微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化

微生物培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化第1頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對(duì)性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！

微生物讓人類(lèi)步步為營(yíng)!2023/7/112第2頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和人類(lèi)對(duì)疾病的不斷認(rèn)識(shí)，醫(yī)學(xué)的學(xué)科分類(lèi)越來(lái)越細(xì)，疾病的分類(lèi)越來(lái)越完善，而與之相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)也日趨精密復(fù)雜。在多數(shù)情況下，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)比病人的主訴敏感、準(zhǔn)確、客觀，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)疾病的診斷和治療越來(lái)越依賴(lài)于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果?！熬由魇迹钪晾?，謬以千里”

——《禮記》2023/7/113第3頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月良好的標(biāo)本是成功了一半！

為了取得準(zhǔn)確的、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量的檢驗(yàn)的第一步。沒(méi)有高質(zhì)量的標(biāo)本，再先進(jìn)、再精密的儀器也得不出準(zhǔn)確的結(jié)果，而很多采集標(biāo)本的患者和醫(yī)務(wù)人員都有忽視了標(biāo)本的采集質(zhì)量而引起結(jié)果很大的偏差的經(jīng)歷。2023/7/114第4頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵；但由于標(biāo)本的采集和運(yùn)送常有護(hù)士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問(wèn)題所在之處，造成的后果是？．．．．．．

臨床醫(yī)生最不能接受的問(wèn)題:陽(yáng)性率低、標(biāo)本污染2023/7/115第5頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月棉花纖維+竹/木條

抑菌區(qū)是因?yàn)椋褐参锓置诔鰜?lái)的：脂肪酸；樹(shù)脂；福爾馬林；2023/7/116第6頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月氯氣，重金屬與膠水的影響

2023/7/117第7頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月推薦使用專(zhuān)業(yè)運(yùn)送培養(yǎng)基

多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧+厭氧低氧化的環(huán)境–不會(huì)對(duì)標(biāo)本的微生物造成損害拭子是深入培養(yǎng)基中來(lái)保護(hù)苛養(yǎng)菌與厭氧菌兩面是以塑料密封,不透水和漏氣–減少污染和維持缺氧環(huán)境第8頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月流感嗜血桿菌在三種不

同的運(yùn)送基的存活率第9頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作4.采樣后立即送檢5.棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康?023/7/1110第10頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月如何提高細(xì)菌陽(yáng)性檢出率？標(biāo)本采集時(shí)機(jī)標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運(yùn)送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境2023/7/1111第11頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月“正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗(yàn)技師都必須通曉其要領(lǐng)?！?/p>

——著名的臨床微生物檢驗(yàn)專(zhuān)著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray2023/7/1112第12頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)菌學(xué)試驗(yàn)的各種標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件

第13頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月正常菌群的分布位部常見(jiàn)菌種皮膚表皮葡萄球菌、類(lèi)白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類(lèi)白喉?xiàng)U菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、卡他球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類(lèi)白喉?xiàng)U菌等胃正常一般無(wú)菌

腸道類(lèi)桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等陰道乳酸桿菌、白色念球菌、類(lèi)白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌等

尿道表皮葡萄球菌、類(lèi)白喉?xiàng)U菌、恥垢桿菌等第14頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月血培養(yǎng)標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2023/7/1115第15頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、血培養(yǎng)指征患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)、體溫超過(guò)38℃或低體溫，懷疑血流感染時(shí)，尤其存在以下情況時(shí)，應(yīng)抽血做細(xì)菌和真菌培養(yǎng)：醫(yī)院內(nèi)肺炎；留置中心靜脈導(dǎo)管超過(guò)72小時(shí)；感染性心內(nèi)膜炎；骨髓炎；有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病；免疫缺陷伴全身感染癥狀；臨床醫(yī)生懷疑有血液感染可能的其他情況。2023/7/1116第16頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、采血時(shí)機(jī)一旦懷疑有血流感染可能，應(yīng)立即采血做血培養(yǎng)，最好在抗生素使用前或停用抗生素24小時(shí)后，以寒戰(zhàn)、發(fā)熱時(shí)采集為宜。2023/7/1117第17頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/7/1118第18頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

三、采血流程㈠消毒1、培養(yǎng)瓶消毒程序：用消毒液消毒培養(yǎng)瓶橡皮塞，待干燥后使用。2、皮膚消毒程序：用消毒液從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)5cm以上，待消毒液揮發(fā)干燥后（常需30秒以上）穿刺采血。㈡靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種成人用注射器無(wú)菌穿刺取血后，排盡針頭內(nèi)空氣，直接注入血培養(yǎng)瓶，勿換針頭（如果行第二次穿刺或用頭皮針取血時(shí)，應(yīng)換針頭），先注入?yún)捬跖囵B(yǎng)瓶，避免注入空氣，然后注入需氧培養(yǎng)瓶，輕輕混勻以防血液凝固。近年來(lái)，臨床普遍采用負(fù)壓血培養(yǎng)瓶，將血從患者靜脈直接吸入血培養(yǎng)瓶，減少污染環(huán)節(jié)。2023/7/1119第19頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月㈢注意事項(xiàng)1、檢驗(yàn)單需注明抗菌藥物使用情況、血液采集時(shí)間和部位、臨床診斷等患者信息。2、采血部位通常為肘靜脈，疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜，切忌在靜滴抗生素的靜脈處采血。除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染，否則不應(yīng)從留置靜脈或動(dòng)脈導(dǎo)管取血，因?yàn)閷?dǎo)管易被皮膚正常菌群污染。3、采血次數(shù)：對(duì)于成年患者，應(yīng)該同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本，在兩個(gè)不同部位分離到同樣菌種才能確定是病原菌。2023/7/1120第20頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第21頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：在24小時(shí)內(nèi)取血3次，每次間隔不少于30分鐘。必要時(shí)次日再做血培養(yǎng)2次。5、采血量：以培養(yǎng)基與血液之比10:1為宜，以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。采血量少會(huì)明顯降低陽(yáng)性率。成人每次每培養(yǎng)瓶采血8~10ml，嬰幼兒每次培養(yǎng)瓶采血2ml。2023/7/1122第22頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第23頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、運(yùn)送要求1、所有標(biāo)本采集后都應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2小時(shí)內(nèi)，如果不能及時(shí)送檢，宜置于室溫環(huán)境。血培養(yǎng)瓶送到檢驗(yàn)科放入培養(yǎng)箱前，不應(yīng)暫存于冰箱內(nèi)。2、送檢標(biāo)本應(yīng)正確粘貼條形碼，注明采樣時(shí)間和送檢時(shí)間。3、安全防護(hù)：放標(biāo)本的容器必須防漏，禁止將滲漏的標(biāo)本送往實(shí)驗(yàn)室。第24頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第25頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第26頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第27頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第28頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第29頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月尿液標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2023/7/1130第30頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、采集時(shí)機(jī)宜為抗菌藥物使用前的清晨第一次尿液。二、采集方法（一）、清潔中段尿1、女性：采集前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液等沖洗外陰，用手指分開(kāi)陰唇，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無(wú)菌容器內(nèi)。2、男性：采集前用肥皂水或0.05%~0.1%的碘伏溶液清洗尿道口，擦干后上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10~20ml于無(wú)菌容器內(nèi)。（二）、恥骨上膀胱穿刺主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒，脊柱損傷患者的尿液采集。先用0.25%的碘伏消毒穿刺部位皮膚，然后使用無(wú)菌注射器直接從恥骨聯(lián)合與臍連線(xiàn)上高于恥骨聯(lián)合2cm處刺入膀胱吸取尿液10~20ml于無(wú)菌容器內(nèi)。2023/7/1131第31頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）、導(dǎo)尿管尿1、直接導(dǎo)尿法：使用0.05%~0.1%的碘伏溶液消毒會(huì)陰局部，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，先棄其前段尿液約15ml，再留取中段尿10~20ml于無(wú)菌容器內(nèi)。2、留置導(dǎo)尿管法：醫(yī)院內(nèi)尿路感染中，臨床最常用方法。采集前先夾住導(dǎo)尿管，采集時(shí)則松管棄其前段尿液，使用0.25%~0.5%的碘伏消毒導(dǎo)尿管的采樣部位，使用無(wú)菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管（從采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁）抽取10~20ml尿液于無(wú)菌容器內(nèi)。3、回腸造口導(dǎo)尿管法：摘除導(dǎo)管，棄去里面的尿液，先用0.05%~0.1%的碘伏消毒吻合口，再將導(dǎo)尿管插入到清潔的吻合口，直至筋膜的深部采集10~20ml尿液于無(wú)菌容器內(nèi)。2023/7/1132第32頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）、小兒收集包對(duì)于無(wú)自控能力的小兒可應(yīng)用收集包采集尿液，這種裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽(yáng)性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)檢。三、標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢并接種，室溫下保持時(shí)間不宜超過(guò)2小時(shí)（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存）。如果不能及時(shí)運(yùn)送或接種，應(yīng)4℃冷藏。但保存時(shí)間也不應(yīng)超過(guò)8小時(shí)。2023/7/1133第33頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、注意事項(xiàng)1.不應(yīng)從集尿袋中采集尿液。2.尿液中不應(yīng)加防腐劑或消毒劑3.若尿液培養(yǎng)前患者曾使用抗菌藥物，應(yīng)反復(fù)多次送檢。4.多次采集或24小時(shí)尿液不應(yīng)用于尿液培養(yǎng)。5.除非進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，不應(yīng)對(duì)長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)進(jìn)行尿液培養(yǎng)。6.培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)、菌落計(jì)數(shù)以及微生物種類(lèi)等進(jìn)行綜合判斷。2023/7/1134第34頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月手術(shù)部位感染標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)化操作第35頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、一般原則1.在抗菌藥物使用前，且僅在有臨床感染癥狀或傷口惡化或長(zhǎng)期不能愈合時(shí)采集標(biāo)本。2.皮膚或黏膜表面的清潔。⑴閉合傷口和穿刺物標(biāo)本：消毒方法同血培養(yǎng)標(biāo)本的皮膚消毒。⑵開(kāi)放傷口：無(wú)菌生理鹽水充分沖洗傷口部位，不可以用消毒劑。3.采集新鮮的感染組織，避免采集淺表的組織碎屑。4.若可以采集穿刺物或活檢標(biāo)本，應(yīng)避免拭子標(biāo)本。二、容器1.較大的標(biāo)本：含有少量生理鹽水的帶螺紋口的無(wú)菌塑料容器。2.標(biāo)本較小或拭子標(biāo)本：MW&ETRANSWAB運(yùn)輸培養(yǎng)基，適用于需氧和厭氧菌。第36頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、采集方法㈠封閉性膿腫1.注射器穿刺抽取膿液。2.若無(wú)法抽到膿液，應(yīng)先皮下注射少量無(wú)菌生理鹽水，再次穿刺抽吸膿液；若膿液過(guò)多，應(yīng)先切開(kāi)引流，在基底部或膿腫壁采集標(biāo)本。膿液的量以大于1ml為宜。3.排除注射器內(nèi)部及針頭的氣體，用無(wú)菌橡皮塞封閉針頭送檢；或直接打入血培養(yǎng)瓶中。疑為厭氧菌，應(yīng)迅速將膿液打入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶中。㈡組織和活檢標(biāo)本1.采集足夠大的組織，體積以1mm3為宜，避免在壞死區(qū)域采集。2.將小塊的組織放在運(yùn)輸培養(yǎng)基內(nèi)；較大的放在無(wú)菌容器中，并加入少量無(wú)菌生理鹽水。第37頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月㈢開(kāi)放傷口1.無(wú)菌生理鹽水徹底沖洗淺表部位，去除表面的滲出物和碎屑。2.用拭子深入傷口的基底部或傷口-正常組織邊緣部采集兩個(gè)標(biāo)本，分別用于培養(yǎng)和革蘭氏染色。四、標(biāo)本的標(biāo)識(shí)填寫(xiě)患者信息、標(biāo)本類(lèi)型（深部組織、表淺組織、膿腫和穿刺物等）、標(biāo)本的來(lái)源（腹腔、腿和上臂等），記錄標(biāo)本采集的日期和時(shí)間及是否在使用抗生藥物前采集，選擇檢查項(xiàng)目（需氧培養(yǎng)或厭氧培養(yǎng)）。五、標(biāo)本的送檢為了更好地分離病原菌，標(biāo)本應(yīng)在采集后的30分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，送檢時(shí)應(yīng)保持標(biāo)本的濕潤(rùn)（盡量采用運(yùn)輸培養(yǎng)基，組織可以放在生理鹽水中）。在送檢前或運(yùn)送過(guò)程中，禁止將標(biāo)本放于冰箱。若不能及時(shí)送檢，運(yùn)輸培養(yǎng)基中標(biāo)本應(yīng)室溫保存。但最長(zhǎng)不可超過(guò)24小時(shí)。第38頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本的采

集及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2023/7/1139第39頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

(1)應(yīng)首先用無(wú)菌生理鹽水清洗膿液及病灶的雜菌，再采集標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。(2)一般用棉拭子采取膿血液及病灶的深部的分泌物，瘺管也可以無(wú)菌手續(xù)采取組織放入無(wú)菌試管內(nèi)送檢。2023/7/1140第40頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

(3)膿腫標(biāo)本以無(wú)菌注射器抽取為好，最好在切開(kāi)排膿時(shí)，以無(wú)菌棉拭子采取，也可以將沾有膿汁的最內(nèi)層敷料放人無(wú)菌平皿中送檢。2023/7/1141第41頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

（4）先用無(wú)菌生理鹽水棉簽擦拭切口表面2遍，去除表面的污染菌，再用含生理鹽水的無(wú)菌棉簽用力擦拭病灶邊緣或膿腔囊壁后放入無(wú)菌試管中送細(xì)菌室。厭氧培養(yǎng)時(shí)應(yīng)吸取深部標(biāo)本而不能擦拭表面。2023/7/1142第42頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月其他事項(xiàng)

疑有放線(xiàn)菌感染時(shí)選取膿液中的“硫磺樣顆?！庇跓o(wú)菌容器內(nèi)送檢當(dāng)創(chuàng)傷出血，敷用藥物2h內(nèi)及燒傷在12h內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本。2023/7/1143第43頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

及運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作

2023/7/1144第44頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。采集方法：無(wú)菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個(gè)無(wú)菌小瓶中（各1～2ml）。用于細(xì)菌和病毒檢測(cè)時(shí)腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測(cè)腦脊液量不少于2ml。2023/7/1145第45頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)本采集后注入無(wú)菌小瓶中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。腦膜炎奈瑟菌離體后會(huì)迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會(huì)影響檢出率。2023/7/1146第46頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月穿刺液類(lèi)標(biāo)本的采取穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標(biāo)本。2023/7/1147第47頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月采集方法：①無(wú)菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本；②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml。胸腔積液、腹水可抽取10ml,心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取2～5ml。③標(biāo)本采集后注入無(wú)菌小瓶或無(wú)菌試管中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。2023/7/1148第48頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml，置無(wú)菌管內(nèi)送檢；膽汁培養(yǎng)標(biāo)本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術(shù)中留取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無(wú)菌管內(nèi)送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢。2023/7/1149第49頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月眼.耳.鼻培養(yǎng)標(biāo)本的采取

眼、耳、鼻培養(yǎng)標(biāo)本用拭子常規(guī)采集各種標(biāo)本。標(biāo)本采集過(guò)程中應(yīng)注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標(biāo)本采集后連同拭子一起置無(wú)菌管內(nèi)送檢。2023/7/1150第50頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

痰標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2023/7/1151第51頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、采集目的一般可用于普通細(xì)菌、分枝桿菌、真菌和軍團(tuán)菌的涂片或培養(yǎng)檢測(cè)，經(jīng)氣管穿刺吸引物可用于厭氧菌的檢測(cè)。二、一般原則1、采集標(biāo)本的最佳時(shí)機(jī)應(yīng)在使用抗菌藥物之前。2、宜采集清晨第二口痰。3、對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天一次，連續(xù)2~3天。不建議24小時(shí)內(nèi)多次采集送檢，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變。4、懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。2023/7/1152第52頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、如何獲得較高“質(zhì)量”的痰？

清晨頭幾口(2-3口）痰菌的陽(yáng)性率高，因?yàn)楹粑纼?nèi)的分泌物經(jīng)過(guò)一夜的聚集總比白天吐的1口痰中含菌量多。如果病人痰多則以第3-4口痰為更好，這是因?yàn)轭^1-2口痰往往混有咽喉部的分泌物，而第3—4口痰來(lái)自呼吸道的深部。要想留到理想的痰標(biāo)本，病人清晨起床后先做幾次深呼吸，然后用力咳嗽以得到呼吸道深部的痰。所以在告訴病人留痰標(biāo)本時(shí)，不應(yīng)僅簡(jiǎn)單地說(shuō)一聲留早晨第一口痰就算了，而應(yīng)具體加以指導(dǎo)，不然痰培養(yǎng)的陽(yáng)性率不會(huì)高。

第53頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、采集方法㈠自然咳痰法與霧化導(dǎo)痰法1、用物準(zhǔn)備：無(wú)菌容器、生理鹽水（250ml或500ml）、化驗(yàn)單。2、核對(duì)患者床號(hào)、姓名等。3、無(wú)痰或痰量極少者可用3%~5%氯化鈉溶液5ml霧化吸入約5分鐘后留取痰液。4、如有可能，應(yīng)在醫(yī)護(hù)人員直視下留取清晨第二口痰。囑咐患者留取前摘去牙托、清潔口腔、如刷牙后反復(fù)生理鹽水漱口；深吸氣后用力自氣管深部咳出痰液，置無(wú)菌容器內(nèi)，應(yīng)盡可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入樣品，不應(yīng)用紙巾包裹痰液。㈡支氣管鏡法鼻或口腔插入支氣管鏡。常用采集方法有經(jīng)支氣管鏡吸引、支氣管肺泡灌洗、防污染毛刷采用或防污染支氣管肺泡灌洗等。2023/7/1154第54頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月㈢經(jīng)人工氣道吸引法1、用物準(zhǔn)備：負(fù)壓吸引器、生理鹽水、一次性吸痰管、無(wú)菌手套、無(wú)菌容器（試管）、化驗(yàn)單。2、核對(duì)患者床號(hào)、姓名等。3、將患者頭部轉(zhuǎn)向操作者一側(cè)。4、進(jìn)行手衛(wèi)生后將一次性吸痰管末端拆開(kāi)，連接吸引器，調(diào)節(jié)吸引器至適宜負(fù)壓（成人：40.0~53.3kPa；小兒：＜40.0kPa）。5、將一次性吸痰管外包裝去除，戴手套持吸痰管試吸生理鹽水，檢查管道是否通暢。2023/7/1155第55頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6、折疊一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工氣道至適宜深度，放開(kāi)吸痰管末端，輕柔、靈活、迅速地左右旋轉(zhuǎn)上提吸痰管吸痰。見(jiàn)吸痰管內(nèi)有痰液吸出，即折疊一次性吸痰管退出。將一次性吸痰管與吸引器分離（使用人工呼吸機(jī)者，一次吸痰時(shí)間不超過(guò)15秒，吸痰前后需吸入高濃度氧氣1——2分鐘）。7、將痰液注入無(wú)菌容器內(nèi)，如痰液黏稠可用一次性針筒向吸痰管末端注入少量生理鹽水，將痰液沖洗入無(wú)菌容器內(nèi)。四、運(yùn)送和保存應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，否則應(yīng)4℃冷藏，但放置時(shí)間不可超過(guò)24小時(shí)。2023/7/1156第56頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第57頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月上呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)化操作2023/7/1158第58頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月【標(biāo)本送檢指征】1病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2023/7/1159第59頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月【標(biāo)本的采集方法】囑患者先用清水漱口，由檢查者將其舌外拉使懸雍垂盡可能向外牽引,用壓舌板將舌向下向外壓，用無(wú)菌棉拭子越過(guò)舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次然后送檢，拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。2023/7/1160第60頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月生殖道標(biāo)本的采集

1、男性標(biāo)本：（1）如疑為急性淋病奈瑟菌或其他化膿性細(xì)菌感染應(yīng)在清洗龜頭部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒劑消毒后，擠出分泌物立即以無(wú)菌棉拭子采取，立即送檢，或以專(zhuān)用的細(xì)拭子插入尿道口1-2cm，停留十余秒鐘輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本置無(wú)菌容器。（2）如疑為前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染應(yīng)由醫(yī)師按摩前列腺，以無(wú)菌手續(xù)自尿道口采取前列腺液送檢。2023/7/1161第61頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、女性標(biāo)本：（1）成年婦女自宮頸采取標(biāo)本，應(yīng)在擴(kuò)陰器的支持下，選取有炎癥或分泌物部位，先以無(wú)菌棉拭子拭去表淺層分泌物，再用另一拭子取分泌物送檢。如做厭氧或真菌培養(yǎng)應(yīng)另外采取標(biāo)本。外陰糜爛：用生理鹽水清洗后用無(wú)菌棉拭子擦洗，取邊緣的分泌物至無(wú)菌容器，立即送檢。（2）如未成年幼女疑患性病傳播疾病時(shí)，不應(yīng)使用擴(kuò)陰器，以一無(wú)菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。2023/7/1162第62頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月糞便標(biāo)本采集2023/7/1163第63頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月【標(biāo)本送檢指征】1急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3無(wú)痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長(zhǎng)期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾，多見(jiàn)于嬰幼兒和小兒。2023/7/1164第64頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月腸道正常菌群比較復(fù)雜，在腸道中菌群間有共生或過(guò)路、互不相干和制約關(guān)系等現(xiàn)象。一旦失去了正常生態(tài)平衡，在臨床上的一個(gè)表現(xiàn)就是菌群失調(diào)癥。如常住細(xì)菌在種群和數(shù)量上的比例失調(diào)就能引起慢性腹瀉，因此在留取糞便標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意防止細(xì)菌污染。2023/7/1165第65頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月糞便標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)挑取有膿血、粘液部分的糞便2—3g；液狀糞便取絮狀物，盛于滅菌的廣口盒中，并及時(shí)送檢和接種。在無(wú)法獲得糞便時(shí)，可用無(wú)菌生理鹽水或增菌液濕潤(rùn)直腸，將棉拭子插入肛門(mén)4～5cm深處(小兒2～3cm)，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)一周擦取直腸表面的粘液后取出，盛入無(wú)菌試管或保存液中送檢。2023/7/1166第66頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月采集時(shí)間：

1.腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便；

2.傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便；

3.懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。2023/7/1167第67頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本

標(biāo)本采集1.要注意避免標(biāo)本污染和與空氣接觸，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作；2.用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、膽汁、腦脊液或無(wú)菌手術(shù)抽出膿液；3.抽出液體標(biāo)本后，要盡快排除注射器內(nèi)的空氣。2023/7/1168第68頁(yè)，課件共75頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月厭氧菌感染