蟾蜍離體坐骨神經腓腸肌標本制備

蟾蜍離體坐骨神經腓腸肌標本制備第一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一刺激和興奮刺激stimulation：指細胞所處環(huán)境因素的變化。刺激要能使細胞發(fā)生興奮，就必須達到一定的刺激量。刺激強度刺激持續(xù)時間刺激強度/時間變化率刺激量【實驗原理】第二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一刺激和興奮刺激stimulation：指細胞所處環(huán)境因素的變化。刺激要能使細胞發(fā)生興奮，就必須達到一定的刺激量。刺激強度刺激持續(xù)時間刺激強度/時間變化率刺激量第三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一閾強度能引起組織發(fā)生反應的最小刺激強度，又稱為閾值。具有閾強度的刺激稱為閾刺激（thresholdstimulus）。＜閾刺激閾下刺激＜閾上刺激有效刺激1.刺激強度與肌肉收縮反應第四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一一條骨骼肌纖維“全或無”(all-or-none)達到閾值→肌纖維收縮超過閾值→收縮力不增加一塊骨骼肌一定范圍內，肌肉收縮力的大小與刺激強度成正比閾下刺激→無興奮收縮閾刺激→少數興奮性最高的肌纖維產生收縮刺激強度↑→肌纖維被興奮數量↑，肌肉收縮力↑最適強度→所有的肌纖維均興奮，肌肉收縮最大＞最適強度→收縮力不增加第五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一單收縮twitch：骨骼肌受到一次短促有效刺激時,可發(fā)生一次動作電位,隨后出現一次收縮和舒張。2.刺激頻率與肌肉收縮反應第六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一動作電位時程(相當于絕對不應期)僅1～2毫秒骨骼肌可在機械收縮過程中接受新刺激發(fā)生新的興奮和收縮收縮過程可達幾十～幾百毫秒第七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一兩個閾上刺激，相繼作用于神經-肌肉標本，如果刺激間隔大于單收縮的時程，肌肉則出現兩個分離的單收縮；第八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一較高頻率連續(xù)刺激作用于標本時，出現多個收縮反應的融合，新收縮過程與上次尚未結束的收縮過程發(fā)生總和，稱為強直收縮tetanus（復合收縮）。后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期時，稱為不完全強直收縮incompletetetanus。后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時，各自的收縮完全融合，肌肉處于持續(xù)的收縮狀態(tài)，稱為完全強直收縮completetetanus。第九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一第十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一第十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一在生理條件下，支配骨骼肌的傳出神經總是發(fā)出連續(xù)的沖動，所以骨骼肌的收縮都是強直收縮；靜息狀態(tài)下，中樞神經也經常發(fā)放低頻率神經沖動至骨骼肌，產生一定程度的強直收縮，稱為肌緊張(muscletone)。第十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一實驗藥品與器材：蛙手術器械，電刺激器，生物醫(yī)學信號采集系統(tǒng)，張力換能器，任氏液等。實驗對象（subject）：蟾蜍第十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一眼科剪：僅用于血管、神經組織剪：軟組織粗剪刀：骨骼、肌肉第十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一實驗步驟：１.破壞腦和脊髓

持蛙第十五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一

(2)枕骨大孔的判斷(3)破壞完全的標準枕骨大孔（Occipitalforamen)第十六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一2.剪除軀干上部和內臟(1)(2)(3)第十七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一3.剝去皮膚將標本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中

第十八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一4.洗凈雙手和用過的手術器械,再進行下列操作5.分離兩腿將標本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中

第十九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一7.用玻璃分針游離坐骨神經6.將標本固定在蛙板上

腹面向上第二十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一8.剪斷股骨,膝關節(jié)處所有的肌腱(1)(2)第二十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一9.檢查標本的興奮性TestedtissueZnCu+Ringer’ssolution第二十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一RM-6240采集和處理系統(tǒng)（dataacquisitionandanalysissystem）計算機（computer）張力換能器（transducer）屏蔽盒（Faradaybox）坐骨神經腓腸肌標本（preparation）10、線路連接（cableconnection）第二十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一10.實驗裝置連接將腓腸肌跟腱的結扎線固定在張力換能器的懸臂梁上（不宜太緊，線與桌面垂直）。把穿好線的坐骨神經輕輕提起，放在刺激電極上，保證神經與刺激電極接觸良好。換能器的輸出端與生物信號采集處理系統(tǒng)的輸入通道相連。啟動生物信號采集系統(tǒng)軟件，選擇好通道和采樣參數設置，啟動記錄按鈕，開始記錄。第二十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期一11.實驗觀察（1）刺激強度對骨骼肌收縮的影響使用單刺激或自動強度調節(jié)方式，波寬為1ms，刺激強度從零開始逐漸增大，找出剛能引起肌肉出現微小收縮的刺激強度（閾強度）。繼續(xù)增強刺激強度，觀察肌肉收縮反應是否也相應增大。繼續(xù)增強刺激強度，直至肌肉收縮曲線不能繼續(xù)升高為止。找出剛能引起肌肉出現最大收縮的最小的刺激強度，即最大刺激強度。