生物化學(xué)代謝調(diào)節(jié)

生物化學(xué)代謝調(diào)節(jié)第1頁/共16頁M型H型

LDH同功酶譜第2頁/共16頁乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase,LDH）

LDH由H型和M型兩型亞基構(gòu)成的四聚體、五種同工酶。LDH1（H型）：對(duì)丙酮酸親和力低（Km大),對(duì)乳酸親和力大;

運(yùn)動(dòng)時(shí)，心肌可利用乳酸氧化產(chǎn)能；LDH5（M型）：對(duì)丙酮酸親和力高（Km?。\(yùn)動(dòng)時(shí)，骨骼肌可以加強(qiáng)糖酵解產(chǎn)生乳酸，補(bǔ)充能量；乳酸經(jīng)過血循運(yùn)至心肌組織利用。第3頁/共16頁

LDH同工酶譜臨床診斷意義：心肌梗塞：血清LDH1↑;

肝癌或急性肝炎：血清LDH5↑;

白血?。貉錖DH4↑意義：同工酶的存在，不僅使調(diào)節(jié)更加精細(xì)、更加合理；而且使臨床診斷更加特異、更加靈敏.。第4頁/共16頁1.4酶蛋白的酶促化學(xué)修飾調(diào)節(jié)1.4.1化學(xué)修飾機(jī)理

磷酸化修飾

磷酸化使酶蛋白分子中Ser-OH、

Thr-OH和Tyr-OH發(fā)生磷酸化修飾；

Ser/Thr蛋白激酶

Tyr蛋白激酶去磷酸

在另外的磷酸酶作用下脫去磷酸，使酶恢復(fù)原型。第5頁/共16頁1.4.2酶促化學(xué)修飾特點(diǎn)：（1）極大多數(shù)受化學(xué)修飾的酶，有無活性和有活性兩種形式，并受不同的酶催化而互變；（2）化學(xué)修飾使酶蛋白發(fā)生共價(jià)鍵的變化（3）磷酸化修飾是一種耗能較少的經(jīng)濟(jì)有效的調(diào)節(jié)方式；（4）級(jí)聯(lián)式的激活過程，對(duì)調(diào)節(jié)信號(hào)有快速、放大效應(yīng)。第6頁/共16頁Gs第7頁/共16頁1.5鈣調(diào)蛋白（又稱鈣調(diào)素，Calmodulin，

CaM)

是一種與Ca2+結(jié)合、并將Ca2+信號(hào)下傳的一類鈣結(jié)合蛋白。1.5.1鈣調(diào)蛋白的分布

分布廣泛，但腦組織內(nèi)含量最高；在細(xì)胞內(nèi)，胞漿中含量最高；1.5.2鈣調(diào)蛋白的分子結(jié)構(gòu)

CaM：

148個(gè)aa、17KD、單鏈，熱穩(wěn)定，耐酸，分子內(nèi)含（30％）酸性氨基酸，pI4.0，

282nm有吸收高峰——可作為鑒定CaM的條件之一。第8頁/共16頁CaM分子中有4個(gè)結(jié)合Ca2+的結(jié)構(gòu)域：

Ⅰ—8~40，

Ⅱ—44~76，

Ⅲ—81~113，

Ⅳ—117~148：

（CH3)3-Lys115

；

能使肽鏈高度扭曲，增加CaM與靶酶的親和力。第9頁/共16頁1.5.3Ca2+·CaM活性復(fù)合物

靜息狀態(tài)時(shí)，胞內(nèi)[Ca2+]10-7mol/L;

細(xì)胞受到外界刺激后，胞內(nèi)[Ca2+]↑→10-6mol/L，

CaM+n

Ca2+

CaM*

·(

Ca2+)n

（n:1~4）

（無活性）（有活性）

CaM*·(Ca2+)n+E

E*·CaM*·(Ca2+)n

第10頁/共16頁1.5.4CaM*·(Ca2+)n

的調(diào)節(jié)作用

(其下游靶蛋白或酶有20多種)CaM*·(Ca2+)n

磷酸二酯酶（PDE）

腺苷酸環(huán)化酶（AC）鳥苷酸環(huán)化酶（GC）磷酸化酶b激酶(phosphorylasebkinase)糖原合酶（glycogensynthase）

肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）一氧化氮合酶（NOS）第11頁/共16頁(1)CaM*

·(Ca2+)n

調(diào)節(jié)胞內(nèi)cAMP水平

ATP

AC

cAMP→

第二信使作用CaM*·(Ca2+)n

PDE

5’-AMP（失活）

(+)(+)第12頁/共16頁（2）CaM*·(Ca2+)n

激活磷酸化酶b激酶→調(diào)節(jié)糖原分解骨骼?。毫姿峄竍激酶（十六聚體蛋白）——（、、、）4

調(diào)節(jié)亞基;

—催化亞基;—CaM第13頁/共16頁細(xì)胞受刺激后：胞內(nèi)[Ca2+]↑→亞基：CaM*·(Ca2+)n

→磷酸化酶b激酶

（全酶）被激活cAMP→PKA途徑

-亞基－P(活化)→激活－亞基→全酶被激活

糖原分解

-亞基-P→

使-亞基－P變構(gòu)而去磷酸→－亞基失活

磷酸化酶b激酶（全酶）失活第14頁/共16頁（