衛(wèi)生學(xué)評價(化妝品)

目錄01化妝品衛(wèi)生學(xué)方面的主要要求02衛(wèi)生化學(xué)檢驗方法03微生物檢驗方法目前一頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點是否含有禁用物質(zhì)？限用物質(zhì)是否超標(biāo)？微生物超標(biāo)？含有致病微生物？功效成分過量？含有違禁成分？目前二頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2006年9月14日，國家質(zhì)檢總局在日本SK-Ⅱ品牌的多項化妝品中，查出禁用成分鉻和釹。檢驗檢疫部門在對一批SK-Ⅱ重點凈白素肌粉餅進(jìn)行檢驗后發(fā)現(xiàn)，其釹成分含量達(dá)4.5mg/kg。此外，SK-Ⅱ清透防曬乳液、SK-Ⅱ多元修護(hù)精華霜、SK-Ⅱ護(hù)膚潔面油、SK-Ⅱ護(hù)膚精華露、SK-Ⅱ重點凈白肌粉底液OB-2、SK-Ⅱ護(hù)膚面膜、SK-Ⅱ重點凈白素肌粉底液OD-3、SK-Ⅱ潤采活膚粉凝霜OB-2系列進(jìn)口產(chǎn)品中均被檢出禁用物質(zhì)鉻，其含量為0.77mg/kg至2.0mg/kg，對皮膚眼睛有損害。目前三頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2007年10月24日《廣州日報》香港消費者委員會抽檢發(fā)現(xiàn)，玉蘭油、H2O+、巴黎雪完美等品牌的部分化妝品含有致癌物丙烯酰胺的單體。機構(gòu)檢測表明：化妝品中存在5ppm以下的丙烯酰胺殘留是安全的。中國香料香精化妝品工業(yè)協(xié)會說明：丙烯酰胺不會作為化妝品組分添加到產(chǎn)品中。專家說：丙烯酰胺在化妝品中所存有極微量的丙烯酰胺是生產(chǎn)上的背景殘留，就是一種低殘留量的聚丙烯酰胺附屬品。聚丙烯酰胺在全世界范圍內(nèi)被長期使用于數(shù)百種護(hù)膚品中來達(dá)到理想的稠度和觸感。作為化妝品工業(yè)界的重要原料，聚丙烯酰胺的作用包括穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑、結(jié)合劑、增稠劑、成膜劑、抗靜電劑和頭發(fā)定型劑。目前四頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2009年4月6日《廣州日報》

2009年4月2日，韓國媒體報道稱，韓國保寧制藥和Babyra等著名嬰幼兒用品制造企業(yè)所生產(chǎn)的嬰幼兒爽身粉中，被發(fā)現(xiàn)含有1級致癌物質(zhì)石棉，其中涉及了中國市場上非常有名的進(jìn)口產(chǎn)品德國NUK嬰兒爽身粉。根據(jù)中國國家衛(wèi)生部關(guān)于化妝品衛(wèi)生規(guī)范，石棉為化妝品原料成分中的禁用物。相關(guān)背景：嬰幼兒爽身粉檢測出石棉是由于原料滑石?；堑V物質(zhì)中的一種，它與含有石棉成分的蛇紋巖共同埋藏在地下，因而在自然形態(tài)下常常含有石棉成分。正因為如此，美國和歐洲等發(fā)達(dá)國家規(guī)定，2005年以后嬰幼兒制品中禁止使用滑石。目前五頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2010年8月7日《南方日報》香港文匯報報道，洗發(fā)水類別中，有23款日化產(chǎn)品含有低量的二惡烷。日化產(chǎn)品和化妝品里多多少少含二惡烷的，因為它是日化產(chǎn)品表面活性劑AES（脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉）合作過程中不可避免產(chǎn)生的，會隨著AES進(jìn)入產(chǎn)品。目前六頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點強生致癌門事件背景：美國“安全化妝品運動聯(lián)盟”在當(dāng)?shù)貢r間2011年11月1日發(fā)表一份報告，報告指出，今年的7~10月，組織購買并檢查了強生在13個國家銷售的嬰兒洗發(fā)水的標(biāo)簽，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中國、美國、加拿大、印尼、澳大利亞5個國家銷售的上述產(chǎn)品含有季銨鹽-15，而日本、英國、瑞典、荷蘭、南非等國家銷售的同類產(chǎn)品不含有季銨鹽-15。上述產(chǎn)品還含有很可能受二惡烷污染的化學(xué)物質(zhì)。該組織質(zhì)疑強生在全球采用雙重標(biāo)準(zhǔn)。專家認(rèn)為：季銨鹽-15是很多洗發(fā)水中普遍和廣泛使用的防腐劑，也是國家允許添加的，在中國衛(wèi)生部關(guān)于化妝品的法規(guī)中，只要添加量小于0.2%就是合法的。季銨鹽-15類白色粉末，屬甲醛供體類防腐劑。世界衛(wèi)生組織、美國全國癌癥研究所和美國國家毒物管理局認(rèn)定，季銨鹽-15和甲醛均為潛在烈性過敏原，可引發(fā)皮疹等皮膚炎癥。目前七頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點第一節(jié)化妝品衛(wèi)生學(xué)方面的主要要求《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》《化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》《化妝品微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法》《化妝品安全性評價程序和方法》1978《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》1999《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007目前八頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點總則毒理學(xué)試驗方法衛(wèi)生化學(xué)檢驗方法微生物檢驗方法人體安全性和功效評價檢驗方法《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007版包括：規(guī)范對化妝品原料和終產(chǎn)品衛(wèi)生要求以及安全性評價的技術(shù)規(guī)定，在我國生產(chǎn)和銷售的化妝品必須符合該規(guī)定。目前九頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點作為化妝品的原料及產(chǎn)品應(yīng)符合以下衛(wèi)生要求：

(1)化妝品應(yīng)該是安全的產(chǎn)品，在正常以及合理的、可預(yù)見的使用條件下，不能對人體健康產(chǎn)生危害。

(2)化妝品使用的原料必須符合原料的規(guī)定?；瘖y品產(chǎn)品必須使用安全，不得對施用部位產(chǎn)生明顯刺激和損傷，且無感染性。目前十頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點一、化妝品原料管理有機類：油脂、蠟、烴、醇、酸、酯無機類：酸、堿、鹽、氧化物高分子（水溶性）：天然高分子、合成高分子、有機高分子、無機高分子天然：動物、植物、礦物合成：全合成、半合成主體原料和輔助原料及添加劑按來源分按化學(xué)結(jié)構(gòu)分按性能用途分目前十一頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》-2007版：發(fā)布了化妝品中的禁用、限用成分表，還規(guī)定了限用成分的使用濃度和限量，使用目的或相關(guān)的警示用語等，從多角度確保化妝品的安全性。

《化妝品衛(wèi)生監(jiān)督條例》-第九條：新原料：化妝品新原料是指在國內(nèi)首次使用于化妝品生產(chǎn)的天然或人工原料。使用化妝品新原料生產(chǎn)化妝品，必須經(jīng)國務(wù)院衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)?！兑咽褂没瘖y品成分名單》-2003版：3176種一般原料：2128植物原料：502特殊原料：546（一般限用、防腐、防曬、色素）目前十二頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點1.禁用成分《關(guān)于解釋化妝品禁用物質(zhì)概念的復(fù)函

》-衛(wèi)生部監(jiān)督局2007.2我國《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》和《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》規(guī)定的禁用物質(zhì)是指不能作為化妝品生產(chǎn)原料即組分添加到化妝品中的物質(zhì)。如果技術(shù)上無法避免禁用物質(zhì)作為雜質(zhì)帶入化妝品時，則化妝品成品必須符合《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》和《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》對化妝品的一般要求，即在正常及合理的、可預(yù)見的使用條件下，不得對人體健康產(chǎn)生危害?！痘瘖y品衛(wèi)生規(guī)范》-2007版：化學(xué)物質(zhì)1208種-石棉、二惡烷、鉻、釹中藥/植物78種-半夏、烏頭目前十三頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》-2007版：化學(xué)物質(zhì)73種-甲醛、氫氧化鈉、過氧化氫、水楊酸防腐劑（均為加入化妝品中以抑制微生物在該化妝品中生長為目的的物質(zhì)）56種-DMDM乙內(nèi)酰脲、水楊酸、甲醛防曬劑（為保護(hù)皮膚免受輻射所帶來的某些有害作用而在化妝品中加入的物質(zhì)）28種-紫外線屏蔽劑（二氧化鈦、氧化鋅），紫外線吸收劑（胡莫柳酯）著色劑（符合規(guī)定范圍及使用范圍，采納了“歐盟準(zhǔn)用著色劑CI號”）156種-使用索引號CI染發(fā)劑（在允許原料范圍，并符合限制使用要求和標(biāo)簽標(biāo)注）93種-對苯二胺、間苯二酚、氫醌2.限用成分目前十四頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點二、制成品1.化妝品生產(chǎn)過程中微生物的存在是另一影響化妝品質(zhì)量的重要因素。2.汞、砷、鉛等重金屬這類污染成分隨化妝品原料進(jìn)入化妝品并疊加。3.制備化妝品的機械和設(shè)備可能將某些重金屬帶入化妝品成品中。目前十五頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點1.化妝品微生物的質(zhì)量要求化妝品受微生物污染后可使化妝品的色、形、氣味等發(fā)生變化，品質(zhì)下降。致病菌的污染可導(dǎo)致人體健康損害，如化膿性細(xì)菌污染可引起皮膚和眼部的感染。當(dāng)人體抵抗力低時，某些非病原菌或條件致病菌也會引起感染。菌落總數(shù)糞大腸菌群銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌霉菌和酵母菌化妝品微生物控制指標(biāo)目前十六頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點具體規(guī)定：眼部化妝品及口唇等粘膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品菌落總數(shù)不得大于500CFU/mL或500CFU/g。其它化妝品菌落總數(shù)不得大于1000CFU/mL或1000CFU/g。每克或每毫升產(chǎn)品中不得檢出糞大腸菌群、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌?；瘖y品中霉菌和酵母菌總數(shù)不得大于100CFU/mL或100CFU/g。目前十七頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點化妝品中所含有毒物質(zhì)（常見污染物）不得超過下表中規(guī)定的限量。2．化妝品中所含有毒物質(zhì)(常見污染物)的限量規(guī)定目前十八頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點化妝品的包裝千姿百態(tài)、所用材料多種多樣，難以對各種包裝分門別類作出規(guī)定，因此，僅對其作了原則性規(guī)定，即要求化妝品的直接容器材料必須無毒，不得含有或釋放可能對使用者造成傷害的有害物質(zhì)。三、化妝品外包裝主要包括：紙容器（盒、袋、管、罐、桶\杯）塑料容器（盒、軟管、罐、瓶\杯）玻璃容器（瓶\杯）金屬容器（盒、罐、瓶\杯）目前十九頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點第二節(jié)衛(wèi)生化學(xué)檢驗方法一、化妝品中無機成分的測定1.汞元素測試

汞是有害金屬元素，汞及其化合物都能穿透皮膚，進(jìn)入體內(nèi)，對人體造成傷害。汞的測試分析方法有三種：碘化亞銅比色法、無火焰原子吸收法和中子活化法。由于汞元素容易揮發(fā)，因此在檢測樣品時要避免采取高溫灼燒干灰化法。通常預(yù)處理方法有：濕式回流消解法、濕式催化消解法和浸提法。測定時將標(biāo)準(zhǔn)汞液的吸光值繪成標(biāo)準(zhǔn)曲線，再將消解后得到的樣品溶液加入氯化亞錫，使汞離子變成游離態(tài)的汞原子，并導(dǎo)人測汞儀測出吸光度值，再從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對應(yīng)的汞含量。目前二十頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2.鉛元素測試鉛對所有生物體都有毒性，鉛中毒能引起神經(jīng)、血液、代謝和分泌等系統(tǒng)的病變，嚴(yán)重時還會損壞肝、腎等器官。由于鉛和鉛化合物可以增白或調(diào)配色彩，常有添加過量鉛元素的違規(guī)化妝品混入銷售市場，因此對化妝品中鉛含量的測試很有必要。鉛的樣品預(yù)前的處理方法有濕式消解法、干濕消解法和浸提法，其測定方法有火焰原子吸收分光光度法、雙硫腙萃取分光光度法。目前二十一頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點3.砷元素測試砷元素雖為人體必需的元素，但由于不同形態(tài)的砷毒性差別很大，因此使用時應(yīng)嚴(yán)格區(qū)分。

單質(zhì)砷元素?zé)o毒性，但其化合物都有毒，三價砷的毒性更大。砷的樣品預(yù)前的處理方法有濕式消解法和干灰化法，其測定方法有二乙氨基二硫代甲酸銀分光光度法、砷斑法。AsArsenic

74.92

目前二十二頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點4.其他無機元素鎘：原子吸收、微分電位溶出法等。鍶、鈹、鈷及可溶性鋅鹽：原子吸收分光光度法。砷、鉛、鎘、鍶、鉻、鉍等：微波消解ICP-AES法（應(yīng)用于測定固體類化妝品中）。硒：微波消解-氣相色譜法、原子熒光光譜法等。硼：甲亞胺-H與硼的顯色反應(yīng)。5．無機陰陽離子陽離子，如K+、Na+、Ca2+、Mg2+：原子吸收法；陰離子，如F一、CI一、Br一、NO3一、SO42一和陽離子NH4+，可采用離子色譜法測定。目前二十三頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點二、有機禁限用物質(zhì)的測定1.甲醇甲醇是無色、易揮發(fā)的有機溶劑，有毒。甲醇對人體眼睛的危害較大，國家標(biāo)準(zhǔn)限量<0.2％(體積分?jǐn)?shù))。甲醇的測定方法有氣相色譜法和比色法。其中氣相色譜法簡便、快速、準(zhǔn)確，已定為國家標(biāo)準(zhǔn)。2.防腐劑防腐劑可采用氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)法或液相色譜一質(zhì)譜法等測定化妝品中易揮發(fā)或高沸點的化學(xué)物質(zhì)。

3.美白祛斑成分可采用氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法測定《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中的禁用成分苯酚和氫醌；用氣相色譜法、液相色譜法、薄層色譜法等分析技術(shù)測定熊果苷、曲酸、抗壞血酸磷酸酯鎂、L-抗壞血酸棕櫚酸酯等功效成分。目前二十四頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點4.紫外線吸收劑紫外線吸收劑的檢測以高效液相色譜法為主。5.激素激素的檢測仍以性激素為主，雌二醇、雌三醇、睪丸酮、雌酮、甲基睪丸酮、黃體酮、己烯雌酚等7種性激素采用高效液相色譜法測定。也有先用七氟丁酸酐衍生化后，再以GC-MS聯(lián)用技術(shù)測定性激素。6.染發(fā)劑染發(fā)劑種類非常多，如氧化型染發(fā)劑中的苯胺、苯酚、鄰甲酚、鄰苯二胺、鄰苯二酚、間苯二胺、對苯二酚、對苯二胺、間苯二酚、對甲苯二胺、間甲苯二胺、僅萘酚等可采用氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、高效毛細(xì)管電泳法測定。目前二十五頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點7．其他有機成分①斑蝥素（育發(fā)類產(chǎn)品中的限用成分）：可采用氣相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行測定。②酞酸酯（如鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸丁基芐基酯、鄰苯二甲酸二(2-乙基己)酯和鄰苯二甲酸二正辛酯六種酞酸酯等）：可采用高效液相色譜法和氣相色譜法測定，方法的檢出限、回收率、精密度等指標(biāo)均能滿足分析要求。③抗氧化劑（如丁基羥基茴香醚和二丁基羥基甲苯）：液相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法均可用于測定化妝品中的檢測。④二惡烷（具有致癌活性，是化妝品組分中的禁用物質(zhì)）：可以采用頂空氣相色譜法測定。目前二十六頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點第三節(jié)微生物檢驗方法化妝品的原料為油脂、膠質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素等微生物生長、繁殖所必需的碳源、氮源及礦物質(zhì)；其次，化妝品中的水分是微生物生長、繁殖所必備條件；第三，pH值一般為4～7，最適宜微生物的生長；另外，化妝品生產(chǎn)、存放和使用時的溫度，也適宜大多數(shù)病源菌的生長、繁殖。因此，當(dāng)化妝品接觸這些微生物后將發(fā)生變質(zhì)腐敗而不能使用；不僅會造成經(jīng)濟損失，而且更為嚴(yán)重的是，若化妝品污染上了致病菌，將危及消費者的身體健康。目前二十七頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點一、常見污染化妝品的微生物對化妝品質(zhì)量影響大的主要是病源細(xì)菌和致病真菌等致病菌。

1.病源細(xì)菌病源細(xì)菌主要包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。（1）革蘭氏陽性菌主要包括：①葡萄球菌：金黃色葡萄球菌是兼性細(xì)菌，人體受到此菌的感染，可引起生癤子、化膿性炎癥，眼部引起麥粒腫、結(jié)膜炎等炎癥。②鏈球菌：兼性細(xì)菌，受感染后，可引起急性咽喉炎、風(fēng)濕熱與急性腎炎等。目前二十八頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點③芽孢及梭狀芽孢桿菌：炭疽桿菌能引起炭疽病，破傷風(fēng)桶狀桿菌是破傷風(fēng)的病原體。④棒狀桿菌：白喉棒狀桿菌是白喉的病源菌。目前二十九頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點（2）革蘭氏陰性菌。①假單胞菌：綠膿桿菌可使燒傷病人感染，還可引起肺炎。②沙門氏菌：沙門氏傷(副傷)寒桿菌是引起傷(副傷)寒的病源菌。③弧菌：霍亂弧菌能引起霍亂病。④埃希氏桿菌：大腸桿菌能引起腹瀉、腎盂腎炎和膀胱炎。⑤志賀氏桿菌：志賀氏痢疾桿菌是痢疾的病源菌。⑥雙球菌：肺炎鏈球菌能引起大葉肺炎、腦膜炎和結(jié)膜炎。目前三十頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2.致病真菌表皮癬菌、白色念球菌、新型隱球菌。目前三十一頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點3.霉菌青霉、曲霉、根霉、毛霉。目前三十二頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點不同類型的化妝品具有不同的染菌特點：膏霜類化妝品含有水分、碳源和氮源，這類化妝品的微生物污染率最高，檢出的微生物種類也最多：類大腸菌群、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌等。洗發(fā)類化妝品中含有大量的水分和微生物生長所需的營養(yǎng)，其含有的大量的表面活性劑，特別容易受到革蘭氏陰性菌的污染，使得其活性成分失效。霉菌和酵母菌引起的污染會使其產(chǎn)生異味，黏度會發(fā)生改變。粉餅類的污染源主要是來自于原材料，此類化妝品檢出抵抗力較強的需氧芽孢菌較多。美容類化妝品的染菌率不高，一旦被致病菌污染，將會對人體健康產(chǎn)生較大的影響，特別是眼部化妝品和唇膏。目前三十三頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點污染菌產(chǎn)品微生物數(shù)目（cfu/g或mL）銅綠假單胞菌護(hù)手霜1.2x103嗜麥芽假單胞菌睫毛油7.0x105類產(chǎn)堿假單胞菌洗面奶3.1x104類產(chǎn)堿假單胞菌發(fā)乳1.9x104熒光假單胞菌發(fā)油4.0x104惡臭假單胞菌啫哩膏2.5x104奧斯陸莫拉菌保濕霜1.3x103陰溝腸桿菌牙膏2.3x105產(chǎn)氣腸桿菌牙粉3.4x106化妝品成品中的常見微生物34目前三十四頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點微生物污染一級污染：化妝品在生產(chǎn)過程中的污染。因此原材料本身的理化性質(zhì)、含水量、生產(chǎn)環(huán)境和設(shè)備、生產(chǎn)工藝、包裝容器和環(huán)境、生產(chǎn)工人的健康狀況等均與化妝品產(chǎn)品的衛(wèi)生質(zhì)量有關(guān)。二級污染：化妝品在使用過程中受到的污染。化妝品啟封后，使用或存放過程中發(fā)生的污染，包括手部接觸化妝品后將微生物帶入，空氣中的微生物落入而被污染。一些美容美發(fā)店的化妝品是共用的，更可造成交叉感染。盡管化妝品中的防腐劑可抑制微生物的繁殖，但其作用有限。二、微生物對化妝品污染的途徑目前三十五頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點三、化妝品中微生物的檢測方法參照《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007版)，主要對化妝品微生物檢驗方法涉及的菌落總數(shù)測定方法，糞大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、霉菌等致病菌檢測方法進(jìn)行介紹。微生物檢驗的基本要求微生物檢驗樣品的采集、保存及制備適用范圍目前三十六頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點隨機抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。應(yīng)從批的整體中各部位抽取，如從四角+中間；分上、中、下層；或上、中上、中、中下、下層；梅花點式等。

所有接觸樣品的工具、容器都必須保持清潔。

樣品的采集1、具有代表性目前三十七頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點3、檢驗量

檢驗時，應(yīng)分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10mL。包裝量小于20g的樣品，采樣量可適當(dāng)增加樣品包裝數(shù)量。2、抽/采樣數(shù)量

按照抽樣批及抽樣方案

符合《JJF1070－2005定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則》目前三十八頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點液體樣品膏、霜、乳劑半固體狀樣品固體樣品無菌容器、材料及操作樣品的均一性樣品的制備樣品的制備及注意事項目前三十九頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點樣品應(yīng)放在室溫陰涼干燥處樣品先進(jìn)行微生物檢驗，再做其他指標(biāo)須防止微生物的再污染和擴散如檢出糞大腸菌群或其它致病菌，自報告發(fā)出之日起該菌種及被檢樣品應(yīng)保存一個月樣品的檢驗及保管目前四十頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點1.化妝品中細(xì)菌總數(shù)的檢測菌落總數(shù)（Aerobicbacterialcount）是指化妝品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH值、需氧性質(zhì)等），1g（1mL）檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。測定菌落總數(shù)便于判明樣品被細(xì)菌污染的程度，是對樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)總評價的綜合依據(jù)。目前四十一頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點數(shù)據(jù)處理混合平板的制備細(xì)菌的培養(yǎng)檢查結(jié)果、觀察與計數(shù)供試液的制備書寫檢驗記錄單★細(xì)菌總數(shù)檢查流程圖目前四十二頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點化妝品中防腐劑抑制細(xì)菌的生長作用。在含卵磷脂、吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行中和。對尼泊金類、苯甲酸類、六氯酚類等有效，但對卡松類的防腐劑的中和效果有限。卡松的中和劑半胱氨酸,可較好的中和卡松的抑菌效果。 因此，檢測時不同的防腐劑加入不同的中和劑。目前四十三頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點為便于區(qū)別化妝品中的顆粒與菌落，可在每100mL卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂中加入1mL

0.5％的TTC（,3,5-三苯基氯化四氮唑）溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而化妝品的顆粒顏色無變化。在膏霜類化妝品中，微生物都是吸附或附著于顆粒狀的原料中，檢測時不易洗脫下來。因此，需要驗證檢測方法的有效性。目前四十四頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點2.化妝品中糞大腸菌群的檢測糞大腸菌群（Fecalcoliforms）是一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌，在44.5℃±0.5℃培養(yǎng)24h～48h，能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。該菌來自糞便，是重要的衛(wèi)生指示菌。目前四十五頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點基本操作方法1、取稀釋后的檢液加到雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基中，置于44.5℃培養(yǎng)24~48h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則為陰性。2、如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則接種到瓊脂平板上，置37℃培養(yǎng)18~24h，典型特征為紫黑色，中心顏色較深。挑選可疑菌落，涂片做革蘭染色鏡檢。3、同時接種到蛋白胨水中，置44℃培養(yǎng)24h，加入靛基質(zhì)試劑約0.5mL，觀察。陽性者液面呈玫瑰紅色，陰性呈試劑本色。4、兩種現(xiàn)象共存，可報告樣品中檢出糞大腸菌群。目前四十六頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點44±0.5℃24±2h0.5mL靛基質(zhì)產(chǎn)酸：黃色產(chǎn)氣：氣泡產(chǎn)酸產(chǎn)氣書寫檢驗記錄單不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣增菌培養(yǎng)供試液的制備配培養(yǎng)基和稀釋液檢查結(jié)果判斷44±0.5℃24~28h分離培養(yǎng)蛋白胨水中培養(yǎng)最終結(jié)果判斷特征菌落36±1℃18~24h雙倍乳糖膽鹽EMB瓊脂液面玫瑰紅色紫黑色★糞大腸菌群檢查流程圖目前四十七頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點3.化妝品中銅綠假單胞菌的檢測銅綠假單胞菌（Pseudomonasaeruginosa）屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42℃±1℃條件下能生長。該菌對人有致病力，可使傷處化膿，引起敗血癥等。目前四十八頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點基本操作步驟1、增菌培養(yǎng)：將稀釋樣加到SCDLP（SoyaCaseinDigestLecithinPolysorbateBroth）培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)18~24h，若有菌，則生成一層薄菌膜，呈黃綠色或藍(lán)綠色。2、分離培養(yǎng)：從上述薄膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種在十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)18~24h。綠膿桿菌的菌落扁平無定型，向周邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，呈灰白色，周圍有水溶性色素。驗證試驗：a染色鏡檢：挑取可疑菌落，涂片，革蘭染色，鏡檢為革蘭陰性者進(jìn)行氧化酶試驗。b氧化酶試驗：將可疑菌落涂在濾紙片上，滴加新配制二甲基對苯二胺，15~30s出現(xiàn)紅色為陽性。c綠膿菌素試驗：取可疑菌落，接種在綠膿菌素測定培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24h，加入氯仿，待氯仿提取液呈藍(lán)色，加鹽酸，如鹽酸呈紅色，則被檢物中含綠膿菌素。目前四十九頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點d硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗：挑取可疑菌落，接種在硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24h，觀察。產(chǎn)生氣體者，表明該菌能還原硝酸鹽，分解亞硝酸鹽產(chǎn)生氮氣。e明膠液化試驗：取可疑菌落，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24h，放冰箱約20min，仍呈溶解狀為陽性。f42℃生長試驗：取可疑菌落，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基中，37培養(yǎng)24h，放冰箱約20min，仍呈溶解狀為陽性。結(jié)果報告增菌分離培養(yǎng)后，有可疑現(xiàn)象證明有革蘭陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗皆為陽性，可報告被檢樣含綠膿桿菌；如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽產(chǎn)氣、42℃生長試驗三者皆為陽性，可報告被檢樣含綠膿桿菌。目前五十頁\總數(shù)五十七頁\編于十八點★銅綠假單胞菌檢查流程圖最終結(jié)果判斷增菌培養(yǎng)供試液的制備書寫檢驗記錄單分離純化無菌落或無特征菌落配培養(yǎng)基和稀釋液革蘭染色、鏡檢→