液相色譜儀維護(hù)-周長明

液相色譜儀維護(hù)-周長明.第一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。第1頁，共117頁。液相色譜儀工作原理液相色譜儀日常維護(hù)液相色譜儀故障診斷色譜柱的使用及保養(yǎng)液相色譜儀期間核查第二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。2第2頁，共117頁。液相色譜儀工作原理色譜原理色譜法：利用樣品組分在兩相間分配系數(shù) 不同而進(jìn)行分離的技術(shù)流動(dòng)相：攜帶樣品流過整個(gè)系統(tǒng)的液體固定相：靜止不動(dòng)的一相，化學(xué)鍵合型固 定相第三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。3第3頁，共117頁。色譜分離過程流動(dòng)相Temporalcourse第四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。4第4頁，共117頁。高效液相色譜分析過程

高效液相色譜儀由高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)等五大部分組成。

分析前，選擇適當(dāng)?shù)纳V柱和流動(dòng)相，開泵，沖洗柱子，待柱子達(dá)到平衡而且基線平直后，用微量注射器把樣品注入進(jìn)樣口，流動(dòng)相把試樣帶入色譜柱進(jìn)行分離，分離后的組分依次流入檢測器的流通池，最后和洗脫液一起排入流出物收集器。當(dāng)有樣品組分流過流通池時(shí)，檢測器把組分濃度轉(zhuǎn)變成電信號(hào)，經(jīng)過放大，用記錄器記錄下來就得到色譜圖。色譜圖是定性、定量和評(píng)價(jià)柱效高低的依據(jù)。第五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。5第5頁，共117頁。高效液相色譜法的特點(diǎn)高效液相色譜法法(HighperformanceLiquidChromatography，HPLC)與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography，HPLC)。HPLC有以下特點(diǎn)：高壓-壓力可達(dá)15~30MPa。高速-流速為0.001~10.000ml/min。高效。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。高靈敏度-紫外檢測器靈敏度可達(dá)0.01ng。熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1pg。第六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。6第6頁，共117頁。HPLC的圖形結(jié)果－色譜圖色譜圖:色譜柱流出物通過檢測器時(shí)所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)對(duì)時(shí)間的曲線圖,其縱坐標(biāo)為信號(hào)強(qiáng)度,橫坐標(biāo)為保留時(shí)間.第七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。7第7頁，共117頁。液相色譜圖相關(guān)術(shù)語（1）第八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。8第8頁，共117頁。液相色譜圖相關(guān)術(shù)語（2）第九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。9第9頁，共117頁。液相色譜圖相關(guān)術(shù)語（3）第十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。10第10頁，共117頁。液相色譜圖相關(guān)術(shù)語（4）上一頁第十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。11第11頁，共117頁。液相色譜儀日常維護(hù)吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器檢測器上一頁第十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。12第12頁，共117頁。日常維護(hù)第十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。13第13頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)第十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。14第14頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)工作原理第十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。15第15頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)何時(shí)需要使用在線脫氣機(jī)第十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。16第16頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)使用在線脫氣機(jī)須知溶劑

棕色玻璃瓶會(huì)避免藻類的生長。

經(jīng)常過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。避免使用下述可腐蝕鋼鐵的溶劑：

堿金屬鹵化物及其酸溶液(如：碘化鋰、氯化鉀等)。

高濃度無機(jī)酸，如硝酸、硫酸.

可能含有過氧化物的色譜醇醚(如THF、二氧六環(huán)、二丙基乙醚)。這些在使用前必須用干燥氧化鋁過濾除去過氧化物。

含強(qiáng)絡(luò)合劑的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。

四氯化碳與2-異丙醇或四氫呋喃的混合液。第十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。17第17頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)防止堵塞溶劑過濾器污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會(huì)縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響泵的運(yùn)行。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH

4至7)中尤其如此。下列建議將會(huì)延長溶劑過濾器的使用壽命并維持泵的運(yùn)行。使用滅過菌的溶劑瓶來減緩藻類生長。使用新鮮配制的流動(dòng)相，特別是水溶劑或鹽緩沖液建議不超過兩天。如果應(yīng)用許可，在溶劑中加人0.0001－0.001

M的疊氮化鈉。避免溶劑瓶暴露在直射陽光下。用氬氣或氦氣置換流動(dòng)相上層的空氣。第十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。18第18頁，共117頁。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)Question?1.如何簡單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？2.如何簡單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？第十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。19第19頁，共117頁。Question?1.如何簡單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？打開Purge閥，設(shè)定泵的流速2ml/min，提起當(dāng)前所使用溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭，使之脫離液面一小段時(shí)間，此時(shí)溶劑傳送管內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一小段氣泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫氣機(jī)，如果脫氣機(jī)正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。2.如何簡單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？關(guān)閉泵，擰開脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線,此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒?，脫氣機(jī)或溶劑過濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。在線脫氣機(jī)日常維護(hù)第二十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。20第20頁，共117頁。四元泵

第二十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。21第21頁，共117頁。四元泵工作原理(低壓梯度泵系統(tǒng))第二十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。22第22頁，共117頁。二元泵ABMixerRestrictionCapillaryMixingCapillaryClampDamperSolventSelectionValveA1A2B1B2第二十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。23第23頁，共117頁。二元泵工作原理(高壓梯度泵系統(tǒng))DamperPurgevalveMixerABInletvalveOutletvalveWasteInletvalveOutletvalve第二十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。24第24頁，共117頁。四元／二元/單元泵日常維護(hù)泵頭(PumpHead)結(jié)構(gòu)圖第二十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。25第25頁，共117頁。Holding/LockScrew(PEEK)1234567泵頭(PumpHead)結(jié)構(gòu)圖四元／二元/單元泵日常維護(hù)第二十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。26第26頁，共117頁。}123四元／二元/單元泵日常維護(hù)泵頭(PumpHead)結(jié)構(gòu)圖第二十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。27第27頁，共117頁。OutletBallValvePurgeValve234567ActiveInletValve(commontoallexcept1050)Cartridge

8newstyle1oldstyle入口主動(dòng)閥出口單向閥沖洗閥四元／二元/單元泵日常維護(hù)第二十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。28第28頁，共117頁。泵使用須知四元／二元/單元泵日常維護(hù)第二十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。29第29頁，共117頁。更好地使用四元泵

將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面(或較高處)。當(dāng)在四元泵上使用鹽溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接在底部的梯度閥口上，將有機(jī)溶劑接在上面的梯度閥口上。有機(jī)通道最好在鹽溶液通道上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在閥口析出得鹽結(jié)晶。操作泵之前，用至少兩個(gè)體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30ml，對(duì)微脫氣機(jī)10ml）沖洗真空脫氣機(jī)

,特別是當(dāng)泵關(guān)閉了一段時(shí)間后（例如，過夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑時(shí)。防止溶劑過濾器堵塞及長菌，當(dāng)慮器表面有黑色或黃色污染層說明慮器發(fā)生了堵塞，請(qǐng)立即清洗或更換之。定期檢查排液閥的慮芯。檢查方法：擰開排液閥，以水作流動(dòng)相，流速5ml/min，若壓力大于10bar,則須立即更換。

四元／二元/單元泵日常維護(hù)第三十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。30第30頁，共117頁。更好地使用泵當(dāng)使用低流速時(shí)（不高于0.2

ml/min）檢查所有1/16英寸接頭有無滲漏（用壓力測試或漏液測試）。每當(dāng)更換泵密封墊時(shí)排液閥慮芯也應(yīng)更換。更換活塞密封墊時(shí)檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導(dǎo)致輕度滲漏，并降低密封墊的使用壽命。應(yīng)盡早更換有劃痕的活塞。使用緩沖溶液時(shí)，關(guān)泵前先用水沖洗系統(tǒng)。當(dāng)需要長時(shí)間使用0.1摩爾或更高濃度得緩沖液時(shí)，最好選用密封墊清洗附件，以減少對(duì)密封墊及活塞桿的磨損。更換活塞密封墊后應(yīng)按照密封墊安裝步驟對(duì)其進(jìn)行磨合，但磨合不適用于正相密封墊。四元／二元/單元泵日常維護(hù)第三十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。31第31頁，共117頁。當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件時(shí)，由于該附件中也有密封墊，這樣就會(huì)增加活塞桿運(yùn)動(dòng)時(shí)的阻力。所以開泵前一定要用10％異丙醇，并將其流速調(diào)至約20滴/分鐘使這溶液流過沖洗裝置。10％異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。不要用其它溶劑代替。

當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不使用，會(huì)使密封墊及活塞桿的壽命減短。四元／二元/單元泵日常維護(hù)第三十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。32第32頁，共117頁。Question?1.如何簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏？2.何時(shí)應(yīng)該更換Purge閥內(nèi)的過濾白頭？3.泵壓力不正常可能由那些原因引起？四元／二元/單元泵日常維護(hù)第三十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。33第33頁，共117頁。Question?1.如何簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏？設(shè)定泵使用一個(gè)單獨(dú)通路（A），打開Purge閥，流速5ml/min，提起其他溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭直至離開液面，觀察這些通路（B、C、D）內(nèi)的溶劑是否隨著流動(dòng)，正常時(shí)均不應(yīng)流動(dòng)。2.何時(shí)應(yīng)該更換Purge閥內(nèi)的過濾白頭？使用純水作流動(dòng)相，打開Purge閥，流速5ml/min，觀察系統(tǒng)壓力，如果超過10bar，應(yīng)該更換。3.泵壓力不正?？赡苡赡切┰蛞?？氣泡，主動(dòng)閥故障，出口閥故障，密封墊或柱塞桿磨損，滲漏或堵塞，比例閥故障，傳感器故障，使用比例閥混合時(shí)鹽濃度太高四元／二元/單元泵日常維護(hù)第三十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。34第34頁，共117頁。手動(dòng)進(jìn)樣器第三十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。35第35頁，共117頁。手動(dòng)進(jìn)樣器工作原理第三十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。36第36頁，共117頁。1.為了防止虹吸應(yīng)注意使第五第六號(hào)放空管的出口與進(jìn)樣口保持在同一平面.手動(dòng)進(jìn)樣器日常使用維護(hù)第三十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。37第37頁，共117頁。2.為了更好的重現(xiàn)性，進(jìn)樣體積最好是樣品環(huán)的5~6倍。3.手動(dòng)進(jìn)樣器預(yù)裝Vespel轉(zhuǎn)子墊圈，請(qǐng)參考自動(dòng)進(jìn)樣章節(jié)選擇轉(zhuǎn)子墊圈。4.一定要使用合規(guī)格的進(jìn)樣器，規(guī)格為外徑0.028英寸，長2英寸的平頭針。一定不能使用尖針！它會(huì)嚴(yán)重刮壞轉(zhuǎn)子墊圈。手動(dòng)進(jìn)樣器日常使用維護(hù)x第三十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。38第38頁，共117頁。手動(dòng)進(jìn)樣器日常使用維護(hù)5.進(jìn)完樣后一定要及時(shí)沖洗進(jìn)樣器，特別是用鹽或緩沖液作流動(dòng)相由于這些溶液會(huì)形成結(jié)晶從而磨損墊圈。

沖洗方法：

A.將進(jìn)樣器轉(zhuǎn)至Inject位置，利用液相泵輸送高純水沖洗(這時(shí)是沖洗樣品環(huán)及溝槽）.

B.用閥清洗接頭和注射器沖洗。第三十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。39第39頁，共117頁。當(dāng)用注射器及接頭清洗時(shí)，應(yīng)注意不要太靠近進(jìn)樣器并戴防護(hù)眼鏡,防止溶劑濺入眼睛。6.經(jīng)常用濕潤的軟布清潔進(jìn)樣器，特別是進(jìn)樣口周圍。7.請(qǐng)仔細(xì)閱讀進(jìn)樣器說明書，上面有詳細(xì)使用及其它信息。手動(dòng)進(jìn)樣器日常使用維護(hù)第四十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。40第40頁，共117頁。8.更換轉(zhuǎn)子密封圈。手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第四十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。41第41頁，共117頁。Question？如何判斷手動(dòng)進(jìn)樣器的密封圈漏？手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第四十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。42第42頁，共117頁。Answer如何判斷手動(dòng)進(jìn)樣器的密封圈漏？通常結(jié)合兩方面：從進(jìn)樣器觀察，進(jìn)樣后將針拔出，若從進(jìn)樣口或排空管有液體冒出，顯示密封圈磨損。從結(jié)果看：通常有壓力不穩(wěn)定，峰面積或保留時(shí)間不穩(wěn)定和殘留嚴(yán)重。手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第四十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。43第43頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器第四十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。44第44頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器工作原理第四十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。45第45頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器工作原理第四十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。46第46頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器結(jié)構(gòu)第四十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。47第47頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器結(jié)構(gòu)第四十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。48第48頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器結(jié)構(gòu)第四十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。49第49頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)定期檢查各傳動(dòng)桿是否足夠潤滑，必要時(shí)先用酒精棉球擦拭干凈后再給這些桿涂抹少量液體潤滑油，臟的傳動(dòng)桿使阻力增大從而造成自動(dòng)進(jìn)樣器在取樣過程中由于馬達(dá)過熱導(dǎo)致出錯(cuò)。檢查取樣爪子的綠色膠套時(shí)否損壞，如果是請(qǐng)更換之，否則會(huì)使樣品放置位置不正確而導(dǎo)致如針，針座等損壞。用酒精棉簽擦拭針座防止灰塵污染堵塞針與針座。若場地確實(shí)灰塵較多，建議購買自動(dòng)進(jìn)樣器門，棕色門還可以幫助防止見光敏感的樣品。第五十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。50第50頁，共117頁。5.更換轉(zhuǎn)子密封圈6.更換針及針座自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第五十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。51第51頁，共117頁。自動(dòng)進(jìn)樣器常見故障漏液

針座磨損轉(zhuǎn)子磨損

進(jìn)樣量不準(zhǔn)轉(zhuǎn)子磨損計(jì)量泵故障抽樣速度太快機(jī)械臂移動(dòng)故障-抓不準(zhǔn)樣品瓶傳感器故障周圍環(huán)境差樣品瓶不標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第五十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。52第52頁，共117頁。Question?樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？2.怎樣判斷自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損

自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第五十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。53第53頁，共117頁。Answer1.樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？在自動(dòng)進(jìn)樣器設(shè)置中，適當(dāng)抬高進(jìn)樣針抽樣時(shí)的位置。自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第五十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。54第54頁，共117頁。Answer2.怎樣判斷自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損？

將第四號(hào)管（排液的細(xì)塑料管）提起，情況下應(yīng)沒有液體滴出，如有則轉(zhuǎn)子墊圈磨損。

色譜現(xiàn)象：壓力不穩(wěn)，保留時(shí)間面積重現(xiàn)性差，殘留嚴(yán)重。自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)第五十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。55第55頁，共117頁。柱溫箱器日常維護(hù)第五十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。56第56頁，共117頁。1.連接的管路盡量短，防止熱擴(kuò)散及峰增寬。2.如果使用小體積分析柱以及流速小于0.2ml/min時(shí)建議使用左邊的柱溫箱(左邊體積較少,3ul).3.除非特殊應(yīng)用，建議將兩邊溫度設(shè)置一樣。并確保關(guān)好前蓋。4.如果是冷凝水導(dǎo)致漏液，建議終止漏液傳感器檢測功能．柱溫箱器日常維護(hù)第五十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。57第57頁，共117頁。Question?1.如果加熱塊堵塞怎么辦？2.如果是冷凝水導(dǎo)致漏液怎么辦？柱溫箱器日常維護(hù)第五十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。58第58頁，共117頁。Answer1.如果加熱塊堵塞怎么辦？

用管線連接泵與加熱塊出口，開泵進(jìn)行反沖。2.如果是冷凝水導(dǎo)致漏液怎么辦？終止漏液傳感器檢測功能柱溫箱器日常維護(hù)第五十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。59第59頁，共117頁。DAD紫外檢測器紫外檢測器工作原理可變波長紫外檢測器第六十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。60第60頁，共117頁。反射鏡1＃反射鏡2＃氘燈光源透鏡濾光片（鈥玻璃/遮光）入射狹縫光柵分光器參比光電二極管數(shù)模轉(zhuǎn)換板樣品光電二極管數(shù)模轉(zhuǎn)換板流通池紫外檢測器工作原理可變波長紫外檢測器第六十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。61第61頁，共117頁。Question?基線噪音大可能由那些原因引起?紫外檢測器日常維護(hù)第六十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。62第62頁，共117頁。Answer基線噪音大可能由那些原因引起

泵壓不穩(wěn)，氣泡，色譜柱污染，系統(tǒng)管路污染，流通池污染，燈強(qiáng)度不足，光學(xué)系統(tǒng)老化或污染，參數(shù)設(shè)置不合理紫外檢測器日常維護(hù)第六十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。63第63頁，共117頁。清洗流動(dòng)池VWD故障診斷,日常維護(hù)第六十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。64第64頁，共117頁。清洗流動(dòng)池如果流動(dòng)池被污染可先用以下方法處理:在不連接色譜柱的情況下先用高純水沖洗20分鐘，然后用5％硝酸沖洗2小時(shí)，最后再用高純水沖洗至流出液中性即可。如上述方法不行，就需更換流動(dòng)池的檢測窗。上述處理方法也適用于DAD的流動(dòng)池。VWD故障診斷,日常維護(hù)第六十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。65第65頁，共117頁。二級(jí)管陣列紫外檢測器工作原理DAD紫外檢測器第六十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。66第66頁，共117頁。可變的光進(jìn)口狹縫系統(tǒng)這一微型狹縫系統(tǒng)是利用硅的機(jī)械性能和總體布局微型加工技術(shù)以及精確的制作功能加工而成，它把所需的光學(xué)性能－狹縫和光柵－集中組合到一起，成為一個(gè)簡單、緊湊的元件。狹縫寬度直接由儀器上的微處理器來控制，并可用為設(shè)定分析方法的一個(gè)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。光柵用一個(gè)凹面全息光柵來實(shí)現(xiàn)分光和光譜成像，光柵把入射光束全部分散成組成它的波長，然后把它反射到二極管陣列上。二極管陣列二極管陣列由1024個(gè)光電二極管和一個(gè)位于陶瓷基座上的電路組成，在190

---950

nm范圍內(nèi)取樣間隔<

1

nm。紫外檢測器工作原理DAD紫外檢測器第六十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。67第67頁，共117頁。燈紫外區(qū)域采用有通光狹縫的氘燈作光源，低壓氘氣體的等離子體能發(fā)出190nm到大約800

nm的光?？梢姽猓╒IS）和近紅外光采用低噪音鎢燈得到，其發(fā)射出的光譜范圍為470---950

nm。消色差透鏡（光源透鏡）消色差透鏡接受氘燈及鎢燈發(fā)出的光，將其聚焦后通過流通池。氧化鈥濾光片當(dāng)進(jìn)行波長校準(zhǔn)時(shí)，氧化鈥濾光片用電力驅(qū)動(dòng)進(jìn)入光路。流通池底座窗口流通池底座窗口部件把氧化鈥濾光片和流通池分開。流通池室光學(xué)單元有一個(gè)流通池室，使流通池易于放入光學(xué)單元，采用相同的快捷安裝系統(tǒng)可以把各種流通池裝入光學(xué)單元，在檢查檢測器的光電性能時(shí)，拿走流通池能消除流通池帶來的影響。紫外檢測器工作原理DAD紫外檢測器第六十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。68第68頁，共117頁。泄漏在檢測器中出現(xiàn)泄漏檢漏系統(tǒng)利用兩個(gè)溫度傳感器（泄漏傳感器和安裝在板上的溫度補(bǔ)償傳感器）進(jìn)行泄漏運(yùn)算，以此發(fā)出的信號(hào)來判斷是否存在泄漏。當(dāng)出現(xiàn)泄漏時(shí)，泄漏傳感器會(huì)被溶劑冷卻。因而改變傳感器的電阻，其信號(hào)被主板上的泄漏傳感器電路獲得。(DAM)可能的原因

接頭松動(dòng)。毛細(xì)管破裂。流通池泄漏。建議采取的措施

保證所有接頭緊固。更換破裂的毛細(xì)管。更換流通池元件。DAD故障診斷第六十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。69第69頁，共117頁。UV燈不能點(diǎn)亮

在點(diǎn)亮UV燈的一段時(shí)間里處理機(jī)連續(xù)地監(jiān)測UV-燈的電流，如果在2－5

s內(nèi)UV燈的電流低于電流下限，就出現(xiàn)故障提示?？赡艿脑?/p>

UV燈電源沒有接上。UV燈壞了。

主板有故障。電源有毛病。建議采取的措施

確保UV燈電源連接牢固。更換UV燈。更換DAD主板。更換電源。DAD故障診斷,日常維護(hù)第七十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。70第70頁，共117頁。DAD故障診斷,日常維護(hù)第七十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。71第71頁，共117頁。其它檢測器使用及日常維護(hù)熒光檢測器(FLD)使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù).

優(yōu)點(diǎn)：1）靈敏度極高，是最靈敏的檢測器之一2）選擇性好

3）對(duì)溫度和流速不敏感，可用于梯度洗脫缺點(diǎn)：僅適用于測定可產(chǎn)生熒光的物質(zhì)可檢測物質(zhì)：多環(huán)芳烴、霉菌毒素、酪氨酸、色氨酸、卟啉、兒茶酚氨等（具有對(duì)稱共軛體系）由于水性流動(dòng)相長時(shí)間留在流動(dòng)池會(huì)有藻類生長，而藻類會(huì)產(chǎn)生熒光，所以可添加有機(jī)溶劑如5％的乙腈或甲醇。如懷疑流動(dòng)池被污染可用以下步驟清洗之：1用雙蒸水沖洗30分鐘以上.2用注射器注射65％硝酸入流動(dòng)池并使其留在流動(dòng)池約1小時(shí)。(注意，為了防止過壓，請(qǐng)緩慢注射).3用雙蒸水沖洗干凈。第七十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。72第72頁，共117頁。其它檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)折光示差檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)原理：連續(xù)測定流通池中溶液折射率來測定試樣中各組分濃度。溶液瓶和廢液瓶應(yīng)高于泵和檢測器，這樣使流動(dòng)池產(chǎn)生輕微壓力有助于提高檢測器的性能。RID的耐受壓力最高只有5bar,所以如要串聯(lián)其它檢測器時(shí)務(wù)必將RID放在最后。一定要使用控溫功能令光路恒溫，為了防止結(jié)晶應(yīng)將溫度設(shè)置至少高于室溫5℃以上。使用合適的responsetime通常用4S。一定要預(yù)先混合好流動(dòng)相，如果是四元泵，請(qǐng)使用轉(zhuǎn)接頭(P/N0100-1847)旁路比例閥。某些流動(dòng)相與柱配合時(shí)會(huì)造成基線噪音。如乙腈/水作流動(dòng)相與含氨丙基柱。第七十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。73第73頁，共117頁。其它檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)折光示差檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)RID基線漂移通常是溶劑變化引起的，如乙腈/水混合溶劑乙腈會(huì)揮發(fā)。四氫呋喃(THF)會(huì)形成過氧化物。某些吸水溶劑等，這些變化都會(huì)引起基線的變化從而造成基線漂移。第七十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。74第74頁，共117頁。其它檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)電導(dǎo)檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)原理：根據(jù)物質(zhì)在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生的電導(dǎo)變化來測定電離物質(zhì)含量。優(yōu)點(diǎn)：對(duì)流動(dòng)相流速和壓力的改變不敏感，可用于梯度洗脫缺點(diǎn)：對(duì)溫度變化敏感（每升高1度，電導(dǎo)率增加2%-2.5%)廣泛應(yīng)用于離子色譜。主要用于檢測水溶性無機(jī)和有機(jī)離子第七十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。75第75頁，共117頁。其它檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)電化學(xué)檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)原理：測量電活性分子在工作電極表面氧化或還原反應(yīng)時(shí)所產(chǎn)生電流變化的檢測優(yōu)點(diǎn)：1）靈敏度高2）選擇性好，只檢測電活性物質(zhì)缺點(diǎn)：1）不適用于梯度洗脫2）對(duì)溫度、壓力變化敏感第七十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。76第76頁，共117頁。其它檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)蒸發(fā)光檢測器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)原理：柱流出物霧化,流動(dòng)相蒸發(fā),溶質(zhì)粒子散射光強(qiáng)度檢測優(yōu)點(diǎn)：1、適用于沒有特征紫外吸收或紫外吸收很弱的待測物2、可以應(yīng)用有強(qiáng)紫外吸收的試劑，如氯仿、丙酮等3、適用于梯度洗脫4、通用型檢測器，只要待測物揮發(fā)性低于溶劑，即可適用5、對(duì)環(huán)境影響不靈敏，室溫下即可操作6、沒有溶劑前緣峰，適用于保留時(shí)間短的物質(zhì)的檢測缺點(diǎn)：1、如果流動(dòng)相不能揮發(fā)（如含有鈉鹽、鉀鹽等)，不適用2、對(duì)有紫外特征吸收的物質(zhì)，檢測靈敏度不如紫外檢測器第七十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。77第77頁，共117頁。HPLC日常維護(hù)－總結(jié)第七十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。78第78頁，共117頁。定期清洗溶劑過濾頭（石英\金屬）流動(dòng)相應(yīng)經(jīng)過0.45um或更小孔徑的濾器過濾，如果使用濾膜，注意有機(jī)膜與水膜的區(qū)別(聚四氟乙烯能適用于所有溶劑)根據(jù)情況更換Purge閥內(nèi)的在線過濾頭（Purge閥打開，純水5ml/min，壓力超過10bar時(shí)需更換）注意清洗在線脫氣機(jī)及比例閥，尤其是長期使用水相或緩沖鹽的通路，使用純水沖洗后，再使用甲醇沖洗，可以打開Purge閥，使用5ml/min的流速。污染比較嚴(yán)重時(shí)，可以使用IPA清洗。

一般的流程，例如

A：BufferB:MeOHC:WaterD:CH3CN

分析：A:B:D=20:30:50

清洗：C100%30min，B100%30minHPLC日常維護(hù)－總結(jié)第七十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。79第79頁，共117頁。安裝有sealwash組件的，無論是否使用緩沖鹽，開泵之前都應(yīng)該使之充滿流動(dòng)的液體（10%IPA水溶液）并調(diào)流速為20滴/分鐘。正相色譜、反相色譜切換時(shí)應(yīng)使用IPA過渡，長期使用正相，應(yīng)更換正相柱塞密封墊樣品進(jìn)樣之前最好過濾，如果樣品量太少，可以適當(dāng)抬高進(jìn)樣針的位置流動(dòng)相pH大于9.5或小于2.3時(shí)，進(jìn)樣閥應(yīng)更換TefzelTM轉(zhuǎn)子密封圈注意不同檢測器流通池耐壓問題，盡量避免使用pH>9.5的流動(dòng)相，以防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動(dòng)相，防止流通池堵塞

VWD40barDAD120barMWD120barFLD20barRID5bar

RID、FLD永遠(yuǎn)是最后一個(gè)檢測器注意不同廠家接頭問題，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭

HPLC日常維護(hù)－總結(jié)第八十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。80第80頁，共117頁。HPLC常用的色譜柱接頭0.090in.0.130in.0.090in.0.170in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090in.0.080in.TroubleshootingLCFittings,PartII.J.W.DolanandP.Upchurch.LC/GCMagazine6:788(1988)HPLC日常維護(hù)－總結(jié)第八十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。81第81頁，共117頁。HPLC日常維護(hù)－總結(jié)毛細(xì)管的區(qū)分

Blue0.25mmColor

i.d.Red0.12mmGreen0.17mm第八十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。82第82頁，共117頁。常見的錯(cuò)誤信息及其解決方法：Shutdown:表示該模塊并無問題，是由于其它模塊出現(xiàn)錯(cuò)誤而導(dǎo)致它也亮紅色。比如其它模塊漏液或脫氣機(jī)出錯(cuò)等。Leak: 表示該模塊發(fā)生漏液，此時(shí)無需關(guān)機(jī)，請(qǐng)檢查該模塊的漏液傳感器周圍是否有液體。如果是，先用紙將之吸干后點(diǎn)擊systemon再檢查液體從何而來。如果不是，請(qǐng)與廠家聯(lián)系，這種情況很可能是儀器內(nèi)部元件有問題。液相色譜儀故障診斷第八十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。83第83頁，共117頁。1.色譜柱未擰緊，多數(shù)發(fā)生再更換柱后。這時(shí)柱溫箱會(huì)顯示Leak。注意，柱溫箱的漏液傳感器在兩加熱塊之間的中間位置。請(qǐng)用吸水紙確認(rèn)，因?yàn)橛袝r(shí)單用眼觀察不易察覺。2.連接管路兩端未擰緊，或連接管路斷裂。3.進(jìn)樣閥漏液，如自動(dòng)進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子墊圈磨損造成漏液。4.泵漏液，開泵后將手伸入泵底部，可感到漏液。5.冷凝水的形成，如果使用柱溫箱的降溫功能，可能會(huì)有冷凝水生成從而使柱溫箱顯示漏液。這種情況下可取消柱溫箱的檢漏功能(在工作站中的instrument菜單下選擇morecolumnthermostat然后選擇取消柱溫箱的檢漏功能).6.流動(dòng)池漏液。漏液的主要原因：第八十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。84第84頁，共117頁。Lampcurrent和UVlampignitedfailed.可能原因：1.燈已嚴(yán)重老化。請(qǐng)?jiān)诠ぷ髡局械膁iagnosis界面中查看燈的使用累積時(shí)間(viewdiagnosisEMF選擇檢測器).通常普通氘燈能用1000小時(shí)或以上，而長壽命氘燈能用2000小時(shí)或以上.2.燈連線未接好。3.檢測器的主板和或電源損壞。注意，更換燈后建議將燈的使用時(shí)間回零：在diagnosis中單擊檢測器圖標(biāo)，然后選擇showmoduledetails再單擊右邊的帶有扳手的圖標(biāo)選擇maintenancelogbookentry，在項(xiàng)目中選擇lampreplace,點(diǎn)ok然后在隨后的提示中回答yes即可。第八十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。85第85頁，共117頁。系統(tǒng)壓力過高。1首先擰開排液閥，以純水作流動(dòng)相并設(shè)流速為5ml/min若壓力超過10bar，應(yīng)先更換排液閥的慮芯。2若排液閥的慮芯沒有堵塞，卸下色譜柱，然后用一兩通代替色譜柱，以水作流動(dòng)相設(shè)流速為1ml/min。通常壓力不會(huì)超過20bar,否則系統(tǒng)可能有堵塞。3若上述的壓力超過20bar,我們可按照從后到前的原則，也就是說先卸下進(jìn)流動(dòng)池的連接管接頭，開泵后，若壓力正常則流動(dòng)池堵塞若仍不正?？蓪⑦@段管另一端也卸下，開泵后再觀察壓力情況。同樣道理，我們就可以找到堵塞的地方。容易堵塞的地方：流動(dòng)池入口管；自動(dòng)進(jìn)樣器的針及針座；柱溫箱第八十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。86第86頁，共117頁。系統(tǒng)壓力過低，不穩(wěn)定或沒液流。首先擰開排液閥，設(shè)流速1~2ml/min后開泵，觀察有無液流，若有再仔細(xì)觀察液流是否有倒吸現(xiàn)象如不能確定可用量筒測量流速的準(zhǔn)確性。如上述無液流，或流速不準(zhǔn)多數(shù)為主動(dòng)閥閥芯或主動(dòng)閥故障，或泵有嚴(yán)重漏液。怎樣是大致判斷主動(dòng)閥抑或其閥芯故障？可用以下方法：當(dāng)泵運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)用手指輕捏主動(dòng)主體，正常的主動(dòng)閥能感到有節(jié)奏的脈動(dòng)，如果沒有，主動(dòng)閥有問題。如果有則可以將主動(dòng)閥閥芯取出進(jìn)行超聲波清洗，如仍有問題，可更換閥芯。注意，千萬不要把整個(gè)主動(dòng)閥放入超聲波清洗這樣會(huì)損壞主動(dòng)閥。若上述流速準(zhǔn)確但擰緊排液閥后壓力不穩(wěn)定，請(qǐng)仔細(xì)檢查有無漏液。(通常漏液地方：各接口包括色譜柱，泵，進(jìn)樣閥等)第八十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。87第87頁，共117頁。保留時(shí)間不穩(wěn)定。1.首先觀察保留時(shí)間是否有規(guī)律的變化，并同時(shí)觀察壓力是否穩(wěn)定若壓力穩(wěn)定而保留時(shí)間呈有規(guī)律變化，多數(shù)是色譜柱未平衡好，特別是含有的流動(dòng)相，需較長的時(shí)間去平衡。2.若壓力穩(wěn)定而保留時(shí)間無規(guī)律變化，請(qǐng)檢查溶劑過濾頭及真空腔是否有堵塞。再平衡色譜柱足夠時(shí)間，如仍然不佳，可更換一色譜柱。3.若壓力不穩(wěn)定，請(qǐng)檢查造成壓力不穩(wěn)定的因素，如：漏液，排液時(shí)間不足夠，鹽濃度過高導(dǎo)致鹽析，主動(dòng)閥比例閥內(nèi)漏，等。第八十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。88第88頁，共117頁。峰面積重現(xiàn)性不好。1.首先觀察壓力是否穩(wěn)定，以及觀察峰面積變化是否有規(guī)律。

若壓力不穩(wěn)定，請(qǐng)檢查造成壓力不穩(wěn)定的因素，如：漏液，排液時(shí)間不足夠，鹽濃度過高導(dǎo)致鹽析，主動(dòng)閥比例閥內(nèi)漏，等。2.若壓力穩(wěn)定但峰面積呈無規(guī)律變化，請(qǐng)檢查樣品是否足夠，確認(rèn)樣品的穩(wěn)定性，必要時(shí)重新配制。檢查進(jìn)樣閥是否漏液。等。3.若壓力穩(wěn)定且峰面積呈規(guī)律變化，多數(shù)為色譜柱未平衡好。第八十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。89第89頁，共117頁?；€不穩(wěn)定?；€漂移：色譜柱未平衡好，柱溫未穩(wěn)定，流動(dòng)相變化，等?；€噪音：

可能原因是：流動(dòng)池有氣泡，流動(dòng)池被污染，對(duì)紫外檢測器可將流動(dòng)池移走即可確認(rèn)。色譜柱和或系統(tǒng)受污染。燈能量不足。外界因素影響，如電源，溫度和濕度，震動(dòng)，等。第九十頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。90第90頁，共117頁。HPLC常見問題及解決辦法：壓力異常

操作壓力的變化往往是故障的征兆。從下表中找出所觀察到的現(xiàn)象，并在右側(cè)的列表中參考相應(yīng)的解決方法。

A、沒有壓力顯示，沒有流動(dòng)相流動(dòng)原因解決方法1、電源問題、1、接通電源，開機(jī)2、保險(xiǎn)絲被燒壞2、更換保險(xiǎn)絲3、控制器設(shè)定不正3、a、采取恰當(dāng)?shù)脑O(shè)定確或設(shè)定失敗b、修理或更換控制器4、柱塞桿折斷4、更換柱塞桿5、泵頭內(nèi)有空氣5、溶劑脫氣、啟動(dòng)泵抽出空氣6、流動(dòng)相不足6、a、補(bǔ)充流動(dòng)相b、更換入口濾頭7、單向閥損壞7、更換單向閥8、漏液8、擰緊或更換手緊接頭第九十一頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。91第91頁，共117頁。B、流動(dòng)相流動(dòng)正常，但沒有壓力顯示原因解決方法1、儀表損壞1、更換儀表2、壓力傳感器損壞2、更換壓力傳感器C、壓力持續(xù)偏高原因解決方法1、流速設(shè)定過高1、調(diào)整流速設(shè)定2、柱前篩板堵塞2、a、在允許情況下反沖色譜柱b、更換篩板c、更換色譜柱3、流動(dòng)相使用不當(dāng)3、a、使用恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相或緩沖鹽的結(jié)晶沉淀b、沖洗色譜柱4、色譜柱選擇不當(dāng)4、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱5、進(jìn)樣閥損壞5、清洗或更換進(jìn)樣閥6、柱溫過低6、提高溫度7、控制器失常7、修理或更換控制器8、保護(hù)柱阻塞8、清洗或更換保護(hù)柱9、在線過濾器阻塞9、清洗或更換在線過濾器第九十二頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。92第92頁，共117頁。

D、壓力持續(xù)偏低原因解決方法1、流速設(shè)定過低1、調(diào)整流速2、系統(tǒng)漏液2、確定漏液位置并維修3、色譜柱選擇不當(dāng)3、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱4、柱溫過高4、降低溫度5、控制器失常5、維修或更換控制器E、壓力波動(dòng)原因解決方法1、泵中有氣體1、a、溶劑脫氣

b、從泵中除去氣體2、單向閥損壞2、更換單向閥3、泵密封損壞3、更換泵密封4、脫氣不充分4、a、溶劑脫氣

b、改變脫氣方法（使用在線脫氣法等）5、系統(tǒng)漏液5、確定漏液位置并維修6、使用梯度洗脫6、由于流動(dòng)相粘度的變化引起的壓力波動(dòng)第九十三頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。93第93頁，共117頁。

HPLC常見問題及解決辦法：漏液

通?？梢酝ㄟ^擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會(huì)導(dǎo)致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題，就必須將接頭取下，檢查是否損壞（例如，卡套損壞、密封表面有雜質(zhì)）；損壞的接頭應(yīng)該更換掉。A、接頭處漏液原因解決方法1、接頭松動(dòng)1、擰緊2、接頭磨損2、更換3、接頭過緊3、a、擰松，再重新擰緊

b、更換4、接頭被污染4、a、拆下清洗

b、更換5、部件不匹配5、使用同一品牌的配件第九十四頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。94第94頁，共117頁。B、泵漏液原因解決方法1、單向閥松動(dòng)1、a、擰緊單向閥（不必?cái)Q的過緊）

b、更換單向閥2、接頭松動(dòng)2、擰緊接頭（不必?cái)Q的過緊）3、混合器密封損壞3、a、更換混合器密封

b、更換混合器4、泵密封損壞4、維修或更換泵密封件5、壓力傳感器損壞5、維修或更換壓力傳感器6、脈沖阻尼器損壞6、更換脈沖阻尼器7、比例閥損壞7、a、檢查隔膜，如果漏液立即更換

b、檢查手緊接頭，損壞的立即更換8、放空閥的損壞8、a、擰緊放空閥

b、更換放空閥第九十五頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。95第95頁，共117頁。C、進(jìn)樣閥漏液原因解決方法1、轉(zhuǎn)子密封損壞1、重新安裝或更換進(jìn)樣閥2、定量環(huán)阻塞2、更換定量環(huán)3、進(jìn)樣口密封松動(dòng)3、調(diào)整4、進(jìn)樣針頭尺寸4、使用恰當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣針不合適5、廢液管中產(chǎn)生虹吸5、保持廢液管高于廢液液面6、廢液管阻塞6、更換或疏通廢液管D、檢測器漏液原因解決方法1、流通池墊片損壞1、a、避免過大的背景壓力

b、更換墊片2、流通池窗破碎2、更換窗口3、手緊接頭漏液3、擰緊或更換4、廢液管阻塞4、更換廢液管5、流通池阻塞5、重新安裝或更換第九十六頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。96第96頁，共117頁。

HPLC常見問題及解決辦法：譜圖的各種問題

液相色譜系統(tǒng)的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變?cè)O(shè)備參數(shù)得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對(duì)于色譜柱和流動(dòng)相的正確選擇是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。

A、峰拖尾原因解決方法1、篩板阻塞1、a、反沖色譜柱

b、更換進(jìn)口篩板

c、更換色譜柱2、色譜柱塌陷2、填充色譜柱3、干擾峰3、a、使用更長的色譜柱

b、改變流動(dòng)相或更換色譜柱4、流動(dòng)相PH選擇錯(cuò)誤4、調(diào)整PH值。對(duì)于堿性化合物低PH值更有利于得到對(duì)稱峰5、樣品與填料表面5、a、加入離子對(duì)試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑溶化點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)

b、更改色譜柱

第九十七頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。97第97頁，共117頁。

B、峰前延原因解決方法1、柱溫低1、升高柱溫2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)2、使用流動(dòng)相作為樣品溶劑3、樣品過載3、降低樣品含量4、色譜柱損壞4、見A1、A2

C、峰變形原因解決方法1、樣品過載1、減少樣品載量

D、早出的峰變形原因解決方法1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)1、a、減少進(jìn)樣體積

b、運(yùn)用低極性樣品溶劑

E、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解決方法1、柱外效應(yīng)1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑小的管路）

b、使用小體積的流通池第九十八頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。98第98頁，共117頁。F、保留時(shí)間波動(dòng)原因解決方法1、溫控不當(dāng)1、調(diào)好柱溫2、流動(dòng)相組分變化2、防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）3、色譜柱沒有平衡3、在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱G、保留時(shí)間不斷變化原因解決方法1、流速變化1、重新設(shè)定流速2、泵中有氣泡2、從泵中除去氣泡3、流動(dòng)相選擇不恰當(dāng)3、a、更換合適的流動(dòng)相

b、選擇合適的混合流動(dòng)相第九十九頁，編輯于星期六：二十二點(diǎn)分。99第99頁，共117頁。H、所有的峰面積都太小原因解決方法1、檢測器衰減設(shè)定過高1、減少衰減的設(shè)定

2、檢測器時(shí)間常數(shù)設(shè)定太大2、設(shè)定較小的時(shí)間常數(shù)

3、進(jìn)樣量太少3、增大進(jìn)樣量4、記錄儀連接不當(dāng)4、使用正確的連接I、所有的峰面積都太大原因解決