梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范課件

梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范

朱穗蘭2013年3月2日梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查與技術(shù)規(guī)范朱穗蘭主要內(nèi)容梅毒概述梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范主要內(nèi)容梅毒概述梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來越小到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播（病期>2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小;梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股溝淋巴結(jié)腫大二期梅毒

可有一期梅毒史，病期在2年以內(nèi)有多形性皮疹、扁平濕疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮膚黏膜損害等，包括神經(jīng)梅毒、心血管梅毒隱性（潛伏）梅毒早期：病期在2年以內(nèi)；晚期：病期在2年以上。無任何梅毒性的癥狀和體征胎傳（先天）梅毒早期：在2歲前發(fā)生；晚期：在2歲以后發(fā)病。胎傳隱性梅毒：無臨床表現(xiàn)梅毒概述（二）一期梅毒梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：病史癥狀實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)病原學(xué)檢測(cè)梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類方法。為什么梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷需要兩類血清學(xué)檢測(cè)方法？梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體在3周-4周產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w的作用無保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么有定性和定量?jī)煞N檢測(cè)法？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣方法包括：（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原

試驗(yàn)特點(diǎn)

原理和成分與試驗(yàn)相同

血清不需要滅活

不需要顯微鏡觀測(cè)結(jié)果

可作定量試驗(yàn)

有現(xiàn)成的試劑盒攜帶方便操作簡(jiǎn)單價(jià)格便宜試驗(yàn)特點(diǎn)原理和成分與試驗(yàn)相同操作要點(diǎn)儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀。定性實(shí)驗(yàn)加樣：吸取50ul血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭加1滴抗原反應(yīng)：將卡片置水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘，立即在亮光下觀察結(jié)果3.定量試驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)備：在圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。下同定性試驗(yàn)。操作要點(diǎn)儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果判斷RPRTRUST非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果判斷非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。為什么要做定量檢測(cè)？非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽性。非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性TRUST結(jié)果解釋示意圖

TRUST結(jié)果解釋示意圖假陽性問題

假陽性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽性①技術(shù)性假陽性由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。②生物學(xué)假陽性是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽性某些疾?。航Y(jié)核、瘧疾、肝病、紅斑狼瘡、流感、肺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、風(fēng)疹、系統(tǒng)性硬化癥等，疾病發(fā)展過程中釋放心磷脂到血液中呈假陽性。老年人。生理機(jī)能發(fā)生變化：少數(shù)孕婦也可發(fā)生生物學(xué)假陽性。假陽性問題假陽性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽性梅毒假陽性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽性反應(yīng)，經(jīng)過重復(fù)試驗(yàn)即可除外。

對(duì)生物學(xué)假陽性反應(yīng)，應(yīng)做TPHA（TPPA）等試驗(yàn)進(jìn)行排除。梅毒假陽性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象。處理：將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)。前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法

梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TTPPATPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見的凝集反應(yīng)，具有較高的敏感性和特異性。TPPA是目前WHO認(rèn)可的梅毒抗原血清學(xué)試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，常用于新方法、新試劑評(píng)價(jià)的參照標(biāo)準(zhǔn)。TPPATPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒，此致敏顆TPPA(TPHA)試驗(yàn)原理示意圖

TPPA(TPHA)試驗(yàn)原理示意圖梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的臨床意義一般情況下，一旦梅毒患者梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)呈陽性，即使經(jīng)過正規(guī)有效治療治，仍將終身陽性。所以TPPA等試驗(yàn)不能作為療效觀察的指標(biāo)。作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)初篩陽性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。TPPA等陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行診斷。

梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的臨床意義一般情況下，一旦梅毒患者梅毒TPPA結(jié)果解釋示意圖

TPPA結(jié)果解釋示意圖梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋

梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范簡(jiǎn)介

全國(guó)梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范第一章

梅毒檢測(cè)樣品的采集和處理第二章

梅毒血清學(xué)檢測(cè)

第三章

梅毒病原體顯微鏡檢測(cè)

第四章

梅毒病原體核酸檢測(cè)

第五章

實(shí)驗(yàn)室生物安全

第六章

梅毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理全國(guó)梅毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范第一章梅毒檢測(cè)樣品的采集和處理第一章樣品的采集和處理血清、血漿、全血及腦脊液:

梅毒血清學(xué)檢測(cè)或核酸檢測(cè)皮損部位組織液、淋巴穿刺液:梅毒病原體檢測(cè)或核酸檢測(cè)。第一章樣品的采集和處理梅毒血清學(xué)試驗(yàn)適用范圍

梅毒血清學(xué)試驗(yàn)適用范圍第二章梅毒血清學(xué)檢測(cè)

檢測(cè)目的:臨床診斷、血液篩查、流行病學(xué)監(jiān)測(cè)以臨床診斷為目的的檢測(cè)是為了確定梅毒感染的狀況。以血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止梅毒的經(jīng)血傳播。以流行病學(xué)監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了調(diào)查梅毒血清學(xué)感染率和發(fā)病率。

第二章梅毒血清學(xué)檢測(cè)檢測(cè)目的:梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略選擇根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W(xué)檢測(cè)方法作為篩查試驗(yàn)。梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略選擇以臨床診斷為目的檢測(cè)策略一

以臨床診斷為目的檢測(cè)策略一以臨床診斷為目的檢測(cè)策略二

以臨床診斷為目的檢測(cè)策略二策略一和策略二比較

策略一和策略二比較第三章梅毒體病原學(xué)檢測(cè)檢測(cè)方法暗視野顯微鏡檢查鍍銀染色檢查第三章梅毒體病原學(xué)檢測(cè)第四章梅毒核酸檢測(cè)可對(duì)血漿、血清、皮損部位組織液、淋巴穿刺液及腦脊液等標(biāo)本的梅毒螺旋體核酸檢測(cè)在早期梅毒、神經(jīng)梅毒和先天梅毒等診斷，以及螺旋體現(xiàn)癥感染和既往感染鑒別診斷中具有一定的價(jià)值可應(yīng)用于梅毒螺旋體的耐藥性監(jiān)測(cè)、菌株流行病學(xué)分型。第四章梅毒核酸檢測(cè)可對(duì)血漿、血清、皮損部位組織液、淋巴穿刺第五章實(shí)驗(yàn)室生物安全梅毒的生物危害梅毒螺旋體屬第三類病原微生物，一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，是有有效治療和預(yù)防方法的致病微生物

梅毒相關(guān)檢測(cè)的生物安全級(jí)別

為了保證安全，對(duì)臨床和現(xiàn)場(chǎng)未知樣本的梅毒血清學(xué)檢測(cè)應(yīng)在符合Ⅱ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。如有艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，可以在艾滋病抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。第五章實(shí)驗(yàn)室生物安全梅毒的生物危害第六章實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理質(zhì)量保證質(zhì)量評(píng)估試劑評(píng)價(jià)第六章實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理質(zhì)量保證質(zhì)量保證檢測(cè)方法和試劑的選擇

用于臨床診斷的檢測(cè)方法應(yīng)使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)的試劑，應(yīng)選擇敏感性高、特異性好的試劑。性病參比實(shí)驗(yàn)室和省級(jí)性病中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期組織開展梅毒診斷試劑的臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)和新方法與技術(shù)的評(píng)估。質(zhì)量保證檢測(cè)方法和試劑的選擇質(zhì)量評(píng)價(jià)所有梅毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部質(zhì)量評(píng)價(jià)省級(jí)中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加國(guó)家級(jí)職能工作考核和PT其他實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加省級(jí)職能工作考核和PT。質(zhì)量評(píng)價(jià)所有梅毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部質(zhì)量評(píng)價(jià)質(zhì)量評(píng)價(jià)考評(píng)組織單位根據(jù)PT考核結(jié)果、職能工作評(píng)價(jià)結(jié)果及對(duì)部分實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)情況，匯總各實(shí)驗(yàn)室的最終考評(píng)結(jié)果，上報(bào)相關(guān)機(jī)構(gòu)?？荚u(píng)單位應(yīng)將考評(píng)得分及扣分原因反饋各參評(píng)實(shí)驗(yàn)室，以適當(dāng)?shù)姆绞皆谶m當(dāng)范圍內(nèi)公開發(fā)布考評(píng)結(jié)果。為合格者頒發(fā)合格證書。質(zhì)量評(píng)價(jià)考評(píng)組織單位根據(jù)PT考核結(jié)果、職能工作評(píng)價(jià)結(jié)果及對(duì)部小結(jié)1、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)陽性往往是梅毒現(xiàn)癥感染者，臨床上即可開展治療。2、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)定量試驗(yàn)可作為療效觀察的指標(biāo)。3、完善操作的標(biāo)準(zhǔn)化，杜絕有個(gè)人特點(diǎn)的操作。4、根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W(xué)檢測(cè)方法作為篩查試驗(yàn)。5、臨床上采用兩種方法同時(shí)檢測(cè)，可以快速診斷梅毒，使病人能夠得到及時(shí)治療。小結(jié)1、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)陽性往往是梅毒現(xiàn)癥感染者，

一致是強(qiáng)有力的，而紛爭(zhēng)易于被征服。。9月-239月-23Tuesday,September12,2023勤奮是登上知識(shí)高峰的一條捷徑，不怕吃苦才能在知識(shí)的海洋里自由遨游。。22:28:1122:28:1122:289/12/202310:28:11PM衷心感謝社會(huì)各界對(duì)電建事業(yè)的明白關(guān)心和支持。9月-2322:28:1122:28Sep-2312-Sep-23可怕的不是失敗，而是自甘墮落。。22:28:1122:28:1122:28Tuesday,September12,2023既然我已經(jīng)踏上這條道路，那么，任何東西都不應(yīng)妨礙我沿著這條路走下去。。9月-239月-2322:28:1122:28:11September12,2023沒有播種，何來收獲；沒有辛苦，何來成功；沒有磨難，何來榮耀；沒有挫折，何來輝煌。。2023年9月12日10:28下午9月-239月-23書不記，熟讀可記；義不精，細(xì)思可精；惟有志不立，直是無著力處。。12九月202310:28:11下午22:28:119月-23效率成就品牌，誠(chéng)信鑄就未來。。九月2310:28下午9月-2322:28September12,2023經(jīng)理不是只告訴別人怎么干的家伙，而是要激發(fā)隊(duì)伍產(chǎn)生一定報(bào)負(fù)，并朝目標(biāo)勇往直前。。2023/9/1222:28:1122:28:1112September2023想起父母，做子女的是多么為他們感到心痛??！他們生我育我，花費(fèi)了