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溶血性鏈球菌檢驗(yàn)
1整理版課件溶血性鏈球菌檢驗(yàn)
1整理版課件分布溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣,存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動(dòng)物的口腔、鼻腔、咽喉中,可通過直接接觸、空氣飛沫傳播或通過皮膚、粘膜傷口感染,被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會(huì)對(duì)人類進(jìn)行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。引起化膿性感染、中毒性感染、超敏反應(yīng)性疾病2整理版課件分布溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣,存在于水、空氣、塵埃、糞生物學(xué)性狀1.形態(tài)結(jié)構(gòu)
2.培養(yǎng)特性
3.分類
4.生化反應(yīng)
5.抵抗力
3整理版課件生物學(xué)性狀3整理版課件形態(tài)與染色球形或卵圓形,直徑0.5~1μm,鏈狀排列,鏈長(zhǎng)短不一,短者4~8個(gè)細(xì)胞組成,長(zhǎng)者20~30個(gè)無芽胞,無鞭毛,培養(yǎng)早期(2~4h)形成透明質(zhì)酸的莢膜4整理版課件形態(tài)與染色球形或卵圓形,直徑0.5~1μm,鏈狀排列,鏈5整理版課件5整理版課件培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求較高,需補(bǔ)充血液、血清、葡萄糖等在血清肉湯中易形成長(zhǎng)鏈,管底呈絮狀沉淀在血瓊脂平板上,不同菌株溶血不一最適生長(zhǎng)溫度為37℃,最適pH為7.4-7.66整理版課件培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧6整理版課件培養(yǎng)特性
---血平板血平板上菌落為灰白色,半透明或不透明,表面光滑,有乳光,直徑約0.5~0.75mm,為圓形突起的細(xì)小菌落,乙型溶血鏈球菌周圍有2~4mm界限分明、無色透明的溶血圈7整理版課件培養(yǎng)特性
---血平板血平板上菌落為灰白色,8整理版課件8整理版課件生化反應(yīng)分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。對(duì)乳糖、甘露醇、水楊苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七葉苷的分解能力因不同菌株而異一般不分解菊糖,不被膽汁溶解觸酶陰性(與葡萄球菌相區(qū)別)9整理版課件生化反應(yīng)分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。對(duì)乳糖、甘露醇、水楊苷、山梨毒素及侵襲性酶鏈球菌溶血素致熱外毒素:曾稱紅疹毒素或猩紅熱毒素透明質(zhì)酸酶:又稱擴(kuò)散因子,溶解細(xì)胞間質(zhì)
鏈激酶:又稱鏈球菌纖維蛋白溶酶,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶,具有增強(qiáng)細(xì)菌在組織中的擴(kuò)散作用,該酶耐熱,100℃50分鐘仍可保持活性。鏈道酶:又稱鏈球菌DNA酶殺白細(xì)胞素:能使白細(xì)胞失去動(dòng)力10整理版課件毒素及侵襲性酶鏈球菌溶血素10整理版課件抵抗力該菌抵抗力一般不強(qiáng),60℃30min即被殺死對(duì)常用消毒劑敏感在干燥塵埃中生存數(shù)月乙型鏈球菌很少有耐藥性11整理版課件抵抗力該菌抵抗力一般不強(qiáng),60℃30min即被殺死11整理微生物學(xué)檢查12整理版課件微生物學(xué)檢查12整理版課件溶血性鏈球菌檢測(cè)流程(GB/T4789.11)25g(ml)樣品+225ml無菌生理鹽水葡萄糖肉浸液肉湯或匹克氏肉湯血平板血平板(分純培養(yǎng))桿菌肽敏感試驗(yàn)鏈激酶試驗(yàn)觀察溶血革蘭氏染色報(bào)告36+1℃24h36+1℃24h36+1℃24h13整理版課件溶血性鏈球菌檢測(cè)流程(GB/T4789.11)25g(ml)鑒定步驟溶血及菌落形態(tài)的觀察革蘭氏染色鏈激酶試驗(yàn)桿菌肽敏感試驗(yàn)14整理版課件鑒定步驟溶血及菌落形態(tài)的觀察14整理版課件鏈激酶試驗(yàn)
---原理致病性乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)生鏈激酶(即溶纖維蛋白酶),此酶能激活正常人體血液中的血漿蛋白酶原,使成血漿蛋白酶,而后溶解纖維蛋白15整理版課件鏈激酶試驗(yàn)
---原理致病性乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)鏈激酶試驗(yàn)
---方法
吸取草酸鉀血漿0.2mL,加0.8mL滅菌生理鹽水,混勻,加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL,混勻,置于36℃水浴10min,血漿混合物自行凝固,觀察凝塊重新完全溶解的時(shí)間,完全溶解為陽性,如24h后不溶解即為陰性。同時(shí)用肉浸液肉湯做陰性對(duì)照,用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對(duì)照。16整理版課件鏈激酶試驗(yàn)
---方法吸取草酸鉀血漿0.桿菌肽敏感試驗(yàn)取乙型溶血性菌落的濃菌液涂布于血平板上,用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上,36℃培養(yǎng)18-24h,如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽性。用已知的陽性菌株做對(duì)照17整理版課件桿菌肽敏感試驗(yàn)取乙型溶血性菌落的濃菌液涂布于血平板上,用滅結(jié)果報(bào)告
在25g(ml)樣品中檢出或未檢出溶血性鏈球菌18整理版課件結(jié)果報(bào)告在25g(ml)樣
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