氣相色譜-質(zhì)譜法測定干紫菜中16種多環(huán)芳烴

氣相色譜-質(zhì)譜法測定干紫菜中16種多環(huán)芳烴

紫色是水生藻類的總稱。它富含維生素、礦物質(zhì)、氨基酸和其他養(yǎng)分，深受人們喜愛。中國是紫菜生產(chǎn)大國也是出口大國,約七成干紫菜出口,各國質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求越來越嚴(yán)格,紫菜中污染物測定也受到越來越多的關(guān)注目前測定食品中PAHs的前處理方法有固相萃取法、加速溶劑萃取法、凝膠滲透色譜法等,其測定方法有氣相色譜法1試驗(yàn)部分1.1均質(zhì)和混合器7890A-5975C型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,配電子轟擊離子源;TDL-40B型離心機(jī);FastPrep-24型生物樣品均質(zhì)器;XW-80A型漩渦混合器。16種PAHs混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、熒蒽、芘、苯并[a]蒽、5種內(nèi)標(biāo)混合溶液:萘-D正己烷、乙腈、丙酮為色譜純,硫酸為優(yōu)級(jí)純,無水硫酸鎂、氯化鈉為分析純;試驗(yàn)用水為超純水。1.2質(zhì)譜條件選擇1)色譜條件HP-5MS毛細(xì)管色譜柱(30m×0.25mm,0.25μm);進(jìn)樣口溫度280℃;載氣為高純氦氣,流量1.0mL·min2)質(zhì)譜條件電子轟擊離子源(EI),電離能量70eV,離子源溫度230℃;四極桿溫度150℃;GC-MS接口溫度280℃;溶劑延遲時(shí)間5min;選擇離子監(jiān)測(SIM)掃描模式。16種PAHs的保留時(shí)間、監(jiān)測離子及對(duì)應(yīng)的內(nèi)標(biāo)物的信息見表1,其中“*”為定量離子。1.3測試方法稱取2.00g粉碎均勻的干紫菜樣品于50mL離心管中,加入1.00mg·L2結(jié)果與討論2.1鉻行為16種PAHs和5種內(nèi)標(biāo)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖見圖1。2.2樣口溫度的選擇對(duì)16種PAHs進(jìn)行質(zhì)譜全掃描,根據(jù)離子豐度確定定量離子和定性離子,同時(shí)確定5種內(nèi)標(biāo)物的監(jiān)測離子,見表1。氣相色譜條件會(huì)影響多環(huán)芳烴的分離和響應(yīng),試驗(yàn)考察了進(jìn)樣口溫度(260,270,280,290℃)對(duì)測定結(jié)果的影響。結(jié)果表明:16種PAHs在進(jìn)樣口溫度為280,290℃時(shí)響應(yīng)值較大。其中苯并[k]熒蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝在進(jìn)樣口溫度為280,290℃時(shí)響應(yīng)值相當(dāng),而其他11種PAHs在進(jìn)樣口溫度為280℃時(shí)的響應(yīng)值大于進(jìn)樣口溫度為290℃的響應(yīng)值。試驗(yàn)選擇進(jìn)樣口溫度為280℃。試驗(yàn)還考察了載氣流量和柱升溫程序?qū)y定結(jié)果的影響,選擇的儀器工作條件見1.2節(jié)。2.3水用量的影響干紫菜樣品通常為鮮紫菜脫水后的加工產(chǎn)品,含水率低。干紫菜中直接加有機(jī)溶劑不容易分散,提取多環(huán)芳烴非常困難,需要加入一定量的水浸潤后再提取。在2.00g紫菜樣品中分別加入0,2,4,6mL水,試驗(yàn)考察了水用量對(duì)提取效率的影響,結(jié)果見表2。由表2可知:不加水時(shí)各化合物的提取量明顯小于加水后的提取量;隨著水用量的增加,各化合物的提取量也在增加,當(dāng)加水量為4,6mL時(shí),各化合物的提取量較大,且相差不大,說明水用量為4mL時(shí)已滿足試驗(yàn)要求。試驗(yàn)選擇水用量為4mL。2.4提取劑為正己烷-1/1的混合液多環(huán)芳烴極性較小,易溶于正己烷等非極性或弱極性的溶劑。試驗(yàn)考察了乙腈、正己烷、丙酮-正己烷(7+3)混合液和丙酮-正己烷(1+1)混合液等提取劑對(duì)提取效果的影響。結(jié)果表明:各化合物的回收率相差不大,但以乙腈、丙酮-正己烷(7+3)混合液、丙酮-正己烷(1+1)混合液為提取劑時(shí)提取液顏色較深,紫菜中極性較大的色素等雜質(zhì)同時(shí)被提取出,給凈化帶來困難,而以正己烷為提取劑時(shí),只有少部分的色素進(jìn)入提取液,提取劑顏色較淺。試驗(yàn)選擇的提取劑為正己烷。2.5凈化方法的優(yōu)化紫菜中主要有色素、蛋白質(zhì)、氨基酸等雜質(zhì),目前對(duì)于紫菜樣品的凈化方法主要有硫酸磺化法、分散固相萃取法等。試驗(yàn)考察了硫酸磺化法和分散固相萃取法對(duì)樣品的凈化效果。結(jié)果表明:分散固相萃取法處理后的樣品色譜圖干擾峰數(shù)量更少、強(qiáng)度更小。試驗(yàn)選擇樣品凈化方式為分散固相萃取法。2.6psa用量的確定試驗(yàn)考察了PSA用量(0,50,100,150,200mg)對(duì)凈化效果的影響,樣品的色譜圖見圖2。由圖2可知:隨著PSA用量的增加,主要干擾峰強(qiáng)度逐漸變小;當(dāng)PSA用量為100mg時(shí),主要干擾峰強(qiáng)度最小;繼續(xù)增加PSA用量,凈化效果沒有明顯提高。試驗(yàn)選擇PSA用量為100mg。2.7己烷不斷稀釋將16種PAHs混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用正己烷逐級(jí)稀釋,配制成1.00,2.00,4.00,10.0,20.0,50.0,100μg·L2.8加標(biāo)回收率和測定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差向紫菜樣品中分別添加不同濃度水平的16種PAHs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,平行測定6次,回收率和測定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見表4。由表4可知:16種PAHs的回收率為78.3%~109%,RSD為1.2%~14%,滿足食品理化檢測的要求。2.9質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測定按試驗(yàn)方法對(duì)5批干紫菜樣品進(jìn)行分析,結(jié)果表明:5批樣品中16種PA