臨床生化檢驗?zāi)I功課件

腎功能常規(guī)生化檢驗?zāi)I功能常規(guī)生化檢驗2檢測項目：Cre（肌酐）BUN（尿素氮）UA（尿酸）CysC（胱抑素C）2檢測項目：Cre（肌酐）3腎臟功能檢測目的：判斷腎臟疾病的嚴重程度以及預(yù)測預(yù)后、確定療效和調(diào)整藥物用量3腎臟功能檢測目的：445腎臟的生理功能

①排泄功能：排泄水以及機體的代謝產(chǎn)物②內(nèi)分泌功能：生成一些生物活性物質(zhì)如腎素等、前列腺素、EPO

③調(diào)節(jié)功能：參與機體的體液酸堿調(diào)節(jié)，保證體內(nèi)水和電解質(zhì)的動態(tài)平衡5腎臟的生理功能6幾個概念腎小球濾過率（GFR）：指在單位時間內(nèi)（min）經(jīng)過腎小球濾出的血漿液體量。腎清除率：指雙腎在單位時間（min）內(nèi)能將若干毫升血漿中某種物質(zhì)全部加以清除。利用清除率可測定GFR內(nèi)生肌酐清除率（Ccr）：指腎臟在單位時間內(nèi)把若干毫升血漿中的內(nèi)生肌酐全部清除出去。反應(yīng)的是腎小球的濾過功能6幾個概念腎小球濾過率（GFR）：指在單位時間內(nèi)（min）經(jīng)7血肌酐（Cre）的測定肌酐是肌酸代謝的終產(chǎn)物。肌酸部分來自食物攝入，部分在體內(nèi)生成，在控制外源性來源、未進行劇烈運動的條件下，肌酐在血中濃度主要取決于GFR（腎小球濾過率）。在腎功能受損，GFR（腎小球濾過率）下降到臨界點時，血中肌酐濃度明顯上升，隨受損程度加重，上升速度也加快。7血肌酐（Cre）的測定肌酐是肌酸代謝的終產(chǎn)物。肌酸部分來自8測定原理：肌酐+H2O肌酸肌酸+H2O+O2

肌氨酸+尿素肌氨酸+H2O+O2

甘氨酸+HCHO+H2O2H2O2+4-APP+ESPMT醌亞胺+4H2O參考值：40~103μmol/L

肌酐氨基水解酶肌酸脒基水解酶肌氨酸氧化酶過氧化物酶8測定原理：肌酐氨基水解酶肌酸脒基水解酶肌氨酸氧化酶過氧化物9臨床意義：①反映GFR減退的后期指標：當腎小球GFR功能減退至50%時，血清Cr仍可正常；患者Ccr（內(nèi)生肌酐清除率）降至正常水平1/3時，血清Cr有明顯上升，且上升曲線斜率會陡然變大，在此階段血清Cr是氮質(zhì)血癥病情觀察和療效判斷的有效指征。9臨床意義：①反映GFR減退的后期指標：當腎小球GFR功能減10②血清Cr一天內(nèi)生理變動幅度通常在10%內(nèi)，但與個體肌肉量有關(guān)。肌肉發(fā)達者與消瘦者的血清Cr濃度可有明顯差異③妊娠期內(nèi)因生理原因GFR可上升，但肌酐生成速度不變，血清Cr因血漿稀釋作用而比常人低10②血清Cr一天內(nèi)生理變動幅度通常在10%內(nèi)，但與個體肌肉11④劇烈肌肉活動后血清Cr有一過性增加⑤進肉食對血清Cr有一定影響，根據(jù)調(diào)查，進食肉食后2-4小時內(nèi)血清肌酐可增加34~44μmol/L可超出正常值上限，約12小時候接近正常水平11④劇烈肌肉活動后血清Cr有一過性增加12尿素（Urea）的測定血中蛋白質(zhì)以外的含氮化合物稱為非蛋白氮組分（NPN）。NPN大部分由腎排出，血中NPN濃度是反映GFR功能的一個指標。血中NPN包括組分多達15種以上，其中血尿素氮（BUN）占45%，因此BUN的變化更能反映GFR功能，且測定方法更簡單。因而BUN測定逐漸取代NPN而成為常規(guī)方法12尿素（Urea）的測定血中蛋白質(zhì)以外的含氮化合物稱為非蛋13測定原理:尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳。氨在α-酮戊二酸和還原理輔酶I存在下，經(jīng)谷氨酸脫氧酶(GLDH)催化，生成谷氨酸。同時NADH被氧化成NAD,可在340nm波長處監(jiān)測吸光度下降的速率，計算樣品中尿素的含量尿素+H2O2NH3+CO2NH3+α-酮戊二酸+NADH+H+

谷氨酸+NAD++H2O

參考值:Surea:1.7~8.3mmol/L尿素酶GLDH13測定原理:尿素酶GLDH14臨床意義：①在蛋白質(zhì)攝入及體內(nèi)分解代謝較恒定的狀態(tài)下Surea濃度取決于從腎排出的速度。因此在一定程度上Surea能反映GFR的功能，但是只有在有效腎單位約50%以上受損時Surea才開始上升②腎外因素：Ⅰ、腎前因素：腎血流量明顯減少，GFR減退，導(dǎo)致尿素排出減少，血中濃度上升。常見于脫水、急性失血、休克等有效循環(huán)容量急劇減少。Ⅱ、腎后因素：見于尿路梗阻，見于尿路結(jié)石、腫瘤、前列腺腫瘤或肥大等14臨床意義：①在蛋白質(zhì)攝入及體內(nèi)分解代謝較恒定的狀態(tài)下Su15③蛋白質(zhì)分解亢進：見于消化道出血，甲狀腺亢進、燒傷、擠壓綜合癥等④生理性增高：見于高蛋白飲食⑤生理性減低：見于妊娠期15③蛋白質(zhì)分解亢進：見于消化道出血，甲狀腺亢進、燒傷、擠壓16附注：血氨升高時，可使尿素測定結(jié)果偏高，溶血標本對測定有干擾。在測定過程中，各種器材和蒸館水應(yīng)無氨離子污染，否則結(jié)果偏高。16附注：血氨升高時，可使尿素測定結(jié)果偏高，溶血標本對測定有17尿酸（UA）的測定在人體內(nèi)，嘌呤核苷酸分解生成嘌呤核苷及嘌呤后，經(jīng)水解脫氨和氧化，最后生成尿酸。UA隨尿排出，血中UA全部通過腎小球濾出，在近端腎小管幾乎被完全重吸收，故UA的清除率極低（<10%）由腎排出的UA占一日總排出量的2/3~3/4,其余在胃腸道內(nèi)被微生物的酶分解，GFR減低時UA不能正常排出，血中UA濃度升高。17尿酸（UA）的測定在人體內(nèi)，嘌呤核苷酸分解生成嘌呤核苷及18測定方法：（酶偶聯(lián)測定法）尿酸+O2+H2O尿囊素+H2O2+CO22H2O2+4-APP+3,5-DHBSA醌亞胺+4H2O參考值：男性：202~417μmol/L

女性：143~340μmol/L尿酸酶POD注：3,5-DHBSA---3,5二羥基苯磺酸18測定方法：（酶偶聯(lián)測定法）尿酸酶POD注：3,5-DHB19臨床意義：①GFR減退時血清UA上升，但因其腎外影響因素較多，血中濃度變化不一定與腎損傷程度平行②UA主要用作與痛風的診斷指標。痛風石嘌呤代謝失調(diào)所致，血清UA可明顯升高③核酸代謝亢進可引起內(nèi)源性UA生成增加，血清UA上升。見于白血病、多發(fā)性骨髓瘤、真性紅細胞增多癥等19臨床意義：①GFR減退時血清UA上升，但因其腎外影響因素20④高血壓等腎血流量減少的病變，因UA排泄減少而使血清UA升高⑤其他：血清UA升高還見于慢性鉛中毒、氯仿及四氯化碳中毒⑥血清UA減低見于肝豆狀核變性、嚴重貧血20④高血壓等腎血流量減少的病變，因UA排泄減少而使血清UA21附注：遇高濃度維生素C的標本，可使測定結(jié)果偏低，應(yīng)在試劑盒中加入抗壞血酸氧化酶(雙試劑法)，消除維生素C的干擾。21附注：遇高濃度維生素C的標本，可使測定結(jié)果偏低，應(yīng)在試22胱抑素C22胱抑素C23主要內(nèi)容胱抑素C的生物學(xué)特性胱抑素C的檢測方法及參考范圍胱抑素C檢測的意義和臨床應(yīng)用23主要內(nèi)容胱抑素C的生物學(xué)特性24什么是胱抑素C？1961年Clausen于腦脊液中發(fā)現(xiàn)一種物質(zhì),因它與哺乳動物胱蛋白A和胱蛋白B的結(jié)構(gòu)及活性相似,當時被稱為胱蛋白C。半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族中的一員半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族三個主要成員：

1.Stefins（type1）：StefinA(CystatinA）、

StefinB(CystatinB)2.Cystatins(type2):CystatinC、D、S、SN、SA

3.Kininogens(type3)

激肽原：高分子糖基化蛋白激肽原、低分子糖基化蛋白激肽原24什么是胱抑素C？1961年Clausen于腦脊液中發(fā)THANKYOUSUCCESS2023/7/2425可編輯THANKYOUSUCCESS2023/7/24226生物學(xué)特性分子量約為13KD，是一種低分子量、堿性蛋白質(zhì)（等電點＝9.3）,含120個氨基酸殘基，是一種非糖基化多肽鏈，完整的Cys-C基因編碼的多肽鏈含有146個氨基酸殘基，其中前26個氨基酸為分泌性信號肽。CysC基因可視為看家基因（house-keepinggene），因為在基因的5‘端有“看家基因”啟動子的特點，即無典型的CAAT框，富含GC，并含有一個轉(zhuǎn)錄SP結(jié)合位點，即在所有有核細胞中恒定持續(xù)的轉(zhuǎn)錄表達。CystatinC是一種分泌性蛋白質(zhì),故廣泛地存在于各種體液中，精漿和腦積液中含量最高，尿液中最低。26生物學(xué)特性分子量約為13KD，是一種低分子量、堿性蛋白質(zhì)27CysC的生理作用（1）CysC是一個內(nèi)源性廣譜蛋白酶抑制劑。在生理條件下Cys-C的重要功能是抑制內(nèi)源性半胱氨酸蛋白酶的活性。

CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族中對組織蛋白酶B抑制作用最強的抑制物，對木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、組織蛋白酶H及L也有抑制作用。有研究表明：Cys-C有抗病毒和原蟲感染的功能。27CysC的生理作用（1）CysC是一個內(nèi)源性廣譜蛋白28CysC的生理作用（2）Cys-C可影響中性粒細胞遷移，對細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換、骨膠原的降解、蛋白質(zhì)前體的分離有重要作用。Cys-C還可參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)換，參與炎癥過程，以及一些神經(jīng)性疾病。所以在疾病中，主要應(yīng)考慮Cys-C與其抑制物是否處于平衡狀態(tài)，一旦失衡將造成一些病理損傷。28CysC的生理作用（2）Cys-C可影響中性粒細胞遷移29CysC的2個重要性質(zhì)人體產(chǎn)生CysC的速率相當恒定編碼CysC的基因5’端序列與“看家基因”的啟動子區(qū)具有相同的特性，可在所有的有核組織細胞中恒定持續(xù)地轉(zhuǎn)錄與表達。血漿CysC的含量較穩(wěn)定，它的濃度幾乎不受年齡、性別、肌肉量和多數(shù)藥物等因素的影響，血清中CysC含量一般在1歲以后就達到成人的水平。

29CysC的2個重要性質(zhì)人體產(chǎn)生CysC的速率相當恒定30腎臟是唯一清除循環(huán)中CysC的器官CysC可以自由的通過腎小球，腎小管不分泌CysC，雖然CysC能被近曲小管上皮細胞重吸收，但隨后就被分解，即腎小球濾過的CysC不會返回血液中。30腎臟是唯一清除循環(huán)中CysC的器官31是反映腎小球濾過率的理想內(nèi)源性指標腎小管不分泌腎小管重吸收并完全代謝自由通過腎小球基底膜在近端的腎小管出現(xiàn)分子量低帶正電荷31是反映腎小球濾過率的理想內(nèi)源性指標腎小管不分泌腎小管重吸32測定原理：血清中胱抑素C與超敏化的抗體膠乳顆粒反應(yīng)，產(chǎn)生凝集，使反應(yīng)溶液濁度增加。其濁度的增加值與血清中脫抑素C的濃度呈正比，可在波長570nm處監(jiān)測吸光度的增加速率，并與標準品對照，計算出脫抑素C的濃度。32測定原理：血清中胱抑素C與超敏化的抗體膠乳顆粒反應(yīng)，產(chǎn)33CysC在人體中的分布和含量正常血清：0.96±0.20腦積液：5.37±3.36孕婦血清：1.08±0.28唾液：1.22±0.67嬰兒：0.18±0.04＜一個月關(guān)節(jié)液：1.27±0.410.39±0.09＜12個月尿液：0.11±0.125

0.72±0.29＞12個月精漿：約51.0（接近成年人）單位：mg/L33CysC在人體中的分布和含量正常血清：0.96±0.234理想的監(jiān)測GFR的標志物應(yīng)具有如下性質(zhì)：（1）不與血漿蛋白結(jié)合，能從腎小球自由濾過

（2）不被腎小管重吸收或分泌（3）腎臟是唯一的排泄器官（4）內(nèi)源性標志物從組織釋放入血流的速率恒定，外源性物質(zhì)則不在體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化、無毒性。性質(zhì)決定用途：血清中CysC的濃度正是反映腎小球的濾過率（glomerularfiltrationrate,GFR）比較理想的內(nèi)源性指標。34理想的監(jiān)測GFR的標志物應(yīng)具有如下性質(zhì)：35ROC---受試者工作特征曲線：

1.是一種全面準確評價診斷實驗的有效方法

2.將靈敏度和特異性以圖示的方式結(jié)合在一起，具有直觀性，利于不同指標間的比較

3.以真陽性率（敏感度）為縱坐標，0-1以假陽性率（特異性）為橫坐標,0-1

AUCROC（面積）越大，診斷準確率越高，接近0.5診斷率越差。CysC在敏感性、特異性和準確性上都優(yōu)于SCr和β2-微球蛋白35ROC---受試者工作特征曲線：

1.是一種全面準確評價36CysC與早期腎功能損傷腎臟具備的強大代償功能，在客觀上易于掩蓋腎損傷。而腎損傷的早期發(fā)現(xiàn)，對于預(yù)后又有十分重要的意義，如慢性腎病、糖尿病早期，其發(fā)展缺乏明顯的早期癥狀和體征。如錯過早期診斷，腎損傷發(fā)展到不可逆的狀態(tài)，終將發(fā)展為腎衰竭36CysC與早期腎功能損傷腎臟具備的強大代償功能，在客觀37GFR與CDK分期分期描述GFR(ml/min/1.73m2)方案---慢性腎臟病危險增加≥90篩查；減少慢性腎病危險因素1期腎損傷、GFR正?；蛟黾印?0診斷并治療合并癥；減少CVD患病危險2期腎損傷、GFR輕度下降60-89評估進展（代償期）3期GFR中度下降30-59評價治療并發(fā)癥4期GFR嚴重下降15-29為腎臟替代治療作準備5期腎衰竭<15腎臟替代治療（尿毒癥）CKD：慢性腎病（ChronicKidneyDisease），腎損害(腎臟結(jié)構(gòu)或功能異常)≥3個月,伴有或不伴有GFR的降低。37GFR與CDK分期分期描述GFR(ml/min/1.7338診斷靈敏度對比CKD患者CystatinC、SCr評價GFR靈敏度的比較CKD分期雙血漿法GFR例數(shù)CystatinC異常(%)Scr異常（%）1期≥809038/90(42.2%)12/90(13.3%)2期

50～805645/56(80.3%)31/56(55.3%)3期

25～506362/63(98.4%)53/63(84.1%)4期

10～254040/40(100%)40/40(100%)5期≤101616/16(100%)16/16(100%)GFR輕、中度下降期,CystatinC異常升高的百分率大于Scr。僅用Scr作為常規(guī)判斷腎功能是否受損，會有部分病人漏檢。臨床上GFR正常而懷疑有慢性腎臟疾病時，建議作CystatinC初篩和定期監(jiān)測。38診斷靈敏度對比CKD患者CystatinC、SCr評價39CysC與糖尿病糖尿病腎病是糖尿病的主要并發(fā)癥，約三分之一的糖尿病患者發(fā)展為腎衰，需要腎透析。其早期無任何臨床指征，進展緩慢，而糖尿病腎病一旦進入臨床蛋白尿期則病情嚴重，發(fā)展迅速，能對糖尿病腎病早期腎損傷進行評價顯得尤為重要。由糖尿病誘發(fā)腎小球微血管病變早期的檢測指標，目前常采用尿微量白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白的測定來評估糖尿病患者發(fā)生腎并發(fā)癥的危險度。但是，尿微量白蛋白的檢測受一些因素的影響，如感染、酮癥、血壓，而Cys-C不受影響。CysC能對輕度的腎功能損傷反應(yīng)靈敏與GFR有較好的相關(guān)性，所以在糖尿病患者中定期檢測CysC可以動態(tài)的觀察病情的發(fā)展。39CysC與糖尿病糖尿病腎病是糖尿病的主要并發(fā)癥，約三分40II型糖尿病不同程度腎損傷患者組別Cys（mg/L)BUN(mmol/L)Scr(mmol/L)mALB(mg/L)糖尿病無腎損傷組0.85±0.154.66±1.8177.89±13.2516.26±9.37糖尿病腎損傷組1.74±1.46★★7.15±5.41★156.31±142.37★99.31±59.90★糖尿病腎病患者5.71±3.35★★12.79±6.89★★483.30±342.90★★482.90±103.30★★正常對照組1.12±0.515.23±1.4588.60±24.107.54±69.5注：與對照組相比，★★P＜0.01；與對照組相比，★

P＜0.0540II型糖尿病不同程度腎損傷患者組別CysBUNScrmA41CysC與高血壓腎病40%以上的高血壓病患者在中、晚期可并發(fā)高血壓腎病。高血壓致腎損害分為三個階段：

Ⅰ階段：腎小球濾過率基本正常，腎內(nèi)壓增加

Ⅱ階段：腎小管高壓性損傷，出現(xiàn)α-微球蛋白等，以及腎小球早期損傷，血CysC升高

Ⅲ階段：腎小球硬化，腎小管萎縮，CysC明顯升高臨床定期監(jiān)測高血壓病患者的血清CysC水平，可以及時發(fā)現(xiàn)高血壓病所導(dǎo)致的早期腎功能損傷，為開展早期預(yù)防、診斷和治療創(chuàng)造條件。41CysC與高血壓腎病40%以上的高血壓病患者在中、晚期42CysC與兒童腎臟疾病對于兒同而言肌肉含量較少，用Cre很難準確的監(jiān)測GFR輕微的變化，小于四歲的兒童Cre正常范圍為2.0-4.0mg/L。而Cys-C含量一般在一歲以后就達到成人水平0.5-0.95mg/L。Cys-C在兒童腎功能監(jiān)測中有獨特的優(yōu)勢。42CysC與兒童腎臟疾病對于兒同而言肌肉含量較少，用Cr43CysC與腎移植在腎移植術(shù)后，移植后的腎可能會因為急性排斥反應(yīng)和免疫抑制產(chǎn)生的腎毒性而受到損傷。通過監(jiān)測GFR及早的發(fā)現(xiàn)和有效的治療，可以大大提高手術(shù)后的生存率。CysC不但能迅速的反映腎臟受損情況，而且能及時地反映腎功能恢復(fù)情況，特別是腎移植腎功能延遲者，血清CysC的含量在腎移植術(shù)后一天迅速下降，之后速度減慢，4-5天內(nèi)達到穩(wěn)定，而Cre下降速度要比CysC慢，一般術(shù)后60小時才能達到CysC下降水平。43CysC與腎移植在腎移植術(shù)后，移植后的腎可能會因為急性44腎臟移植后血清CysC含量變化病歷號移植前(mg/L)移植后(mg/L)差值(mg/L)下降率（%）15.331.294.0475.824.281.243.0471.035.891.434.4675.742.031.060.9747.853.161.371.7955.662.761.361.4050.774.031.222.8169.7合計3.93±1.381.28±0.122.64±1.3263.6±12.0結(jié)果表明，腎移植后的血清CycC含

量比腎移植前顯著降低（P＜0.01）44腎臟移植后血清CysC含量變化病歷號移植前移植后差值45CysC與腎透析對腎移植后需要進行透析的患者CysC的清除率與透析膜的超濾系數(shù)（UFC）有關(guān)當UFC<15ml.h/m2s時，CysC清除率為0％，肌酐清除率為40％當UFC>15ml.h/m2s時，此時CysC清除率與肌酐清除率同為60％，如采用高通量的透析膜時，可以根據(jù)透析后的CysC濃度來評估透析效果。45CysC與腎透析對腎移植后需要進行透析的患者CysC46CysC與化療多種腫瘤如胃癌，肺癌，卵巢癌，頭頸腫瘤等，使用順鉑（PDD），卡鉑（Carboplatin)進行化療?；熕幬镯樸K，卡鉑可直接損害腎實質(zhì)，引起腎功損害。在癌癥病人化療前和化療期