DB4117T 321-2021動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制指南

ICS65.020.99CCSB40[JB4117市地方標(biāo)準(zhǔn)DB4117/T321—2021動(dòng)物病原微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制指南2021-10-29實(shí)施20212021-10-29實(shí)施駐馬店市市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB4117/T321DB4117/T321—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由駐馬店市畜牧局提岀。本文件歸口于駐馬店市畜牧獸醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會。本文件起草單位：駐馬店市獸藥飼料（動(dòng)物產(chǎn)品）質(zhì)量檢驗(yàn)監(jiān)測中心、新蔡縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)、濟(jì)源市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、許昌市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、安陽市殷都區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所、許昌市建安區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、鄢陵縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、西平縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、泌陽縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所、上蔡縣臥龍街道辦事處社區(qū)服務(wù)中心、上蔡縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、泌陽縣獸藥飼料監(jiān)督監(jiān)察所、泌陽縣獸藥械服務(wù)中心、駐馬店市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、焦作市中站區(qū)府城街道辦事處、遂平縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所、濟(jì)源市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測檢驗(yàn)中心、上蔡縣家畜改良站、駐馬店市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、正陽縣獸藥飼料質(zhì)量檢驗(yàn)監(jiān)測中心、驛城區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所、武陟縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所。本文件主要起草人：馬寧、黃志偉、袁奎超、蔣歡、葛會杰、戚學(xué)洲、曹世杰、鄭麗敏、翟素穎、王永剛、侯明陽、胡紅偉、李榮玲、劉輝、陳玉霞、胡芬芬、王旺、郝佳、王亦欣、劉苗苗、張冬艷、張留賓、鄭豐、常清華、孫政豪、張艷紅、王雙林。本文件為首次發(fā)布。DB4117/T321DB4117/T321—2021#f）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在操作動(dòng)物病原微生物樣本的實(shí)驗(yàn)間內(nèi)配備生物安全柜。5.2.2通風(fēng)空調(diào)實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)要求如下：a） 實(shí)驗(yàn)室可利用自然通風(fēng)。如果采用機(jī)械通風(fēng)，應(yīng)避免交叉污染。b） 若操作有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì)，應(yīng)配備適當(dāng)?shù)呢?fù)壓排風(fēng)柜。c） 應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計(jì)要求安裝和使用生物安全柜，如果生物安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件；如果使用管道排風(fēng)的生物安全柜，應(yīng)通過獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排岀。5.2.3供水供電實(shí)驗(yàn)室供水供電要求如下：a） 供水和排水管道應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計(jì)。b） 應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)。必要時(shí)，重要設(shè)備（如：培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等）應(yīng)配置備用電源。5.3實(shí)驗(yàn)室區(qū)域控制5.3.1微生物實(shí)驗(yàn)室需具備污染區(qū)和潔凈區(qū)，污染區(qū)及潔凈區(qū)需分開，并應(yīng)達(dá)到BSL-2實(shí)驗(yàn)室基本要求。建立環(huán)境清潔制度，包括地面、墻裙、頂面、門窗、紗窗及通風(fēng)排氣網(wǎng)罩等應(yīng)定期進(jìn)行清潔；預(yù)防積塵等造成污染。3.2污染區(qū)空氣潔凈度應(yīng)滿足ISO8級（潔凈度D級），其中，浮游菌應(yīng)不超過200cfu/m3,沉降菌應(yīng)不超過100cfu/4小時(shí)（690mm），表面微生物應(yīng)不超過50cfu/碟（655mm）;溫度為20°C?26°C；相對濕度30%?65%；噪音W75分貝；照度N300勒克斯。5.3.3潔凈區(qū)空氣潔凈度應(yīng)滿足ISO5級（潔凈度B級），其中，浮游菌應(yīng)不超過10cfu/m3,沉降菌應(yīng)不超過5cfu/4小時(shí)（090mm），表面微生物應(yīng)不超過5cfu/碟（655mm）;溫度為20°C?26°C:相對濕度30%?70%；噪音W75分貝；照度N300勒克斯。5.3.4生物安全柜錯(cuò)凈度應(yīng)滿足ISO4.8級（潔凈度A級），其中，浮游菌應(yīng)不超過1cfu//,沉降菌應(yīng)不超過1cfu/4小時(shí)（690nmT,字面微生物應(yīng)不超過1cfu/碟（655mm）;溫度為20°C?25°C；相對濕度30%?60%；噪音W75分貝；照度N500勒克斯。5.4實(shí)驗(yàn)室空氣控制4.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝紫外線燈或臭氧發(fā)生器等消毒設(shè)施設(shè)備,定期對微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行滅菌消毒處理,并建立消毒驗(yàn)證方法，對紫外線輻射強(qiáng)度、臭氧濃度進(jìn)行定期監(jiān)控，以確保滅菌、消毒效果。4.2實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)設(shè)施能力應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室功能要求相適應(yīng)。當(dāng)發(fā)生微生物、化學(xué)品污染物聚集達(dá)到不安全濃度或?qū)嶒?yàn)室有缺氧風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，應(yīng)有充足的通風(fēng)抽排設(shè)施以確?？葱У嘏懦蛱幚?。5.5實(shí)驗(yàn)用水控制5.5.1實(shí)驗(yàn)室用水需達(dá)到無菌條件。5.5.2制定實(shí)驗(yàn)室制水系統(tǒng)（超純水、蒸餡水）的微生物控制程序，規(guī)定清潔維護(hù)、消毒的頻次及方法要求，確保充分考慮到不同季節(jié)波動(dòng)等情況；水質(zhì)處理設(shè)備應(yīng)定期維護(hù)并記錄；應(yīng)定期監(jiān)測并在停用重新啟用時(shí)必須進(jìn)行相應(yīng)處理并監(jiān)測合格。5.5.3盡量縮短制備好的水的存儲時(shí)間，根據(jù)實(shí)際情況，自主選用定期加熱處理后的水、使用臭氧氧化或加裝紫外燈照射等措施消毒控制微生物的滋生。5.6微生物保存控制5.6.1應(yīng)當(dāng)制定嚴(yán)格的安全保管制度，做好微生物菌種和樣本進(jìn)岀和儲存的記錄、建立檔案制度、并制定專人負(fù)責(zé)。5.6.2微生物菌種保存期間，要定期檢查菌種存放設(shè)施的溫度和濕度、菌株有無污染，如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)重新移植培養(yǎng)后更換。5.7實(shí)驗(yàn)室安防控制實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置安防措施，避免無授權(quán)人員進(jìn)入，如門禁系統(tǒng)。安防系統(tǒng)設(shè)計(jì)應(yīng)優(yōu)先考慮消防、應(yīng)急要求。5.8實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志控制實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)活動(dòng)類型設(shè)置相應(yīng)安全標(biāo)志，包括：化學(xué)品作業(yè)場所安全警示標(biāo)志、生物安全警示標(biāo)志、氣瓶標(biāo)志等。緊急通道和岀入口應(yīng)設(shè)置醒目標(biāo)志。6環(huán)境監(jiān)測6.1環(huán)境空氣微生物1.1 細(xì)菌總數(shù)監(jiān)測：沉降菌監(jiān)測采用自然沉降法，浮游菌監(jiān)測撞擊法采樣，營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基技術(shù)的方法測定微生物實(shí)驗(yàn)室中空氣中的細(xì)菌總數(shù),具體操作按照GB/T18204.3執(zhí)行。6.1.2真菌總數(shù)監(jiān)測：沉降菌監(jiān)測采用自然沉降法，浮游菌監(jiān)測撞擊法采樣，沙氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)技術(shù)的方法測定實(shí)驗(yàn)室空氣中的真菌總數(shù)，具體操作按照GB/T18204.3執(zhí)行。6.1.3 溶血性鏈球菌監(jiān)測：采用撞擊法采樣、血瓊脂培養(yǎng)基計(jì)數(shù)的方法測定實(shí)驗(yàn)室空氣中的溶血性鏈球菌，具體操1'靈照砸夕18204.3執(zhí)行。6.1.4嗜肺軍團(tuán)菌監(jiān)測：采用液體沖擊法采樣、培養(yǎng)法定性測定公共場所空氣中的嗜肺軍團(tuán)菌，具體操作按照GB/T18204.3執(zhí)行。6.2實(shí)驗(yàn)用水微生物2.1菌落總數(shù)監(jiān)測：以無菌操作方法用滅菌吸管吸取待測25mL充分混勻的水樣，進(jìn)行梯度稀釋后，注入無菌培養(yǎng)皿中，通過平板計(jì)數(shù)法對待測水樣培養(yǎng)后測量菌落數(shù)，具體操作按照GB4789.2執(zhí)行。6.2.2霉菌總數(shù)監(jiān)測：通過平板計(jì)數(shù)法對待測水樣培養(yǎng)后価最菌落數(shù)，或通過直接鏡檢計(jì)數(shù)法測量，具體操作按照GB4789.15執(zhí)行。6.2.3大腸菌群監(jiān)測：通過大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法通過培養(yǎng)觀察產(chǎn)期情況統(tǒng)狀腸菌群，或通過大腸菌群平板計(jì)數(shù)法測量，具體操作按照GB4789.3執(zhí)行。2.4金黃色葡萄球菌監(jiān)測：進(jìn)行金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)，通過Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法或金黃色葡萄球菌MPN法進(jìn)行計(jì)數(shù)測量，具體操作按照GB4789.10執(zhí)行。6.2.5乳酸菌監(jiān)測：本標(biāo)準(zhǔn)中的乳酸菌主要為乳桿菌屬、雙歧桿菌屬和鏈球菌屬，使用不同的培養(yǎng)基進(jìn)行平板計(jì)數(shù)，進(jìn)行乳酸菌總數(shù)計(jì)數(shù)、雙擊桿菌計(jì)數(shù)、嗜熱鏈球菌計(jì)數(shù)及乳桿菌計(jì)數(shù)，具體操作按照GB4789.35執(zhí)行。DB4117/T321DB4117/T321—20216.2.6沙門氏菌監(jiān)測：具體操作按照GB4789.4執(zhí)行。6.3表面微生物可使用接觸采樣或拭子采樣對表面微生物進(jìn)行監(jiān)測，具體操作按照GB/T25916.1中附錄C執(zhí)行。不同菌種檢測方法參照本文件6.1和6.2進(jìn)行。7偏移控制如果監(jiān)測結(jié)果表明，設(shè)施或環(huán)境條件已發(fā)生偏移，應(yīng)停止檢驗(yàn)工作，對此期間岀具的檢驗(yàn)檢測數(shù)據(jù)的有效性應(yīng)作岀分析和判斷處理。及時(shí)采取有效措施，在記錄或報(bào)告中說明，待調(diào)整滿足要求后方可繼續(xù)。8記錄8.1實(shí)驗(yàn)室建立并保留的實(shí)驗(yàn)檔案應(yīng)當(dāng)如實(shí)記錄與環(huán)境相關(guān)的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)和設(shè)施工作狀態(tài)情況，以及實(shí)驗(yàn)活動(dòng)產(chǎn)生的廢水、廢氣和危險(xiǎn)廢物無害化處理、集中處置以及檢驗(yàn)的情況。8.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立用于識別、