腦脊液檢驗(yàn)-課件

第三節(jié)腦脊液檢驗(yàn)1ppt課件

腦脊液（cerebrospinalfluid，CSF）是存在于腦室及蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)的無(wú)色透明液體。正常人：120-180ml?存在蛛網(wǎng)膜下腔；1/4腦室系統(tǒng)2ppt課件

腦脊液形成大約70%的腦脊液是在腦室的脈絡(luò)叢通過(guò)主動(dòng)分泌和超濾的聯(lián)合過(guò)程形成的；約30%的腦脊液是在大腦和脊髓的細(xì)胞間隙形成的間質(zhì)液。形成的腦脊液經(jīng)第三、第四腦室進(jìn)入小腦延髓池，然后分布于蛛網(wǎng)膜下隙內(nèi)。腦脊液吸收是通過(guò)蛛膜絨毛而返回靜脈。

3ppt課件

腦脊液功能保護(hù)腦和脊髓免受外力震蕩損傷；調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力；供給中樞神經(jīng)系統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并運(yùn)走其代謝產(chǎn)物；調(diào)節(jié)堿貯量，保持PH在7.31-7.34；通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)生物胺類物質(zhì)參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。

4ppt課件由于血腦屏障的存在，脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞對(duì)血漿各種物質(zhì)的分泌的超濾具有選擇性。氯、鈉、鎂離子及乙醇等最易通過(guò)；白蛋白、葡萄糖、乳酸、鈣離子、氨基酸、尿素和肌酐次之；而大分子如纖維蛋白原、補(bǔ)體、抗體、毒物和某些藥物以及膽素紅素、膽固醇等則極難或不能通過(guò)。5ppt課件中樞神經(jīng)系統(tǒng)任何部位發(fā)生器質(zhì)性病變時(shí)，如感染、炎癥、腫瘤、外傷、水腫和阻塞等都可引起腦脊液成分的改變。通過(guò)對(duì)腦脊液壓力、一般性狀、顯微鏡、化學(xué)成分、微生物、免疫學(xué)的檢查，達(dá)到對(duì)疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷的目的。6ppt課件

第一節(jié)標(biāo)本采集適應(yīng)證

①原因不明的劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓。②有腦膜刺激癥狀者，如腦膜感染性疾?、垡捎酗B內(nèi)出血中樞神經(jīng)梅毒、腦膜白血病患者等。④中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患需系統(tǒng)觀察或需椎管內(nèi)給藥、造影和腰麻等。

7ppt課件禁忌證：①各種原因所致顱內(nèi)高壓，特別是有視神經(jīng)乳頭水腫或有腦疝先兆者；②腰椎結(jié)核或穿刺部位有感染；③有出血傾向者；④身體狀況不允許穿刺者如休克、衰竭或?yàn)l危狀態(tài)的人；⑤顱后窩有占位性病變或伴有腦干癥狀的病人。

8ppt課件標(biāo)本采集

腦脊液標(biāo)本的采集通過(guò)腰椎穿刺術(shù)(腰穿)獲得。標(biāo)本采集后分別收集于三個(gè)無(wú)菌小瓶中，第一管作細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)，第二管作化學(xué)或免疫學(xué)檢查，第三管作一般性狀檢查和顯微鏡檢查。標(biāo)本采集后要立即送檢，存放時(shí)間不得超過(guò)1h。

9ppt課件

第二節(jié)理學(xué)檢查

顏色：正常腦脊液是無(wú)色透明的液體。在病理情況下，腦脊液可呈不同顏色改變。

10ppt課件紅色：常見(jiàn)于穿刺損傷或出血性病變。前者在留取三管標(biāo)本時(shí)，第一管為血性，以后兩管顏色逐漸變淡，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果也依次減少，經(jīng)離心后上清液呈無(wú)色透明。當(dāng)蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血時(shí)，三管均呈紅色，離心后上清液顯淡紅色或黃色。

11ppt課件

黃色：可因陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血、椎管梗阻、化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、重癥如核黃疸等引起。12ppt課件白色或灰白色：多因白細(xì)胞增加所致，常見(jiàn)于化膿性腦膜炎。褐色或黑色：常見(jiàn)于腦膜黑色素瘤。13ppt課件

透明度

正常腦脊液清晰透明。病毒性腦炎、神經(jīng)梅毒等疾病的腦脊液也可呈透明的外觀。腦脊液混濁由感染、出血所致；混濁程度與細(xì)胞數(shù)量有關(guān)。腦脊液中白細(xì)胞如超過(guò)300×106/l時(shí)可變?yōu)榛鞚?；蛋白質(zhì)或含大量微生物也使其混濁。填寫(xiě)報(bào)告時(shí)用“清晰透明”、“微濁”、“混濁”等描述。14ppt課件

凝固性薄膜、凝塊和沉淀物收集腦脊液于試管內(nèi)，靜置12-24小時(shí)，正常腦脊液不形成薄膜、凝塊和沉淀物。結(jié)核性腦膜炎的腦脊液靜置12-24小時(shí)后，標(biāo)本表面有纖細(xì)的網(wǎng)膜形成；蛛網(wǎng)膜下隙梗阻時(shí)，遠(yuǎn)端的腦脊液蛋白質(zhì)含量高達(dá)15g/L此時(shí)腦脊液呈黃色膠胨狀。填寫(xiě)報(bào)告“無(wú)凝塊”、“有凝塊”、“有薄膜”、“膠胨狀”描述。15ppt課件

比密健康人腦脊液比密為1.006-1.008腦脊液比密增高見(jiàn)于顱內(nèi)炎癥；比密減低見(jiàn)于腦脊液分泌增多16ppt課件

第三節(jié)顯微鏡檢查

一、細(xì)胞計(jì)數(shù)：包括細(xì)胞總數(shù)及白細(xì)胞計(jì)數(shù)。

17ppt課件【方法學(xué)評(píng)價(jià)】通常采用手工法細(xì)胞少時(shí)應(yīng)將腦脊液直接灌入Fuchs-Rosenthal計(jì)數(shù)板，總體積為3.6μl。改良牛鮑氏計(jì)數(shù)盤的誤差更大，所以應(yīng)增加計(jì)數(shù)面積。如果標(biāo)本內(nèi)細(xì)胞較多，可用生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液稀釋后再用人工計(jì)數(shù)，也可用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行計(jì)數(shù)。18ppt課件當(dāng)穿刺損傷血管或出血性腦血管病的血性腦脊液時(shí)，計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)已無(wú)意義，白細(xì)胞數(shù)亦須經(jīng)校正。①估計(jì)值：即以紅細(xì)胞與白細(xì)胞數(shù)之比為700：1的關(guān)系估計(jì)白細(xì)胞數(shù)。②通過(guò)外周血紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)和腦脊液中紅細(xì)胞數(shù)當(dāng)中計(jì)算出從血液中帶進(jìn)腦脊液中白細(xì)胞數(shù)。以后者較為準(zhǔn)確。19ppt課件【參考值】無(wú)紅細(xì)胞白細(xì)胞：成人（0-10）×106/L；兒童為（0-15）×106/L；新生兒為（0-30）×106/L。20ppt課件

二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)【方法學(xué)評(píng)價(jià)】直接分類：白細(xì)胞計(jì)數(shù)后即可轉(zhuǎn)高倍鏡直接分類，但不能觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，個(gè)別細(xì)胞難以辨認(rèn)。染色分類：準(zhǔn)確性高，但對(duì)細(xì)胞形態(tài)有影響。21ppt課件【參考值】正常腦脊液中白細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞，之比約為7：3，可含極少中性粒細(xì)胞；偶可見(jiàn)到軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞、室管膜細(xì)胞、脈絡(luò)膜細(xì)胞。22ppt課件

三、細(xì)胞學(xué)檢查免疫活性細(xì)胞：小淋巴細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞、漿細(xì)胞。出現(xiàn)提示免疫反應(yīng)參于了疾病過(guò)程。單核-吞噬細(xì)胞：吞噬細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)脂粒、紅細(xì)胞、含鐵血黃素等多核型白細(xì)胞：中性粒、嗜酸、嗜堿。腫瘤細(xì)胞：出現(xiàn)有確診價(jià)值。23ppt課件【方法學(xué)評(píng)價(jià)】一般用腦脊液離心沉渣涂片，經(jīng)瑞特染色后用油鏡分類，但細(xì)胞形態(tài)常受影響。細(xì)胞玻片離心沉淀儀運(yùn)用于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查，提高了癌細(xì)胞的檢出率。染色方法：如吖啶橙熒光染色法適用于瘤細(xì)胞的辨認(rèn)；非特異性酯酶染色法適用腦脊液中T細(xì)胞辨認(rèn)；高碘酸雪夫染色法用以鑒別腺癌細(xì)胞和原淋巴細(xì)胞；過(guò)氧化物酶染色用以鑒別形態(tài)相似的幼稚細(xì)胞；脂類染色法用于鑒別脂類吞噬細(xì)胞；硝基四氮唑染色法用于鑒定成熟和幼稚的中性粒細(xì)胞等。24ppt課件

【臨床意義】1.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾?、偌毙匝仔詽B出期，呈粒細(xì)胞反應(yīng)；②亞急性增殖期，呈激活淋巴細(xì)胞或單核-巨噬細(xì)胞反應(yīng)；③修復(fù)期呈淋巴細(xì)胞反應(yīng)?；撔阅X膜炎：細(xì)胞顯著增高，以中性粒細(xì)胞為主。結(jié)核性腦膜炎：細(xì)胞中度增高，發(fā)病初期以中性粒細(xì)胞為主，數(shù)天后中性粒細(xì)胞趨下降而淋巴細(xì)胞為主。特點(diǎn)粒細(xì)胞、淋巴及漿細(xì)胞同時(shí)存。25ppt課件病毒性腦炎、腦膜炎：細(xì)胞輕度增加，以淋巴細(xì)胞為主，亞急性期出現(xiàn)較早，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。新型隱球菌性腦膜炎：細(xì)胞中度增高，以淋巴細(xì)胞為主，可在腦脊液中查到新型隱球菌，必要時(shí)用印度墨汁染色予以確診。26ppt課件2.蛛網(wǎng)膜下腔出血腦室和蛛網(wǎng)膜下腔出血可見(jiàn)大量紅細(xì)胞和中性粒細(xì)胞增多，2-3天內(nèi)達(dá)高峰，在腦脊液中可發(fā)現(xiàn)吞噬細(xì)胞，出血后數(shù)小時(shí)至第3天可出現(xiàn)含有紅細(xì)胞的吞噬細(xì)胞，5天后可見(jiàn)含鐵血黃素吞噬細(xì)胞。27ppt課件表8-1穿刺損傷出血和腦及蛛網(wǎng)膜下腔出血的鑒別

檢查內(nèi)容穿刺損傷出血腦及蛛網(wǎng)膜下腔出血

外觀三管紅色逐漸變淡三管紅色均勻一致離心后上清液的顏色無(wú)色透明呈淡紅色或黃色上清液隱血試驗(yàn)陰性陽(yáng)性紅細(xì)胞形態(tài)變化無(wú)變化呈鋸齒狀或皺縮

白細(xì)胞總數(shù)不增加繼發(fā)性或反應(yīng)性增加

28ppt課件3.中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤腦脊液細(xì)胞數(shù)可正常或稍高，以淋巴細(xì)胞為主。腦脊液中能否找到腫瘤細(xì)胞取決于腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和采集標(biāo)本的多少。同時(shí)也與檢查者技術(shù)水平有關(guān)，采用細(xì)胞玻片離心沉淀儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細(xì)胞是白血病腦膜轉(zhuǎn)移的證據(jù)。29ppt課件4.腦寄生蟲(chóng)病：腦脊液細(xì)胞數(shù)升高，并可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多，約占白細(xì)胞的60%或更高。如將腦脊液離心鏡檢可發(fā)現(xiàn)血吸蟲(chóng)卵、阿米巴原蟲(chóng)、弓形體、旋毛蟲(chóng)的幼蟲(chóng)等，甚至還可找至細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的頭節(jié)或頭鉤。5．紅斑狼瘡：有時(shí)可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細(xì)胞。30ppt課件

第四節(jié)化學(xué)和免疫學(xué)檢查

31ppt課件

一、酸堿度測(cè)定正常腦脊液PH為7.31-7.34，比動(dòng)脈血的PH低。腦脊液PH比較恒定，即使全身酸堿失衡時(shí)對(duì)它的影響也甚小，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥時(shí)腦脊液PH降低，化膿性腦膜炎的腦脊液的PH降低更明顯。如同時(shí)測(cè)定腦脊液的乳酸含量則更有價(jià)值。32ppt課件

二、蛋白質(zhì)檢查蛋白質(zhì)定性蛋白質(zhì)定量33ppt課件蛋白質(zhì)定性[方法學(xué)評(píng)價(jià)]Pandy試驗(yàn)需要的CSF標(biāo)本量少，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果觀察較為明確，其沉淀的多少與蛋白質(zhì)含量成正比，臨床實(shí)驗(yàn)室常用此法，但由于該試驗(yàn)過(guò)于敏感，一部分正常人亦可出現(xiàn)極弱陽(yáng)性（土）結(jié)果。硫酸銨試驗(yàn)操作較為復(fù)雜，而且不如Pandy試驗(yàn)敏感。Ross-Jones試驗(yàn)主要檢測(cè)CSF中球蛋白含量，其靈敏度較弱，但特異性強(qiáng)，一旦試驗(yàn)陽(yáng)性，則反映球蛋白增多，臨床上其診斷價(jià)值較大。Nonne-Apett試驗(yàn)可分別檢測(cè)球蛋白和白蛋白，但操作較繁瑣，臨床較少選用。李文生試驗(yàn)并非鑒別腦膜炎的特異性試驗(yàn)，由于沉淀物界面不整齊，往往不易測(cè)量，有時(shí)兩管中沉淀物相仿，亦難以判斷。因此僅在實(shí)驗(yàn)室條件較差時(shí)考慮應(yīng)用。34ppt課件[方法學(xué)評(píng)價(jià)]比濁法：采用磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法，特點(diǎn)簡(jiǎn)單、快速，但受白蛋白/球蛋白的比值變化而影響結(jié)果，同時(shí)還受操作、速度、室溫和放置時(shí)間等影響。比色法：考馬斯亮藍(lán)、麗春紅S應(yīng)用較多，具有靈敏度較高，標(biāo)本用量少，重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，但對(duì)PH要求較嚴(yán)格。蛋白質(zhì)定量35ppt課件【參考值】

成人：腰池200-400mg/L，小腦延髓池100-250mg/L，腦室50-150mg/L。36ppt課件【臨床意義】

腦脊液蛋白質(zhì)含量增加，提示血腦屏障受破壞，常見(jiàn)于腦、脊髓及腦膜炎、腫瘤、出血等以及腦軟化、腦退化性疾病、和引起腦脊液循環(huán)梗阻性疾病等，當(dāng)腦脊液中蛋白質(zhì)在10g/L以上時(shí)，流出后呈黃色膠凍狀凝固，而且還有蛋白-細(xì)胞分離現(xiàn)象，臨床上稱為Froin綜合征，是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻性腦脊液的特征。37ppt課件

三、葡萄糖測(cè)定

[方法學(xué)評(píng)價(jià)]

腦脊液五管糖半定量法現(xiàn)已淘汰。目前已改用葡萄糖氧化酶或已糖激酶的定量測(cè)定法，后者無(wú)論特異性、準(zhǔn)確性均佳，如需將標(biāo)本保存較長(zhǎng)時(shí)間，可加入適量氟化鈉以抑制細(xì)菌或細(xì)胞對(duì)標(biāo)本中葡萄糖的酵解。38ppt課件【參考值】2.5-4.4mmol/L39ppt課件

【臨床意義】減低：中樞神經(jīng)系統(tǒng)受細(xì)菌或真菌感染時(shí)，這些病原體或被破壞的細(xì)胞都能釋放出葡萄糖分解酶使葡萄糖消耗，而使腦脊液中葡萄糖降低，尤其化膿性腦膜炎早期降低最為顯著，甚至測(cè)定不出來(lái)。結(jié)核性、隱球菌性腦膜炎的腦脊液中葡萄糖降低多發(fā)生在中、晚期，且葡萄糖含量越低預(yù)后越差。中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤：顯著降低，嚴(yán)重為零。腦寄生蟲(chóng)病：降低40ppt課件增高：主要見(jiàn)于腦出血、下丘腦損害、糖尿病等。病毒性腦炎時(shí)腦脊液中葡萄糖多為正常。41ppt課件

四、氯化物測(cè)定[方法學(xué)評(píng)價(jià)]硝酸汞滴定法簡(jiǎn)便，不需特殊儀器。但由于受到操作者技術(shù)、終點(diǎn)判斷、試劑質(zhì)量、玻璃用品清潔度等因素影響，準(zhǔn)確度和精密度較差，工作效率低，目前多被離子選擇性電極法和電量法所取代。硫氰酸汞比色法該法為血氯化物測(cè)定最常使用方法，準(zhǔn)確度和精密度良好，但不太適用于體液標(biāo)本測(cè)定。庫(kù)侖滴定法即電量分析法，為參考方法，具有高精密度和高準(zhǔn)確度特點(diǎn)。臨床應(yīng)用較少。離子選擇性電極法為常規(guī)方法，準(zhǔn)確度和精密度良好，可自動(dòng)化，臨床上應(yīng)用廣泛。42ppt課件【參考值】120-130mmol/L43ppt課件【臨床意義】正常腦脊液氯化物比血漿高；減低：①低氯血癥：如大量嘔吐或腹瀉。②血腦屏障通透性增加，如腦膜炎。③CSF中蛋白含量增加，如腦膜炎。④細(xì)菌性或真菌性腦膜炎：常見(jiàn)于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎及真菌性腦膜炎。尤其結(jié)核性腦膜炎時(shí)，CSF中氯化物降低尤為明顯，比葡萄糖降低出現(xiàn)得還要早，故對(duì)結(jié)核性腦膜炎與化膿性腦膜炎鑒別有一定價(jià)值。44ppt課件增高：主要見(jiàn)于高氯血癥、呼吸性堿中毒等。病毒性腦膜炎CSF氯化物可正?；蛏陨?。而病毒性腦炎時(shí)無(wú)顯著變化。45ppt課件

五、酶學(xué)檢查

酶種類臨床意義肌酸激酶CK神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病時(shí)活性增高，其中以化膿性腦膜炎增高最為明顯，結(jié)核性腦膜炎次之，病毒性腦膜炎輕度增高。乳酸脫氫酶LD①神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)