中藥制劑的含量測定

中藥制劑的含量測定中藥制劑的含量測定第1頁目錄§2供試品溶液制備§3常見定量分析方法§1概述中藥制劑的含量測定第2頁§1概述二、特點：單一成份

君藥、珍貴藥、有毒藥一、目標：控制制劑質量，確保臨床用藥安全、有效中藥制劑的含量測定第3頁§2供試品溶液制備最大程度地保留被測定組分，除去干擾物質，將被測組分濃縮至最小檢測限標準中藥制劑的含量測定第4頁粉碎：目標：①樣品均勻；②充分提取提?。宏P鍵是提取完全除雜：關鍵是不損失待測成份濃縮：到達檢測限衍生化：定量反應步驟供試品溶液制備中藥制劑的含量測定第5頁關鍵兩步供試品溶液制備樣品提取冷浸、回流提取、索氏提取、升華、超聲提取、超臨界流體萃取樣品凈化液-液萃取法、色譜法、沉淀法、升華法、消化法、鹽析法、水蒸汽蒸餾法中藥制劑的含量測定第6頁索氏提取回流提取特點：無需過濾、提取效率高、所需溶劑少、提取雜質少。但費時、提取不完全特點：對熱不穩(wěn)定或含有揮發(fā)性成份不宜使用。提取完全，快速。提取方法回流瓶，0.5~2h索氏提取器，5~8h中藥制劑的含量測定第7頁浸泡過夜揮發(fā)性成份20min特點：快速、低溫、省時，提取完全特點：操作簡單，適于熱不穩(wěn)定樣品，且提取雜質少。少有于定量分析。提取方法冷浸水蒸氣蒸餾超聲提取中藥制劑的含量測定第8頁例：P90~91（本科教材）

精密稱取…，…，準確加入甲醇50ml，稱重，超聲提取30min，放冷并再次稱重，用甲醇補足其重量特點：計量關系準確※注明超聲波頻率、功率，以確保重現(xiàn)性最常見提取方法（HPLC）供試品溶液制備中藥制劑的含量測定第9頁常見溶劑：正丁醇、氯仿、

EtOAc、乙醚屢次萃?。?-5次）調整水相酸度，提取有機酸、有機堿利用鹽析作用，降低乳化凈化方法液-液萃取法例：P69中藥制劑的含量測定第10頁離子對萃取法：生物堿P125溴百里酚藍凈化方法液-液萃取法溴甲酚綠中藥制劑的含量測定第11頁中藥制劑分析常見方法凈化方法色譜法柱大?。洪L～10cm，內徑～10mm步驟：裝柱、上樣、洗脫、搜集裝柱方法：濕法裝柱、干法裝柱裝柱要求：填裝均勻、緊密，表面平整中藥制劑的含量測定第12頁色譜柱凈化方法柱填料：硅膠、氧化鋁、活性炭、鍵合相硅膠、大孔樹脂、離子交換樹脂、聚酰胺中藥制劑的含量測定第13頁色譜柱凈化方法例：P124生物堿甲醇提→氧化鋁→乙醇洗脫氧化鋁硅膠酸性吸附劑，強烈保留堿性化合物適合用于中性或酸性成份洗脫次序：極性小→大（正相洗脫）堿性吸附劑，適合用于堿性成份洗脫次序：同硅膠中藥制劑的含量測定第14頁例：三七皂苷甲醇提取→蒸干→水溶解→上樣→水洗→70%乙醇洗→搜集色譜柱凈化方法大孔樹脂分為極性、非極性非極性型（D101等）常見使用前需要用有機溶劑除去雜質洗脫次序：極性大→?。ǚ聪嘞疵摚┲兴幹苿┑暮繙y定第15頁例益母草流浸膏中鹽酸水蘇堿判別取本品10ml，水浴蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加稀鹽酸調整pH值至1～2，…加在強酸性陽離子交換樹脂柱（732Na-型，內徑0.9cm，柱長12cm）上，以水洗至流出液近無色，棄去水液，再以2mol/L氨溶液40ml洗脫，搜集洗脫液…作為供試品溶液。色譜柱凈化方法離子型化合物離子交換樹脂中藥制劑的含量測定第16頁洗脫次序：極性大→小（反相洗脫）聚酰胺活性炭非極性吸附劑，除色素P72常見于黃酮類色譜柱凈化方法中藥制劑的含量測定第17頁固相萃取法凈化方法C18小柱分開脂溶性和水溶性成份例：P204操作：①柱活化②上樣③清洗④洗脫洗脫次序：極性大→小（反相洗脫）P194中藥制劑的含量測定第18頁蒸餾法沉淀法例六味地黃顆粒中丹皮酚含量測定

取本品約2g，研細，精密稱定，用水蒸汽蒸餾，搜集餾出液約450ml，置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度。…274nm波優(yōu)點測定吸收度…。凈化方法用于揮發(fā)性成份加入沉淀劑中藥制劑的含量測定第19頁消化法濕法消化：強酸腐蝕干法消化：高溫熾灼測定中藥制劑中無機元素凈化方法中藥制劑的含量測定第20頁注意：各劑型樣品預處理標準：應依據(jù)被測成份理化性質和存在狀態(tài)以及各類成份之間相互干擾程度及制備工藝與劑型不一樣、賦形劑特點等進行綜合考慮固體制劑：丸劑、片劑、顆粒劑、栓劑、膠囊

半固體制劑：流浸膏、浸膏、糖漿、煎膏液體制劑：合劑、口服液、酊劑、注射劑中藥制劑的含量測定第21頁片劑：淀粉、糊精、滑石粉、糖精散劑：注意取樣代表性蜜丸、糖漿劑、煎膏劑：消除粘性顆粒劑：糖、糊精固體制劑：排除賦形劑影響注意：各劑型樣品預處理固體稀釋劑：硅藻土

P144中藥制劑的含量測定第22頁栓劑：基質（油脂性基質和親水性基質）滴丸：基質（水溶性基質和水不溶性基質）

復方丹參滴丸中三七測定

取本品40丸，加甲醇10ml，振搖10分鐘，于4℃放置二十四小時，使聚乙二醇析出完全，濾過，取濾液作為供試品溶液注意：各劑型樣品預處理中藥制劑的含量測定第23頁注射劑：直接取樣合劑、口服液：直接取樣或經(jīng)過分離凈化液體制劑：搖勻后再取樣西洋參精口服液中人參總皂甙含量測定精密移取待測樣品10ml，加入處處理好大孔樹脂柱上，加蒸餾水80ml洗柱，洗液棄去，再用70%乙醇100ml洗柱，搜集洗脫液，……酒劑、酊劑：加熱蒸去乙醇，然后再用 有機溶劑萃取或柱層析注意：各劑型樣品預處理中藥制劑的含量測定第24頁HPLC475GC35UV-vis41TLCS49化學法51其它41§3常見定量分析方法中藥制劑的含量測定第25頁化學分析法揮發(fā)法：如水分測定、灰分測定萃取法：昆明山海棠片藥典P492

乙醇回流→蒸干→鹽酸溶解→氨 →乙醚萃取沉淀法：西瓜霜含量測定適合用于：含量較高成份重量分析中藥制劑的含量測定第26頁化學分析法

酸堿滴定：生物堿、有機酸

沉淀滴定：含Cl-制劑絡合滴定：朱砂→硫氰酸銨石膏、白礬→EDTA

氧化還原：雄黃→I2

磁石、赭石→重鉻酸鉀滴定分析中藥制劑的含量測定第27頁紫外－可見分光光度法（一）基礎原理：A=Ecl儀器：紫外-可見分光光度計光源單色器比色皿檢測器中藥制劑的含量測定第28頁（二）用途：總成份測定（三）定量方法：①吸收系數(shù)法②標準曲線法③對照品比較法紫外－可見分光光度法中藥制劑的含量測定第29頁取本品粉末…，精密稱定，…加鹽酸-甲醇（1:100）…

，回流……置氧化鋁柱……用乙醇洗脫，搜集洗脫液，……。

……在345nm波長測定吸光度，按鹽酸小檗堿（C20H18Cl16NO4）吸收系數(shù)（）為728計算※注意：對儀器進行波長校正計算公式：吸收系數(shù)法中藥制劑的含量測定第30頁吸收系數(shù)法A=0.358w=0.9926gH2O%=8.0%中藥制劑的含量測定第31頁標準曲線法12345cA回歸求方程

A=kc

+m注意：供試品濃度應在線性范圍內cxAx相關系數(shù)r>0.999中藥制劑的含量測定第32頁排石顆粒中總黃酮含量測定對照品溶液制備每1ml含無水蘆丁0.2mg測定取本品…照標準曲線…依法測定標準曲線制備精量對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分別置10ml量瓶中，…加5%亞硝酸鈉…硝酸鋁…氫氧化鈉…再加50%甲醇至刻度，搖勻。在510nm下測定A，以A為縱坐標，c為橫坐標，繪制標準曲線標準曲線法中藥制劑的含量測定第33頁1、某同學欲用吸收系數(shù)法測定三黃片中總生物堿，請設計一個合理供試品溶液制備試驗方案2、某同學欲用分光光度法測定冠心丹參片中總皂苷，為除去雜質干擾，請設計一個有效供試品溶液制備方法中藥制劑的含量測定第34頁（一）基礎原理A=kw儀器：薄層掃描儀薄層掃描法（TLCS）中藥制劑的含量測定第35頁（二）試驗條件λ例：熊果酸薄層掃描法

吸收掃描法光源：氘燈、鎢燈掃描方式：鋸齒式測光方式：透射、反射

設定散射系數(shù)SX雙波長掃描法λRλSA中藥制劑的含量測定第36頁例：小檗堿特點：靈敏度高熒光掃描法薄層掃描法光源：汞燈直線式掃描無需曲線校直中藥制劑的含量測定第37頁（三）定量方法Aww1wxw2A1A2Ax?

點樣量在線性范圍內?

交叉點樣：每一樣品≥2個點樣點?

市售預制板外標二點法例：P80薄層掃描法中藥制劑的含量測定第38頁氣相色譜法（GC）載氣色譜柱進樣檢測器（一）基礎原理中藥制劑的含量測定第39頁（二）試驗條件

◆固定相：硅氧烷類固定液

◆色譜柱：彈性交聯(lián)石英毛細管柱◆檢測器：FID◆進樣量：1~2μl，分流進樣，分流比※

特點：適合用于揮發(fā)性及易氣化成份不一樣成份靈敏度不一樣進樣量重復性差氣相色譜法中藥制劑的含量測定第40頁（三）定量方法：內標法選擇某純物質作為內標物，準確稱量，加入待測液中，比較待測組分與內標物峰面積相對校正因子：Sx氣相色譜法中藥制劑的含量測定第41頁例1馬應龍麝香痔瘡膏中龍腦含量測定（P84）【校正因子測定】

內標：水楊酸甲酯3.0mg/ml

對照品：龍腦2.0mg/ml

吸收1μl，注入氣相色譜儀，計算校正因子【測定法】取本品約1g，……，精密加入內標溶 液10ml，超聲……濾過，吸收續(xù)濾液1μl，注入氣相色譜儀…。氣相色譜法中藥制劑的含量測定第42頁iSR【對照品溶液】

iS：3.0mg/mlAs=882R：2.0mg/mlAR=600氣相色譜法中藥制劑的含量測定第43頁iSx特點：定量準確度與進樣量無關【供試品溶液】

m：1.050g

iS：3.0mg/mlAs=980

Ax

=700氣相色譜法中藥制劑的含量測定第44頁系統(tǒng)適用性試驗P81◆理論塔板數(shù)：n◆分離度：R≥1.5◆拖尾因子：0.95≤T≤1.05◆重復性：n≥5，RSD≤2.0%氣相色譜法中藥制劑的含量測定第45頁（一）試驗條件色譜柱：ODS（5μm，4.6mm×250mm）流動相：色譜純，脫氣，水相過0.45μm膜檢測器：UVD，ELSD高效液相色譜法（HPLC）中藥制劑的含量測定第46頁（二）方法分類1、反相鍵合相色譜固定相：C18、C8流動相：甲醇-水、乙腈-水洗脫次序：極性大→小對象：低極性成份例：藥典P126

辛夷木蘭脂素固定