發(fā)酵思考題答案解析

2023發(fā)酵工藝與設(shè)備思考題答案參考〔2023發(fā)酵工藝與設(shè)備思考題答案參考〔0401〕誠意感謝曹劍磊、趙常紅、趙西云、薛峰、高亦豹、洪晨江、唐波、武誠意感謝曹劍磊、趙常紅、趙西云、薛峰、高亦豹、洪晨江、唐波、武秀江、秦久福等同學(xué)的辛苦整理！此答案僅供參考，懇請指正！第八章發(fā)酵過程1，發(fā)酵過程的定義“發(fā)酵”的全部領(lǐng)域，而且還包括固定化細胞的反響過程、生物法廢水處理過程和細菌采礦等過程。2，為何要爭論發(fā)酵過程培育溫度、pH、氧的需求等，并深入地了解生產(chǎn)菌在合成產(chǎn)物過程中的代謝調(diào)控機制以及可能的代謝途徑，為設(shè)計合理的生產(chǎn)工藝供給理論根底。同時，為了把握菌種在發(fā)酵過程中的代謝變化規(guī)律，可以通過各種監(jiān)測手段如取樣測定隨時間變化的菌體濃度，糖、氮消耗及產(chǎn)物濃度，以及承受傳感器測定發(fā)酵罐中的培育溫度pH、溶解氧等參數(shù)的狀況，并予以有效地把握，使生產(chǎn)菌種處于產(chǎn)物合成的優(yōu)化環(huán)境之中。3，發(fā)酵過程的主要把握參數(shù)主要分為哪三大類物理、化學(xué)和生物三類4，發(fā)酵過程中通常測定的參數(shù)有哪些pH離心壓縮細胞體積%)等。5，參數(shù)測定方法有：在線測定，取樣測定〔離線測定〕6，代謝變化就是反映發(fā)酵過程中菌體的生長，發(fā)酵參數(shù)〔培育基，培育條件等〕和產(chǎn)物形成速率三者間的關(guān)系。了解生產(chǎn)菌種在具有適宜的培育基、pH、溫度和通氣攪拌等環(huán)境條件下對基質(zhì)的利用、細胞的生長以及產(chǎn)物合成的代謝變化，有利于人們對生產(chǎn)的把握。7，分批發(fā)酵、補料分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵的定義。對這三種發(fā)酵方式進展比較。分批發(fā)酵(Batchfermentation)是指在一封閉系統(tǒng)內(nèi)含有初始限量基質(zhì)的發(fā)酵方式。在這一過程中，除了氧氣、消泡劑及把握pH特點：微生物所處的環(huán)境在發(fā)酵過程中不斷變化，其物理，化學(xué)和生物參數(shù)都隨時間而變化，是一個不穩(wěn)定的過程。優(yōu)點：操作簡潔；操作引起染菌的概率低。不會產(chǎn)生菌種老化和變異等問題缺點：非生產(chǎn)時間較長、設(shè)備利用率低。補料分批發(fā)酵(Fed-batchfermentation)定義：補料分批發(fā)酵又稱半連續(xù)發(fā)酵或流加分批發(fā)酵，是指在分批發(fā)酵過程中，間歇或連續(xù)地補加穎培育基的發(fā)酵方式。優(yōu)點使發(fā)酵系統(tǒng)中維持很低的基質(zhì)濃度；和連續(xù)發(fā)酵比、不需要嚴格的無菌條件；不會產(chǎn)生菌種老化和變異等問題。缺點存在確定的非生產(chǎn)時間；和分批發(fā)酵比，中途要流加穎培育基，增加了染菌的危急。連續(xù)發(fā)酵(Continuousfermentation)定義：培育基料液連續(xù)輸入發(fā)酵罐，并同時放出含有產(chǎn)品的一樣體積發(fā)酵液，使發(fā)酵罐內(nèi)料液量維持恒定，微生物在近似恒定狀態(tài)〔恒定的基質(zhì)濃度、恒定的產(chǎn)物濃度、恒定的pH、恒定菌體濃度、恒定的比生長速率〕下生長的發(fā)酵方式。優(yōu)點能維持低基質(zhì)濃度；可以提高設(shè)備利用率和單位時間的產(chǎn)量；便于自動把握。缺點菌種發(fā)生變異的可能性較大；要求嚴格的無菌條件。8，依據(jù)產(chǎn)物生成與菌體生長是否同步，可將分批發(fā)酵分為哪兩種類型，并用公式進展表述。這種分類方法對實際生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義第一類型〔生長關(guān)聯(lián)型〕其次類型〔局部生長關(guān)聯(lián)型〕第三類型〔非生長關(guān)聯(lián)型〕9，代謝變化、代謝曲線代謝變化就是反映發(fā)酵過程中菌體的生長，發(fā)酵參數(shù)〔培育基，培育條件等〕和產(chǎn)物形成速率三者間的關(guān)系。把它們隨時間變化的過程繪制成圖，就成為所說的代謝曲線。10，溫度對發(fā)酵過程有何影響？影響各種酶的反響速率和蛋白質(zhì)性質(zhì)，影響發(fā)酵液的物理性質(zhì)，影響生物合成的方向。11，pHpH影響酶的活性，當pHpH影響微生物細胞膜所帶電荷的狀態(tài)，從而轉(zhuǎn)變細胞膜的滲透性，影響微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的吸取及代謝產(chǎn)物的排泄，因此影響代謝的正常進展；pH影響培育基某些組分和中間代謝產(chǎn)物的離解；從而影響微生物對這些物質(zhì)的利用；(4)pH12，簡述發(fā)酵過程中引起pH引起pH下降的因素：碳源過量，消泡油添加過量，生理酸性物質(zhì)的存在。引起pH上升的因素：氮源過多；生理堿性物質(zhì)的存在；中間補料，堿性物質(zhì)添加過多13，發(fā)酵過程中pH調(diào)整根底培育基的配方，調(diào)整碳氮比〔C/N〕，添加緩沖劑，補料把握，直接加酸加堿，補加碳源或氮源。14，發(fā)酵過程中泡沫產(chǎn)生的緣由〔〔發(fā)泡性物質(zhì)。15，發(fā)酵過程中泡沫的產(chǎn)生有何不利的影響降低發(fā)酵設(shè)備的利用率增加了菌群的非均一性增加了染菌的時機導(dǎo)致產(chǎn)物的損失消泡劑會給后提取工序帶來困難16，在發(fā)酵過程中影響泡沫穩(wěn)定性的因素有哪些通氣與攪拌的強度培育基的配比及原材料組成培育基的破壞程度接種量的大小培育液本身性質(zhì)的變化培育基滅菌的方法和操作染菌17，發(fā)酵過程中泡沫把握的方法。物理消沫法化學(xué)消沫法18，化學(xué)消泡的機理。劑，以降低泡沫的機械強曲或參與某些具有強極性的物質(zhì)與發(fā)泡劑爭奪液膜上的空間，降低液膜強度，使泡沫裂開。使液膜的液體流失，導(dǎo)致泡沫裂開。19，發(fā)酵過程中補料把握的目的，所補的物料包括哪些類型，補料的原則及把握策略目的：解除基質(zhì)過濃的抑制；解除產(chǎn)物的反響抑制；解除葡萄糖分解代謝阻遏效應(yīng)類型：補充微生物能源和碳源的需要；補充菌體所需要的氮源；補充微量元素或無機鹽。原則：1，把握微生物的中間代謝，使之向著有利于產(chǎn)物積存的方向進展。2，為實現(xiàn)這一目標，在中間補料把握時，必需選擇恰當?shù)姆错懓盐諈?shù)和補料速率。把握策略：大多數(shù)補料分批發(fā)酵均補加生長限制性基質(zhì)以閱歷數(shù)據(jù)或推想數(shù)據(jù)把握流加；pH、尾氣、溶氧、產(chǎn)物濃度等參數(shù)間接把握流加；以物料平衡方程，通過傳感器在線測定的一些參數(shù)計算限制性基質(zhì)的濃度，間接把握流加；用傳感器直接測定限制性基質(zhì)的濃度，直接把握流加。20，臨界氧濃度臨界氧濃度〔C臨〕：指不影響菌體呼吸所允許的最低氧濃度，或微生物對發(fā)酵液中溶解氧濃度的最低要求。21，請表達發(fā)酵過程中溶解氧的一般變化規(guī)律。發(fā)酵前期：由于微生物大量生殖，需氧量不斷大幅度增加，此時需氧超過供氧，溶氧明顯下降發(fā)酵中后期：溶氧濃度明顯地受工藝把握手段的影響，如補料的數(shù)量、時機和方式等發(fā)酵后期：由于菌體年輕，呼吸減弱，溶氧濃度也會逐步上升，一旦菌體自溶，溶氧就會明顯地上升22，二氧化碳對發(fā)酵的影響及其機理，發(fā)酵過程如何把握二氧化碳CO是微生物的代謝產(chǎn)物，同時也是某些合成代謝的基質(zhì)。它是細胞代謝的重要指標。在發(fā)酵過程中，2CO2CO對菌體具有抑制作用，當排氣中CO24%時，微生物的糖代謝和呼吸速率下降2CO2對發(fā)酵促進。如牛鏈球菌發(fā)酵生產(chǎn)多糖，最重要的發(fā)酵條件是供給的空氣中要含5%CO2對發(fā)酵抑制。如對肌苷、異亮氨酸、組氨酸、抗生素等發(fā)酵的抑制影響發(fā)酵液的酸堿平衡23，發(fā)酵過程的根本自控系統(tǒng)包括哪些前饋把握(feedforwardcontrol)，后〔反〕饋把握(feedbackcontrol)，自適應(yīng)把握(adaptivecontrol)24，發(fā)酵動力學(xué)的定義，爭論發(fā)酵動力學(xué)的目的?；俣鹊挠绊?，并以數(shù)學(xué)，工程學(xué)的原理，定量描述。目的：通過動力學(xué)爭論，優(yōu)化發(fā)酵的工藝條件及調(diào)控方式；〔爭論各種物理，化學(xué)因素的影響，為調(diào)控供給依據(jù)〕建立反響過程的動力學(xué)模型來模擬最適當?shù)墓に嚵鞒毯凸に噮?shù)，推想反響的趨勢；把握發(fā)酵過程，甚至用計算機來進展把握。25，爭論發(fā)酵動力學(xué)方法有哪兩種？宏觀處理法：構(gòu)造動力學(xué)模型〔通過爭論微觀反響機制建立〕非構(gòu)造動力學(xué)模型〔不考慮微觀反響機制，只考慮宏觀變量之間的關(guān)系〕質(zhì)量平衡法〔依據(jù)質(zhì)量守恒定律〕物質(zhì)在系統(tǒng)中的積存速度=物質(zhì)進入系統(tǒng)速度+物質(zhì)在系統(tǒng)中生成的速度-物質(zhì)在系統(tǒng)中排解的速度-物質(zhì)在系統(tǒng)中消耗的速度26，簡述Monod方程與米氏方程的區(qū)分與聯(lián)系。依據(jù)試驗結(jié)果計算Monod方程的參數(shù)Monod〔empiricalmodel〕米氏方程是依據(jù)酶反響盡力推導(dǎo)得出，是機理方程〔mechanisticmodel〕Monod27，恒化器和恒濁器的定義。生長速率，培育液中限制性底物濃度保持恒定。恒濁器：通過把握生長限制性基質(zhì)的流量維持恒定的菌體密度。28，在連續(xù)培育過程中，其實際結(jié)果為何會和理論推導(dǎo)的結(jié)果發(fā)生偏差限制性基質(zhì)為碳源時，局部消耗的碳源作為能量供生命活動，X偏低；N，SDXMg,P,KYX/S復(fù)合培育基時，狀況簡潔，隨著μ變化，限制性基質(zhì)會轉(zhuǎn)變，X下降。29，宏觀產(chǎn)率系數(shù)宏觀產(chǎn)率系數(shù)(或稱得率系數(shù))Yi/j是化學(xué)計量學(xué)中一種格外重要的參數(shù)，常用于對碳源等底物形成菌體或產(chǎn)物的潛力進展評價，其中ijY Y XXXx/sStS S0dx/dt r dx ds/dtrxds0ts30，理論代謝產(chǎn)物產(chǎn)率的計算假設(shè)發(fā)酵過程中完全沒有菌體生成，則YP/S可達理論最高值，稱為理論代謝產(chǎn)物產(chǎn)率31，分批發(fā)酵、補料分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵動力學(xué)方程的推導(dǎo)32，爭論連續(xù)培育動力學(xué)有何用途確定最正確培育條件富集，選育特別外形菌種建立選擇性的培育環(huán)境生長速率不同的菌種在連續(xù)培育中的“去”“留”。第九章厭氧發(fā)酵設(shè)備1、酒精發(fā)酵設(shè)備的根本要求答：1〕滿足酒精發(fā)酵的工藝要求即滿足酒精酵母生長和代謝的必要工藝條件及能將發(fā)酵產(chǎn)生的熱量準時移走有利于發(fā)酵液的排出，設(shè)備的清洗、修理以及設(shè)備制造安裝便利等問題。2、酒精發(fā)酵罐的冷卻裝置有哪三種形式？中小型發(fā)酵罐：多承受罐頂噴水淋于罐外壁外表進展膜狀冷卻；大型發(fā)酵罐：由于罐外壁冷卻面積不能滿足冷卻要求，所以，罐內(nèi)裝有冷卻蛇管或罐內(nèi)蛇管和罐外壁噴灑聯(lián)合冷卻裝置。此外，也有承受罐外列管式噴琳冷卻的方法，此法具有冷卻發(fā)酵液均勻、冷卻效率高等優(yōu)點。3、微生物在厭氧發(fā)酵過程中總的發(fā)酵熱Nnt241答：微生物在厭氧發(fā)酵過程中總的發(fā)酵熱，一般由生物合成熱Q1，蒸發(fā)熱損失Q2，罐壁向四周散失的熱損失Q3Q=Q1-〔Nnt2414、酒精發(fā)酵罐罐數(shù)的計算答：對于間歇發(fā)酵，發(fā)酵罐罐數(shù)可按下式計算：式中 N：發(fā)酵罐個數(shù)〔個〕n：每24小時內(nèi)進展加料的發(fā)酵罐t：發(fā)酵周期〔小時〕5、啤酒圓筒體錐底發(fā)酵罐的優(yōu)缺點答：優(yōu)點：1〕加速發(fā)酵，C.C.T〔圓筒體錐底發(fā)酵罐〕發(fā)酵和傳統(tǒng)發(fā)酵相比，由于發(fā)酵基質(zhì)(麥汁)和酵母對流獲得強化，可加速發(fā)酵。2〕廠房投資節(jié)約。 3〕冷耗節(jié)約。 4〕酵可依靠CIP自動程序清洗消毒，工藝衛(wèi)生更易得到保證。缺點：1〕5～6代)；2〕貯酒時，澄清比較困難(特別在使用非分散性酵母)，過濾必需強化；3〕假設(shè)承受單釀發(fā)酵，罐壁溫度和罐中心溫度全都，一般要5~7d全都第十章通風發(fā)酵設(shè)備1，常用的通風發(fā)酵罐有哪幾種類型答：共五種機械攪拌發(fā)酵罐，氣升式發(fā)酵罐，自吸式發(fā)酵罐，伍式發(fā)酵罐和文氏管發(fā)酵罐。2，械攪拌發(fā)酵罐的根本要求答：1,機發(fā)酵罐應(yīng)具有適宜的徑高比;2發(fā)酵罐能承受確定壓力;3發(fā)酵罐的攪拌通風裝置能使氣液充分混合，保證發(fā)酵液必需的溶解氧;4發(fā)酵罐應(yīng)具有足夠的冷卻面積;5發(fā)酵罐內(nèi)應(yīng)盡量削減死角，避開藏垢積污，滅菌能徹底，避開染菌;6攪拌器的軸封應(yīng)嚴密，盡量削減泄漏。3，機械攪拌發(fā)酵罐的攪拌器的作用和種類答：攪拌器的作用是打碎氣泡，使空氣與溶液均勻接觸，使氧溶解于發(fā)酵液中。攪拌器有軸向式〔槳葉式、螺旋槳式〕和徑向式〔渦輪式〕兩種。4，擋板的作用答：擋板的作用是轉(zhuǎn)變液流的方向，由徑向流改為軸向流，促使液體猛烈翻動，增加溶解氧。5，全擋板條件答：全擋板條件：是指在確定轉(zhuǎn)數(shù)下再增加罐內(nèi)附件而軸功率仍保持不變。要到達全擋板條件必需滿足下式要求：6，消泡器的作用和種類答：消泡器的作用是將泡沫打破。消泡器常用的形式有鋸齒式、梳狀式及孔板式?？装迨降目讖郊s10~200．657，發(fā)酵罐上常用的軸封有哪兩種，比較其優(yōu)缺點答：〔1〕，常用的軸封有填料函和端面軸封兩種。填料函式軸封是由填料箱體，填料底襯套，填料壓蓋和壓緊螺栓等零件構(gòu)成，使旋轉(zhuǎn)軸到達密封的效果。端面式軸封又稱機械軸封。密封作用是靠彈性元件〔彈簧、波浪管等〕的壓力使垂直于軸線的動環(huán)和靜環(huán)光滑外表嚴密地相互貼合，并作相對轉(zhuǎn)動而到達密封?！?〕，填料函式軸封的優(yōu)點是構(gòu)造簡潔。主要缺點是：死角多，很難徹底滅菌，簡潔滲漏及染菌；軸的磨損狀況較嚴峻；填料壓緊后摩擦功率消耗大；壽命短，常常修理，耗工時多。端面式軸封的優(yōu)點：清潔；密封牢靠；無死角，可以防止雜菌污染；使用壽命長；摩擦功率耗損??；軸或軸套不受磨構(gòu)造比填料密封簡潔，裝拆不便；對動環(huán)及靜環(huán)的外表光滑度及平直度要求高。8，機械攪拌發(fā)酵罐的冷卻裝置有哪三種？各適用于什么場合？比較其優(yōu)缺點？答：〔1〕，夾套式換熱裝置這種裝置多應(yīng)用于容積較小的發(fā)酵罐、種子罐；夾套的高度比靜止液面優(yōu)點是：構(gòu)造簡潔；加工簡潔，罐內(nèi)無冷卻設(shè)缺點是：傳熱壁較厚，冷卻水流速低，發(fā)酵時降溫效果差。，豎式蛇管換熱裝置這種裝置是豎式的蛇管分組安裝于發(fā)酵罐內(nèi)，有四組、六組或八組不53以上的發(fā)酵罐多用這種換熱裝置。這種裝置的優(yōu)點是：冷卻水在管內(nèi)的流速大；傳熱系數(shù)高。這種冷卻裝置適用于冷卻用水溫度較低的地區(qū)，水的用量較少。但是氣溫高的地區(qū)，冷卻用水溫度較高，則發(fā)酵時降溫困難，發(fā)酵溫度常常超過40C，影響發(fā)酵產(chǎn)率，因此應(yīng)承受冷凍鹽水或冷凍水冷卻，這樣就增加了設(shè)備投資及生產(chǎn)本錢。此外，彎曲位置比較簡潔蝕穿。，豎式列管(排管)換熱裝置這種裝置是以列管形式分組對稱裝于發(fā)酵罐內(nèi)。其優(yōu)點是：加工便利，適用于氣溫較高，水源充分的地區(qū)。這種裝置的缺點是：傳熱系數(shù)較蛇管低，用水量較大。9，自吸式發(fā)酵罐的充氣原理答：10，氣升式發(fā)酵罐的工作〔充氣〕原理答：自吸式發(fā)酵罐的主要的構(gòu)件是自吸攪拌器及導(dǎo)輪，簡稱為轉(zhuǎn)子及定子。轉(zhuǎn)子由箱底向上升入的主葉輪均為空心形。11，攪拌器的軸功率簡稱軸功率。它不包括機械傳動的摩擦所消耗的功率，因此它不是電動機的軸功率或耗用功率。發(fā)酵罐液體中的溶氧速率以及氣液固相的混合強度與單位體積液體中輸入的攪拌功率有很大關(guān)系。12，影響攪拌器輸入攪拌液體的功率的因素流體的性質(zhì)和擋板的尺寸和數(shù)目。13，功率準數(shù)答：功率準數(shù)表征著機械攪拌所施與單位體積被攪拌液體的外力與單位體積被攪拌液體的慣性之比。N N P單位體積液體所受外力單位體積液體的慣性力/Vma/V式中 ω：渦輪線速度a：加速度V：液體體積m：液體質(zhì)量14，依據(jù)功率準數(shù)所表征的意義推導(dǎo)ND，VD3P0VmVmaVNP0ND，4aD2，aN2DD2rN2PP 0NND24DP0N 3D515，機械攪拌發(fā)酵罐主要由哪三個局部組成及各自的作用裝置：由傳動裝置、攪拌軸、攪拌器組成,由電動機和皮帶傳動驅(qū)動攪拌軸使攪拌器依據(jù)確定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn),以實現(xiàn)攪拌的目的。軸封：為攪拌罐和攪拌軸之間的動密封,以封住罐內(nèi)的流體不致泄漏。罐體：罐體、加熱裝置及附件。它是盛放反響物料和供給傳熱量的部件。第十章通風發(fā)酵設(shè)備15，機械攪拌發(fā)酵罐主要由哪三個局部組成及各自的作用軸封：為攪拌罐和攪拌軸之間的動密封,以封住罐內(nèi)的流體不致泄漏。罐體：罐體、加熱裝置及附件。它是盛放反響物料和供給傳熱量的部件。16，依據(jù)產(chǎn)品的年產(chǎn)量計算所需發(fā)酵罐的數(shù)量，并計算發(fā)酵罐的構(gòu)造尺寸例如，一年產(chǎn)5萬檸檬酸的發(fā)酵廠，發(fā)酵產(chǎn)酸水平平均為14%，提取總收率90%，年生產(chǎn)日期30096每日的產(chǎn)量=50000/300=166.7噸每日所需發(fā)酵液的量=166.7/〔0.14×0.9〕=1322.8米385%則每日所需發(fā)酵罐容積=1322.8/0.85965則所需發(fā)酵罐的總數(shù)=5×6+1=31個V V V2V D2[H 2(h1D)]0 1 2 4 0 b 6HHH 2(hh)0a b17，了解機械攪拌發(fā)酵罐的構(gòu)造好氣性機械攪拌發(fā)酵罐是密封式受壓設(shè)備，主要部件包括：罐身軸封消泡器攪拌器聯(lián)軸器中間軸承擋板空氣分布管換熱裝置人孔以及管路等第十一章發(fā)酵染菌的防治1，何謂“雜菌”？答：所謂“雜菌”，是指在發(fā)酵培育中侵入了有礙生產(chǎn)的其他微生物。2，不同染菌途徑對發(fā)酵的影響答：種子帶菌：種子帶菌可使發(fā)酵染菌具有連續(xù)性空氣帶菌：空氣帶菌也使發(fā)酵染菌具有連續(xù)性，導(dǎo)致染菌范圍擴大至全部發(fā)酵罐〔連續(xù)性，擴大性〕培育基或設(shè)備滅菌不徹底：一般為孤立大事，不具有連續(xù)性設(shè)備滲漏：這種途徑造成染菌的危害性較大3，染菌是如何影響產(chǎn)物提取和產(chǎn)品質(zhì)量的答：對過濾的影響①菌體自溶，發(fā)酵液的粘度加大②由于發(fā)酵不徹底，基質(zhì)的殘留濃度增加造成的后果①過濾時間拉長，影響設(shè)備的周轉(zhuǎn)使用，破壞生產(chǎn)平衡②大幅度降低過濾收率對提取的影響①有機溶劑萃取工藝：染菌的發(fā)酵液含有更多的水溶性蛋白質(zhì)，易發(fā)生乳化，使水相和溶劑相難以分開交換量對產(chǎn)品質(zhì)量的影響①對內(nèi)在質(zhì)量的影響：染菌的發(fā)酵液含有較多的蛋白質(zhì)和其它雜質(zhì)。對產(chǎn)品的純度有較大影響。②對產(chǎn)品外觀的影響：一些染菌的發(fā)酵液經(jīng)處理過濾后得到澄清的發(fā)酵液，放置后會消滅混濁，影響產(chǎn)品的外觀。4，無菌試驗的目的答：①監(jiān)測培育基、發(fā)酵罐及附屬設(shè)備滅菌是否徹底②監(jiān)測發(fā)酵過程中是否有雜菌從外界侵入③了解整個生產(chǎn)過程中是否存在染菌的隱患和死角推斷發(fā)酵是否染菌應(yīng)以無菌試驗結(jié)果為依據(jù)5，雜菌的檢查方法有哪幾種？各種檢查方法的比較？答：目前生產(chǎn)上常用的雜菌檢查方法①顯微鏡檢查：染色——鏡檢②平板劃線檢查：倒平板——空培育——待測樣品劃線——培育觀看③酚紅肉湯培育檢查：無菌肉湯培育基空培育——接入樣品——培育觀看NOTE(其中后兩種為無菌試驗，鏡檢只能作為參考)各種檢查方法的比較顯微鏡檢查優(yōu)：簡便、快速，準時覺察雜菌缺：但由于鏡檢取樣少，視野的觀看面也小，因此不易檢出早期雜菌。平板劃線法和肉湯培育方法優(yōu)：比顯微鏡能檢出更少的雜菌，而且結(jié)果也更為準確缺：需經(jīng)較長時間培育(一般要過夜)才能推斷結(jié)果，且操作較繁瑣6，總?cè)揪蚀穑褐敢荒陜?nèi)發(fā)酵染菌的批次與總投料批次數(shù)之比乘以100得到的百分率7，試從不同染菌規(guī)模分析各自引起染菌的緣由答：大批發(fā)酵罐染菌：空氣系統(tǒng)局部發(fā)酵罐(或罐組)染菌：前期可能是種子帶雜菌，或滅菌不徹底；中后期則可能是中間補料系統(tǒng)或油管路系統(tǒng)發(fā)生問題所造成的每批發(fā)酵的染菌時間向前推移的現(xiàn)象個別發(fā)酵罐偶然染菌：緣由比較簡潔，由于各種染菌途徑都可能引起。8，試從染菌分析染菌的可能緣由有哪幾種？答：從染菌規(guī)模上看大批發(fā)酵罐染菌：空氣系統(tǒng)局部發(fā)酵罐(或罐組)染菌：前期可能是種子帶雜菌，或滅菌不徹底；中后期則可能是中間補料系統(tǒng)或油管路系統(tǒng)發(fā)生問題所造成的每批發(fā)酵的染菌時間向前推移的現(xiàn)象個別發(fā)酵罐偶然染菌：緣由比較簡潔，由于各種染菌途徑都可能引起。從染菌的時間來分析發(fā)酵早期染菌：種子帶菌、培育基和設(shè)備滅菌不徹底、設(shè)備或管道有死角中、后期染菌：中間補料、設(shè)備滲漏、操作不合理從染菌的類型來分析耐熱性芽抱桿菌：死角或滅菌不徹底球菌、酵母：可能是從蒸汽的冷凝水或空氣中帶來的淺綠色菌落(革蘭氏陰性桿菌)：發(fā)酵罐的冷卻管或夾套滲漏〔自來水中大量〕霉菌：滅菌不徹底或無菌操作不嚴格9，種子帶菌的緣由可能有哪幾種答：①無菌室的無菌條件不符合要求②培育基滅菌不徹底③操作不當10，無菌室的根本要求及其所要求的無菌程度答：無菌室的根本要求4—622．6②為了削減外界空氣的侵入，無菌室要有1—3〔無死角〕④室內(nèi)布置應(yīng)盡量簡潔，最好能安裝空氣調(diào)整裝置，通入無菌空氣并調(diào)整室內(nèi)的溫濕度。⑤無菌室的每個套間一般都用紫外線滅菌。無菌室內(nèi)無菌度的要求把無菌培育皿平板翻開蓋子在無菌室內(nèi)放置30分鐘，依據(jù)一般工廠的閱歷，長出的菌落在3個以下為好。11，造成設(shè)備泄漏可能有哪些緣由答：設(shè)備滲漏的緣由①腐蝕發(fā)酵液中腐蝕性物質(zhì)對設(shè)備的腐蝕②磨蝕發(fā)酵液中固體物料因攪拌槳的攪動與冷卻管摩擦而引起管外壁磨損冷卻介質(zhì)和加熱時蒸汽的沖擊，引起管內(nèi)壁的磨損③設(shè)備加工不良彎管時，彎頭處管壁變薄焊接不良12，盤管試漏方法有哪兩種？答：①氣壓試驗：先在發(fā)酵罐內(nèi)放滿清水，用壓縮空氣通入管子，觀看水面有無氣泡產(chǎn)生以確定管子有否滲漏和滲漏的部位。氣壓法快速便利，但管子下部彎曲處積水不易排盡，有漏孔時不產(chǎn)生氣泡就難以覺察。②水壓試驗：用手動泵或試壓齒輪泵將水漸漸壓入冷卻管，泵到確定壓力時，觀看管子有否滲漏現(xiàn)象13，發(fā)酵罐管路的連接方式有哪三種，并對這三種連接方式進展比較稱“由寧”)，接頭平面用石棉橡膠板或橡皮等作墊圈。由于管路受冷熱和震驚的影響，活接頭的接口易松動，使密封面不能嚴密而簡潔造成滲漏。如在接種輸液時，因液體快速流淌造成局部真空，在滲漏處將外界空氣吸入、空氣中的菌就被帶入發(fā)酵罐中而造成危害。所以，重要的管路連接大多承受法蘭連接。②法蘭連接：法蘭連接密封牢靠，壓力、溫度和管徑的適用范圍大，但費用較高。③焊接：焊接的方法比其他方法簡便，而且密封牢靠。所以空氣滅菌系統(tǒng)、培育液滅菌系統(tǒng)和其他物料管路以焊接連接為好。但需常常拆卸的管路則不宜用焊接連接。14，何謂死角答：所謂死角是指滅菌時因某些緣由使滅菌溫度達不到或不易到達的局部地區(qū)。發(fā)酵罐及其管路如有死角存在，則死角內(nèi)埋伏的雜菌不易殺死，會造成連續(xù)染菌，影響生產(chǎn)的正常進展。15，發(fā)酵工廠的管路承受法蘭連接時，如安裝或操作不當有可能會形成哪些死角答：①法蘭與管子焊接時受熱不勻使法蘭翹曲密封面發(fā)生凹凸不平現(xiàn)象就會造成死角②墊片的內(nèi)圓比法蘭內(nèi)徑大或比較小以及安裝時沒有對準中心也會造成死角16，請問以以下圖中的管道連接方式有何不合理之處，為什么？請畫出正確的連接方式閥1的半截上裝設(shè)旁通，焊上一個小的放氣閥，如以以下圖所示，此段管路即可得到蒸汽的充分滅菌。5分，要求適當開放論述，否則酌情扣分〕17，預(yù)防噬菌體感染的措施有哪些答：①發(fā)酵罐的排氣管要用汽封或引入藥液(如高錳酸鉀、漂白粉或石灰水等溶液)槽中。才允許排入下水道〔。③把好種子關(guān)，實現(xiàn)嚴格的無菌操作。④搞好生產(chǎn)場地的環(huán)境衛(wèi)生。車間四周要常常進展檢查，如覺察噬菌體即時用藥液噴灑。NOTE:〔前兩點最重要，及不行把活菌體排入四周環(huán)境〕18，在實際生產(chǎn)過程中，如何從過程檢查結(jié)果分析推斷染菌的緣由，并提出解決的措施。答：分析推斷方法從染菌規(guī)模上看大批發(fā)酵罐染菌：空氣系統(tǒng)局部發(fā)酵罐(或罐組)染菌：前期可能是種子帶雜菌，或滅菌不徹底；中后期則可能是中間補料系統(tǒng)或油管路系統(tǒng)發(fā)生問題所造成的每批發(fā)酵的染菌時間向前推移的現(xiàn)象個別發(fā)酵罐偶然染菌：緣由比較簡潔，由于各種染菌途徑都可能引起。從染菌的時間來分析發(fā)酵早期染菌：種子帶菌、培育基和設(shè)備滅菌不徹底、設(shè)備或管道有死角中、后期染菌：中間補料、設(shè)備滲漏、操作不合理從染菌的類型來分析耐熱性芽抱桿菌：死角或滅菌不徹底球菌、酵母：可能是從蒸汽的冷凝水或空氣中帶來的淺綠色菌落(革蘭氏陰性桿菌)：發(fā)酵罐的冷卻管或夾套滲漏〔自來水中大量〕霉菌：滅菌不徹底或無菌操作不嚴格解決措施總之，消滅染菌狀況后要合理分析，然后一個個排解。對于設(shè)備方面，設(shè)備使用前要先空培育，定期更換空氣過濾器，要著重留意設(shè)備內(nèi)有無死角，管道閥門是否泄露，縮小目標，分段排解；對于操作方面，要對洗罐，接種，取樣等操作嚴格操作。且要定期取樣。交集第十二章下游加工過程1、下游加工過程的定義發(fā)酵產(chǎn)品系通過微生物發(fā)酵過程、酶反響過程或動植物細胞大量培育獲得。從上述發(fā)酵液、反響液或培育液中分別、精制有關(guān)產(chǎn)品的過程稱為下游加工過程(Downstreamprocessing)。它由一些化學(xué)工程的單幾操作組成，但由于生物物質(zhì)的特性，有其特別要求，而且其中某些單元操作一般化學(xué)工業(yè)中應(yīng)用較少。2、下游加工過程的特點培育液(或發(fā)酵液)是簡潔的多相系統(tǒng)，含有細胞、代謝產(chǎn)物和末用完的培育基等。分散在其中的固體和膠狀物質(zhì)，具可壓縮性，其密度又和液體相近，加上粘度很大，屬非牛頓性液體，使從培育液中分別固體很困難。質(zhì)常常伴有大量性質(zhì)相近的雜質(zhì)蛋白質(zhì)。另一個特點是欲提取的生物物質(zhì)通常很不穩(wěn)定、遇熱、極端pH、有機溶劑會引起失活或分解。發(fā)酵或培育都是分批操作、生物變異性大，各批發(fā)酵液不盡一樣，要求下游加工有確定的彈性。3、對一具體發(fā)酵產(chǎn)品，在確定其下游加工工藝時應(yīng)考慮哪些因素1，物理性質(zhì)1〕力學(xué)性質(zhì)：重力、離心力、篩分〔〕熱力學(xué)性質(zhì)：狀態(tài)變化、相平衡3〕傳質(zhì)性質(zhì)：粘度、集中、熱集中〔〕電磁性質(zhì)：電泳、電滲析、磁化；2，化學(xué)性質(zhì)〕化學(xué)熱力學(xué)；化學(xué)平衡〔〕反響動力學(xué)：反響速率〔〕離子化；3，生物學(xué)性質(zhì)1〕分子識別：生物親和作用、生物學(xué)識別〔2〕輸送性質(zhì)：生物膜輸送3〕反響、響應(yīng)、把握：酶反響、免疫系統(tǒng)。4、發(fā)酵產(chǎn)品的下游加工工藝過程可分為哪四個階段發(fā)酵的下游加工過程可以下過程：預(yù)處理和固液分別：目的是除去發(fā)酵液中的菌體細胞和不溶性固體雜質(zhì)。初步分別：目的是除去與產(chǎn)物性質(zhì)差異較大的雜質(zhì)，為后道精制工序制造有利條件。高度純化：去除與產(chǎn)物的物理化學(xué)性質(zhì)比較接近的雜質(zhì)。成品制作：成品形式由產(chǎn)品的最終用途打算。5，發(fā)酵液分散和絮凝的機理分散是在中性鹽作用下，由于雙電層排斥電位的降低，而使膠體體系不穩(wěn)定的現(xiàn)象。絮凝是指在某些高分子絮凝劑存在下，基于架橋作用，使膠粒形成粗大的絮凝團的過程，是一種以物理的集合為主的過程?！し兜氯A(London—Vanderwaals)凝劑存在下，基于架橋作用，使膠粒形成粗大的絮凝團使之更簡潔過濾。6，影響絮凝因素有哪些絮凝效果與絮凝劑的加量、分子量和類型，溶液的pH，攪拌速度和時間等因素有關(guān)。在絮凝過程中，常需參與確定的助凝劑以增加絮凝效果。料液中，絮凝劑濃度增加有助于架橋充分，酶發(fā)酵液的絮凝試驗中，絮凝劑加量對絮凝效果(濾速)的影響如以以下圖所示。適宜的加量通常由試驗得溶液pH如，承受堿式氯化鋁和陰離子聚丙烯酰胺搭配使用的混凝方法處理2709堿性蛋白酶發(fā)酵液，發(fā)酵液pH對陰離子聚丙烯酰胺絮凝效果的影響如以以下圖所示?？梢妏H適當提高能增大濾速，這是由于聚丙烯酰胺分子鏈上的羧基解離程度提高，而使其到達較大的伸展程度，發(fā)揮了最正確的架橋力氣。7，在發(fā)酵工業(yè)中，常用的固液分別設(shè)備有哪幾種類型不同性狀約發(fā)酵液應(yīng)選擇不同的固-液分別設(shè)備。常用于發(fā)酵液的分別設(shè)備有：板框壓濾機、鼓式真空過濾機、離心沉降分別機8，錯流過濾9，微生物細胞裂開的技術(shù)有哪些機械方法:球磨機,高壓勻漿器,X-press非機械方法:酶解,滲透壓沖擊,凍結(jié)和溶化,枯燥法,化學(xué)法.10，如何選擇細胞裂開的方法細胞的數(shù)量；所需要的產(chǎn)物對裂開條件(溫度、化學(xué)試劑、酶等)的敏感性；要到達的裂開程度及裂開所必要的速度，盡可能承受最溫存的方法；具有大規(guī)模應(yīng)用潛力的生化產(chǎn)品應(yīng)選擇適合于放大的裂開技術(shù)。11，鹽析的定義及其機理和優(yōu)缺點定義：在膠體溶液中參與確定量的鹽溶液，會有沉淀析出的現(xiàn)象。原理：在蛋白質(zhì)溶液中加人中性鹽后會壓縮集中雙電層、降低ξ電位，即中性鹽既會使蛋白質(zhì)脫水，又會中和蛋白質(zhì)所帶的電荷，使顆粒間的相互排斥力失去，在布朗運動的相互碰撞下，蛋白質(zhì)分子結(jié)合成聚攏物而沉淀析出。優(yōu)缺點？12，有機溶劑沉淀的原理和優(yōu)缺點原理？優(yōu)點：是某些蛋白質(zhì)沉淀的濃度范圍相當寬，所得產(chǎn)品的純度較高，從沉淀的蛋白質(zhì)中除去有機溶劑很便利，而且有機溶劑本身可局部地作為蛋白質(zhì)的殺菌劑。缺點：是需要耗用大量的溶劑，而溶劑的來源、貯存都比較因難或麻煩，并且沉淀操作需在低溫下進展，使用上有確定的局限性，收率也比鹽析法低。13，等電沉淀的原理和優(yōu)缺點原理：蛋白質(zhì)溶液的pH值等于其pI值時，則溶解度最小。蛋白質(zhì)等電點沉淀法就是基于不同蛋白質(zhì)離子，具有不同等電點的特性，用依次轉(zhuǎn)變?nèi)芤簆H值的方法，將雜蛋白沉淀除去，最終獲得目標產(chǎn)物。在蛋白質(zhì)疏水性比較大和結(jié)合水比較小時這種類型的沉淀更有效。缺點：這個技術(shù)的最大缺點是無機酸會引起較大的蛋白質(zhì)不行逆變性的危急。14，吸附法的原理、優(yōu)缺點，吸附的類型原理：吸附法是利用吸附劑與雜質(zhì)、色素物質(zhì)、有毒物質(zhì)、產(chǎn)品之間分子引力的差異，從而起到分別的作用。優(yōu)點：可不用或少用有機溶劑；操作簡便、安全、設(shè)備簡潔；生產(chǎn)過程中pH變化小，適用于穩(wěn)定性較差的生化物質(zhì)。缺點：可不用或少用有機溶劑；操作簡便、安全、設(shè)備簡潔；生產(chǎn)過程中pH變化小，適用于穩(wěn)定性較差的生化物質(zhì)。類型：交換吸附：吸附劑外表如為極性分子或離子所組成則它會吸引溶液中帶相反電荷的離子而形成雙電層。這種吸附又稱為極性吸附。15，影響吸附過程的因素有哪些吸附劑的性質(zhì)；吸附物的性質(zhì)；溶液pH值的影響；溫度的影響；其它組分的影響20，膜的清洗方法有哪兩種①機械方法：加海綿球，增大流速，逆洗(對中空纖維超濾器)，脈沖流淌，超聲波等。②化學(xué)方法用起溶解作用的物質(zhì)，如：酸、堿、酶(蛋白酶)，螯合劑，外表活性劑。用起切斷離子結(jié)合作用的方法，如轉(zhuǎn)變離子強度、pH、電位。起氧化作用的物質(zhì)，如過氧化氫、次氯酸鹽。用起滲透作用的物質(zhì)，如磷酸鹽、聚磷酸鹽21，納濾的特點納濾〔Nanofilitration，NF〕2090膜和超濾膜之間，為200～2023；另一個是納濾膜對無機鹽有確定的截流率，由于它的外表分別層由聚電介質(zhì)所構(gòu)成，對離子有靜電相互作用。從構(gòu)造上看納濾膜大多是復(fù)合型膜，即膜的外表分別層和1nm左右的微孔構(gòu)造納濾技術(shù)的特點：①膜構(gòu)造絕大多數(shù)是多層疏松構(gòu)造；②分別過程無任何化學(xué)反響，無需加熱，無相轉(zhuǎn)變，不會破壞生活活性，不會轉(zhuǎn)變風味、香味。22，反滲透什么是反滲透?反滲透是60年月進展起來的一項的膜分別技術(shù),是依靠反滲透膜在壓力下使溶液中的溶劑與溶質(zhì)進展分別的過程.反滲透的英文全名是“REVERSEOSMOSIS”,縮寫為“RO”.反滲透的原理:首先要了解“滲透”的概念.滲透是一種物理現(xiàn)象.當兩種含有不同鹽類的水,如用一張半滲透性的薄膜分開就會覺察,含鹽量少的一邊的水分會透過膜滲到含鹽量高的水中,而所含的鹽分并不滲透,這樣,漸漸把兩邊的含鹽濃度融合到均等為止.然而,要完成這一過程需要很長時間,這一過程也稱為滲透壓力.但假設(shè)在含鹽量高的水側(cè),試加一個壓力,其結(jié)果也可以使上述滲透停頓,這時的壓力稱為滲透壓力.假設(shè)壓力再加大,可以使方向相反方向滲透,而鹽分剩下.因此,反滲透除鹽原理,就是在有鹽分的水中(如原水),施以比自然滲透壓力更大的壓力,使?jié)B透向相反方向進展,把原水中的水分子壓力到膜的另一邊,變成干凈的水,從而到達除去水中雜質(zhì)、鹽分的目的.23，萃取的安排定律在恒溫恒壓的條件下，一種物質(zhì)在兩種成相的溶劑〔A與B，或上相與下相〕的安排濃度之比是一常數(shù)，該常數(shù)稱為安排系數(shù)K。上相〔A〕中溶質(zhì)的濃度下相〔B〕中溶質(zhì)的濃度

CA KCB24，兩水相及其優(yōu)點雙水相系統(tǒng)是指某些高聚物之間或高聚物與無機鹽之間在水中以適當?shù)臐舛热芙鈺纬苫ルp水相萃取的優(yōu)點易于放大；雙水相系統(tǒng)之間的傳質(zhì)過程和平衡過程快速,因此能耗較小,可以實現(xiàn)快速分別；易于進展連續(xù)化操作；相分別過程溫存,生化分子如酶不易受到破壞；選擇性高、收率高；操作條件溫存。25，超臨界流體萃取的原理，其典型流程包括哪三種類型原理臨界溫度(Tc)：當氣體的溫度高于某一數(shù)值時，任何壓縮都不能使它變?yōu)橐后w。臨界壓力Pc：在臨界溫度下，氣體能被液化的最低壓力。超臨界狀態(tài)：當物質(zhì)所處的溫度高于臨界溫度、壓力大于臨界壓力時Tc和臨界壓力Pc象：壓力和溫度的微小變化都會引起氣體密度的很大變化。隨著向超臨界氣體加壓，氣體密度增大到達液態(tài)性質(zhì)，這種狀態(tài)的流體稱為超臨界流體。其性質(zhì)介于氣體和液體之間。超臨界萃?。菏褂贸R界流體作為溶劑的萃取方法，就稱為超臨界萃取。超臨界流體萃取的流程可分為：等溫變壓法；等壓變溫法；吸附法。第十三章固定化細胞發(fā)酵1，固定化細胞的定義、優(yōu)缺點、分類答：固定化細胞就是被限制自由移動的細胞，既細胞受到物理化學(xué)等因素約束或限制在確定的空間界限內(nèi)，但細胞仍保存催化活性并具備能被反復(fù)或連續(xù)使用的活力。是在酶固定化根底上進展起來的一項技術(shù)。固定化細胞的優(yōu)點：1〕，與游離細胞相比固定化細胞可以將微生物發(fā)酵改為連續(xù)酶反響可以獲得更高的細胞濃度；細胞可以重復(fù)使用；在高稀釋率時，不會產(chǎn)生洗脫現(xiàn)象；單位容積的產(chǎn)率高；提高遺傳穩(wěn)定性；細胞不會受到剪切效應(yīng)的影響。發(fā)酵液中菌體含量少，有利與產(chǎn)品的分別純化。2〕，與固定化酶相比免去了裂開細胞提取酶的手續(xù)酶在細胞內(nèi)的穩(wěn)定性較高，完整細胞固定化后酶活性損失少固定化細胞制備的本錢比固定化酶低無需輔酶再生固定化細胞的缺點：僅能利用胞內(nèi)酶； 細胞膜、細胞壁和載體都存在著集中限制作用；載體形成的孔隙大小影響高分子底物的通透性；可能有副反響。固定化細胞的分類 1〕，按細胞類型分為三類：微生物，動物，植物 2〕，按生理狀態(tài)分為兩大類死細胞：完整細胞、細胞碎片、細胞器。適用于一種酶催化的反響?；罴毎涸鲋臣毎㈧o止細胞、饑餓細胞。適用于多酶反響，特別是需要輔酶的反響。2，細胞固定化的方法及其比較Adsorption〔吸附〕covalentbonding〔共價結(jié)合〕Crosslinking〔交聯(lián)〕Entrapment〔包埋〕、Encapsulation〔微膠囊〕固定化方法的比較：1，吸附法：條件溫存、方法簡便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。2，共價法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細胞的破壞。3，交聯(lián)法：可得到高細胞濃度，但機械強度低，無法再生，不適于實際應(yīng)用。4，包埋法：細胞和載體間沒有束縛，固定化后，細胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。3，固定化細胞反響器的優(yōu)點，主要有哪些類型 答在固定化細胞反響器中承受高稀釋率有以下優(yōu)點：生產(chǎn)強度、轉(zhuǎn)化率高；與衡化器相比，固定化細胞反響器具有更好的穩(wěn)定性；節(jié)約投資和能耗。固定化細胞反響器的類型細胞再循環(huán)系統(tǒng)〔Cellrecyclesystems〕填充床反響器〔Fixedbedreactors〕流化床反響器〔Fluidizedbedreactors〕絮凝細胞系統(tǒng)〔Flocculatedcellsystems〕第十四章基因工程菌發(fā)酵1，基因工程基因工程是指在基因水平上，承受與工程設(shè)計格外類似的方法，依據(jù)人們的意愿，主要是在體外進展基因切割、拼接和重組合，再轉(zhuǎn)入生物體內(nèi)，產(chǎn)生出人們所期望的產(chǎn)物，或制造出具有的遺傳特征的生物類型，并能使之穩(wěn)定地遺傳給后代?；蚬こ痰暮诵募夹g(shù)是DNA4取得符合人們要求的DNA片段，這種DNA片段被稱為“目的基因”；將目的基因與質(zhì)?；虿《綝NA連接成重組DNA；把重組DNA把目的基因能表達的受體細胞選擇2，如何獲得一個工程菌確定目的產(chǎn)物。找出產(chǎn)該產(chǎn)物的細胞。將細胞裂開后提純出全部信使RNA。這些信使中包含了該細胞內(nèi)表達的全部蛋白質(zhì)的合成信息。利用基因擴增技術(shù)〔PCR〕，找出所需的目的基因。將目的基因連接到設(shè)計好的質(zhì)粒載體，形成了重組DNA分子。將重組后DNA記，從菌落中篩選出目的基因的重組(工程)菌。3，一個可用于工業(yè)化生產(chǎn)的工程菌必需符合哪些要求發(fā)酵產(chǎn)品是高濃度、高轉(zhuǎn)化率和高產(chǎn)率的，同時是分泌型菌株。菌株能利用常用的碳源，并可進展連續(xù)發(fā)酵。菌株不是致病株，也不產(chǎn)內(nèi)毒素。代謝把握簡潔進展。能進展適當?shù)腄NA重組，并且穩(wěn)定，重組的DNA4，物理密封、生物學(xué)密封物理密封是將重組菌封閉于設(shè)備內(nèi)，以防止傳染給試驗人員和向外界集中。試驗規(guī)模在20L以下時，物理密封由密封設(shè)施、試驗室設(shè)計和試驗留意事項組成。密封程度分為P1、P2、P3P4生物學(xué)密封載體，通過這樣組合的宿主載體系統(tǒng)，可以防止重組菌向外集中。按密封程度分B1和B2級，B25，和自然細胞培育過程相比，工程菌的