的抗生素：如影響DNA結(jié)構(gòu)和功能的絲裂霉素C。（5）抑制生物能作用的抗生素：如抑制電子轉(zhuǎn)移的抗霉素。16現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一17現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一3.5根據(jù)抗生素的合成途徑分類(lèi)（1）氨基酸、肽類(lèi)衍生物抗生素：如青霉素類(lèi)、頭孢菌素等寡肽抗生素。（2）糖類(lèi)衍生物抗生素：如鏈霉素等糖苷類(lèi)抗生素。（3）以乙酸、丙酸為單位的衍生物抗生素：紅霉素等丙酸衍生物。18現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一生產(chǎn)方法：1、生物合成法：

①傳統(tǒng)方法②“工程菌”制造法③細(xì)胞融合技術(shù)法

2、化學(xué)合成法；3、生物合成加化學(xué)合成法。

4抗生素的生產(chǎn)工藝19現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

1、生物合成法：

①傳統(tǒng)方法大多數(shù)抗生素是由放線菌和霉菌產(chǎn)生的。菌種是通過(guò)從土壤中分離、篩選獲得，一般采用深層通風(fēng)攪拌發(fā)酵罐生產(chǎn)。傳統(tǒng)方法目前存在很多不足，因此，人們采用基因工程和細(xì)胞融合技術(shù)，對(duì)抗生素產(chǎn)生菌進(jìn)行了改造和重新設(shè)計(jì)，不僅可以制造出許多高效低毒的新型抗生素，還可改革工藝，使抗生素產(chǎn)量成倍地增長(zhǎng)。20現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一②“工程菌”制造法

第一次由“工程菌”制造的全新抗生素—麥迪紫紅素A，是美國(guó)報(bào)道的。他們將產(chǎn)放線紫紅素的部分基因插入產(chǎn)麥迪霉素的放線菌中，構(gòu)建的“工程菌”產(chǎn)生了全新的抗生素。我國(guó)新構(gòu)建的生產(chǎn)丁胺卡那霉素的“工程菌”，就是把?；富蚩寺〉娇敲顾禺a(chǎn)生菌中獲得的。新的“工程菌”生產(chǎn)的新抗生素毒副作用小，對(duì)耐卡那霉素、慶大霉素致病菌臨床療效顯著。21現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一③細(xì)胞融合技術(shù)法

對(duì)抗生素產(chǎn)生菌采用細(xì)胞融合技術(shù)的成果更為突出。橄欖色無(wú)孢小單孢菌細(xì)胞融合株抗生素產(chǎn)率比原菌株提高140倍。目前DNA重組技術(shù)已廣泛用于紅霉素、鏈霉素等20多種抗生素的育種工作，可以預(yù)見(jiàn)不久將來(lái)會(huì)有更多的由“工程菌”生產(chǎn)的新型抗生素問(wèn)世。22現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一2、化學(xué)合成法

根據(jù)某種抗生素的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)，通過(guò)化學(xué)合成的方法，可生產(chǎn)部分抗生素。如：氯霉素、磷霉素等。經(jīng)過(guò)化學(xué)合成方法和控制條件的不斷深入研究，越來(lái)越多的抗生素可用化學(xué)合成法生產(chǎn)。23現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一3、生物合成加化學(xué)合成法

許多細(xì)菌逐漸出現(xiàn)了抗藥性，已經(jīng)證實(shí)某些抗藥性因子位于細(xì)菌內(nèi)的質(zhì)粒上，質(zhì)?？梢栽诩?xì)菌之間轉(zhuǎn)移，結(jié)果抗性菌日益增多，抗生素療效就越來(lái)越低。為了對(duì)付細(xì)菌的抗藥性，科學(xué)家對(duì)原有的抗生素進(jìn)行了“整容手術(shù)”，細(xì)菌因再無(wú)法識(shí)別改頭換面的抗生素而被抑制或殺死?，F(xiàn)在已能使用克隆了酰化酶基因的“工程菌”（大腸桿菌）高效率的生產(chǎn)半合成抗生素。臨床現(xiàn)在使用的貴重特效藥物先鋒霉素（頭孢菌素類(lèi)）、氨芐青霉素，就是這類(lèi)半合成抗生素類(lèi)藥物。國(guó)外已有幾十種這類(lèi)藥物在實(shí)驗(yàn)室研制成功。24現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一抗生素制備的一般流程圖菌種孢子制備種子制備發(fā)酵發(fā)酵液預(yù)處理及種子加濾提取及精制成品檢驗(yàn)前體發(fā)酵階段提取階段成品包裝25現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一5青霉素概述26現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一青霉素的理化性質(zhì)青霉素本身為一元酸，可與鉀、鈉、鎂、鈣、鋁和銨等化合成鹽類(lèi)。易溶于水，游離酸易溶于醇、酮、醚、酯等一般有機(jī)溶劑。游離酸或鹽類(lèi)的水溶液均不穩(wěn)定，極易失去抗菌效力。不耐熱，一般保存于冰箱中，但青霉素鹽的結(jié)晶純品，在干燥條件下可于室溫保存數(shù)年。青霉素的抗菌效力與其分子中的β-內(nèi)酰胺環(huán)有關(guān)。27現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一抗菌作用和臨床應(yīng)用青霉素主要抑制G+菌，但對(duì)某些G-菌，螺旋體及放線菌也有強(qiáng)大的抗菌作用，青霉素的抗菌作用與抑制細(xì)胞壁的合成有關(guān)。青霉素臨床上用于治療葡萄球菌傳染癥如腦膜炎、化膿炎、骨髓炎等，溶血性鏈球菌傳染癥如腹膜炎、產(chǎn)褥熱，以及肺炎、淋病、梅毒和炭疽等。28現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一菌種：產(chǎn)黃青霉生長(zhǎng)發(fā)育分七個(gè)階段：Ⅰ—Ⅳ期：菌絲生長(zhǎng)期，適宜做種子；Ⅳ—Ⅴ期：青霉素分泌期；Ⅵ期：菌絲體自溶期。5.1青霉素生產(chǎn)菌的特性點(diǎn)青霉29現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一青霉素產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)過(guò)程分生孢子發(fā)芽期菌絲繁殖期脂肪粒形成期脂肪粒減少，小空孢大空孢自溶菌絲生長(zhǎng)期青霉素分泌期菌絲自溶期30現(xiàn)在是30頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

第1期：分生孢子萌發(fā)，具有小泡。 第2期：菌絲繁殖，嗜堿性，類(lèi)脂肪小顆粒。 第3期：脂肪包涵體，貯藏物，嗜堿性很強(qiáng)。

第4期：空泡，嗜堿性減弱，開(kāi)始產(chǎn)生抗生素。 第5期：大空泡，中性染色大顆粒，脂肪包涵體 消失，青霉素產(chǎn)量最高。 第6期：個(gè)別細(xì)胞自溶，胞內(nèi)無(wú)顆粒，釋放氨，

pH上升。 第7期：菌絲完全自溶，僅有空細(xì)胞壁。發(fā)酵培養(yǎng)下的生長(zhǎng)過(guò)程及細(xì)胞學(xué)變化現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

鏡檢控制規(guī)定時(shí)間取樣，顯微鏡觀察7個(gè)時(shí)期的態(tài)變化，控制發(fā)酵。1－4期為菌絲生長(zhǎng)期，3期的菌體適宜種子。4－5期為生產(chǎn)期，生產(chǎn)能力最強(qiáng)，通過(guò)工程措施，延長(zhǎng)此期，獲得高產(chǎn)。第6期到來(lái)之前結(jié)束發(fā)酵?，F(xiàn)在是32頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一帶放補(bǔ)料工6.1青霉素生產(chǎn)流程結(jié)晶器種子罐1和2米孢子預(yù)處理罐過(guò)濾器發(fā)酵罐萃取器蒸發(fā)器工業(yè)鹽提煉工藝藝發(fā)冷凍干燥孢子瓊脂斜面酵

培養(yǎng)基制備無(wú)菌空氣冷至15℃6.青霉素發(fā)酵工藝過(guò)程現(xiàn)在是33頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

(1)、生產(chǎn)孢子制備斜面種子：砂土孢子用甘油、葡萄糖、蛋白胨組成的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，最適溫度25-26℃，培養(yǎng)6-8天，形成單菌落。再傳斜面，培養(yǎng)7天，形成綠色斜面孢子。 米孢子：移植到小米或大米固體培養(yǎng)基 上，生長(zhǎng)7天，25℃

注意：每批孢子必需進(jìn)行嚴(yán)格搖瓶試 驗(yàn)，測(cè)定效價(jià)及雜菌情況。6.2青霉素發(fā)酵工藝過(guò)程現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(2)、種子罐培養(yǎng)工藝

一級(jí)種子發(fā)酵：發(fā)芽罐，孢子萌發(fā)，形成菌絲。

培養(yǎng)基：葡萄糖，玉米漿，碳酸鈣，玉米油，消沫劑等?？諝饬髁?：3（體積比）；充分?jǐn)嚢?00-350rpm；

pH自然，溫度27±1℃,40h

二級(jí)種子罐：繁殖罐，大量繁殖。接種量10％ 培養(yǎng)基：葡萄糖、玉米漿，玉米油，消沫劑等。 通氣量1:1-1.5；攪拌250-280rpm；pH自然，25±1℃。10-14h

質(zhì)量：菌絲致密，菌絲粗壯，III期，倍增期6-8h現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(3)、生產(chǎn)罐培養(yǎng)工藝

三級(jí)罐：生產(chǎn)罐；接種量20％ 培養(yǎng)基：花生餅粉，葡萄糖，尿素，硝酸銨， 硫代硫酸鈉，苯乙酰胺，CaCO3,玉米油,硅油.

參數(shù)條件： 通氣量1：；150-200r/min； 前60小時(shí)，26℃；

60小時(shí)后:pH6.7,24℃?，F(xiàn)在是36頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一6.3發(fā)酵培養(yǎng)與過(guò)程控制

操作方式：反復(fù)分批式發(fā)酵 發(fā)酵罐：100m3，裝料80m3.

帶放:6-10次，帶放量10％，間隔24h。 發(fā)酵周期：180-220h發(fā)酵過(guò)程需連續(xù)流加葡萄糖、硫酸銨以及前體物質(zhì)苯乙酸鹽，補(bǔ)糖率是最關(guān)鍵的控制指標(biāo)，不同時(shí)期分段控制?，F(xiàn)在是37頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一過(guò)程控制——補(bǔ)料分批操作控制基質(zhì)濃度

前40小時(shí)：培養(yǎng)基中的主要營(yíng)養(yǎng)物

40小時(shí)后：低速連續(xù)補(bǔ)加葡萄糖、氮源和苯乙酸等，維持一定的最適濃度。 半饑餓狀態(tài)：延長(zhǎng)合成期，提高產(chǎn)量。 碳源占成本12％以上，采用糖化液流加,降低成本。 糖與6APA結(jié)合形成糖基-6APA，影響青霉素產(chǎn)量?，F(xiàn)在是38頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一a.流加碳源控制

根據(jù)殘?zhí)恰H、尾氣中CO2和O2含量。殘?zhí)牵プ笥?，pH開(kāi)始升高時(shí)流加糖。 葡萄糖的波動(dòng)范圍較窄，濃度過(guò)低使抗生素合成 速度減慢或停止，過(guò)高則導(dǎo)致呼吸活性下降，甚至 引起自溶。

(1)培養(yǎng)基現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一b.流加氮源控制

玉米漿:最好，含有多種氨基酸及其前體苯乙酸和衍生物。 補(bǔ)加無(wú)機(jī)氮源：硫酸銨、氨水、尿素 氨基氮濃度：0.01-0.05%。現(xiàn)在是40頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一c.鹽離子控制

無(wú)機(jī)鹽：硫、磷、鎂、鉀等。 鐵對(duì)青霉素合成有毒，30-40ug/ml以下。 罐壁涂環(huán)氧樹(shù)脂保護(hù)層?，F(xiàn)在是41頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一d.添加青霉素側(cè)鏈前體

時(shí)期：合成階段 種類(lèi)：苯乙酸及其衍生物，苯乙酰胺、苯乙胺、 苯乙酰甘氨酸 毒性：抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和青霉素合成。 策略：低濃度流加 濃度：苯乙酸0.1%，苯乙酰胺0.05-0.08%

控制：保持供應(yīng)速率略大于生物合成需要。現(xiàn)在是42頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

(2).溫度控制適宜菌絲生長(zhǎng)溫度30℃，分泌青霉素25℃。20℃青霉素破壞少，周期很長(zhǎng)。變溫控制，不同階段不同溫度。生長(zhǎng)階段:較高溫度，縮短生長(zhǎng)時(shí)間；生產(chǎn)階段適當(dāng)降低溫度，以利于青霉素合成。前期控制26℃左右，后期降溫控制24℃現(xiàn)在是43頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(3).pH控制合成適宜pH6.4－6.6左右，避免超過(guò)7.0直接加酸或堿：自動(dòng)控制流加葡萄糖：恒速；變速，依賴pH變化快慢。pH下降：補(bǔ)加CaCO3、通氨、尿素或提高通氣量pH上升：補(bǔ)加糖、生理酸性物質(zhì)（硫酸銨、油脂）現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(4).溶氧控制＜30％飽和度，產(chǎn)率急劇下降；＜10％，造成不可逆的損害。臨界溶氧濃度：30％。通氣比：1：0.8－1.5。適宜的攪拌速度:保證氣液混合，提高溶氧調(diào)整攪拌轉(zhuǎn)速:各階段的生長(zhǎng)和耗氧量不同?，F(xiàn)在是45頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(5).消沫

天然油脂：玉米油； 化學(xué)消沫劑：泡敵。 策略：少量多次。 注意：前期不宜多加入，影響呼吸代謝?，F(xiàn)在是46頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一7青霉素的提煉工藝過(guò)程青霉素不穩(wěn)定，遇酸、堿、熱分解失活水溶液中不穩(wěn)定，非極性溶劑中穩(wěn)定易溶于有機(jī)溶劑，水中溶解度很小青霉素鹽很穩(wěn)定；降解產(chǎn)物具有致敏性防止降解，條件溫和、快速?，F(xiàn)在是47頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一(1)、預(yù)處理青霉素的存在部位：發(fā)酵液濃度較低：10－30Kg/m3含有大量雜質(zhì)：菌體細(xì)胞、核酸、雜蛋白質(zhì)、細(xì)胞壁多糖等、殘留的培養(yǎng)基、色素、鹽離子、代謝產(chǎn)物等目的：濃縮目的產(chǎn)物，去除大部分雜質(zhì)，改變發(fā)酵液的流變學(xué)特征，利于后續(xù)的分離純化過(guò)程。預(yù)處理:發(fā)酵液加少量絮凝劑沉淀蛋白現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有55頁(yè)\編輯于星期一

(2)、過(guò)濾鼓式真空過(guò)濾機(jī)過(guò)濾：一次濾液：，略渾，棕黃或綠色，蛋白質(zhì)含量0.5-2.0%。板框式過(guò)濾機(jī)過(guò)濾：