積壓血清弱凝集

積壓血清弱凝集第1頁/共49頁交叉配血常見錯(cuò)誤的分析第2頁/共49頁責(zé)任性錯(cuò)誤特殊原因?qū)е屡溲e(cuò)誤技術(shù)性錯(cuò)誤交叉配血常見錯(cuò)誤第3頁/共49頁

在交叉配血中發(fā)生重大差錯(cuò)事故往往是工作責(zé)任心不強(qiáng)，粗心大意，馬馬虎虎造成。要把事故消滅在萌芽狀態(tài)必須做到以下幾點(diǎn)：

1、熱愛本職工作，愛崗敬業(yè)，認(rèn)真按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。

2、防止交叉配血標(biāo)本拿錯(cuò)和離心后結(jié)果看錯(cuò)。

3、各種配血器皿、器材要清潔、干燥，防止溶血和交叉污染。一、責(zé)任性錯(cuò)誤（責(zé)任心不強(qiáng)）第4頁/共49頁4、交叉配血用的滴管、試管等不能互相交叉混用。5、標(biāo)準(zhǔn)血清不用時(shí)應(yīng)及時(shí)放入冰箱，防止細(xì)菌生長導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)血清變質(zhì)。6、觀察結(jié)果要仔細(xì)，遵守規(guī)定的時(shí)間，冬季注意保溫，防止冷凝集素干擾配血結(jié)果。7、觀察結(jié)果時(shí)，除了用肉眼觀察外，必須用顯微鏡觀察，注意區(qū)分假凝集與真凝集反應(yīng)。一、責(zé)任性錯(cuò)誤（責(zé)任心不強(qiáng)）第5頁/共49頁8、注意病人有無輸血史和妊娠史，交叉配血時(shí)一定要用鹽水相（如鹽水配血法）和非鹽水相（如凝聚胺配血法、抗凝球蛋白法、卡式法）兩種方法同時(shí)配血，防止不完全抗體漏檢。

①鹽水法優(yōu)缺點(diǎn):簡便、快速、成本低，但有局限性。

迄今人類紅細(xì)胞血型已發(fā)現(xiàn)23個(gè)系統(tǒng)。鹽水法只能檢出ABO、P、Lewis、I和MN等系統(tǒng)的抗體，而不能檢出Rh、等系統(tǒng)的抗體。前者多為天然抗體，屬IgM球蛋白；后者由免疫產(chǎn)生，屬IgG球蛋白。IgM分子量大，分子長度長，能在鹽水中與紅細(xì)胞上相應(yīng)抗原結(jié)合，連接相鄰紅細(xì)胞出現(xiàn)可見的凝集反應(yīng)：而IgG分子量小，分子長度短，不能在鹽水中起可見的凝集反應(yīng)。因此，交叉配血不能只用鹽水法，還要選用能有效檢出IgG抗體的方法。

一、責(zé)任性錯(cuò)誤（責(zé)任心不強(qiáng)）第6頁/共49頁②能夠檢出IgG抗體的酶法、抗球蛋白法及凝聚胺法各有優(yōu)缺點(diǎn)：

凝聚胺法對大多數(shù)血型系統(tǒng)敏感度高，且操作簡便、快速。目前我國適合應(yīng)用凝聚胺法、因?qū)h系統(tǒng)特別敏感。因我國以Rh系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)最為常見。第7頁/共49頁9、一個(gè)血標(biāo)本只能配血1次，第2次輸血時(shí)必須重抽標(biāo)本配血（24-72小時(shí)內(nèi)的標(biāo)本能代表病人的免疫狀態(tài)）。10、交叉配血全過程應(yīng)由2個(gè)人反復(fù)復(fù)查、核對，準(zhǔn)確無誤后才能出具《配血試驗(yàn)報(bào)告單》和發(fā)放血液。11、配血完成后應(yīng)將病人和供血者的標(biāo)本置2～8℃冰箱保存至少7d，輸血后血袋至少保存3-7d，以備復(fù)查。一、責(zé)任性錯(cuò)誤（責(zé)任心不強(qiáng)）第8頁/共49頁二、特殊原因?qū)е屡溲e(cuò)誤冷凝集現(xiàn)象緡錢狀形成不相容現(xiàn)象其他第9頁/共49頁1、冷凝集現(xiàn)象

這是冬天配血最常見的問題，主要是因?yàn)楂I(xiàn)血者或受血者血清中存在冷凝集素（IgG）造成。

（正常人血清中冷凝集素效價(jià)一般不高，且在4℃以下時(shí)才有活性。但由于人免疫系統(tǒng)的差異，在惡性腫瘤或病原體感染后有時(shí)，冷反應(yīng)性自身抗體可異常增高，可導(dǎo)致溶血性貧血。這種冷凝集素效價(jià)在4℃可高于1000，用37℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞）

二、特殊原因?qū)е屡溲e(cuò)誤第10頁/共49頁1、冷凝集現(xiàn)象

處理方法：37℃孵育或37℃水浴5～10分鐘，取出后立即用顯微鏡觀察，凝塊消失者是冷凝集，不消失者是真凝集。

(含有冷凝集素的血液輸注時(shí)應(yīng)先將血液預(yù)熱后再輸注。)第11頁/共49頁冷凝集現(xiàn)象第12頁/共49頁冷凝集37℃水浴5～10分鐘后第13頁/共49頁正常紅細(xì)胞形態(tài)第14頁/共49頁2、緡錢狀形成交叉配血時(shí)有時(shí)紅細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)串錢狀假凝集，沒有經(jīng)驗(yàn)的人會(huì)認(rèn)為這是真凝集，而造成配血錯(cuò)誤。造成假凝集的原因是受血者或獻(xiàn)血者血液中球蛋白及纖維蛋白原含量增高，使紅細(xì)胞易于靠近而形成緡錢狀。

（常見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性腫瘤等。）二、特殊原因?qū)е屡溲e(cuò)誤第15頁/共49頁RBC緡錢狀假凝集第16頁/共49頁正常RBC形態(tài)第17頁/共49頁3、不相容現(xiàn)象血清中有免疫抗體或不規(guī)則抗體（IgM或IgG和IgM混合型）時(shí)，交叉配血結(jié)果會(huì)出現(xiàn)不相容現(xiàn)象，做不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)可查明。4、其他有自身抗體（積壓血清）、弱凝集、假凝集、亞型、細(xì)菌性凝集、混合外觀凝集現(xiàn)象、自身免疫性溶血性貧血時(shí)，會(huì)影響交叉配血結(jié)果。二、特殊原因?qū)е屡溲e(cuò)誤第18頁/共49頁假凝集

血清在室溫和37℃中，使紅細(xì)胞出現(xiàn)了假凝集，造成配血錯(cuò)誤。常見于某些肝病、傳染病、多發(fā)性骨髓瘤、霍金氏病、心肌梗塞、感染等病，或用紙片或玻片作血型鑒定時(shí)，時(shí)間過長水份蒸發(fā)引起紅細(xì)胞發(fā)生凝集，這種凝集在鏡下為緡錢狀，可看清紅細(xì)胞形態(tài)，患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性.處理方法：用生理鹽水稀釋或洗滌紅細(xì)胞可使凝集消失。第19頁/共49頁弱凝集

血型試驗(yàn)是抗原抗體反應(yīng)，當(dāng)患者紅細(xì)胞上抗原異常或血清中存在ABO血型以外的不規(guī)則抗體時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致減弱的或缺少的凝集反應(yīng)?？乖惓０ǎ孩賮喰?，這種亞型紅細(xì)胞抗原性較弱，可以通過亞型定型試劑來具體定型。②紅細(xì)胞抗原形成不足或敏感性降低，如新生兒、老年人及少數(shù)惡病質(zhì)患者。鑒定血型時(shí)要注意正反定型的結(jié)合，加用抗H和抗A，B型標(biāo)準(zhǔn)血清、A2紅細(xì)胞等檢查唾液中的血型物質(zhì)，必要時(shí)作吸收放散試驗(yàn)以確定。若血清中存在不規(guī)則抗體可在反定型用O細(xì)胞加以鑒定，有些亞型因?yàn)榭乖哪承┪稽c(diǎn)缺失，也會(huì)產(chǎn)生相對于缺失抗原位點(diǎn)的抗體，這些抗體的產(chǎn)生有助于亞型的判定。第20頁/共49頁細(xì)菌性凝集

常見有類B凝集，A型或O型病人因大腸桿菌O86感染，從而使紅細(xì)胞上獲得類B抗原，能與抗B抗體發(fā)生凝集，表現(xiàn)為AB或B型，其不受溫度影響。處理方法：等病情好轉(zhuǎn)類B凝集即消失。另外紅細(xì)胞被細(xì)菌或細(xì)菌酶污染，紅細(xì)胞上的T抗原被激活，與供血者中抗T抗體發(fā)生凝集。處理方法：此種凝集在4℃和37℃之間隨著溫度的升高凝集程度逐漸減弱，在37℃時(shí)最弱或消失。第21頁/共49頁自身免疫性溶血性貧血

紅細(xì)胞被自身抗體強(qiáng)烈致敏后將干擾ABO定型，且自身抗體的存在會(huì)導(dǎo)致交叉配血不合。

處理方法：選擇合適的試驗(yàn)方法對紅細(xì)胞上結(jié)合的抗體做放散處理，確定抗體的特異性。如果抗體屬于同種抗體，則交叉配血時(shí)應(yīng)選取該抗原陰性的獻(xiàn)血者的血液。如果該抗體無法確定特異性，則交叉配血時(shí)要根據(jù)患者自身紅細(xì)胞與自身血清的對照反應(yīng)選取較弱反應(yīng)的獻(xiàn)血者血液。

第22頁/共49頁自身免疫性溶血性貧血

因?yàn)樽陨砜贵w的干擾而發(fā)生ABO正反定型不相符時(shí)。

處理方法：可用37℃～45℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞三次，或者用放散后的紅細(xì)胞（放散方法需不破壞紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)），血清定型則可用洗滌或放散后的紅細(xì)胞將血清中的自身抗體吸收后再進(jìn)行。第23頁/共49頁混合外觀凝集現(xiàn)象

出現(xiàn)混合外觀凝集的情況時(shí)一般要核對標(biāo)本，必要時(shí)可重新抽取血樣?；颊咴诮谟羞^骨髓移植或輸血史、胎盤出血和白血病等應(yīng)在疾病恢復(fù)后再確定血型。其他原因如嵌合現(xiàn)象、A3亞型及Tn多凝集反應(yīng)等在定型時(shí)可幫助正確判斷血型。第24頁/共49頁不規(guī)則抗體及亞型

血型試驗(yàn)是抗原抗體反應(yīng)，當(dāng)患者血清中存在ABO型以外的IgM或IgG和IgM混合型不規(guī)則抗體時(shí)，必然會(huì)導(dǎo)致ABO正反定型不一致。處理方法：可通過測定唾液中的血型物質(zhì)來鑒定ABO血型。由于受檢者紅細(xì)胞上有弱抗原，且抗原表達(dá)性特別弱，在紙片定型中很可能被錯(cuò)誤定型，另外抗A/抗B/抗AB血清的效價(jià)低等其他因素的影響，正反定型不相符，也可能被錯(cuò)定或無法確認(rèn)。處理方法：應(yīng)用試管鹽水法鏡檢顯示抗A/抗B/抗AB管呈弱的混合外觀，正反定型相符，且經(jīng)吸收放散試驗(yàn)進(jìn)一步確定相應(yīng)的亞型。

第25頁/共49頁不規(guī)則抗體及亞型

由于某些亞型紅細(xì)胞與抗A，B血清呈現(xiàn)出特異性反應(yīng)，因此同時(shí)采用抗A，B血清，而在反定型時(shí)加入O細(xì)胞可以檢出部分不規(guī)則抗體。對ABO血型正反定型不一致的標(biāo)本，正定型時(shí)加入抗H有助于檢測紅細(xì)胞表面H抗原的量，對鑒別亞型具有重要意義，同時(shí)有助于發(fā)現(xiàn)稀有血型，如孟買型等第26頁/共49頁三、技術(shù)性錯(cuò)誤

1、交叉配血中出現(xiàn)溶血時(shí)被誤認(rèn)為是陰性（血液相配合）。溶血是因?yàn)檠合饶笤谘逖a(bǔ)體作用下形成的，是血液不配合的表現(xiàn)?？朔椒ǎ合葘⒀?6℃滅活補(bǔ)體后，再做交叉配血試驗(yàn)。

2、交叉配血時(shí)紅細(xì)胞懸液太濃或太淡，易造成假陰生結(jié)果。

3、交叉配血時(shí)生理鹽水加量過多導(dǎo)致血清（漿）被稀釋，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

第27頁/共49頁

4、配血時(shí)離心速度太低或太高，造成了假陰性和假陽性結(jié)果。

5、聚凝胺配血時(shí)重懸液加量過少或殘留液過多，造成了假陽性結(jié)果。

6、聚凝胺試劑使用前沒有恢復(fù)至室溫就做實(shí)驗(yàn)，造成了錯(cuò)誤結(jié)果。

7、病人血標(biāo)本中肝素含量過多，配血時(shí)聚凝胺沒有雙倍加量，造成配血錯(cuò)誤。三、技術(shù)性錯(cuò)誤第28頁/共49頁

8、聚凝胺配血時(shí)各試劑的比例不恰當(dāng)，增加血清或紅細(xì)胞的量后，LISS及聚凝胺、重懸液的量沒有相應(yīng)增加，使靈敏度降低導(dǎo)致配血錯(cuò)誤。

9、聚凝胺配血時(shí)最適溫度是22℃，溫度降低靈敏度會(huì)下降，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。10、紅細(xì)胞不正確的洗滌和懸浮，使抗球蛋白實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。三、技術(shù)性錯(cuò)誤第29頁/共49頁案例分析一第30頁/共49頁第31頁/共49頁此病人交叉配血（抗人球蛋白卡）主側(cè)：無凝聚無溶血次側(cè)：有凝聚（++++）交叉配血（凝聚胺法）主側(cè)：無凝聚無溶血次側(cè)：無凝聚無溶血不規(guī)則抗體及自身對照：全陰第32頁/共49頁考慮獻(xiàn)血員的血清中是否存在抗體？做獻(xiàn)血員的不規(guī)則抗體篩查：第33頁/共49頁第34頁/共49頁獻(xiàn)血員的不規(guī)則抗體篩查結(jié)果檢測細(xì)胞Ⅰ：++++

檢測細(xì)胞Ⅱ：++++

檢測細(xì)胞Ⅲ：陰性說明該獻(xiàn)血員存在不規(guī)則抗體。處理方法：與血站聯(lián)系退血。立即更換一袋血做交叉配血后主次側(cè)無凝聚無溶血。第35頁/共49頁案例分析第36頁/共49頁第37頁/共49頁病人交叉配血：主側(cè)：無凝聚無溶血

次側(cè)：有凝聚

不規(guī)則抗體：全陰

自身對照：++

第38頁/共49頁直接抗人球蛋白：++

說明病人本身紅細(xì)胞上存在抗體，鑒于輸血安全考慮，建議輸注同型的洗滌紅細(xì)胞。第39頁/共49頁案例分析第40頁/共49頁陳倩君嬰、女、5天血型鑒定：0型RH陰性。其父母雙方為0型RH陽性。第41頁/共49頁案例分析謝秦雁女33歲婦二科診斷：宮內(nèi)妊娠雙活胎第42頁/共49頁卡式法：B型較弱1～2+；

玻片法：正定型為B型，

反定型為B型，正反相符。第43頁/共49頁正定型操作方法：

1、A型：紅懸液+抗A抗體試劑

B型：紅懸液+抗B抗體試劑

2、放置10min后離心，混勻，結(jié)果：B型凝集。第44頁/共49頁凝聚胺介質(zhì)