藥物分析 第八章 含氮類(lèi)藥物的分析

藥物分析學(xué)第八章含氮類(lèi)藥物的分析學(xué)習(xí)要求掌握各類(lèi)藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；亞硝酸鈉滴定法、非水堿量法測(cè)定藥物含量的原理、方法及注意事項(xiàng)。熟悉各類(lèi)藥物的鑒別方法；有關(guān)物質(zhì)檢查方法；溴量法、高效液相色譜法測(cè)定藥物含量的原理、方法及注意事項(xiàng)。了解藥物中其他特殊雜質(zhì)的來(lái)源及檢查方法，其他含量測(cè)定方法的原理及注意事項(xiàng)。芳胺類(lèi)藥物的分析1苯乙胺類(lèi)藥物的分析2芳氧丙醇胺類(lèi)藥物的分析3苯并二氮雜?類(lèi)藥物的分析4吡啶類(lèi)藥物的分析5吩噻嗪類(lèi)藥物的分析6沙坦類(lèi)藥物的分析7目錄思考題81.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物第一節(jié)芳胺類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)芳胺類(lèi)藥物分子結(jié)構(gòu)中都具有對(duì)氨基苯甲酸酯的基本結(jié)構(gòu)：苯佐卡因鹽酸普魯卡因鹽酸丁卡因2.主要理化性質(zhì)（1）芳伯氨基特性

具有芳伯氨基，可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。（2）水解特性

酯鍵易水解（3）弱堿性

具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。（4）光譜特征（5）溶解性

游離堿多為堿性油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；其鹽酸鹽均具有一定的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。二、鑒別試驗(yàn)1.芳香第一胺反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)例1.鹽酸普魯卡因的鑒別：本品顯芳香第一胺類(lèi)的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）

取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

2.水解及水解產(chǎn)物反應(yīng)例2.鹽酸普魯卡因的鑒別：取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。例3.苯佐卡因的鑒別：取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。3.制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)

例4.鹽酸丁卡因的鑒別：本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。4.氯化物的反應(yīng)5.紫外光譜

例5.注射用鹽酸丁卡因的鑒別：取本品1瓶，加水溶解，定量轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在227nm與310nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。

6.紅外光譜例6.鹽酸普魯卡因注射液的鑒別：取本品（約相當(dāng)于鹽酸普魯卡因80mg)，水浴蒸干，殘?jiān)?jīng)減壓干燥，依法測(cè)定。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集397圖）一致。7.高效液相色譜法

1.鹽酸普魯卡因及其制劑中對(duì)氨基苯甲酸的檢查雜質(zhì)來(lái)源：水解產(chǎn)生三、特殊雜質(zhì)檢查ChP2010鹽酸普魯卡因及其各種制劑均采用離子對(duì)色譜法檢查對(duì)氨基苯甲酸例7.鹽酸普魯卡因中對(duì)氨基苯甲酸的檢查：取本品，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.2mg的溶液，作為供試品溶液；另取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量制成每1ml中含1g的溶液，作為對(duì)照品溶液；取供試品溶液1ml與對(duì)照品溶液9ml混合均勻，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。照高效液相色譜法試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.1％庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（68∶32）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為279nm。取系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液10l，注入液相色譜儀，理論板數(shù)按對(duì)氨基苯甲酸峰計(jì)算不低于2000，鹽酸普魯卡因峰和對(duì)氨基苯甲酸峰的分離度應(yīng)大于2.0。取對(duì)照品溶液10l，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分峰高約為滿(mǎn)量程的20%。精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各10l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與對(duì)氨基苯甲酸峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過(guò)0.5%。2.鹽酸丁卡因及其制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢查例8.鹽酸丁卡因中有關(guān)物質(zhì)的檢查：取本品，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液；另取對(duì)丁氨基苯甲酸對(duì)照品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-異丙胺（98∶7∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，置紫外燈（254nm）下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深（0.2%）。1.亞硝酸鈉滴定法（1）原理具芳伯氨基的藥物四、含量測(cè)定

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。（2）主要測(cè)定條件1）加入適量KBr加快反應(yīng)速率

KBr為催化劑

在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：（1）K1（2）K2

因?yàn)椋篕1≈300K2

加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速率2）加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng)在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3鹽酸1∶（2.5～6）加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果3）反應(yīng)溫度室溫條件下滴定10～30℃4）滴定方式與速度控制滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定（3）指示終點(diǎn)的方法1）永停滴定法ChP、BP永停滴定法（附錄ⅦA）

用作重氮化法的終點(diǎn)指示時(shí)，調(diào)節(jié)R1使加于電極上的電壓約為50mV。取供試品適量，精密稱(chēng)定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液（1→2）15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑—鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。例9.鹽酸普魯卡因的含量測(cè)定：取本品約0.6g，精密稱(chēng)定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl2）電位法USP3）外指示劑法碘化鉀—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

4）內(nèi)指示劑法

中性紅不可逆指示劑2.酸堿滴定法鹽酸丁卡因的水溶液顯酸性，在反應(yīng)體系中加入適量乙醇和鹽酸，用氫氧化鈉滴定液滴定，電位法指示滴定終點(diǎn)。

第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：

根據(jù)兩個(gè)等當(dāng)點(diǎn)間相應(yīng)的氫氧化鈉滴定液的體積，即可計(jì)算吩噻嗪類(lèi)藥物的鹽酸鹽的含量。

例10.鹽酸丁卡因的含量測(cè)定：取本品約0.25g，精密稱(chēng)定，加乙醇50ml振搖使溶解，加0.01mol/L鹽酸溶液5ml，搖勻，照電位滴定法，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，兩個(gè)突躍點(diǎn)體積的差作為滴定體積。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于30.08mg的C15H24N2O2·HC1。3.非水堿量法例11.JP鹽酸丁卡因的含量測(cè)定：取預(yù)先干燥過(guò)的本品約0.2g，精密稱(chēng)定，加甲酸2ml與醋酐80ml溶解后，在30℃水浴中加熱15min，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，電位法指示終點(diǎn)，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于30.08mg的C15H24N2O2?HCl。4.紫外分光光度法例12.注射用鹽酸丁卡因的含量測(cè)定：取本品10瓶，分別加水溶解，并分別定量轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取鹽酸丁卡因?qū)φ掌?，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每lml中約含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各3ml，分別置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（1→200）5ml與磷酸鹽緩沖液（pH6.0）（取磷酸氫二鉀20g與磷酸二氫鉀80g，加水溶解并稀釋至1000ml，用6mol/L磷酸溶液或1mol/L的氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至6.0）10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（附錄ⅣA），在310nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算每瓶的含量，求出平均含量，即得。5.高效液相色譜法例13.鹽酸普魯卡因注射液的含量測(cè)定：照髙效液相色譜法（附錄VD）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.1%庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（68∶32）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm,理論板數(shù)按鹽酸普魯卡因峰計(jì)箅不低于2000。鹽酸普魯卡因峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。測(cè)定法精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1ml中含鹽酸普魯卡因0.02mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取10l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸普魯卡因?qū)φ掌?，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含鹽酸普魯卡因0.02mg的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。第二節(jié)苯乙胺類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物苯乙胺類(lèi)藥物具有苯乙胺的基本結(jié)構(gòu)，苯環(huán)上大都有酚羥基，基本結(jié)構(gòu)為：*腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素重酒石酸間羥胺鹽酸甲氧明鹽酸多巴胺鹽酸多巴酚丁胺鹽酸異丙腎上腺素鹽酸克侖特羅鹽酸苯乙雙胍硫酸沙丁胺醇鹽酸氯丙那林硫酸特布他林2.主要理化性質(zhì)（1）弱堿性具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可用非水堿量法測(cè)定含量。（2）酚羥基性質(zhì)

可與三氯化鐵反應(yīng)呈色或氧化劑氧化呈色鑒別，或溴量法測(cè)定含量（3）

旋光性（4）光譜特征（5）溶解性（6）取代基

如鹽酸克侖特羅結(jié)構(gòu)中有芳伯氨基，也可供分析用。二、鑒別試驗(yàn)1.與三氯化鐵反應(yīng)2.氧化反應(yīng)

例1.重酒石酸去甲腎上腺素的鑒別：取本品約1mg，加酒石酸氫鉀的飽和溶液10ml溶解，加碘試液1ml，放置5min后，加硫代硫酸鈉試液2ml，溶液為無(wú)色或僅顯微紅色或淡紫色。

例2.硫酸沙丁胺醇的鑒別：取本品約10mg，加0.4%硼砂溶液20ml使溶解，加3%4-氨基安替比林溶液1ml與2%鐵氰化鉀溶液1ml，加三氯甲烷10ml振搖，放置使分層，三氯甲烷層顯橙紅色。3.與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)Rimini試驗(yàn)例3.重酒石酸間羥胺的鑒別：取本品約5mg，加水0.5ml使溶解，加亞硝基鐵氰化鈉試液2滴、丙酮2滴與碳酸氫鈉0.2g，在60℃的水浴中加熱1min，即顯紅紫色。4.雙縮脲反應(yīng)例4.鹽酸去氧腎上腺素的鑒別：取本品約10mg，加水1ml溶解后，加硫酸銅試液1滴與氫氧化鈉試液1ml，搖勻，即顯紫色；加乙醚1ml振搖，乙醚層應(yīng)不顯色。5.紫外光譜與紅外光譜例5.硫酸特布他林氣霧劑的鑒別：取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，加三氯甲烷適量，用5號(hào)垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，濾液備用；濾渣用三氯甲烷25ml洗滌。照紅外分光光度法測(cè)定，其紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集668圖）一致。6.TLC與HPLC例6.鹽酸去氧腎上腺素注射液的鑒別：避光操作。取本品，置水浴上蒸干，加甲醇制成每1ml中約含鹽酸去氧腎上腺素20mg的溶液，作為供試品溶液；另取鹽酸去氧腎上腺素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml約含20mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以異丙醇-三氯甲烷-濃氨溶液（80∶5∶15）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，噴以重氮苯磺酸試液使顯色。供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)一致。三、特殊雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來(lái)源原料殘存

檢查方法紫外分光光度法

1.酮體的檢查

檢查原理利用酮體在310nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而藥物本身在此波長(zhǎng)處幾乎沒(méi)有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長(zhǎng)處的吸光度限制酮體的量。2.有關(guān)物質(zhì)的檢查

TLC或HPLC鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查

檢查方法：紙色譜法（PC）分離后，甲醇萃取，紫外分光光度法于232nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，控制吸光度以控制有關(guān)雙胍的量例7.鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)物質(zhì)的檢查：取本品1.0g，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法試驗(yàn)，精密吸取0.2ml，分別點(diǎn)于兩張色譜濾紙條（7.5cm×50cm）上，并以甲醇作空白點(diǎn)于另一色譜濾紙條上，樣點(diǎn)直徑均為0.5～1cm；照下行法，將上述色譜濾紙條同置展開(kāi)室內(nèi)，以乙酸乙酯-乙醇-水（6∶3∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)至前沿距下端約7cm處，取出，晾干，用顯色劑（取10％鐵氰化鉀溶液1ml，加10％亞硝基鐵氰化鈉溶液與10％氫氧化鈉溶液各1ml，搖勻，放置15min，加水10ml與丙酮12ml，混勻）噴其中一張點(diǎn)樣紙條（有關(guān)雙胍顯紅色帶，Rf值約為0.1），參照此色譜帶，在另一張點(diǎn)樣紙條及空白紙條上，剪取其相應(yīng)部分并向外延伸1cm，并分剪成碎條，精密量取甲醇各20ml，分別進(jìn)行提取，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在232nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.48。四、含量測(cè)定1.非水堿量法

2.溴量法

鹽酸去氧腎上腺素及其注射液、重酒石酸間羥胺；反應(yīng)摩爾比為1∶33.紫外-可見(jiàn)分光光度法

鹽酸克侖特羅栓具芳伯氨基，可發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)對(duì)照品比較法定量

偶合劑N-（1-萘基）-乙二胺遇亞硝酸也能顯色，干擾比色測(cè)定，所以在重氮化后，應(yīng)加氨基磺酸銨將剩余的亞硝酸分解除去，再加偶合試劑N-（1-萘基）-乙二胺。

例8.鹽酸克侖特羅栓的含量測(cè)定：取本品20粒，精密稱(chēng)定，切成小片，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于鹽酸克侖特羅0.36mg），置分液漏斗中，加溫?zé)岬娜燃淄?0ml使溶解，用鹽酸溶液（9→100）振搖提取3次（20ml、15ml、10ml），分取酸提取液，置50ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→100）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取鹽酸克侖特羅對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加鹽酸溶液（9→100）溶解并定量稀釋制成每1ml中含7.2g的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15ml，分別置25ml量瓶中，各加鹽酸溶液（9→100）5ml與0.1%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置3min，各加0.5%氨基磺酸銨溶液1ml，搖勻，時(shí)時(shí)振搖10min，再各加0.1%鹽酸萘乙二胺溶液1ml，搖勻，放置10min，用鹽酸溶液（9→100）稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見(jiàn)分光光光度法（附錄IVA），在500nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得。4.HPLC例9.鹽酸異丙腎上腺素注射液的含量測(cè)定：

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以庚烷磺酸鈉溶液（取庚烷磺酸鈉1.76g，加水800ml使溶解）-甲醇（80∶20），用1mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。取重酒石酸腎上腺素對(duì)照品適量，加含1%焦亞硫酸鈉的流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中含0.2mg的溶液作為溶液（1），取鹽酸異丙腎上腺素對(duì)照品適量，加0.1%焦亞硫酸鈉溶液溶解并稀釋制成每1ml中含0.02mg的溶液作為溶液（2），取溶液（1）1ml與溶液（2）18ml，混勻，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。取20μl，注入液相色譜儀，理論板數(shù)按鹽酸異丙腎上腺素峰計(jì)算不低于2000，重酒石酸腎上腺素峰與鹽酸異丙腎上腺素峰的分離度應(yīng)大于3.5。

測(cè)定法

精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，用0.1%焦亞硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取鹽酸異丙腎上腺素對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

本法為離子對(duì)色譜法，調(diào)節(jié)溶液pH為3.0，加入離子對(duì)試劑庚烷磺酸鈉外標(biāo)法定量第三節(jié)芳氧丙醇胺類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物芳氧丙醇胺類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)中有芳環(huán)，并具有氨基丙醇側(cè)鏈，基本結(jié)構(gòu)為：阿替洛爾鹽酸卡替洛爾鹽酸普萘洛爾氧烯洛爾酒石酸美托洛爾富馬酸比索洛爾2.主要理化性質(zhì)（1）弱堿性（2）旋光性（3）光譜特征（4）溶解性二、鑒別試驗(yàn)1.沉淀反應(yīng)例1.鹽酸普萘洛爾注射液的鑒別：取本品適量，加硅鎢酸試液數(shù)滴，即產(chǎn)生淡粉紅色沉淀。2.與高錳酸鉀反應(yīng)例2.馬來(lái)酸噻嗎洛爾的鑒別：取本品約5mg，加水lml使溶解，加高錳酸鉀試液3滴，紫色立即消失，加熱，即生成紅棕色沉淀。3.紫外光譜例3.富馬酸比索洛爾的鑒別：取本品，加水溶解并分別稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液（1）和每1ml中約含0.01mg的溶液（2），照紫外—可見(jiàn)分光光度法（附錄IVA）測(cè)定，溶液（1）在271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；溶液（2）在223nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。4.紅外光譜例4.酒石酸美托洛爾的鑒別：取本品適量，加水溶解后，再加氨試液堿化，用二氯甲烷提取，靜置，取適量二氯甲烷液，置水浴上蒸干，置五氧化二磷干燥器中放置過(guò)夜，依法測(cè)定。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集685圖）一致。例5.鹽酸卡替洛爾滴眼液的鑒別：取本品，用水稀釋制成每lml中約含鹽酸卡替洛爾5mg的溶液，作為供試品溶液；另取鹽酸卡替洛爾對(duì)照品適量，加水溶解并稀釋制成每lml中約含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄VB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2l,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254

薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-濃氨溶液（50∶20∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)一致。5.色譜法三、特殊雜質(zhì)檢查1.游離萘酚的檢查例6.鹽酸普萘洛爾中游離萘酚的檢查：取本品20mg，加乙醇與10%氫氧化鈉溶液各2ml，振搖使溶解，加重氮苯磺酸試液lml，搖勻，放置3min；如顯色，與-萘酚的乙醇溶液（每lml中含-萘酚20g）0.30ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.3%）。2.有關(guān)物質(zhì)的檢查例7.酒石酸美托洛爾中有關(guān)物質(zhì)的檢查（1）取本品，加甲醇溶解并定量稀釋制成每lml中約含50mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，用甲醇分別定量稀釋制成每lml中含0.1mg和0.25mg的溶液，作為對(duì)照溶液（1）和（2）。照薄層色譜法試驗(yàn)，量取上述三種溶液各51，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲醇-乙酸乙酯（10∶90）為展開(kāi)劑（層析缸底部放置2個(gè)盛有展開(kāi)劑體積30%的濃氨溶液小燒杯，并預(yù)先平衡1h以上），展開(kāi)后，在空氣中晾干3h，再置碘蒸氣缸中放置15h，取出，立即檢視，除主斑點(diǎn)與原點(diǎn)外，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照溶液（2）的主斑點(diǎn)比較，不得更深，且深于對(duì)照溶液（1）主斑點(diǎn)的雜質(zhì)斑點(diǎn)不得多于1個(gè)。（2）取本品適量，精密稱(chēng)定，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中含2mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中含10g的溶液，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以醋酸鹽緩沖液（取醋酸銨3.9g，加水810ml溶解后，加三乙胺2.0ml，冰醋酸10.0ml，磷酸3.0ml，搖勻）-乙腈（824∶146）為流動(dòng)相；流速為每分鐘2ml；柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。另取灑石酸美托洛爾對(duì)照品，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中含2mg的溶液，置石英杯中，在距離紫外光燈（254nm）下5cm處，放置3h，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。取系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液20l，注入液相色譜儀，酒石酸美托洛爾峰的保留時(shí)間約為7min，相對(duì)保留時(shí)間約0.3處為4-[(2RS)-2-羥基-3-[(1-異丙基)氨基]丙氧基]苯甲醛（雜質(zhì)I）峰，酒石酸美托洛爾峰與雜質(zhì)I峰的分離度應(yīng)大于10.0，理論板數(shù)按酒石酸美托洛爾峰計(jì)算不低于3000。取對(duì)照溶液20l，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿(mǎn)量程的10%。再精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍。供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ保留時(shí)間一致的色譜峰，其峰面積乘以校正因子0.1后不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.6倍（0.3%）；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.6倍（0.3%）；各雜質(zhì)峰面積的和（雜質(zhì)I峰面積乘以校正因子0.1后計(jì)入）不得大于對(duì)照溶液的主峰面積（0.5%）。供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液主峰面積0.1倍的色譜峰忽略不計(jì)。四、含量測(cè)定1.非水堿量法

本類(lèi)藥物的原料藥大多用該法測(cè)定含量。氧烯洛爾片的含量測(cè)定也采用非水堿量法，為排除輔料的干擾，采用三氯甲烷提取主藥，過(guò)濾后測(cè)定。例8.氧烯洛爾片的含量測(cè)定：取本品30片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于氧烯洛爾0.2g），置碘瓶中，精密加三氯甲烷50ml，振搖提取，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，置錐形瓶中，加二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯粉紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于26.52mg的C15H23NO3。2.紫外分光光度法例9.鹽酸卡替洛爾滴眼液的含量測(cè)定：精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1ml中約含鹽酸卡替洛爾16g的溶液，照紫外—可見(jiàn)分光光度法（附錄IVA），在252nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另取鹽酸卡替洛爾對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含鹽酸卡替洛爾16g的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，即得。3.高效液相色譜法例10.阿替洛爾片的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀6.8g，辛烷磺酸鈉1.3g，加水溶解并稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）—甲醇（70∶30）作為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)226nm。理論板數(shù)按阿替洛爾峰計(jì)算不低于2000。阿替洛爾峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。測(cè)定法

取本品20片（糖衣片應(yīng)除去包衣），精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿替洛爾25mg），置100ml量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取20l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿替洛爾對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。第四節(jié)苯并二氮雜?類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物目前臨床應(yīng)用的1,4-苯并二氮雜?類(lèi)藥物為取代苯環(huán)與七元含氮雜環(huán)并合而成的有機(jī)藥物，基本結(jié)構(gòu)為：地西泮氯氮?奧沙西泮氯硝西泮三唑侖阿普唑侖2.主要性質(zhì)（1）弱堿性可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。（2）水解性（3）光譜特征二、鑒別試驗(yàn)1.化學(xué)鑒別法（1）沉淀反應(yīng)例1.氯氮?的鑒別：取本品約10mg，加鹽酸溶液（9→1000）10ml溶解后，加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。例2.阿普唑侖的鑒別：取本品約5mg，加鹽酸溶液（9→1000）2ml溶解后，分為兩份：一份加硅鎢酸試液1滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。（2）水解后呈芳香第一胺反應(yīng)

氯氮?、艾司唑侖、勞拉西泮、硝西泮、奧沙西泮例3.氯氮?的鑒別：取本品約10mg，加鹽酸溶液（1→2）15ml，緩緩煮沸15min，放冷；溶液顯芳香第一胺類(lèi)的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。（3）硫酸-熒光反應(yīng)例4.地西泮的鑒別：取本品約10mg，加硫酸3ml，振搖使溶解，在紫外燈（365nm）下檢視，顯黃綠色熒光。

艾司唑侖——天藍(lán)色例5.地西泮的鑒別：取本品20mg，照氧瓶燃燒法（附錄ⅦC）進(jìn)行有機(jī)破壞，以5%氫氧化鈉溶液5ml為吸收液，燃燒完全后，用稀硝酸酸化，并緩緩煮沸2分鐘，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。（4）分解產(chǎn)物的反應(yīng)2.光譜法3.色譜法三、有關(guān)物質(zhì)的檢查四、含量測(cè)定原料藥：非水堿量法制劑：紫外分光光度法

高效液相色譜法第五節(jié)吡啶類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物吡啶類(lèi)藥物均含吡啶環(huán)，基本結(jié)構(gòu)為：異煙肼尼可剎米硝苯地平2.主要理化性質(zhì)（1）吡啶環(huán)1）弱堿性

非水堿量法測(cè)定含量或沉淀反應(yīng)鑒別2）吡啶環(huán)的開(kāi)環(huán)反應(yīng)（2）二氫吡啶環(huán)1）還原性氧化還原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法測(cè)定含量2）不穩(wěn)定性

其分析應(yīng)避光操作，同時(shí)應(yīng)檢查引入的特殊雜質(zhì)（3）取代基1）異煙肼位上酰肼基還原性氧化還原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法含量測(cè)定可與某些羰基試劑發(fā)生縮合反應(yīng)鑒別或比色法含量測(cè)定酰胺鍵易水解引入特殊雜質(zhì)游離肼2）尼可剎米

位上酰胺基易水解，遇堿水解后，釋放出具有堿性的乙胺，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色，故可以此進(jìn)行鑒別。3）硝苯地平硝基具有氧化性（4）光譜特征二、鑒別試驗(yàn)1.吡啶環(huán)的反應(yīng)（1）吡啶環(huán)的開(kāi)環(huán)反應(yīng)本反應(yīng)適用于吡啶環(huán)的β或γ位上的氫被羧基衍生物所取代的吡啶類(lèi)藥物。1）戊烯二醛反應(yīng)（k?nig反應(yīng)）例1.尼可剎米的鑒別：取本品1滴，加水50ml，搖勻，分取2ml，加溴化氰試液2ml與2.5％苯胺溶液3ml，搖勻，溶液漸顯黃色。2）二硝基氯苯反應(yīng)例2.BP異煙肼注射液的鑒別：取本品適量（約相當(dāng)于異煙肼25mg），加乙醇5ml，加硼砂0.1g及5％的2,4-二硝基氯苯乙醇溶液5ml，水浴蒸干，繼續(xù)加熱10min，殘?jiān)蛹状?0ml攪拌溶解后，即顯紫紅色。（2）沉淀反應(yīng)例3.尼可剎米的鑒別：取本品2滴，加水1ml，搖勻，加硫酸銅試液2滴與硫氰酸銨試液3滴，即生成草綠色沉淀。2.二氫吡啶的解離反應(yīng)二氫吡啶類(lèi)藥物與堿作用，二氫吡啶環(huán)1,4-位氫均可發(fā)生解離，形成p-共軛而發(fā)生顏色變化，可用于鑒別。例4.硝苯地平的鑒別：取本品約25mg，加丙酮1ml溶解，加20％氫氧化鈉溶液3～5滴，振搖，溶液顯橙紅色。3.酰肼基的反應(yīng)（1）還原反應(yīng)例5.異煙肼的鑒別：取本品約10mg，置試管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸銀試液1ml，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。（2）縮合反應(yīng)4.分解產(chǎn)物的反應(yīng)

例6.尼可剎米的鑒別：取本品10滴，加氫氧化鈉試液3ml，加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色。5.重氮化-偶合反應(yīng)例7.BP硝苯地平的鑒別：取本品25mg，加10ml混合溶液（鹽酸∶水∶乙醇=1.5∶3.5∶5），溫?zé)?，加入鋅粒0.5g，放置5min，濾過(guò)，濾液加亞硝酸鈉溶液（10g/L）5ml，放置2min，再加入氨基磺酸銨溶液（50g/L）2ml，搖勻，加入鹽酸萘乙二胺溶液（5g/L）2ml，即顯紅色（持續(xù)5min以上）。6.紫外光譜與紅外光譜7.高效液相色譜法三、特殊雜質(zhì)檢查1.異煙肼中游離肼的檢查雜質(zhì)來(lái)源：原料殘存、降解產(chǎn)生檢查方法：TLC

例8.異煙肼中游離肼的檢查：取本品，加丙酮-水（1∶1）溶解并稀釋制成每1ml中約含100mg的溶液，作為供試品溶液；另取硫酸肼對(duì)照品，加丙酮-水（1∶1）溶解并稀釋制成每1ml中約含0.08mg（相當(dāng)于游離肼20μg）的溶液，作為對(duì)照品溶液；取異煙肼與硫酸肼各適量，加丙酮-水（1∶1）溶解并稀釋制成每1ml中分別含異煙肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇-丙酮（3∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液所顯游離肼與異煙肼的斑點(diǎn)應(yīng)完全分離，游離肼的Rf值約為0.75，異煙肼的Rf值約為0.56。在供試品溶液主斑點(diǎn)前方與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。2.有關(guān)物質(zhì)例9.硝苯地平中有關(guān)物質(zhì)的檢查：避光操作。取本品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；另取2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯（雜質(zhì)Ⅰ）對(duì)照品與2,6-二甲基-4-(2-亞硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯（雜質(zhì)Ⅱ）對(duì)照品，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含10μg的混合溶液，作為對(duì)照品貯備液；分別精密量取供試品溶液與對(duì)照品貯備液各適量，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1ml中分別含硝苯地平2μg、雜質(zhì)Ⅰ1μg與雜質(zhì)Ⅱ1μg的混合溶液，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（60：40）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm。取硝苯地平對(duì)照品、雜質(zhì)Ⅰ對(duì)照品與雜質(zhì)Ⅱ?qū)φ掌犯鬟m量，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中各約含1mg、10μg與10μg的混合溶液，取20μl，注入液相色譜儀，雜質(zhì)Ⅰ峰、雜質(zhì)Ⅱ峰與硝苯地平峰之間的分離度均應(yīng)符合要求。取對(duì)照溶液20μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使硝苯地平色譜峰的峰高約為滿(mǎn)量程的50％；再精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。供試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)Ⅰ峰、雜質(zhì)Ⅱ峰保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，均不得過(guò)0.1％；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液中硝苯地平峰面積（0.2％）；雜質(zhì)總量不得過(guò)0.5％。四、含量測(cè)定1.氧化還原滴定法（1）溴酸鉀滴定法異煙肼與溴酸鉀反應(yīng)的摩爾比為3∶2

例10.注射用異煙肼的含量測(cè)定：取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱(chēng)取約0.2g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度。搖勻；精密量取25ml，加水50ml、鹽酸20ml與甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）緩緩滴定（溫度保持在18～25℃）至粉紅色消失。每1ml溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。（2）溴量法異煙肼與溴反應(yīng)的摩爾比為1∶2

例11.BP異煙肼注射液的含量測(cè)定：精密量取本品適量（約相當(dāng)于異煙肼0.4g），加水稀釋至250ml，搖勻。精密量取25ml，置具塞錐形瓶中，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀1g，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。（3）鈰量法硝苯地平與硫酸鈰反應(yīng)的摩爾比為1∶2

例12.硝苯地平的含量測(cè)定：取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇50ml，微熱使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、鄰二氮菲指示液3滴，立即用硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，在水浴中加熱至50℃左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.32mg的C17H18N2O6。2.非水堿量法

例13.尼可剎米的含量測(cè)定：取本品約0.15g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸10ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.82mg的C10H14N2O。3.紫外分光光度法

例14.尼可剎米注射液的含量測(cè)定：用內(nèi)容量移液管精密量取本品2ml，置200ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻；精密量取適量，加0.5％硫酸溶液定量稀釋成每1ml中約含尼可剎米20μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（附錄ⅣA），在263nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)（）為292計(jì)算，即得。4.高效液相色譜法例15.異煙肼的含量測(cè)定：照高效液相色譜法（附錄VD）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.02mol/L磷酸氫二鈉溶液（用磷酸調(diào)pH值至6.0）-甲醇（85∶15）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為262nm。理論板數(shù)按異煙肼峰計(jì)算不低于4000。測(cè)定法

取本品適量，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取異煙肼對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。第六節(jié)吩噻嗪類(lèi)藥物的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.基本結(jié)構(gòu)與代表藥物鹽酸氯丙嗪鹽酸異丙嗪奮乃靜鹽酸氟奮乃靜癸氟奮乃靜鹽酸三氟拉嗪鹽酸硫利達(dá)嗪（1）硫氮雜蒽母核

1）含S、N的三環(huán)共軛的大體系，S、N與苯環(huán)形成p-共軛——具有紫外吸收光譜特征

2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有還原性，易氧化呈色

3）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色（2）取代基

R：脂烴胺基、哌嗪基、哌啶基，具堿性

R：鹵素2.主要理化性質(zhì)（1）光譜特征

本類(lèi)藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般在紫外光區(qū)具有三個(gè)峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。

2位上的取代基（R′）不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移。其結(jié)構(gòu)中-2價(jià)的硫，易氧化，其氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。吩噻嗪類(lèi)藥物隨取代基R和R′的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜。圖吩噻嗪及其氧化產(chǎn)物的紫外吸收?qǐng)D譜（2）易被氧化呈色（3）易與金屬離子絡(luò)合呈色（4）弱堿性二、鑒別試驗(yàn)1.紫外光譜與紅外光譜

例1.鹽酸氯丙嗪的鑒別：取本品，加鹽酸溶液（9→1000）制成每lml中含5g的溶液，照紫外可見(jiàn)分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在254nm與306nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在254nm的波長(zhǎng)處吸光度約為0.46。例2.鹽酸異丙嗪片的鑒別：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸異丙嗪100mg），加三氯甲烷10ml，研磨溶解，濾過(guò)，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?jīng)減壓干燥，依法測(cè)定。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜（光譜集350圖）一致。2.顯色反應(yīng)（1）氧化劑氧化顯色氧化劑

硫酸、硝酸、過(guò)氧化氫例3.奮乃靜的鑒別：取本品5mg，加鹽酸與水各1ml，加熱至80℃，加入過(guò)氧化氫溶液數(shù)滴，即顯深紅色；放置后，紅色漸褪去。例4.鹽酸氟奮乃靜的鑒別：取本品5mg，加硫酸5ml使溶解，即顯淡紅色；溫?zé)岷笞兂杉t褐色。

例5.癸氟奮乃靜的鑒別：取本品約50mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化鈀溶液3ml，即有沉淀生成，并顯紅色，再加過(guò)量的氯化鈀溶液，顏色變深。

（2）與鈀離子絡(luò)合顯色3.分解產(chǎn)物的反應(yīng)例6.癸氟奮乃靜的鑒別：取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20min，放冷，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過(guò)，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。4.色譜法三、有關(guān)物質(zhì)的檢查四、含量測(cè)定1.非水堿量法

利用吩噻嗪類(lèi)藥物10位取代基上脂烴胺基、哌啶基、哌嗪基的堿性，可在非水介質(zhì)中直接用高氯酸滴定。例7.奮乃靜注射液的含量測(cè)定：精密量取本品適量（約相當(dāng)于奮乃靜125mg），置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液2ml使成堿性，用三氯甲烷振搖提取4次，每次20ml，合并提取液，以置有無(wú)水硫酸鈉5g的干燥濾紙濾過(guò)，濾液置水浴上蒸干，加冰醋酸10ml溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.20mg的C21H26ClN3OS。本法為消除溶劑水對(duì)測(cè)定的干擾，樣品堿化、有機(jī)溶劑提取，揮干有機(jī)溶劑后，再照原料藥的方法測(cè)定。奮乃靜與高氯酸反應(yīng)的摩爾比為1∶2

例8.JP鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定：精密量取本品適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪0.15g），置分液漏斗中，加水30ml與20%氫氧化鈉溶液10ml，用乙醚30ml提取2次，再用乙醚20ml提取3次，合并提取液；用水10ml逐次洗滌上述提取液，直至水層遇酚酞指示液不再顯紅色。水浴濃縮乙醚層至20ml，加無(wú)水硫酸鈉5g，靜置20分鐘，脫脂棉過(guò)濾，乙醚洗滌，合并洗液與濾液，水浴揮干乙醚。殘?jiān)颖?0ml與冰醋酸5ml使溶解，加溴甲酚綠-結(jié)晶紫混合指示液3滴，用高氯酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由紫紅色變?yōu)樗{(lán)紫色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于17.77mg的C17H19ClN2S·HCl。3.紫外-可見(jiàn)分光光度法（1）直接紫外分光光度法

ChP2005鹽酸異丙嗪：片劑測(cè)定波長(zhǎng)為249nm（為910）；注射液為了消除抗氧劑維生素C（max243nm）對(duì)測(cè)定的干擾，測(cè)定波長(zhǎng)改為299nm（為108）。

同理，鹽酸氯丙嗪片劑測(cè)定波長(zhǎng)為254nm（為915）；注射液測(cè)定波長(zhǎng)改為306nm（為115）。

ChP2010鹽酸氯丙嗪注射液測(cè)定波長(zhǎng)為254nm

例9.鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定：避光操作。精密量取本品適量（約相對(duì)于鹽酸氯丙嗪50mg），置200ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（附錄ⅣA），在254nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系數(shù)為915計(jì)算，即得。（2）萃取后紫外分光光度法

例10.USP鹽酸異丙嗪口服溶液的含量測(cè)定：避光操作。精密量取本品適量（約相當(dāng)于鹽酸異丙嗪25mg），置250ml分液漏斗中，加氨試液10ml，用三氯甲烷振搖提取6次，每次40ml，合并三氯甲烷液，用鹽酸溶液（1→9）25ml洗滌三氯甲烷液，再用三氯甲烷25ml洗滌酸溶液，洗液并入三氯甲烷提取液。水浴加熱至三氯甲烷提取液的體積約為5～10ml，通入流通空氣至三氯甲烷液完全蒸干。加硫酸溶液（1→100）微溫使殘?jiān)芙?，?00ml量瓶中，放冷，用硫酸溶液（1→100）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；以硫酸溶液（1→100）作空白，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在298nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另精密稱(chēng)取鹽酸異丙嗪對(duì)照品適量，加硫酸溶液（1→100）溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50μg的對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。（3）萃取—雙波長(zhǎng)分光光度法1）原理

在待測(cè)組分（a）的最大吸收波長(zhǎng)（測(cè)定波長(zhǎng)，1）處測(cè)定待測(cè)組分和干擾組分（b）吸光度的總和；另選一適當(dāng)波長(zhǎng)（參比波長(zhǎng)，2）測(cè)定吸光度，并使干擾組分在測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)處的吸光度相等，即，而待測(cè)組分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處吸光度的差值足夠大。2）定量依據(jù)

樣品在二波長(zhǎng)下吸光度差值（A）：即，吸光度差值（A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)。3）必要條件①干擾組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸光度相等②待測(cè)組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸光度相差足夠大4）應(yīng)用①萃取除去抗氧劑的干擾

②雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定

排除氧化產(chǎn)物的干擾，對(duì)照法比較法定量

測(cè)定波長(zhǎng)

254nm

參比波長(zhǎng)277nm

例11.USP鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定：精密量取本品適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪100mg），置500ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置250ml分液漏斗中，加水20ml，加氨試液使成堿性，用乙醚振搖提取4次，每次25ml，合并乙醚液，用0.1mol/L鹽酸溶液振搖提取4次，每次25ml，合并鹽酸提取液，置250ml量瓶中，通氣除去殘留乙醚，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；以0.1mol/L鹽酸溶液作空白，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，分別在254nm及277nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另精密稱(chēng)取鹽酸氯丙嗪對(duì)照品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含8μg的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。（4）二階導(dǎo)數(shù)分光光度法

干擾物的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線(xiàn)的一條直線(xiàn)，不干擾測(cè)定

因此可從二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰～谷距離，對(duì)照品比較法定量

例12.BP鹽酸氟奮乃靜片（2mg/片或≥2mg/片）的含量測(cè)定：避光操作。取本品10片，置1000ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液20ml，超聲振蕩使分散，加鹽酸-乙醇溶液（取80％乙醇溶液990ml，加1.0mol/L鹽酸溶液10ml，搖勻）600ml，振搖20分鐘，用鹽酸-乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在230～300nm的波長(zhǎng)區(qū)間記錄二階導(dǎo)數(shù)吸收光譜，量取266nm與258nm波長(zhǎng)處的峰-谷振幅值；另精密稱(chēng)取鹽酸氟奮乃靜對(duì)照品適量，加鹽酸-乙醇溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含