如何制作檢驗科質(zhì)控圖26514課件

質(zhì)控圖的制作主講人：時間：主要內(nèi)容：*質(zhì)控圖的制作主講人：*1

質(zhì)控血清1．內(nèi)部對照質(zhì)控血清

2．外部對照質(zhì)控血清

外部對照質(zhì)控血清是各級實驗室為了監(jiān)控每次檢測的重復性和穩(wěn)定性以及檢驗試劑盒批間差異而設置的一套陰性和陽性對照血清。設立外部對照還可以提示標本處于臨界值狀態(tài)時的檢驗操作情況。

*質(zhì)控血清1．內(nèi)部對照質(zhì)控血清*2

一、外部對照質(zhì)控血清的組成

理想的外部對照應該包括陽性對照、弱陽性對照、臨界值對照和陰性對照。在每次實驗時應設置一個單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對照。這個弱陽性對照的值以設定在該試劑盒Cut-off值的2－3倍為宜。*一、外部對照質(zhì)控血清的組成

理想的外部對照應該包括3

二、外部對照質(zhì)控血清的來源和選擇1）通過向有關機構購買獲得2）通過實驗室制備獲得(比較經(jīng)濟的方法)①混合試劑盒內(nèi)部對照血清，等量分裝。②混合HIV抗體陽性或陰性人血清，3000轉/分鐘離心15分鐘，用0.2

m生物濾膜過濾除菌后再進行56℃30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強陽性血清并經(jīng)標定后得到。弱陽性對照的OD值以2－3倍于Cut-off為宜。*二、外部對照質(zhì)控血清的來源和選擇1）通過向有關機構購買獲4三、外部對照質(zhì)控血清的保存

1）外部對照血清或血漿的一次制備量應該足夠本實驗室一年使用2）外部對照血清應該均一、無菌3）外部對照血清標定后應該等量分裝，每個分裝的量應足夠一周使用4）外部對照應該分類作好標記，使用不同顏色的標簽5）外部對照血清應該存放在－70℃，如無條件則存放在非自動除霜的－20℃冰箱6）外部對照血清一旦融解以后應該存放在2－8℃，一周后必須棄去，不能重新凍存。*三、外部對照質(zhì)控血清的保存

1）外部對照血清或血漿的一次制備5

四、外部對照質(zhì)控血清的使用

原則上每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實驗操作的一致性和結果的準確性。同時可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。*四、外部對照質(zhì)控血清的使用

原則上每一次實6質(zhì)控圖(1)X-2SXX+SX-SX+2S*質(zhì)控圖(1)X-2SXX+SX-SX+2S*7

建立質(zhì)控圖參數(shù)

對HIV抗體檢測(ELISA)外部對照質(zhì)控血清的評價采用多次測定的OD值的均值上下各兩個標準差的范圍，即外部對照OD值的95％可信限為x

2s。各個外部對照的標定即確定外部對照的均值和可信限，可用下列幾個統(tǒng)計學參數(shù)來確定可信限:①算術平均值(x)代表一組OD值數(shù)的平均值。②標準差(s)③變異系數(shù)(cv)，*建立質(zhì)控圖參數(shù)對HIV抗體檢測(ELISA)外部8次數(shù)質(zhì)控血清ODCut-off值ODS/CO值10.1800.1051.7120.1900.1051.8130.2000.1051.9040.2280.1051.8150.1370.1051.0960.2210.1052.1070.1500.1051.4380.1700.1051.6290.1800.1052.14100.1500.1051.43110.2000.1051.90120.1420.1051.35130.2100.1052.00140.2210.1051.52150.1800.1051.71160.1900.1051.81170.1600.1051.52180.2210.1052.10190.2100.1052.00200.1500.1051.43

范例：參考鄭懷競主編《免疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控》，1997年出版。

*次數(shù)質(zhì)控血清Cut-off值S/CO值10.1800.1059x

計算公式為：

Σx

x=──N

s

計算公式為：───────∑(xn-x)2

s=───────N

cv

計算公式為：

s

cv=──x100%

x

*x計算公式為：*10

通過上表，計算S/CO值的均值（x），標準差（s）和變異系數(shù)（cv）

x=1.72s=0.29cv=16.9%

根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制室內(nèi)質(zhì)控框架圖,開始質(zhì)量控制次數(shù)日期質(zhì)控血清ODCut-off值S/CO值217.40.1600.1051.52227.70.1900.1051.81237.80.2000.1051.90247.110.2280.1051.81257.120.1390.1051.10267.150.2210.1052.10277.160.1500.1051.43287.180.1700.1051.62297.190.2250.1052.14*通過上表，計算S/CO值的均值（x），標準差（s）和變異11質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖)*質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖)*12

質(zhì)控圖的判定和分析

如果檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)時，質(zhì)控對照值超出

2s，則本次實驗結果不能被接受(失控)。

位移：如果幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(3-5次)都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化(失控)。引起位移的原因有使用新批號的試劑盒、使用新試劑、實驗員的更換、孵育溫度的改變、儀器(移液器)故障等。

*質(zhì)控圖的判定和分析

如果檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)時，質(zhì)13質(zhì)控圖的判定和分析

趨勢：當幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(5-7個)幾乎按一個方向分布時稱之為趨勢(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準確等。發(fā)生漂移和趨勢的最常見的原因是試劑(如酶標記物)或對照的失效。*質(zhì)控圖的判定和分析趨勢：當幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(14

質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點

a．可以先進行最佳條件下的變異測定，即在最佳條件下(人、儀器、試劑、實驗室等因素)對同一批質(zhì)控血清連續(xù)進行測定20次以上，獲得一組數(shù)據(jù)，求x

和s值。然后求出常規(guī)條件下的x

和s。如果常規(guī)條件下的x

和s

值與最佳條件下的x和s值比較接近，則可以接受。若不作最佳條件下的測定，可以用本室以往處于控制狀態(tài)下的數(shù)值替代。b．采用S/CO比值制圖要比單用OD或A值制圖的方法給出更為精確的評估，因為它將每次/每天OD值的浮動考慮在內(nèi)。從S/CO質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對照值的漂移和趨勢。*質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點*15

質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點c．

由專人負責建立質(zhì)控圖，每月(月末)定期召開質(zhì)量控制會，討論本月檢測的質(zhì)量控制情況。檢驗人員在每次檢驗之前，了解一下質(zhì)控圖的結果，做到心中有數(shù)。d．

建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒。*質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點c．由專人負責建立質(zhì)控16

質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點e．使用新批號或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。原則上，如果改用新批號試劑盒，應重新制作室內(nèi)質(zhì)控框架圖，并建議對新舊兩批試劑盒進行平行性試驗。f．

發(fā)現(xiàn)全部對照值劇烈位移，立即報告室主管，分析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。*質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點e．使用新批號或使用不同17

質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點h．

外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應該注意試劑、技術或設備出現(xiàn)問題(如洗板機等)。i．

實驗室配制新批次的外部對照質(zhì)控血清或變動外部對照質(zhì)控血清的值時，必須重新計算均值和標準差，建立新的質(zhì)控圖。j．

操作者在測定質(zhì)控血清時，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應填寫失控報告單，上交室負責人，由室負責人決定是否要發(fā)出檢驗報告。*質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點h．外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控18**19

“即刻法”質(zhì)控采用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計方法，只需在常規(guī)條件下對外部質(zhì)控血清連續(xù)測定3次，按以下統(tǒng)計方法計算，如連續(xù)測定3次的結果都在控制范圍之內(nèi)，即可對第3次結果進行質(zhì)控，以保證檢驗結果的質(zhì)量。*“即刻法”質(zhì)控采用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計方法，只需在常規(guī)條件20

“即刻法”的建立參見鄭懷競主編《免疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控》具體計算方法如下：先將測定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn(x1為最小值，xn為最大值)計算X和s計算SI上限值和SI下限值*“即刻法”的建立參見鄭懷競主編《免疫學檢驗室間質(zhì)評21SI上限=X最大值

–XSSI下限= X-X最小值

S

將SI上限、SI下限與SI值表中的數(shù)字比較。*SI上限=X最大值–X*22SI值表N n3s n2s N n3s n2s

3 1.15 1.15 12 2.55 2.29 4 1.49 1.46 13 2.61 2.33 5 1.75 1.67 14 2.66 2.37 6 1.94 1.82 15 2.71 2.41 7 2.10 1.94 16 2.75 2.44 8 2.22 2.03 17 2.79 2.47 9 2.32 2.11 18 2.82 2.50 102.412.1819 2.85 2.53 112.482.2320 2.88 2.56 *SI值表N n3s n2s 23當SI上限和SI下限<n2s時，表示該數(shù)據(jù)處于控制范圍內(nèi)，可以繼續(xù)往下測定，繼續(xù)重復以上各項計算；當SI上限和SI下限有一值處于n2s和n3s值之間時，說明該值在2s-3s范圍，處于“告警”狀態(tài)；當SI上限和SI下限有一值>n3s值時，說明該值已在3s范圍之外，屬“失控”。*當SI上限和SI下限<n2s時，表示該數(shù)據(jù)處于控制范圍內(nèi)，可24

處于“告警”和“失控”狀態(tài)的數(shù)值應舍去，需重新測定該外部質(zhì)控血清和病人樣本。舍去的只是本次失控的數(shù)值及同時測定的樣本，其他次測定值仍可繼續(xù)使用。當檢測的數(shù)值超過20次后,不必再使用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計計算,可以轉入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控。*處于“告警”和“失控”狀態(tài)的數(shù)值應舍去，需重25

21次質(zhì)控血清檢測S/CO值

次數(shù) S/CO值 次數(shù)S/CO值

1 1.71 12 1.35 2 1.81 13 2.00 3 1.90 14 1.52 4 1.81 15 1.71 5 1.09 16 1.81 6 2.10 17 1.52 7 1.43 18 2.10 8 1.62 19 2.00 9 2.14 20 1.43 10 1.43 21 1.52 11 1.90 *21次質(zhì)控血清檢測S/CO值次數(shù) 26在第3次測定后按“即刻法”計算：n=3三次S/CO值從小到大排列為：

1.71 1.81 1.90

求出X=1.81,S=0.10

計算:SI下限= 1.81-1.71 =1.0 0.10 SI上限= 1.90-1.81 =0.9 0.10 查SI值表:n=3時,n2s=1.15,n3s=1.15，SI上限和SI下限均小于n2s，表示該三次檢測數(shù)據(jù)在控制范圍內(nèi)。*在第3次測定后按“即刻法”計算：n=3*27

在第5次測定后,按上法計算:n=51.09 1.71 1.81 1.81 1.90 X=1.66,S=0.33SI下限= 1.66-1.09 =1.73 0.33 SI上限= 1.90-1.66 =0.73 0.33 查SI值表：n=5時,n2s=1.67,n3s=1.75

n2s(1.67)<SI下限(1.73)<n3s(1.75),SI下限值在n2s和n3s之間,說明該值在2s~3s范圍，處于“告警”狀態(tài)，故本次數(shù)據(jù)及同時測定的樣本結果應棄去后重新測定。*在第5次測定后,按上法計算:n=5*28第6次檢測，n仍為5進行計算:n=51.711.811.811.90 2.10X=1.87,S=0.15SI下限