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文檔簡介

細胞核細胞生物學課件詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點優(yōu)選細胞核細胞生物學課件目前二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點DNA復(fù)制replication:由一個親代雙螺旋產(chǎn)生兩個子代雙螺旋的過程(3.2×109

核苷酸對)艱巨任務(wù):在子代細胞誕生前迅速而精確地完成這一過程(約8小時)=8小時內(nèi)寫滿1000冊書!奇跡是怎樣創(chuàng)造的?目前三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點第四節(jié)遺傳物質(zhì)的復(fù)制replicationofthegenomicmaterials

一、DNA復(fù)制過程及其特征二、DNA復(fù)制的有關(guān)酶類和蛋白質(zhì)目前四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點一、DNA復(fù)制過程及其特征半保留復(fù)制復(fù)制從復(fù)制起始點開始復(fù)制叉、雙向復(fù)制和復(fù)制泡復(fù)制叉的不對稱性:前導(dǎo)鏈、后隨鏈和岡崎片段校讀糾錯機制整個染色體的復(fù)制目前五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點DNA復(fù)制:由一個親代DNA雙螺旋產(chǎn)生兩個子代雙螺旋的過程。1.半保留復(fù)制(semi-conservativereplication)

目前六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點CGTAGCATCGGC以一條DNA鏈作為模板(舊鏈)復(fù)制新鏈,復(fù)制后的雙螺旋含一條舊鏈和一條新鏈。1.半保留復(fù)制目前七頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點母鏈復(fù)制復(fù)制復(fù)制后的DNA分子,各含有1條原來的舊鏈和1條新鏈,兩個新合成的雙螺旋都是原來雙螺旋的精確復(fù)制品,這稱為半保留復(fù)制。復(fù)制目前八頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點2.復(fù)制從復(fù)制起始點replicationorigins開始目前九頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制起始點:特殊的DNA序列能被起始蛋白識別并結(jié)合通常為富含A、T的重復(fù)序列在細菌只有一個,在真核細胞有多個目前十頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點細菌真核細胞基因組(核苷酸對)數(shù)百萬個3.2×109(人)速度500個核苷酸/秒50個核苷酸/秒復(fù)制起始點一個多個目前十一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制的起始與雙鏈解旋:大量特異蛋白和酶參與目前十二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制從復(fù)制起始點開始向兩個方向推進。(細菌環(huán)狀DNA分子)目前十三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點3.復(fù)制叉、雙向復(fù)制和復(fù)制泡

(replicationforks,two-directionreplication&replicationbubbles)

復(fù)制叉:已經(jīng)打開的2條單鏈與未解開的雙鏈間形成Y形。目前十四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制從復(fù)制起始點開始向兩個方向推進,形成兩個反向的復(fù)制叉。目前十五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制叉replicationfork目前十六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點在真核細胞的染色體上,復(fù)制叉由多處復(fù)制起始位點向兩個方向移動目前十七頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點4.復(fù)制叉的不對稱性asymmetryofreplicationfolk:

前導(dǎo)鏈、后隨鏈和岡崎片段問題:一條新鏈:5’→3’方向合成另一條新鏈如何合成?提示:1.DNA聚合酶只能催化單核苷酸5’→3’方向加入2.5→3連續(xù)合成將使鏈延長與復(fù)制叉推進相反?目前十八頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點4.復(fù)制叉的不對稱性:前導(dǎo)鏈、后隨鏈和岡崎片段答案:一條新鏈:5→3方向不間斷合成-前導(dǎo)鏈另一條新鏈:5→3方向間斷合成-后隨鏈目前十九頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點RNA引物岡崎片段連接酶連接2個相鄰DNA片段DNA聚合酶I將相鄰片段的5’RNA引物切除并填補空隙DNA聚合酶III在RNA引物3’端延伸新DNA根據(jù)模板在引物酶作用下生成RNA引物舊鏈

新鏈間斷合成的新鏈后隨鏈目前二十頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點在后隨鏈合成中,由DNA聚合酶在RNA引物的3’-OH上合成一段多核苷酸鏈,此DNA片段加上RNA引物構(gòu)成岡崎片段。岡崎片段(Okazakifragments)DNA聚合酶I5’3’切除RNA引物5’3’填充脫氧核苷酸DNA連接酶:連接兩DNA片段岡崎片段連接:岡崎片段目前二十一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點3’3’5’5’

復(fù)制叉推進方向

復(fù)制起始點模板鏈復(fù)制起始點DNA的雙向復(fù)制示意圖復(fù)制叉推進方向目前二十二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制叉內(nèi)部結(jié)構(gòu)是不對稱的:一條鏈不間斷地合成,并率先發(fā)生,因而叫作前導(dǎo)鏈另一條鏈間斷合成,由岡崎片段連接而成,并滯后發(fā)生,因而叫作后隨鏈。(后隨鏈合成滯后的原因)后隨鏈中核苷酸聚合的方向與鏈延伸的方向是相反的,而鏈延伸的方向與復(fù)制叉推進的方向是一致的。圖示目前二十三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制的主要步驟在復(fù)制起始點打開雙鏈合成一段RNA引物前導(dǎo)鏈合成(DNA鏈在RNA引物后開始合成)后隨鏈合成(岡崎片段在引物后開始合成)DNA雙鏈復(fù)制

目前二十四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點T

TTTCA5.校讀糾錯機制proofreading&mistake-correction目前二十五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點復(fù)制過程中DNA多聚酶的校讀糾錯作用一、在新的核苷酸中堿基剛剛與對應(yīng)堿基結(jié)合、尚未與新鏈末端共價聯(lián)結(jié)的時候,多聚酶就對配對進行校對,堿基配對錯誤則使DNA合成暫停。二、“核酸外切校讀”。如果聯(lián)結(jié)在RNA引物3’-OH末端的是錯配核苷酸,該酶切除錯配者,直至正確配對的核苷酸作為引物的3’末端才開始DNA合成。目前二十六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點6.整個染色體的復(fù)制多個復(fù)制泡不斷發(fā)生,各個區(qū)段復(fù)制順序先后固定.端粒酶保證真核染色體末端的完整復(fù)制.DNA新鏈合成完畢后立即就有組蛋白與之裝配,新的核小體形成.目前二十七頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點快速分裂的核中提取的DNA電鏡照片復(fù)制泡return多個復(fù)制泡不斷發(fā)生,各個區(qū)段復(fù)制順序先后固定返回目前二十八頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點端粒酶保證真核染色體(后隨鏈)末端的完整復(fù)制末端復(fù)制返回目前二十九頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點組蛋白加入,形成新的核小體返回目前三十頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點組蛋白核心DNA雙鏈合成的新鏈舊鏈新的組蛋白核心返回目前三十一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點二、DNA復(fù)制的有關(guān)酶類和蛋白質(zhì)一系列酶和其他蛋白質(zhì)組成復(fù)合體,作為一個整體沿DNA分子移動,協(xié)調(diào)兩條鏈上的合成過程。

奇跡的創(chuàng)造者目前三十二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點目前三十三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點

參加大腸桿菌DNA復(fù)制的蛋白質(zhì)及其功能

蛋白質(zhì)功能DnaA蛋白(起始因子)識別起始順序在復(fù)制起始點打開雙鏈DnaB蛋白(解旋酶)松解DNA雙螺旋DnaC蛋白輔助解旋酶結(jié)合到起始點DNA拓撲異構(gòu)酶I和II解除DNA超螺旋并防止鏈纏繞DnaG蛋白(引物酶)合成RNA引物(前導(dǎo)鏈上一個,后隨鏈上多個引物)SSB蛋白(單鏈結(jié)合蛋白)結(jié)合至單鏈DNA維持其單鏈狀態(tài)滑動鉗夾幫助DNA聚合酶穩(wěn)定結(jié)合于模板鏈上DNA聚合酶III1.延長新鏈(5‘3’聚合酶活性:以DNA為模板,在RNA引物3‘-OH加上dNTP)2.錯配校讀(3‘5’外切酶活性:切除錯配dNTP)DNA聚合酶I在崗崎片段之間除去引物并填補空隙,錯配校讀DNA連接酶連接崗崎片段3‘-OH與5’-P目前三十四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點第四章細胞核nucleus第一節(jié)核被膜第二節(jié)染色質(zhì)和染色體第三節(jié)核仁第四節(jié)遺傳物質(zhì)的復(fù)制第五節(jié)遺傳信息的表達目前三十五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點一個人的兩種細胞:攜帶完全相同的遺傳信息,卻有著截然不同的形態(tài)和功能目前三十六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點一個人的兩種細胞,源于同一個細胞(同一個受精卵),兩者形態(tài)和功能卻截然不同。怎么會這樣呢?目前三十七頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點受精卵→胚胎干細胞→→→各種細胞分化分化:基因選擇性表達的結(jié)果紅細胞:專一表達血紅蛋白分化目前三十八頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點第五節(jié)遺傳信息的表達Expressionofthegenomicinformation

一、基因的轉(zhuǎn)錄transcription-從DNA到RNA

二、基因的翻譯translation-從RNA到蛋白質(zhì)目前三十九頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點中心法則Thecentralprinciple

細胞內(nèi)的基因先將它的遺傳信息轉(zhuǎn)錄在mRNA上,再經(jīng)過翻譯,將特定的遺傳信息翻譯為特定的蛋白質(zhì)。目前四十頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點遺傳信息的流向目前四十一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點一、基因的轉(zhuǎn)錄-從DNA到RNA(同樣的語言)(一)轉(zhuǎn)錄過程(二)有意義鏈和反意義鏈(三)真核RNA的轉(zhuǎn)錄后加工目前四十二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點ComparisonofDNAandRNAFeatureDNARNASugardeoxyriboseribose

BasepairingA-T/G-CA-U/G-CStructuredoublehelixsinglesinglestrandedstructures目前四十三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點

rRNA和tRNA能發(fā)生分子內(nèi)的堿基配對,易于折疊成三維結(jié)構(gòu),從而發(fā)揮結(jié)構(gòu)分子的作用。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)目前四十四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生與一條DNA鏈互補的RNA鏈,是基因表達的核心步驟(一)轉(zhuǎn)錄過程目前四十五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點由RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶:催化這一合成反應(yīng),所以又叫轉(zhuǎn)錄酶。作用是解開DNA雙鏈,以其中的反基因鏈為模板,將4種三磷酸核苷酸聚合成與模板互補的RNA鏈。目前四十六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點啟動子和終止子:特殊的DNA序列,對RNA聚合酶發(fā)出的信號。目前四十七頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點原核細胞的啟動子

-轉(zhuǎn)錄酶識別和結(jié)合的部位,結(jié)合后啟動轉(zhuǎn)錄起始點酶識別部位不同原核生物啟動子區(qū)序列的比較酶結(jié)合部位Pribnow盒啟動子目前四十八頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點RNA聚合酶催化的細菌基因的轉(zhuǎn)錄:聚合酶遇到啟動子序列就與之結(jié)合,打開雙鏈開始轉(zhuǎn)錄,直至遇到終止子.轉(zhuǎn)錄目前四十九頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點三種轉(zhuǎn)錄物:信使RNA(mRNA)-傳遞遺傳信息核糖體RNA(rRNA)-作為結(jié)構(gòu)分子和酶組分轉(zhuǎn)運RNA(tRNA)-作為結(jié)構(gòu)分子目前五十頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點基因鏈(genestrand):基因遺傳信息所在的DNA單鏈。反基因鏈(antigenestrand):與基因鏈互補的那條DNA

單鏈。mRNA鏈:序列與基因鏈相同(T=U)(二)有意義鏈和反意義鏈sense/antisensestrands基因鏈或有意義鏈反基因鏈或反意義鏈目前五十一頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點

一段細菌染色體上多個基因的轉(zhuǎn)錄方向理論上任何一段DNA的兩條鏈都可以轉(zhuǎn)錄出兩個RNA分子,但實際上一段DNA上總是只有一條鏈作為RNA的模板,即反基因鏈,由此轉(zhuǎn)錄出來的RNA鏈序列與模板鏈互補,與基因鏈相同。一段DNA的兩條鏈何者作為模板可以看作由特定基因的啟動子位置決定。啟動子一般位于基因上游,轉(zhuǎn)錄酶先結(jié)合上啟動子,就決定了模板鏈。目前五十二頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點細菌基因與真核生物基因的比較(三)、真核細胞RNA的轉(zhuǎn)錄和加工Transcriptionandprocessing

目前五十三頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點細胞內(nèi)產(chǎn)生的RNA的種類

RNA種類功能

mRNA編碼蛋白質(zhì)

rRNA形成核糖體的一部分并參與蛋白質(zhì)的合成

tRNA蛋白質(zhì)合成中作為mRNA與氨基酸之間的連接物小RNA用于未成熟mRNA的拼接、蛋白質(zhì)向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的轉(zhuǎn)運以及其他細胞過程目前五十四頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點mRNA(真核加工)rRNA(真核、原核均加工)tRNA(真核、原核均加工)(三)、真核細胞RNA的轉(zhuǎn)錄和加工目前五十五頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點真核生物原核生物原核生物和真核生物的轉(zhuǎn)錄、翻譯過程細胞核轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄翻譯翻譯目前五十六頁\總數(shù)六十三頁\編于二十一點

mRNA的加工 作用

1.加帽(capping)增加穩(wěn)定性

5’-三磷酸-7-甲基鳥苷

2.加尾(tailing)

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