生物顯微鏡的原理

生物顯微鏡的原理第1頁/共19頁二、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡原理

是將兩個凸透鏡系統(tǒng)適當(dāng)?shù)亟M合在儀器上對標(biāo)本進行放大，經(jīng)物鏡形成倒立實像，經(jīng)目鏡放大成虛像。第2頁/共19頁1、照明系統(tǒng)：光源(普通光線可見光)、折光鏡、聚光鏡、濾光片

2、光學(xué)放大系統(tǒng)：兩組玻璃透鏡——目鏡、物鏡

3、機械裝置：保證光學(xué)系統(tǒng)的準確配置和靈活調(diào)控三、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡構(gòu)造第3頁/共19頁普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡鏡筒載物臺聚光鏡光闌粗動螺旋微動螺旋照明裝置基座棱鏡光路圖第4頁/共19頁第5頁/共19頁四、普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡使用方法

1．取鏡和安放：顯微鏡平時存放在柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，略偏左（顯微鏡放在距實驗臺邊緣7cm左右處），鏡座后端距桌邊4－6cm為宜，便于坐著操作。安裝好目鏡和物鏡。安裝物鏡時要用左手食指和中指托住物鏡，然后用右手將物鏡裝上去，這樣即使沒安裝好，也不會摔到地上。

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2、對光：用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動)，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心)。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開)，同時調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

3、放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。第7頁/共19頁4、調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5mm處，應(yīng)注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時，一般顯微鏡的物距在１cm左右。如果物距已遠超過１cm，仍未看到物像，那可能是標(biāo)本未在視野內(nèi)或轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋速度過快，此時應(yīng)調(diào)整裝片位置，然后再重復(fù)上述步驟，當(dāng)視野中出現(xiàn)模糊的物像時，就要換用細準焦螺旋調(diào)節(jié)，使看到的物像更加清晰。只有這樣，才能縮小，切不可心急而盲目地上升鏡臺。第8頁/共19頁

5、觀察：使用準焦螺旋調(diào)節(jié)焦距，找到物象可以說是顯微鏡使用中最重要的一步，也是學(xué)生感覺最難的一步。用顯微鏡觀察物體時，應(yīng)雙眼同時睜開，左眼向目鏡內(nèi)看，同時反方向轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。尋找范圍，提高找到物像的速度。第9頁/共19頁

6、轉(zhuǎn)換物鏡：使用低倍鏡后換用高倍鏡時應(yīng)手握轉(zhuǎn)換器的下層轉(zhuǎn)動板轉(zhuǎn)換物鏡。不能用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，因為這樣雖比較省力，但因轉(zhuǎn)換器的材料質(zhì)地較軟，精度較高，螺紋受力不均勻很容易松脫，容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜。一旦螺紋破壞，整個轉(zhuǎn)換器就會報廢。

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高倍鏡的使用方法：一定要先在低倍鏡下選好目標(biāo)后，把需進一步觀察的部位調(diào)到中心，同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，然后轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼觀察，物象不太清楚的，可將細調(diào)節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)。如果亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如需要更換玻片標(biāo)本時，必須順時針(切勿轉(zhuǎn)錯方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降，方可取下玻片標(biāo)本。第11頁/共19頁

油鏡的使用方法：經(jīng)低、高倍鏡觀察，然后將需進一步放大的部分移到視野的中心。將集光器上升到最高位置，光圈開到最大。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時應(yīng)按：低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍→油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭。油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去，再用干擦鏡紙擦干凈。第12頁/共19頁

7、邊觀察邊畫圖。

8、整理登記：實驗完畢，取下標(biāo)本片，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔，下降鏡臺，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實驗臺柜內(nèi)。最后填寫使用登記表。第13頁/共19頁五、光學(xué)顯微鏡的維護要點：

1、取送顯微鏡時一定要一手握住彎臂，另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜，以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時要輕拿輕放。不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣，以免碰翻落地。

2、觀察時，不能隨便移動顯微鏡的位置。

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3、保持顯微鏡的干燥、清潔，避免灰塵、水及化學(xué)試劑的玷污。顯微鏡的光學(xué)部分只能用特殊的擦鏡紙與溶液一同擦拭，不能亂用他物擦拭，更不能用手指觸摸透鏡，以免汗液玷污透鏡。切忌口吹手抹或用布擦，機械部分用布擦拭。水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺，如果沾污應(yīng)立即擦凈。

4．放置玻片標(biāo)本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。第15頁/共19頁

5、轉(zhuǎn)換物鏡鏡頭時，不要搬動物鏡鏡頭，只能轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器?，F(xiàn)在顯微鏡有電動轉(zhuǎn)換,使用也很方便,是一個發(fā)展方向。

6、切勿隨意轉(zhuǎn)動調(diào)焦手輪。使用微動調(diào)焦旋鈕時，用力要輕，轉(zhuǎn)動要慢，轉(zhuǎn)不動時不要硬轉(zhuǎn)。

7、不得任意拆卸顯微鏡上的零件，嚴禁隨意拆卸物鏡鏡頭，以免損傷轉(zhuǎn)換器螺口，或螺口松動后使低高倍物鏡轉(zhuǎn)換時不齊焦。

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9、用畢將光源調(diào)到最小,延長燈泡的使用壽命。

10、物鏡和目鏡的生霉生霧的處理辦法：準備30%無水乙醇+70%乙醚，將不同的鏡頭單獨分開放置干燥劑器皿中，最好用棉花棒，紗布，柔軟的刷子等比較柔軟的東西來擦拭，注意不能用力擦，以防止損傷鍍膜層。油鏡當(dāng)時就要清洗，特別是100X的油鏡，處理不當(dāng)?shù)脑?，前片容易浸油或開膠。目鏡可以自己拆下來清洗，16X目鏡注意別裝反了，前片凹面在上。物鏡不要隨便拆下。指針不要用頭發(fā)來做，易弄臟鏡頭，廠家可配備一個指針。一般2個月最好能集中保養(yǎng)一次。顯微鏡多時，各個鏡頭要標(biāo)號以免弄錯了搭配。第17頁/共19頁

11、透鏡的清潔

清潔灰塵用用棉花棒，紗布，柔軟的刷子等比較柔軟的東西來，注意輕柔慢緩。有些較頑固的污跡如油跡，指紋等，可以用干凈的軟棉布，棉花棒鏡頭紙等蘸上無水酒精輕輕的擦去。如果是從油鏡上擦去浸油，應(yīng)用鏡頭紙，軟棉布或紗布，蘸上二甲苯輕輕擦去。注意，不要用二甲苯清洗雙目鏡筒底部