蛋白質(zhì)化學(xué)中職生物化學(xué)

蛋白質(zhì)化學(xué)中職生物化學(xué)第一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二

認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)十八世紀(jì)，人們根據(jù)物質(zhì)受熱后的性質(zhì)變化，將物質(zhì)分為二類，一是受熱后其性質(zhì)保持不變的，稱為無機(jī)物（如金屬、鹽類、水等）；另一類受熱后發(fā)生質(zhì)的變化，因其大部分直接或間接來自有機(jī)體，故稱為有機(jī)物。1777年，法國化學(xué)家馬凱（MacquerP.J.）將加熱后能凝固的物質(zhì)稱為“蛋白性物質(zhì)”。十九世紀(jì)三十年代，荷蘭生理學(xué)家米勒（MüllerG.J.）用元素分析法對血清、蛋清、蠶絲等進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，它們的元素組成都很相似，可用化學(xué)式C40H62N10O12來表示。而且，他發(fā)現(xiàn)可用此化學(xué)式表示的物質(zhì)在生物體中無所不在，認(rèn)為這種物質(zhì)對生物體是最重要的，于是命名為proteid。同時(shí)，瑞典化學(xué)家柏齊力烏斯（Berzelius）稱之為protein，此詞來自希臘語，意思是“最重要的”、“第一位的”。這就是我們中國人所稱之為的蛋白質(zhì)。第三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二蛋白質(zhì)在生命中的重要性

恩格斯曾指出：“生命是蛋白體存在的一種形式，這種存在方式本質(zhì)上就在于這些蛋白體的化學(xué)組成部分的不斷的自我更新?！?/p>

第一，蛋白體是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)；第二，生命是物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的特殊形式，是蛋白體的存在方式；第三，這種存在方式的本質(zhì)就是蛋白體與其外部自然界不斷的新陳代謝。第四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二Nat.CellBiol.：英國發(fā)現(xiàn)“餓死”癌細(xì)胞方法研究人員發(fā)現(xiàn)一種名為NF－kB的蛋白質(zhì)控制著其能量供應(yīng)方式的轉(zhuǎn)換，如果抑制這種蛋白質(zhì)的功能，癌細(xì)胞就不能按需轉(zhuǎn)換能量供應(yīng)方式，會(huì)進(jìn)入能量供應(yīng)不足的狀態(tài)甚至“餓死”。第五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二Firefliesemitlightcatalyzedbyluciferase（熒光素酶）withATP第六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二Erythrocytes（紅細(xì)胞）containalargeamountofhemoglobins（血紅蛋白）,theoxygen-transportingprotein.第七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二Theproteinkeratin（角蛋白）isthechiefstructuralcomponentsofhair,horn,wool,nailsandfeathers.第八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二什么是蛋白質(zhì)？蛋白質(zhì)是一切生物體中普遍存在的，由20種左右天然α-氨基酸通過肽鍵相連形成的高分子含氮化合物；其種類繁多，具有一定的相對分子量、復(fù)雜分子結(jié)構(gòu)和特定生物學(xué)功能；是表達(dá)生物遺傳形狀的一類主要物質(zhì)。第九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二

一、蛋白質(zhì)的元素組成

二、氨基酸—蛋白質(zhì)的基本組成單位第一節(jié)、蛋白質(zhì)的化學(xué)組成第十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二一、蛋白質(zhì)的元素組成第十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二蛋白氮占生物組織所有含氮物質(zhì)的絕大部分。蛋白質(zhì)含氮量恒定，大多數(shù)蛋白質(zhì)含氮量接近于16%蛋白質(zhì)含量=每克樣品中含氮的克數(shù)6.25凱氏定氮法第十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二——蛋白質(zhì)的基本組成單位二、氨基酸AminoAcid(AA)*

氨基酸的結(jié)構(gòu)

氨基酸的分類

稀有氨基酸

非蛋白質(zhì)氨基酸氨基酸的性質(zhì)第十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二蛋白質(zhì)和多肽可被催化水解蛋白質(zhì)——月示——胨——多肽——肽——AA1*1045*1032*1031000200100酸/堿能將蛋白完全水解得到各種AA的混合物酶水解一般是部分水解得到多肽片段和AA的混合物氨基酸是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位1、蛋白質(zhì)的水解第十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二2、氨基酸的結(jié)構(gòu)自然界氨基酸有300種，蛋白質(zhì)氨基酸有20種，構(gòu)成蛋白質(zhì)的AA都是L-構(gòu)型，天然AA都是α-AA。α-氨基酸結(jié)構(gòu)通式第十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二什么是α-氨基酸？----C-C-C-C-COOH

γβα----C-C-C-C(NH2)-COOHα-氨基酸氨基和羧基均與α碳原子相連第十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二3、氨基酸的分類（1）中性氨基酸（1—NH2，1—COOH）a.脂肪族氨基酸甘氨酸丙氨酸纈氨酸亮氨酸異亮氨酸第十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二b.含羥基或硫氨基酸絲氨酸半胱氨酸蘇氨酸甲硫（蛋）氨酸巰基甲硫基第十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二胱氨酸半胱氨酸第十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第二十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二c.芳香族氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸酚基吲哚基第二十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二d.環(huán)狀亞氨基酸脯氨酸吡咯環(huán)第二十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（2）酸性氨基酸及其酰胺（1—NH2，2—COOH）天冬氨酸谷氨酸天冬酰胺谷氨酰胺酰胺基第二十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（3）堿性氨基酸（2—NH2，1—COOH）賴氨酸精氨酸組氨酸呱基咪唑基第二十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二

人體所需的八種必需氨基酸

賴氨酸(Lys)，纈氨酸(Val)，蛋氨酸(Met)

色氨酸(Trp)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile)

蘇氨酸(Thr)，苯丙氨酸(Phe)必需氨基酸賴色苯丙蛋，蘇纈異亮亮第二十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第二節(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)第二十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)指組成蛋白質(zhì)分子的多肽鏈中AA的排列順序。從左到右：N端→C端。AA-NH2與另一AA-COOH間失水形成的酰胺鍵稱肽鍵，所形成的化合物稱肽。酰胺鍵—肽鍵穩(wěn)定一級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵第二十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二由兩個(gè)AA組成的肽稱為二肽。由多個(gè)AA組成的肽則稱為多肽。組成多肽的AA單元稱為氨基酸殘基。N-端C-端第二十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第二十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二N末端C末端牛核糖核酸酶第三十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二谷胱甘肽(glutathione,GSH)結(jié)構(gòu):三肽谷氨酸的-羧基形成肽鍵－SH為活性基團(tuán)為酸性肽是體內(nèi)重要的還原劑第三十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二GSH過氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSG

GSH還原酶NADPH+H+NADP+主要功能:第三十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ)。第三十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)肽鍵的空間結(jié)構(gòu)肽鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。第三十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二肽鍵具有平面性，組成肽鍵的4個(gè)原子和2個(gè)Cα（—Cα—CO—NH—Cα）幾乎處在同一平面內(nèi)（酰胺平面、肽平面）。第三十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二1、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)指組成蛋白質(zhì)的多肽鏈的主鏈骨架以肽鍵平面為單位進(jìn)行卷曲、折疊而形成的特定的空間結(jié)構(gòu)。主要次級(jí)鍵：氫鍵。主要有-螺旋、-折疊、-轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲。第三十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（一）-螺旋（-helix）第三十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二-螺旋的結(jié)構(gòu)要點(diǎn)★1、順時(shí)針方向，為右手螺旋2、肽平面鍵長鍵角一定3、肽鍵的原子排列呈反式構(gòu)型第三十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二4、相鄰肽平面構(gòu)成二面角第三十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二5、螺旋參數(shù)每圈含3.6個(gè)AA殘基，螺距5.4nm，每個(gè)AA殘基占1.5nm，繞軸旋轉(zhuǎn)100°。6、肽鏈內(nèi)形成氫鍵每個(gè)肽鍵的羰基氧和第四個(gè)肽鍵的亞氨氫形成的氫鍵保持螺旋穩(wěn)定。氫鍵與螺旋長軸基本平行。第四十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二①R基大?、赗基的電荷性質(zhì)③Pro影響-螺旋形成的因素第四十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二由兩/多條幾乎完全伸展的肽鏈平行排列，通過鏈間的氫鍵交聯(lián)而形成,也可以在同一肽鏈的不同部分之間形成?！?/p>

（二）-折疊第四十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二

①C總是處于折疊的角上。②AA的R基團(tuán)處于折疊的棱角上（上方或下方）并與之垂直。③肽鏈相當(dāng)伸展，肽鏈平面之間折疊成鋸齒狀，相鄰肽鍵平面間呈110。角。④有平行和反平行之分，氫鍵主要在鏈間/同一肽鏈不同部分間形成，氫鍵與鏈的長軸接近垂直。⑤肽鏈從N-端到C-端走向。-折疊結(jié)構(gòu)特點(diǎn)第四十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第四十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第四十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二-角蛋白第四十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二絲蛋白的結(jié)構(gòu)第四十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（三）-轉(zhuǎn)角1、β轉(zhuǎn)角（βturn/bend/hairpinstructure）肽鏈主鏈骨架180°的回折結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：由4個(gè)連續(xù)的AA殘基組成第一個(gè)AA殘基C=O第四個(gè)AA殘基N—H形成氫鍵第四十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二主要存在于球狀蛋白分子中多數(shù)處在蛋白質(zhì)分子的表面-轉(zhuǎn)角處常為脯氨酸，脯氨酸的N上缺少H，不能形成氫鍵，經(jīng)常出現(xiàn)在α-螺旋的端頭，改變多肽鏈的方向并終止螺旋第四十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二沒有確定規(guī)律性部分的肽鏈構(gòu)象，肽鏈中肽鍵平面不規(guī)則排列，屬于松散的無規(guī)卷曲（四）無規(guī)卷曲第五十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二——指多肽鏈在一級(jí)、二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，肽鏈的不同區(qū)段的側(cè)鏈基團(tuán)相互作用再進(jìn)行三維多向性盤曲形成近似球狀的構(gòu)象。

維系力:氫鍵/疏水鍵/離子鍵/范德華力，主要是疏水鍵只有一條肽鏈的蛋白質(zhì)最高結(jié)構(gòu)形式是三級(jí)結(jié)構(gòu)，必須具備三級(jí)結(jié)構(gòu)才有生物學(xué)功能。2、蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)第五十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第五十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二蝦紅素

第五十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二木瓜蛋白酶

組織蛋白酶第五十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二★球狀蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)主要特征：1、含多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元2、緊密的球狀或橢球狀實(shí)體3、疏水基團(tuán)在內(nèi)；親水基團(tuán)在外4、分子表面內(nèi)陷形成凹穴第五十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二3、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)——指由兩條或兩條以上的具有三維結(jié)構(gòu)的多肽鏈相互締合而成的特定的空間構(gòu)象。

亞基：球狀蛋白質(zhì)分子中具有一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈。寡聚蛋白質(zhì)：由兩個(gè)及以上亞基構(gòu)成的蛋白質(zhì)。亞基數(shù)目及排布、亞基之間的作用維系力：非共價(jià)鍵（疏水鍵、離子鍵、氫鍵、范德華力等）第五十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二血紅蛋白四級(jí)結(jié)構(gòu)示意圖第五十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二總結(jié)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)一級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu)四級(jí)結(jié)構(gòu)定義指蛋白質(zhì)多肽鏈中的AA排列順序組成蛋白質(zhì)的多肽鏈盤繞和折疊的方式多肽鏈在一級(jí)、二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，再進(jìn)行三維多向性盤曲形成近似球狀的構(gòu)象。兩條或兩條以上的具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈相互締合而成的特定的空間構(gòu)象表現(xiàn)形式多肽α-螺旋，β-折疊，β-轉(zhuǎn)角等球狀蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)特征亞基，寡聚蛋白化學(xué)鍵肽鍵（主要）二硫鍵氫鍵疏水鍵、離子鍵、范德華力、氫鍵疏水鍵（主要）、離子鍵、氫鍵第五十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第五十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第三節(jié)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系第六十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二同源蛋白質(zhì)：來自不同生物體、執(zhí)行同一/相似功能的蛋白質(zhì)

結(jié)構(gòu)基本相同，差異可能僅表現(xiàn)其種數(shù)特異性

例：胰島素一、一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（一）同源蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中AA順序的變化反映了種數(shù)差異與物種進(jìn)化第六十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二胰島素來源氨基酸順序的部分差異A8A9A10B30人蘇絲異亮蘇豬蘇絲異亮丙狗蘇絲異亮丙兔蘇絲異亮絲牛丙絲纈丙羊丙甘纈丙馬蘇甘異亮丙抹香鯨蘇絲異亮丙同源蛋白質(zhì)的氨基酸順序的部分差異，表現(xiàn)其種屬特異性第六十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二生物名稱與人不同的氨基酸數(shù)目黑猩猩0獼猴1兔9袋鼠10小蠅25小麥35酵母44不同生物細(xì)胞色素C的氨基酸差異親緣關(guān)系越近，其結(jié)構(gòu)越相似；親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，在結(jié)構(gòu)上的差異越大第六十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第六十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（二）一級(jí)結(jié)構(gòu)變異導(dǎo)致分子病一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，一般來說，功能也會(huì)發(fā)生變化。分子病由于遺傳基因的突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的改變或某種蛋白質(zhì)缺乏引起的疾病。例：鐮刀形細(xì)胞貧血病第六十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二N-Val·His·Leu·Thr·Pro·Glu·Glu·····C(146)HbSβ肽鏈HbAβ肽鏈N-Val·His·Leu·Thr·Pro·Val

·Glu·····C(146)第六十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（三）蛋白質(zhì)激活（蛋白質(zhì)與其前體一級(jí)結(jié)構(gòu)的關(guān)系）蛋白質(zhì)分子的部分肽鏈必須先按特定方式斷裂，然后才呈現(xiàn)出活性。是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能具有高度統(tǒng)一性的表現(xiàn)例：胰島素原的激活第六十七頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第六十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二二、空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（一）變構(gòu)作用有一些蛋白質(zhì)可以通過改變其構(gòu)象來改變其生物活性例：血紅蛋白第六十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二(R)relaxedstate(T)tensestate血中氧分子的運(yùn)送：Lung氧分子HemoglobinMyoglobinMuscle靜脈動(dòng)脈環(huán)境氧高時(shí)Hb快速吸收氧分子環(huán)境氧低時(shí)Hb迅速釋放氧分子釋放氧分子后Hb變回

Tstate任何一個(gè)亞基接受氧分子后，會(huì)增進(jìn)其它亞基吸附氧分子的能力第七十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二兩種不同的構(gòu)象當(dāng)?shù)谝粋€(gè)亞基和氧結(jié)合后，血紅蛋白整個(gè)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，增加了其他亞基對氧的親和力，有利于血紅蛋白分子同氧的結(jié)合；氧的釋放也具有這種效應(yīng)。——變構(gòu)作用第七十一頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（二）蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性

在某些物理和化學(xué)因素作用下，蛋白質(zhì)分子的特定空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。

天然狀態(tài)，有催化活性尿素、β-巰基乙醇

去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性第七十二頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二瘋牛病瘋牛病是由朊病毒蛋白(prionprotein,PrP)引起的一組人和動(dòng)物神經(jīng)退行性病變。PrPcα-螺旋正常PrPscβ-折疊瘋牛病第七十三頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和分類第七十四頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二1、蛋白質(zhì)的兩性電離

蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團(tuán)，在一定的溶液pH條件下都可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。一、理化性質(zhì)第七十五頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二2、蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí)，蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢相等，即成為兼性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn).魚精蛋白（12~12.4）；胃蛋白酶（1~2.5）；血紅蛋白（~7）利用蛋白質(zhì)兩性電離的性質(zhì)，可通過電泳、離子交換層析、等電聚焦等技術(shù)分離蛋白質(zhì)。第七十六頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二3、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)膠體溶液的特點(diǎn)：分子直徑在1-100nm內(nèi)丁達(dá)爾效應(yīng)布朗運(yùn)動(dòng)半通透性由于膠體溶液中的蛋白質(zhì)不能通過半透膜，因此可以應(yīng)用透析法將非蛋白的小分子雜質(zhì)除去——透析天然蛋白質(zhì)保持穩(wěn)定的親水膠體狀態(tài)的因素由于蛋白質(zhì)分子表面分布著極性R基，分子表面會(huì)結(jié)合一層水分子。——水化膜蛋白質(zhì)顆粒表面有可解離的基團(tuán)，在一定pH值時(shí)，同種蛋白質(zhì)分子總是帶相同的電荷?！姾膳懦庾饔玫谄呤唔?，共八十八頁，編輯于2023年，星期二+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化膜++++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)－－－－－－－－帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用第七十八頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二破壞蛋白質(zhì)穩(wěn)定的親水膠體狀態(tài)，就會(huì)使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來——蛋白質(zhì)的沉淀作用。蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅(jiān)固的凝塊，此凝塊不易再溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿中——蛋白質(zhì)凝固。（1）等電點(diǎn)沉淀蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)靜電荷為0，電荷排斥作用減弱，此時(shí)溶解度最小，容易聚集而沉淀。4、蛋白質(zhì)的沉淀與凝固第七十九頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（2）鹽析法（高濃度中性鹽沉淀）加入中性鹽脫去蛋白質(zhì)的水化層，鹽的解離增加了離子強(qiáng)度，中和了蛋白質(zhì)的表面電荷。第八十頁，共八十八頁，編輯于2023年，星期二（3）有機(jī)溶劑沉淀在蛋白質(zhì)溶液中，加入一定量與水相溶的有機(jī)溶劑（乙醇、丙酮等），脫去水化層，使蛋白質(zhì)的溶解度降低而沉淀。低溫下操