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一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)了解細(xì)胞融合原理初步掌握聚乙二醇法誘導(dǎo)細(xì)胞融合試驗(yàn)方法。細(xì)胞融合專業(yè)知識(shí)講座第1頁(yè)二、試驗(yàn)內(nèi)容㈠試驗(yàn)原理細(xì)胞融合是指在自然條件或利用人工方法（生物、物理，化學(xué)），使兩個(gè)或兩個(gè)以上細(xì)胞合并成一個(gè)含有雙核或多核細(xì)胞過(guò)程。利用人工誘導(dǎo)方法，不但能夠使同種細(xì)胞發(fā)生融合，而且能夠使不一樣種間細(xì)胞發(fā)生融合。

人工誘導(dǎo)方法很多，如：聚乙二醇（PEG）法、滅活仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)法、電場(chǎng)融正當(dāng)?shù)?。?xì)胞融合專業(yè)知識(shí)講座第2頁(yè)聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）法原理：PEG分子能改變各類細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使兩細(xì)胞接觸點(diǎn)處質(zhì)膜脂類分子發(fā)生疏散和重組，因?yàn)閮杉?xì)胞接口處雙分子層質(zhì)膜相互親合以及彼此表面張力作用，使細(xì)胞發(fā)生融合。細(xì)胞融合專業(yè)知識(shí)講座第3頁(yè)㈡試驗(yàn)方法1.處死蟾蜍。2.取血：注射器內(nèi)吸收1mlAlsver液，再吸收1ml蛙血，加入已盛有8mlAlsver液玻璃離心管。3.分別取1ml細(xì)胞懸液移入塑料離心管中，加入0.85%生理鹽水4ml混勻，1200r/min，離心5min。4.棄去上清液，再加入0.85%生理鹽水至5ml，混勻，離心。5.重復(fù)步驟4。細(xì)胞融合專業(yè)知識(shí)講座第4頁(yè)6．搜集最終一次離心沉淀血細(xì)胞，加入1mlGKN液混勻。（按壓積紅細(xì)胞體積配成10%紅細(xì)胞懸液）7．再加入0.5ml預(yù)熱50%PEG混勻，室溫下分別于2min、15min取一滴該懸液于潔凈載玻片上，蓋上蓋玻片顯微鏡下觀

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