精甲霜靈在紅薯上的殘留測定

精甲霜靈在紅薯上的殘留測定

抗凍性。它的英文名稱為甲醇5m，化學名稱為（r）-n-（2-甲基乙?；?n-（2，6-二甲苯基）-2-丙氨酸甲酯，方程式為c13h21no4。精甲霜靈是甾醇脫甲基化抑制劑,具有內吸、保護和治療性。對霜霉病菌、疫霉病菌、腐霉病菌所致的蔬菜、果樹、煙草、油料、棉花、糧食等作物病害具有高效。近年來,在西紅柿種植中大量使用精甲霜靈農(nóng)藥用于莖葉噴灑防治西紅柿葉斑病、黑星病等,被認為是一種前景較好的殺菌劑。但是,目前關于精甲霜靈農(nóng)藥在西紅柿上的殘留特征及積累規(guī)律研究報道較少,為此筆者于2006年在海南省對精甲霜靈農(nóng)藥在西紅柿果實上進行殘留消解規(guī)律研究。本文報道精甲霜靈在西紅柿上的殘留分析方法及消解殘留動態(tài)分析測試結果,并對其安全性進行評價。1材料和方法1.1材料表面1.1.1家在西瓜上的試驗試驗農(nóng)藥為68%精甲霜靈農(nóng)藥(先正達(中國)投資有限公司生產(chǎn)),試驗農(nóng)藥廠家推薦安全間隔期3d。根據(jù)試驗農(nóng)藥廠家在西紅柿上的推薦使用劑量為1020~1224g/hm2,本試驗施藥劑量為1224g/hm2(以下別稱低濃度)和2248g/hm2(以下別稱高濃度)。試驗作物:西紅柿。試驗地點:海南省?？谑虚L流基地,熱帶海洋性季風氣候,土壤類型為紅壤。試驗期間平均氣溫25.5℃,降雨量為192.4mm。試驗時間:2006年3月~2006年4月。1.1.2主要生產(chǎn)設備⑴儀器:氣相色譜儀,FinniganTraceGC2000型帶氮磷檢測器(NPD)(美國熱電公司生產(chǎn));臺式離心機,TDL-40B型(上海安亭科學儀器廠生產(chǎn));氮吹儀,HGC-24A型(上海泉島科貿有限公司生產(chǎn));噴霧器,WS-16(山東衛(wèi)士植保機械有限公司生產(chǎn))。⑵試劑:乙酸乙酯、丙酮、正己烷均為分析純。1.2方法1.2.1調查和測定西瓜果實不同濃度紅外施藥后的殘留試驗⑴消解動態(tài)試驗。在試驗基地設一組試驗處理,每處理3次重復,每小區(qū)面積37.23m2(5.1m×7.3m)。以精甲霜靈農(nóng)藥兌水稀釋為試驗設計濃度,在西紅柿果實生長期采用葉面噴霧法均勻噴灑在西紅柿植株上。采用對角線采樣法,分別于噴藥后2h、1、3、5、7、14、21、30d采樣,每小區(qū)采集西紅柿果實2kg。將樣品保存在-20℃冰箱中待測。同時同法采集對照小區(qū)樣品。⑵最終殘留試驗。在試驗基地根據(jù)施藥劑量及施藥次數(shù)分別設處理區(qū)和對照區(qū),每處理3次重復,每小區(qū)面積37.23m2(5.1m×7.3m)。施藥劑量為高濃度和低濃度兩個水平;每水平施藥次數(shù)分別為4次和5次;每次施藥間隔為3d。對照區(qū)不施藥。分別于最后一次施藥后2、3、5d以多點采樣法采集各處理區(qū)和對照區(qū)樣品,測定精甲霜靈的殘留量,分別考察施藥量和施藥次數(shù)對精甲霜靈殘留量的影響。2結果與分析2.1標準曲線的繪制和回收率試驗在上述檢測條件下,分別注射濃度為0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL標準工作液,取1.00μL進樣測定,外標法定量,繪制精甲霜靈標準曲線,回歸方程為:y=1.3759e-6x-0.0040,相關系數(shù)r2=0.9993,以峰面積作為定量指標,精甲霜靈保留時間為7.30min,標準色譜圖見圖1。圖1證明在試驗條件范圍內儀器響應信號與進樣量成良好的線性關系。取空白對照區(qū)的西紅柿樣品,按照樣品處理步驟進行回收率試驗,每次試驗重復5次,試驗結果見表1。從表1可知,該方法的準確度和精密度符合殘留檢測要求。2.2紅柿蘋果多糖和精甲霜靈的降解規(guī)律西紅柿果實中精甲霜靈殘留量隨時間的推移呈現(xiàn)明顯的降低趨勢。在施藥2h后,精甲霜靈在西紅柿果肉上沉積量達最高值,為0.976mg/kg。受環(huán)境因素和植株生理生化的影響,西紅柿果肉中精甲霜靈的含量隨時間的延長而逐漸降低,在7d時降解比率達到90%以上,其降解規(guī)律符合上述回歸模型。根據(jù)回歸方程計算,精甲霜靈在西紅柿果肉上殘留半衰期為1.74d。2.3低濃度對西瓜精甲霜靈殘留的影響不同施藥條件下精甲霜靈在西紅柿果實中不同時間的殘留水平見表3。從表3可知,高濃度處理與低濃度處理的西紅柿果實中精甲霜靈殘留濃度存在一定差異,說明精甲霜靈在西紅柿果實中的殘留濃度隨著施藥量增多而增高。精甲霜靈在西紅柿果實中的殘留量在施藥4次處理與施藥5次處理間無顯著差異,說明施藥次數(shù)多少(4~5次)與精甲霜靈在西紅柿果實中的殘留濃度無關。3討論3.1甲霜靈的檢測方法精甲霜靈為外消旋物甲霜靈的R型旋光異構體,因此甲霜靈的殘留分析方法對精甲霜靈同樣適用。目前關于甲霜靈的殘留分析方法多采用甲醇提取,二氯甲烷萃取,酸性氧化鋁層析柱凈化,采用HPLC法進行測定[7~9]。也有采用混合有機相提取、凝膠滲透色譜凈化、氣相色譜檢測的途徑分析包括甲霜靈在內的23種農(nóng)藥殘留,但此方法試劑耗費量大,過程繁瑣,成本高,不適用于甲霜靈單種農(nóng)藥的殘留分析。筆者采用乙酸乙酯提取,正己烷凈化,氣相色譜(氮磷檢測器)測定,具有稱樣量小、試劑消耗量少、操作簡便、可操作性強等優(yōu)勢,尤其適合批量測定。3.2精甲霜靈殘留標準精甲霜靈在田間施用于西紅柿以后,受到溫度、水分、施用濃度、施藥次數(shù)等因子影響。精甲霜靈的消解速率同溫度成正相關,同時下雨則可能稀釋而影響其降解速率。試驗表明,精甲霜靈施用后在環(huán)境中降解很快。根據(jù)本試驗數(shù)據(jù)計算精甲霜靈在西紅柿果實上殘留半衰期為1.74d。目前我國尚未制定有關商品中精甲霜靈的最高殘留容許量。因此以性質相似的甲霜靈(Metalaxyl)殘留標準作為依據(jù),GB2763-2005《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》4.89中規(guī)定甲霜靈最大殘留限量為,黃瓜0.5mg/kg、葡萄1mg/kg。中國國家標準化管理委員會(SAC)2005年10月3日制定發(fā)布的《蘋果、梨中甲霜靈、腐霉利、乙烯菌核利、福美雙、甲基硫菌靈、百草枯、西瑪津、莠去津和乙烯利最大殘留限量》規(guī)定了蘋果、梨中甲霜靈最大殘留限量為1mg/kg。根據(jù)試驗結果,距離最后一次噴藥2d時,精甲霜靈在西紅柿果實上的殘留量最大為0.074mg/kg,已達到甲霜靈最大殘留限量的相關規(guī)定,因此認為該農(nóng)藥生產(chǎn)廠家推薦的安全間隔期3d合理。1.2.2樣品的制備和色譜條件⑴提取,稱取試樣5g(精確到0.01g)于10mL具塞離心管中,加入1mL丙酮混勻,先后分3次加入定量的乙酸乙酯(4mL/次)進行離心(2000r/min,2min)萃取3次,每次萃取后將盛裝試樣的具塞離心管中的上層乙酸乙酯溶液轉入另一潔凈試管中,將3次萃取的乙酸乙酯提取液合并,置于氮吹儀上吹干(80℃水浴)。⑵凈化,用正己烷洗滌試管,并定容至5.00mL,用氣相色譜(氮磷檢測器)測定。⑶儀器條件,儀器:毛細管色譜柱為DB-1(30m×0.32mm×1μm),氮磷檢測器(NPD)。升溫程序:60℃保持0.5min,以60℃/min升溫至240℃,保持3.5min,再以20℃/min升溫至260℃,最后以80℃/min升溫至280℃,保持2.5min;進樣口溫度:250℃;進樣量:1.00μL;載氣:氮氣,純度≥99.99%,流速為7.00mL/min;氫