和厚樸酚羥丙基-環(huán)糊精包合物的制備

和厚樸酚羥丙基--環(huán)糊精包合物的制備

和厚樸酚（honokiol，香港）是中國傳統(tǒng)的中醫(yī)木蘭科植物。etwilsbaile，etwils）或扁平厚樸（meniarehs）是從干燥的干皮、根皮和分枝皮中提取的生物活性物質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn),和厚樸酚具有明顯的抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抗輻射及心血管保護作用等藥理活性1儀器和試劑UV-3150型紫外分光光度計(日本島津公司);綜合熱分析儀STA449(SimultaneousTG-DTA/DSCApparatusSTA449C,德國Netzsch公司);紅外光譜儀(AVATAR330FT-IR,美國ThermoNicolet公司);DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(鞏義市予華儀器);AR2140精密電子天平(美國OHAUS公司);SHZ-88臺式水浴恒溫振蕩器(江蘇太倉市實驗設(shè)備廠)。和厚樸酚(西安小草植物科技有限公司,純度>98.48%);羥丙基-β-環(huán)糊精(西安德立生物化工有限公司);實驗用水為超純水,其余所用試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1包劑中的藥物含量是通過測定包劑中的藥物含量來確定的2.1.1測量波長的選擇精密稱取10mgHK,置于50mL的量瓶中,用無水乙醇溶解定容,獲得質(zhì)量濃度為200μg·mL2.1.2標準曲線精密稱取HK適量,配制成質(zhì)量濃度為4、8、12、16、20、24、28和32μg·ml2.1.3包合率和工藝曲線的測定精密稱取100mg包合物,加適量水使溶解,用0.45μm的微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液0.5mL置于10mL的量瓶中,用無水乙醇定容至刻度,于292nm處測其吸光度A,根據(jù)標準曲線方程計算和厚樸酚的含量,并按下式計算包合率。包合率(%)=包合物中和厚樸酚的質(zhì)量/和厚樸酚投藥質(zhì)量×100%2.2hp-hplc包裝工藝的篩選2.2.1u3000加入hpcd水溶液精密稱取適量HK和HPCD,HK用適量乙醇溶解。在攪拌的條件下,將HK乙醇溶液緩慢加入HPCD水溶液中,室溫攪拌24h。然后將上述反應(yīng)體系用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液冷凍干燥獲得固體包合物2.2.2超聲過濾精密稱取適量HK和HPCD,在HPCD水溶液中加入HK后,立即超聲30min,用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液冷凍干燥。平行制備3份。2.2.3包合物的制備精密稱取適量HK和HPCD,加適量蒸餾水將HPCD研勻,在研磨的條件下,緩慢分次加入HK,充分研磨30min,獲得的糊狀物冷凍干燥。平行制備3份。溶液攪拌法、超聲法及研磨法3種方法制備獲得包合物的包合率分別為(43.98±0.24)%,(48.67±4.5)%,(49.54±6.5)%(n=3)?？紤]到超聲法和研磨法不利于工業(yè)化生產(chǎn),而溶液攪拌法的穩(wěn)定性和可重復(fù)性較好,最終選擇溶液攪拌法制備包合物。2.3制備工藝對包合物包合率的影響2.3.1包合物包合率的變化按“2.2.1”項下,考察HK與HPCD的摩爾比分別為1∶1,1∶1.5,1∶2,1∶3和1∶5時包合物包合率的變化。結(jié)果顯示,包合物的包合率分別為(25.67±1.97)%,(41.45±3.30)%,(50.63±6.14)%,(65.03±2.79)%,(73.30±4.87)%(n=3)。2.3.2時對包合物包合率的影響按“2.2.1”項下,考察反應(yīng)溫度分別為30、40、50和60℃時對包合物包合率的影響。結(jié)果顯示,包合率分別為(41.99±2.62)%,(42.03±1.20)%,(49.21±1.80)%,(48.48±1.60)%(n=3)。2.3.3各合率的影響按“2.2.1”項下,考察反應(yīng)時間分別為1、2、4、8、12和24h對包合物包合率的影響。結(jié)果顯示,包合物的包合率分別為(41.99±2.62)%,(43.06±4.09)%,(47.90±1.42)%,(46.99±2.33)%,(47.10±1.20)%,(45.71±1.00)%(n=3)。2.3.4攪拌速度按“2.2.1”項下,考察轉(zhuǎn)速分別為150、200及300r·min2.3.5結(jié)論通過對以上影響因素的考察,初步確定各影響因素的實驗范圍,投料比1∶1~1∶5,反應(yīng)溫度30~70℃,反應(yīng)時間1~5h。2.4投料摩爾比值以包合率為效應(yīng)指標,對影響包合率的處方因素、制備工藝中的各種影響因素進行單因素考察,結(jié)果表明HK與HPCD的投料摩爾比值(X以包合率為因變量,對各因素各水平進行二次多項式擬合,擬合方程如下。Y=-50.22+77.95X由圖1可知,隨著投料摩爾比值(X2.5包合率及預(yù)測值按優(yōu)化后的處方:HK與HPCD投藥摩爾比1∶5,反應(yīng)溫度為50℃,反應(yīng)時間為3h。按優(yōu)化后的處方制備3批樣品,包合率為(79.64±1.67)%,預(yù)測值為(74.22±2.13)%。偏差為-7.3%,絕對值小于10%,提示建立的數(shù)學模型預(yù)測性良好。2.6表觀溶解度測定根據(jù)HiguchiandConnors原理,測定HK在不同濃度的HPCD溶液37,50,60℃下的表觀溶解度,同時計算在不同溫度下對和厚樸酚的增溶倍數(shù)見表3。結(jié)果表明,隨HPCD濃度的增加,HK在水中的溶解量逐漸增加。當HPCD的濃度為30mmol·L2.7包組分的檢查2.7.1表1處有吸熱峰HK、HPCD、HK-HPCD包合物和HK/HPCD物理混合物的DSC圖譜見圖2,HK在90℃附近有吸熱峰,這是HK的特征熔點峰;HPCD在60℃附近有吸熱峰;物理混合物在60~100℃內(nèi)有一個較寬的吸熱峰,這個峰基本上是HPCD與HK在此溫度范圍內(nèi)圖譜的疊加;包合物在60~100℃內(nèi)沒有吸熱峰,而是在110~140℃內(nèi)出現(xiàn)了新的吸熱峰,證明包合物已形成。2.7.2紅外光譜法HK、HPCD、HK-HPCD包合物和HK/HPCD物理混合物的紅外圖譜見圖3。HK在2360cm3羥基自由基磺酸鈉包合物3.1和厚樸酚是中藥厚樸中提取的主要有效成分。傳統(tǒng)中醫(yī)將厚樸用于消除胸腹?jié)M悶、濕滯傷中、脘痞吐瀉、活血化瘀及腹脹便秘等?，F(xiàn)代藥理研究表明,和厚樸酚具有多靶點、多效應(yīng)、多環(huán)節(jié)等作用特點,特別是在抗炎、抗氧化、抗腫瘤和治療糖尿病等方面表現(xiàn)出巨大的潛力。3.2羥丙基-β-環(huán)糊精是β-環(huán)糊精的一種衍生物,是由羥丙基取代β-環(huán)糊精2、3或6位羥基H原子所得。與β-環(huán)糊精相比羥丙基-β-環(huán)糊精的水溶性更好(>500g·L3.3本實驗采用相溶解度法測定表觀溶解度,大量預(yù)試結(jié)果顯示,溫度在30~60℃內(nèi)包合物的包合率較高且較穩(wěn)定,故選擇37、50、60℃測定其表觀溶解度。實驗37℃條件下,測定和厚樸酚在水中的溶解量約為99μ