長春花堿1課件

長春堿類

（抗癌藥）長春堿類基本信息：發(fā)現(xiàn)、性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和來源功能作用、抗癌機制臨床問題：多藥耐藥性和不良反應(yīng)劑型的創(chuàng)新

結(jié)語發(fā)現(xiàn)夾竹桃科長春花，通常為淡粉紅色，花的中心有一暗紫色小點，別名日日新、雁來紅、四時春。原產(chǎn)地中海沿岸、印度、熱帶美洲。中國栽培長春花的歷史不長，主要在長江以南地區(qū)栽培，廣東、廣西、云南等省（自治區(qū)）栽培較為普遍。由于抗熱性強，開花期長，色彩鮮艷，發(fā)展很快，在草本花卉中已占有一定位置。發(fā)現(xiàn)在牙買加，長春花茶常被當?shù)厝擞脕碇委熖悄虿?，還能用來止血、止痛。1958年，Noble等人在長春花葉的提取物中首次分離出具有抗細胞增殖作用的天然生物堿-長春堿（最初命名為長春花堿，VLB），之后EliLilly制藥公司開始了此藥物的生產(chǎn)。1961年，Svoboda分離出長春新堿。1980年，長春地辛（長春堿酰胺）在法國上市，長春堿半合成衍生物。1989年，皮耳法伯制藥PierreFabre公司開發(fā)的長春瑞賓（去甲長春花堿）首先在法國上市，它也是一種半合成的長春花屬生物堿。2009年，長春氟寧在歐洲上市，用于膀胱癌的治療。性質(zhì)長春堿二聚吲哚類生物堿。針狀晶體，不溶于水、石油醚，溶于氯仿、丙酮和乙醇。味苦，有引濕性，遇光或熱變黃，故要密閉、避光、涼暗處保存。熔點211～216℃。折光率：+42°（氯仿）。其硫酸鹽為白色結(jié)晶性粉末，無臭，有引濕性，遇光或熱變黃。易溶于水，溶于甲醇或氯仿，在乙醇中極微溶解。熔點284～285℃。結(jié)構(gòu)長春酰胺去甲長春花堿長春堿長春新堿長春氟寧來源提取分離-溶劑提取早期曾用乙醇提取，但發(fā)現(xiàn)長春堿在乙醇中溶解度小，提取率低。Jovanovics等改用甲醇水溶液浸取，提取率大幅提高，但甲醇極性較大，浸取液雜質(zhì)較多，選擇性不高。Gedeon等人使用含少量硫酸的90%甲醇水溶液提取，使之轉(zhuǎn)化為硫酸鹽的形式而更易提取。提取方法不斷改進來源高純度長春堿的提取—Atta-ur-Rahman等人提取率較高0.1%，總生物堿中長春堿質(zhì)量分數(shù)為3%缺點：步驟繁瑣，耗用溶劑大，不適合工業(yè)生產(chǎn)，也不環(huán)保來源高效環(huán)保的長春堿提取方法—Gunasekera等人提取率0.359%，總生物堿中長春堿含量為8.29%，含量較高。評價：步驟簡單，有機溶劑使用較少，毒性較小，提取率較高，適合工業(yè)生產(chǎn)，但酸水極性較大，選擇性低，提取物中雜質(zhì)較多，必須要有成熟高效的柱層析方法進行后續(xù)操作，才能得到高質(zhì)量產(chǎn)品。氨水調(diào)PH6-7乙酸水浸取兩次二氯甲烷萃取蒸干溶劑總生物堿來源提取分離—超臨界萃取法研究較少，最初研究表明在壓力8～20MPa、提取溫度40℃下的萃取效果不佳，此條件下N2O萃取效果比CO2稍好。Choi等研究發(fā)現(xiàn)，用二氧碳-甲醇-三乙胺以80∶18∶2的比例能有效提取長春花全草中的長春堿，超臨界萃取中使用三乙胺等堿性改性劑后提取率大大提高。評價：無毒、無污染，萃取所需時間短、能耗低。但是需要耐高壓的設(shè)備，設(shè)備成本較高，進行大規(guī)模原料萃取從經(jīng)濟的角度看不太適用。來源分離純化將粗提后總生物堿中的長春堿、長春新堿、異長春堿以及一些結(jié)構(gòu)性質(zhì)比較相近的生物堿分開，使目標產(chǎn)品分離出來。柱層析法：簡單易行、成本低、處理量大，比較適合工業(yè)化生產(chǎn)。制備型TLC法、制備型HPLC法和CPC(離心逆流色譜)法：分離量小、成本較高，不適合工業(yè)生產(chǎn)來源化學合成（結(jié)構(gòu)修飾）長春堿和長春新堿雖廣泛的用于治療惡性腫瘤及白血病，但治療毒性大，限制了其臨床應(yīng)用，人們開始尋找更高活性、更廣抗瘤譜和更低毒性的結(jié)構(gòu)類似物。以長春堿（左圖化合物1）為原料，通過半合成得到長春堿酰胺（左圖化合物3）、去甲長春堿（化合物4）、長春氟寧（化合物5）等來源化學合成-長春堿酰胺（化合物（1），硫酸鹽形式）來源化學合成-去甲長春花堿（1T，其酒石酸鹽）功能作用抗腫瘤體外細胞毒活性大量研究顯示，長春堿類藥物在體外對多種人類腫瘤細胞株有明顯抑制作用，包括：肺癌、白血病、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤等。去甲長春花堿對非小細胞肺癌H522細胞毒性最強，對結(jié)腸癌DLD/1毒性最弱。長春氟寧對上述瘤株的IC50為10-8—10-7與長春堿、長春新堿和去甲長春花堿相比，要低2到40倍。Barret等人實驗發(fā)現(xiàn)它與順鉑、絲裂霉素C和喜樹堿連用時具有協(xié)同增效作用，并與紫杉醇、鬼臼亞乙苷等聯(lián)用時不會產(chǎn)生拮抗效應(yīng)。功能作用體內(nèi)抗腫瘤毒性50年代晚期，Noble和Svoboda分別從長春花中提取并發(fā)現(xiàn)長春堿和長春花堿對P1534小鼠白血病的療效十分顯著。Cros等人對接種B16黑色素瘤的小鼠注射去甲長春花堿，發(fā)現(xiàn)可延長生命率達100%，由于長春堿和長春花堿。Kruczynski等人通過類似的實驗，發(fā)現(xiàn)長春氟寧也有同樣的作用，而且不引起主要的毒性反應(yīng)。進一步的研究表明去甲長春花堿的總體評價（抑瘤率、生存期和毒副作用）不如長春氟寧。功能作用降血糖、降壓氧長春堿、長春質(zhì)堿、洛柯堿等有不同程度的降血糖作用，作用緩慢持久；總堿靜脈注射，對麻醉貓、兔均有降壓作用，血壓下降速度快，與蘿芙木總堿制劑的緩慢降壓不同，且在降壓同時伴有呼吸加深，幅度變大現(xiàn)象；切斷迷走神經(jīng)或用阿托品不影響其降壓效果。——《中華本草》其他作用抗瘤機制細胞周期特異性抗腫瘤藥，與微管蛋白二聚體結(jié)合抑制微管聚合，使分裂的細胞不能形成紡錘體而使分裂停止于中期。不同化合物與微管蛋白的作用有差異，均呈濃度依賴性。Kruczynski通過研究指出幾種長春花堿衍生物與微管蛋白的結(jié)合力：長春新堿>長春堿>去甲長春花堿>長春氟寧?？沽鰴C制這方面的相關(guān)研究合理的解釋了臨床上的一些現(xiàn)象：長春新堿劑量較低，而去甲長春花堿劑量較高。長春新堿會引起較為嚴重的神經(jīng)毒性副作用，而其他幾類同類藥物則不會?？沽鰴C制Hlowell和Hill等研究發(fā)現(xiàn)，長春堿、長春新堿和長春氟寧都具有抑制血管生成的作用。長春新堿還可以干擾蛋白質(zhì)代謝及抑制RNA多聚酶的活力，并引起腫瘤細胞膜脂質(zhì)的改變。不同的長春花堿類抗腫瘤藥物選擇性地抑制和調(diào)控過度激活表達的癌基因從而起抗腫瘤的作用。多藥耐藥性多藥抗藥性指癌細胞接觸過一種抗癌藥物后獲得的針對多種天然抗癌藥物的抗藥性。長春堿類抗腫瘤藥都可引起由P-糖蛋白介導的交叉耐藥性，導致細胞內(nèi)藥物濃度降低，從而降低藥物細胞毒活性。鈣拮抗劑、利血平等藥物可逆轉(zhuǎn)其多藥耐藥性。不良反應(yīng)骨髓抑制大多有不同程度的白細胞下降，停藥后可恢復神經(jīng)毒性Binet等研究指出有絲分裂的抗微管活性與抗腫瘤活性有關(guān)，而軸突的抗微管活性與神經(jīng)毒性有關(guān)。26劑型創(chuàng)新長春新堿-IgG結(jié)合物余竹元等采用活性酯方法合成了長春新堿-IgG結(jié)合物，但由于只有游離物才能發(fā)揮作用，結(jié)合物需在溶酶體內(nèi)代謝成小分子游離物，因此結(jié)合物作用較遲緩。27劑型創(chuàng)新長春堿納米粒劉玉梅等通過乳化聚合法制備長春堿聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒，該組細胞數(shù)量明顯減少，凋亡細胞增多，表明PBCA-NP可作為腫瘤藥物長春堿有效載體，增強其抗腫瘤活性。28劑型創(chuàng)新控釋膜能使藥物在病灶局部達到控制釋放、提高局部藥物濃度、增強藥物療效由于藥物能夠緩慢釋放，故可以減輕全身的毒副作用，對擴大長春堿類藥物的臨床應(yīng)用有重要意義。29劑型創(chuàng)新脂質(zhì)體趙妍等采用pH梯度法制備硫酸長春新堿脂質(zhì)體，研究結(jié)果表明硫酸長春新堿脂質(zhì)體降低藥物釋放度,提高藥效。劑型創(chuàng)新傳遞體在普通脂質(zhì)體磷脂雙分子層中加入了表面活性劑，如膽酸鈉等。具有與皮膚親和力好、安全無毒等普通脂質(zhì)體的優(yōu)點外，還具有高度柔韌性及高效滲透性，藥物能大量透過皮膚角質(zhì)層到達深部真皮，進入淋巴管發(fā)揮治療作用。結(jié)語謝謝！參考文獻[1]C.E.M.Gidding,S.J.Kellie,W.A.Kamps,etal.Vincristinerevisited[J].OncologyHematology,1999,29:267-287.[2]馬彥.長春花堿類長腫瘤藥物的研究進展[J].中山大學研究生學刊（自然科學、醫(yī)學版），2004,25（3）：30-39.[3]Jovanovies,Karola,Szasz,Kalman.Isolationofvinblastineandleurosine[P],Hung:154715,APr.30，1968.[4]李曉蕾.抗腫瘤藥長春堿的提取分離工藝研究[D].杭州:浙江大學，2004.[5]習利平，宋新波，張麗娟.長春堿類抗腫瘤藥的研究進展[J].藥物評價研究,2011,34(1):59-62[6]肖亮，全海天，徐永平，等.長春氟寧抗腫瘤作用的研究[J].中國藥理學通報,2007,23(4):507-511.[7]KruczynskiA,ColpactF,TarayreJ-P,etal.Preclinicalinvivoantitumouractivityofvinflunine,anovelfluorinatedVincaalkaloid.CancerChemotherPhamaclo.1998,41:437-447.[8]KruczynskiA,BarretJ-M,EtievantC,etal.Antimitoticandtubulin–interactingproperitiesofvinflunine,anovelfluorinatedVincaalkaloid.BiochemPharmacol.1998,55:908-915.[9]BinetS,ChaincauE,FellousA,etal.Immunofluorescencestudyoftheactionofnavelbine,vincristineandvinblastineonmitoticandaxonalmicrotubules.IntJCancer.1990,15,46(2):262-266.[10]余竹元,馬瑾瑜.長春新堿-抗體結(jié)合物的抗肝癌作用[J].腫瘤,1989,9(4):154.[11]劉玉梅，歐陽五慶，馬淑燕，等.長春堿納米粒的制備及其抗腫瘤活性[J].上海交通大學學報(農(nóng)業(yè)科學版),2008,26(3):228-232.[12]趙妍,于彬,鄧意輝,等.主動載藥法制備硫酸長春新堿脂質(zhì)體及其包封率的測定[J].中國藥學雜志,2005,4