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文檔簡介
專題11DNA的粗提取與鑒定
知識梳理
i.實驗原理
(1)DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同
溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液
DNA溶解度
DNA溶解析出
NaCl
00.14mol/L濃度
NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從
部分發(fā)生鹽析沉
蛋白質(zhì)2mol/L逐漸降低的過程溶解
淀
中,溶解度逐漸增大
(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)
進(jìn)一步分離。
(3)DNA與二苯胺沸水浴加熱,呈藍(lán)色。
2.操作流程
材料的選?。哼x用3區(qū)含量相對較高的生物組織”
破碎細(xì)胞以雞血為例):雞血細(xì)胞一加翎比f用玻璃棒攪拌用紗布過濾f收集濾液,
去除雜質(zhì):利用DNA在不同濃度的NaCl溶滿中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)f
DNA的析出:將處理后的溶滿過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液“
DNA的鑒定:在溶有DNA的溶灑中加入二菸胺試劑,混合均勻后將試管置于沸水中加熱5nun,'溶灑變成
3、DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、3、4”
①加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;②加到含DNA的2moi/L的
加蒸儲
NaCl溶液中,使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度稀釋到0.14mol/L,使DNA
水2次
析出
用紗布①過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;②過濾用2moi/L的
過濾4NaCl充分溶解的DNA,濾去溶液中的雜質(zhì);③濾取0.14mol/L的NaCl
次溶液中析出的DNA(黏稠物);④過濾溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液
用NaCl①加2mol/L的NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);②用0.14mol/L的
溶液4NaCl溶液使DNA析出:③用2mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA
次黏稠物;④用2moi/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA
實戰(zhàn)演練
一、選擇題
1.下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,錯誤的是()
A.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)
C.常溫下菜花勻漿中某些酶類會影響DNA的提取
D.用酒精進(jìn)行提純DNA是因為蛋白質(zhì)不溶于酒精,而DNA可溶解
【答案】ABD
【分析】
“DNA粗提取與鑒定實驗”的實驗原理有:DNA在氯化鈉溶液中溶解度不同,先減小后增大;DNA不溶于
酒精溶液,而細(xì)胞中某些物質(zhì)可以溶解于酒精;DNA遇二苯胺在沸水浴中會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。
【詳解】
A、DNA粗提取與鑒定實驗中,洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但對DNA的溶解度沒有影響,A錯誤;
B、將DNA絲狀物先溶解在2moi7L的NaOH溶液中,然后加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴,冷卻后變藍(lán),B
錯誤;
C、常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提取,C正確;
D、用冷酒精可提純DNA,因為DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,D錯誤。
故選ABDo
2.在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中,相關(guān)敘述正確的是()
A.用蒸儲水將NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度調(diào)至0.14mol/L,過濾去除析出物
B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì)
C.將絲狀物溶解在濃度為2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈紫色
D.用植物替代雞血作為實驗材料,其實驗操作步驟相同
【答案】B
【分析】
DNA的粗提取與鑒定的實驗原理:
①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為
0」4moi/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出;
②DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出
含雜質(zhì)較少的DNA;
③洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但是對DNA沒有影響:
④蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度,在80℃條件下會變性,而DNA對溫度的耐受性較高;
⑤蛋白酶能水解蛋白質(zhì),而對DNA沒有影響;
⑥D(zhuǎn)NA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】
A、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,DNA存在于析出物中,不能去掉析出物,A錯誤;
B、利用DNA在不同濃度氯化鈉溶液中的溶解度不同,可以通過DNA的反復(fù)溶解和析出除去雜質(zhì),蛋白
酶能水解蛋白質(zhì),而對DNA沒有影響,因此可以利用木瓜蛋白酶除去雜蛋白,B正確;
C、用二苯胺試劑檢測DNA分子的條件是水浴加熱,C錯誤;
D、植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,所以用植物做實驗材料時,需要研磨,加入食鹽和洗滌劑,D錯誤。
故選B。
3.以菜花為材料進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”的實驗中,下面操作與其目的錯誤的是()
ABCD
加入試劑加入蒸儲水加入食鹽加入洗滌劑95%冷卻的酒精
目的使細(xì)胞破裂溶解DNA瓦解細(xì)胞膜析出DNA
A.AB.BC.CD.D
【答案】A
【分析】
1、DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14
mol/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜
質(zhì)較少的DNA。
【詳解】
A、植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁,加入蒸飽水不會吸水漲破,A錯誤;
B、DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同,加入食鹽的作用是溶解DNA,B正確;
C、加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜,有利于DNA釋放,C正確;
D、DNA不溶于酒精,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精,故加入95%冷卻的酒精可析出DNA,D正
確。
故選Ao
4.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()
A.向菜花組織中加入蒸福水并攪拌可釋放核DNA
B.鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行加熱
C.利用雞血細(xì)胞提取DNA時,加入冷卻的酒精溶液靜止后出現(xiàn)的白色絲狀物,就是粗提取的DNA
D.向雞血細(xì)胞中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精,可以獲得無雜質(zhì)的DNA
【答案】C
【分析】
DNA粗提取和鑒定的原理:
(l)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶
液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。
【詳解】
A、菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞,有細(xì)胞壁保護,因此加蒸儲水不會吸水脹破,A錯誤;
B、鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物先溶解到2moi/L的NaCl溶液中,然后再加入二苯胺試劑進(jìn)行沸水浴,B錯
誤;
C、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,向濾液中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的
酒精,靜置2?3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,就是粗提取的DNA,C正確;
D、DNA存在于血細(xì)胞中,血細(xì)胞沒有破壞,向雞血細(xì)胞中加入冷卻的95%的酒精,不能獲得DNA,D錯
誤。
故選C。
5.下列與利用NaCl溶液初步析出DNA黏稠物有關(guān)的敘述,不正確的是()
A.DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同
B.操作時用玻璃棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整
C.向2mol/L的NaCl溶液中加蒸儲水降低NaCl溶液濃度可以增加DNA的溶解度
D.當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時,NaCl溶液的濃度可認(rèn)為是0.14mol/L
【答案】C
【分析】
DNA粗提取和鑒定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解
度不同:DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。
【詳解】
A、根據(jù)分析,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,A正確:
B、在操作時,用玻璃棒輕緩攪拌,防止DNA斷裂,以保證DNA分子完整,B正確;
C、加蒸儲水可降低DNA的溶解度,C錯誤;
D、當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時,此時NaCl溶液的濃度相當(dāng)于0.14mol/L,此時DNA的溶解度最低,D正確。
故選C。
6.下列與DNA粗提取與鑒定過程有關(guān)的敘述中,錯誤的是()
A.將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中,紅細(xì)胞漲破后將DNA釋放出來
B.用2moi/L的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后,須保留上清液
C.在提取液中加入75%的冰酒精后蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出
D.DNA與二苯胺溶液在沸水浴加熱條件下會呈現(xiàn)藍(lán)色
【答案】C
【分析】
1、DNA的溶解性:
(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14moi/L溶解度最低),利用這一
特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的;
(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)
進(jìn)一步的分離。
2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能
忍受60-80C的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。
3、DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】
A、將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中,紅細(xì)胞破裂后將DNA釋放出來,A正確:
B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,氯化鈉溶液為2moi/L時,DNA溶解度最大,所以用2moi/L
的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后,須保留上清液,B正確;
C、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,在提取液中加入95%的
冷凍酒精后,蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出,C錯誤;
D、將提取的絲狀物加入2moi/L的NaCl溶液中溶解,再加入二苯胺試劑,混勻后將試管置于沸水中水浴
加熱5min,指示劑將變藍(lán),D正確。
故選Co
7.多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定,用香蕉也可以取得較好的實驗效果,下列操作正確的
是()
A.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸儲水并研磨,以釋放核DNA
B.經(jīng)研磨過濾后,將研磨液離心5分鐘,取沉淀物進(jìn)行下一步操作
C.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì),得到粗提取的DNA
D.將DNA溶于NaCl溶液后,加入現(xiàn)配的二苯胺試劑,混合均勻即可出現(xiàn)藍(lán)色
【答案】C
【分析】
根據(jù)DNA的溶解性提取DNA:
1、DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl中的溶解度不同。
2、DNA不溶于酒精,但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。
3、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。
【詳解】
A、香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護,因此加蒸儲水?dāng)嚢璨粫茐募?xì)胞,不能將DNA釋放出來,A錯誤;
B、經(jīng)研磨過濾后,將研磨液離心5分鐘,取上清液進(jìn)行下一步操作,B錯誤;
C、DNA不溶于酒精,因此可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)析出DNA,獲得較純凈的DNA,C
正確;
D、在沸水中,DNA遇二苯胺會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng),D錯誤。
故選C。
8.下圖是“DNA的粗提取和鑒定”實驗中幾個重要操作的示意圖,下列敘述錯誤的是()
A.圖①的原理是DNA不溶于酒精,而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精
B.圖①和圖③都需要用玻棒沿一個方向輕緩攪拌,便于DNA的析出并保持結(jié)構(gòu)完整
C.若圖③操作后接圖②操作,則DNA會留在濾液中
D.若圖④操作后接圖②操作,則DNA會留在紗布上
【答案】B
【分析】
DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是:
①DNA的溶解性,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同,利用這一特點可以
選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出,從而達(dá)到分離的目的;
②DNA不容易酒精溶液,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精,利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一
步分離;
③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性,蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是不能水解DNA,蛋白質(zhì)不能耐受較高
溫度,DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但是對DNA沒有影響;
④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。
【詳解】
A、DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以圖①的原理是DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)可溶
于酒精,以便除去溶于酒精的雜質(zhì),提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA,A正確;
B、圖①玻璃棒逆時針方向攪拌,目的是提取出含雜質(zhì)較少的DNA,圖③玻璃棒順時針方向攪拌,目的是
加速細(xì)胞吸水破裂,B錯誤;
C、圖③操作是加入蒸儲水,破碎細(xì)胞,圖②操作是過濾,獲取含DNA的濾液,使DNA留在濾液中,C
正確;
D、圖④操作是去除濾液中雜質(zhì),析出DNA,圖②操作是過濾,將DNA留在紗布上,D正確。
故選B。
9.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述,正確的是()
A.用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近
B.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出
C.預(yù)冷的乙醉可用來溶解DNA
D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱
【答案】D
【分析】
1、DNA粗提取和鑒定的原理:
(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶
液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。
2、DNA粗提取和鑒定的過程:
(1)實驗材料的選?。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,
成功的可能性更大。
(2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:動物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入
?定量的蒸儲水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑
溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研
磨,過濾后收集研磨液。
(3)去除濾液中的雜質(zhì):方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白
酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。方案二是利用蛋白酶分解
雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而
使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。
(4)DNA的析出與鑒定:①將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2?3min,
溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取
上面的水分。②取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2moi/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中
一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,
將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是
否變藍(lán)。
【詳解】
A、豬是哺乳動物,其成熟的紅細(xì)胞中沒有DNA,因此用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量不
可能相近的,A錯誤;
B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mol/L時,DNA溶解度最小,
因此改變NaCl溶液的濃度既能使DNA溶解也能使其析出,B錯誤;
C、在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的沉淀量最大,預(yù)冷的乙醇可用來進(jìn)一步純化粗提的
DNA,C錯誤;
D、用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱,D正確。
故選D。
10.不同儲藏條件對棉葉DNA純度及提取率(提取率越高,獲得的DNA越多)的影響,結(jié)果如圖所示。
3d3d7d7d7d
3d3d7d7d7d
A.利用NaCl溶液提取DNA時,NaCl溶液濃度越大,DNA的溶解度越小
B.新鮮棉葉的DNA純度最高,提取DNA的量也最多
C.冷凍保存3d組的DNA提取效果優(yōu)于冷鮮保存3d
D.用二苯胺試劑鑒定,藍(lán)色最淺的是冷凍3d處理后提取的DNA
【答案】C
【分析】
DNA的溶解性:
1、DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在O.I4mol/L的氯化鈉中溶解度最
低);
2、DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。
【詳解】
A、DNA在0.14moi/L的氯化鈉中溶解度最低,在2moi/L的氯化鈉中溶解度最大,A錯誤;
B、新鮮棉葉提取的DNA純度最高,但提取率不高,因此新鮮棉葉提取DNA的量不是最多的,B錯誤;
C、結(jié)合題圖可知,冷凍保存3d組的DNA提取效果優(yōu)于冷鮮保存3d,提取DNA的純度不僅高而且提取率
也高,C正確;
D、冷凍3d處理提取的DNA量是最多的,因此用:苯胺試劑鑒定,顏色最深的是冷凍3d處理后提取的DNA,
D錯誤。
故選C。
11.下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗的部分操作,有關(guān)分析正確的是()
DNA濃鹽溶液
圖2
A.圖1中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入檸檬酸鈉加快DNA析出
B.圖1中完成過濾之后收集濾液
C.圖2中完成過濾之后收集濾液
D.圖1和2中加入蒸儲水的目的相同
【答案】B
【分析】
1、DNA的溶解性(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度
最低),利用這一特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離
目的。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精.利用這一原理,可以將DNA與
蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。
2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響.大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍
受60-80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。
3、DNA的鑒定在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】
A、圖1中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入檸檬酸鈉防止血液凝固,A錯誤;
B、圖1中完成過濾之后收集濾液,濾液中含有DNA,B正確:
C、圖2中DNA在濃鹽溶液中會析出,完成過濾之后要收集不溶物,不溶物中含有大量的DNA,C錯誤;
D、圖1加入蒸儲水的目的是溶解DNA,圖2中加入蒸儲水的目的是析出DNA,D錯誤。
故選Bo
12.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,正確的是()
A.新鮮的洋蔥和豬肝可作為實驗材料提取DNA,而菠菜不能用于提取DNA
B.DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度相同,可以用NaCl溶液溶解DNA
C.利用DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理可以初步分離DNA和蛋白質(zhì)
D.用95%的冷酒精處理,靜置后析出DNA,DNA加入二苯胺試劑,水浴加熱呈灰綠色
【答案】C
【分析】
DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn):DNA含量高,并且材料易得。由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,
因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理:1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在
不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低):DNA不溶于酒精溶液,但
細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定:在沸水浴的
條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。
【詳解】
A、DNA含量高,并且材料易得的生物都可以作為提取DNA的材料,所以菠菜也可以作為提取DNA的材
料?,A錯誤;
B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不相同,在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低,B錯誤;
C、利用DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理可以初步分離DNA和蛋白質(zhì),C正確;
D、用95%的冷酒精處理,靜置后析出DNA,DNA加入二苯胺試劑,水浴加熱呈藍(lán)色,D錯誤。
故選Co
13.下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實驗的敘述,正確的是()
A.豬成熟的紅細(xì)胞不宜選作DNA粗提取材料
B.等體積雞(2n=78)的血液和鴨(2n=78)的血液提取的DNA量相等
C.切碎的洋蔥中,加入洗滌劑和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞壁
D.用棕色瓶收集并保存好剩余的二苯胺試劑,以備下一次實驗時繼續(xù)使用
【答案】A
【分析】
DNA粗提取和鑒定的原理:
1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的
氯化鈉中溶解度最低):DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。
2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。
3、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。
【詳解】
A、豬成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,不含DNA,不宜選作DNA粗提取材料,A正確;
B、等體積雞(2n=78)的血液和鴨(2n=78)的血液中所含血細(xì)胞的數(shù)量不同,所以提取到的DNA量不同,
B錯誤;
C、切碎的洋蔥中,加入洗滌劑有利于去除細(xì)胞膜,食鹽能溶解DNA,C錯誤;
D、二苯胺試劑應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,D錯誤。
故選A。
14.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()
A.用蒸儲水使家兔的紅細(xì)胞漲破,可獲取富含DNA的濾液
B.DNA不溶于95%的冷酒精,但可溶于2moi/L的NaCl溶液
C.植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水脹破,釋放DNA
D.鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴
【答案】B
【分析】
1、DNA的溶解性:(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,
選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。(2)DNA不溶于
酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2、
DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍
受60-80C的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。3、DNA
的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】
A、兔屬于哺乳動物,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,不能用于DNA的粗提取,A錯誤;
B、DNA不溶于95%的冷酒精,而溶于2moi/L的NaCl溶液,B正確;
C、洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。植物材料需先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜,C錯誤;
D、鑒定DNA時,將絲狀物溶于2moi/L的NaCL溶液后加入二苯胺試劑,進(jìn)行沸水浴冷卻后呈藍(lán)色,D錯
誤。
故選B。
15.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗操作的說法中,正確的是()
A.該實驗中有兩次加入蒸饋水,均是為了析出DNA
B.該實驗中多次要求用玻璃棒單向攪拌,目的是攪拌均勻
C.該實驗中有3次過濾,過濾時使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān)
D.實驗3次加入NaCl溶液,第二次的目的是析出DNA
【答案】C
【分析】
1、DNA粗提取和鑒定實驗中三次加NaCl浴液的目的:
①第一次加入NaCl溶液后必須充分?jǐn)嚢?,加速染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離,使DNA充分游離并溶解在
NaCl溶液中。
②第二次加入NaCl溶液的目的是使DNA溶解。
③第三次(即DNA鑒定環(huán)節(jié))中加NaCl溶液的目的是溶解DNA。
2、攪拌的目的
第一次:攪拌加蒸儲水的雞血細(xì)胞液,加速細(xì)胞破裂;
第二次:攪拌含DNA的高濃度鹽溶液,加速DNA的溶解;
第三次:攪拌加蒸儲水的NaCl溶液,均勻稀釋以析出更多DNA;
第四次:攪拌含DNA的高濃度鹽溶液,加速DNA的溶解;
第五次:攪拌含DNA的酒精,提取含雜質(zhì)較少的DNA:
第六次:攪拌含DNA白色絲狀物的鹽溶液,加速DNA的溶解。
3、兩次加入蒸饋水的目的:第一次是使血細(xì)胞漲破;第二次降低NaCl溶液濃度使DNA析出。
【詳解】
A、整個DNA提取過程中,兩次加蒸鐳水的目的,第一次是使血細(xì)胞吸水漲破,第二次是為了降低溶液中
NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達(dá)到最低,析出DNA分子,A錯誤;
B、該實驗中多次要求用玻璃棒單向攪拌,目的不都是攪拌均勻,如加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后攪拌的
目的是提取出DNA分子,B錯誤;
C、該實驗中有3次過濾,過濾時使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān),C正確;
D、實驗3次加入NaQ溶液,第二次的目的是溶解DNA,D錯誤。
故選C。
16.在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品分別是()
①0.Ig/mL的檸檬酸鈉溶液
②2.00mol/L的NaCl溶液
③0.14moi/L的NaCl溶液
④體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液
A.①③B.②③C.②④D.③④
【答案】D
【分析】
DNA粗提取和鑒定的原理:
1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,
但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精:DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
2、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色.
【詳解】
@0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液是作為抗凝劑防止血液凝固的,沒有用于DNA的初步析出和提純,①錯誤:
②DNA可以溶于2.00mol/L的NaCl溶液,未用于DNA的初步析出和提純,②錯誤;
③DNA在O.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低,此時DNA會從溶液中析出,可用于初步析出DNA,③
正確;
④由于DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)可以溶于酒精,因此利用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,可提取較純凈
的DNA,④正確。
綜上正確的選項是③④,D正確,ABC錯誤。
故選D。
二、綜合題
17.依據(jù)以雞血為材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的有關(guān)實驗回答:
(1)實驗不用哺乳動物血液,以雞血為實驗材料,是因為雞血紅細(xì)胞___________,每100毫升的血液中
需要加入3克的,防止血液凝固。
(2)鑒定DNA的原理是:在___________條件,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)________色。
(3)調(diào)節(jié)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時,DNA將會(填“析出“或“溶解"),過濾棄去
(域'濾液"或“不容物
【答案】有細(xì)胞核,能獲取DNA檸檬酸鈉沸水浴藍(lán)析出濾液
【分析】
1、雞血分為血細(xì)胞和血漿,DNA存在于血細(xì)胞中,正常情況下,血漿中不含有DNA,因此用雞血為實驗
材料提取DNA,一般不用雞全血,用血細(xì)胞。
2、DNA存在于細(xì)胞內(nèi),提取DNA時,首先要破碎細(xì)胞,獲取含有DNA的濾液,具體操作方法是向雞血
細(xì)胞液中加入蒸儲水,使血細(xì)胞吸水漲破,釋放核DNA。
3、由于DNA在不同氯化鈉溶液中的溶解度不同,因此可以通過控制氯化鈉溶液的濃度使DNA析出或溶解。
4、在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色,因此二苯胺可以作用鑒定DNA的試劑。
【詳解】
(1)哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,而雞血紅細(xì)胞有細(xì)胞核,能獲取DNA。為了防止血液凝固,向
雞血細(xì)胞溶液中加入檸檬酸鈉。
(2)在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。
(3)向溶液中加入蒸鐲水調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L(此時DNA的溶解度最?。?,DNA
將會析出,過濾去除濾液中的雜質(zhì)。
【點睛】
本題考查DNA粗提取和分離的實驗,解答本題的關(guān)鍵是掌握DNA粗提取、提純和鑒定的原理,明確DNA
鑒定時需要水浴加熱。
18.真核生物細(xì)胞內(nèi),大量DNA和蛋白質(zhì)以及一些RNA等混雜在一起,難以分離。生物興趣小組的同學(xué)
為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究。
(1)分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法,根據(jù)圖示說明
該興趣小組是從各種物質(zhì)在不同飽和度的硫酸鏤溶液中的差異角度開展研究的:
①取雞血細(xì)胞懸液10mL,加蒸錨水20mL,同時用玻璃棒攪拌過濾,取濾液,轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中。
該步驟中加入蒸播水的作用是O
②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸鍍?nèi)芤?,用玻棒沿一個方向(填“輕輕攪拌”或“快速攪
拌”),同時不斷收集析出的物質(zhì)。
下圖是根據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線,請據(jù)圖分析:
物
質(zhì)
析
出
的
相
對
量
③如果只要收集纖維蛋白,可采取的措施是o
④先用飽和度40%的硫酸鏤溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白,再在飽和度約為的硫
酸核溶液中析出DNA(既保證DNA提取量較大又避免其他雜質(zhì)過多),與此同時析出的物質(zhì)還有
(2)如果要進(jìn)一步去掉雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,可采取以下方法:
a:將混有雜質(zhì)的DNA加入到濃度為的氯化鈉中,收集析出物。
b:將混有雜質(zhì)的DNA溶解到氯化鈉溶液中,然后加入酶去除雜質(zhì)。
c:將混有雜質(zhì)的DNA加入到體積分?jǐn)?shù)為的冷卻酒精中,然后收集析出物。
(3)對提取的DNA可以用試劑鑒定,經(jīng)沸水浴冷卻后呈________色。
【答案】溶解度使雞血細(xì)胞吸水脹破輕輕攪拌在硫酸錠濃度達(dá)到30%之前收集析出物50%
球蛋白0.14mol/L蛋白(酶)95%二苯胺藍(lán)
【分析】
1、分析圖解可知,不同物質(zhì)在不同飽和度硫酸核溶液中的溶解度不同,圖中看出,纖維蛋白在30%硫酸鉞
溶液中溶解度最小,球蛋白在40%硫酸鍍?nèi)芤褐腥芙舛茸钚?,DNA在飽和度約為50%的硫酸銹溶液中溶解
度最小。
2、DNA粗提取和鑒定的原理:①DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解
度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;②DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
【詳解】
(1)分析曲線圖可知,不同物質(zhì)在不同濃度的硫酸鍍中析出的相對量有所差別,即該興趣小組是從各種物
質(zhì)在不同飽和度的硫酸鏤溶液中溶解度的差異角度開展研究的。
①在蒸儲水中,雞紅細(xì)胞吸水脹破,此時可以用玻璃棒快速攪拌,以加速血細(xì)胞的破裂。
②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸鏤溶液,為了防止將DNA的絮狀物攪碎,此時應(yīng)用玻棒沿一個
方向輕輕攪拌,同時不斷收集析出的物質(zhì)。
③據(jù)圖可知,纖維蛋白在30%硫酸銹溶液中溶解度最小,如果只要收集纖維蛋白,可以在硫酸鏤濃度達(dá)到
30%之前收集析出物。
④由圖中看出,DNA在飽和度約為50%的硫酸鍍?nèi)芤褐腥芙舛茸钚?,故可在飽和度約為50%的硫酸鍍?nèi)芤?/p>
中析出DNA(既保證DNA提取量較大乂避免其他雜質(zhì)過多),與此同時析出的物質(zhì)還有球蛋白,只是球蛋
白析出量較少。
(2)由于提取的DNA中混有蛋白質(zhì),如果要進(jìn)一步去掉雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,a:可利用
DNA和蛋白質(zhì)溶解性的差異,將混有雜質(zhì)的DNA加入到濃度為0.14mol/L的氯化鈉中(DNA在此濃度的
氯化鈉溶液中溶解度最低,而蛋白質(zhì)可溶解),收集析出物。
b:將混有雜質(zhì)的DNA溶解到氯化鈉溶液中,然后加入蛋白酶去除雜質(zhì)(少量蛋白質(zhì))。
c:由于DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)可溶于酒精,將混有雜質(zhì)的DNA加入到體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精
中,然后收集析出物。
(3)對提取的DNA可以用二苯胺試劑鑒定,經(jīng)沸水浴冷卻后呈藍(lán)色。
【點睛】
本題考查了DNA的粗提取與鑒定的相關(guān)知識,包括實驗的原理、操作步驟等,意在考查考生的識記能力和
實驗操作能力,難度適中。
19.科研人員通過觀察老年(65歲~79歲)14例、高齡(80歲~89歲)16例及長壽老人(三90歲)12例,
肝、脾組織基因組DNA含量的變化及差異,探討衰老進(jìn)程中DNA含量變化的規(guī)律,并為今后的衰老相關(guān)
研究提供實驗數(shù)據(jù)。實驗的主要操作步驟如下:
步驟一、稱取組織100mg放入-80℃冰箱;
步驟二、將組織放入I.5ml離心管中,加入樣品裂解液,并用微量電動勻漿器充分勻漿;
步驟三、加入蛋白酶,56c消化48h,90℃高溫處理lh;
步驟四、加入①____和緩沖液,37℃水浴鍋中放置lh,以去除樣品中的RNA;
步驟五、加入等體積的冷乙醵,離心?、冢?/p>
步驟六、緩沖液溶解DNA,進(jìn)行DNA的含量和純度檢測。
實驗結(jié)果如下表:
肝組織脾組織
組別
DNA含量(mg/ml)OD260/OD280DNA含量(mg/ml)OD260/OD280
65-79歲1.4641.8581.7232.059
80-89歲0.3101.3990.9382.028
>90歲1.1471.7951.6881.973
(注:表中OD260反映溶液中核酸的濃度,OD280反映溶液中蛋白質(zhì)或氨基酸的濃度。理論上,純DNA
溶液的OD260/OD280為1.8。若比值大于1.8表示存在RNA殘留,若小于1.8表示存在蛋白質(zhì)污染。)
請據(jù)表回答:
(1)推測第二步中樣品裂解液的作用是,第三步中高溫處理的目的是:。
(2)補全實驗步驟①;②。
(3)與肝組織相比,從脾組織中提取的DNA中含有的雜質(zhì)更多,因此在提取脾組織中DNA時,上
述實驗步驟四可以怎樣改進(jìn):。
(4)無論肝組織還是脾組織中,高齡組DNA含量總比老年組少,說明在一定年齡范圍內(nèi),DNA含量隨
著年齡的增長逐漸減少,說明DNA含量減少可能是細(xì)胞的分子基礎(chǔ)。但長壽老人比高齡組的DNA含
量顯著增高,科學(xué)家推測可能長壽老人體內(nèi)存在長壽基因,保持了對DNA,減少了DNA的損傷,從
而延緩了細(xì)胞的衰老。
(5)本研究可能存在一些不足,請指出其中的一項是。
【答案】瓦解組織細(xì)胞的細(xì)胞膜使蛋白質(zhì)變性RNA酶沉淀物RNA加大RNA酶的量
(或者延長保溫時間)細(xì)胞衰老修復(fù)能力每一組人數(shù)偏少(各年齡組別人數(shù)偏少)
【分析】
衰老細(xì)胞的特征:(1)細(xì)胞內(nèi)水分減少,細(xì)胞萎縮,體積變小,但細(xì)胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加
深;(2)細(xì)胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運輸功能降低;(3)細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累枳;(4)有些酶
的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢.
【詳解】
(1)“樣品裂解液''是將組織裂解,能夠使DNA出來,所以作用是瓦解組織細(xì)胞膜;DNA比較穩(wěn)定,高溫
下也不會變性,但蛋白質(zhì)會變性,所以這一步目的是使部分蛋白質(zhì)變性。
(2)步驟四要去除RNA雜質(zhì),所以①處應(yīng)加入RNA酶;DNA不溶于酒精中,所以②處是沉淀物。
(3)讀表可知,肝組織OD260/OD280有大于1.8的,也有小于1.8的,說明RNA和蛋白質(zhì)都有污染,而
脾組織均大于1.8,只有RNA污染;因為步驟三的作用是去除RNA,因此可以增加步驟三中RNA酶的量
(或延長保溫時間)進(jìn)行改進(jìn)。
(4)無論肝組織還是脾組織中,高齡組DNA含量總比老年組少,說明在一定年齡范圍內(nèi),DNA含量隨著
年齡的增長逐漸減少,說明DNA含量減少可能是細(xì)胞衰老的分子基礎(chǔ)。但長壽老人比高齡組的DNA含量
顯著增高,科學(xué)家推測可能長壽老人體內(nèi)存在長壽基因,保持了對DNA修復(fù)能力,減少了DNA的損傷,
從而延緩了細(xì)胞的衰老。
(5)本研究可能存在一些不足比如每一組別的人數(shù)偏少(各年齡組別偏少)。
【點睛】
本題主要考查細(xì)胞衰老以及DNA的粗提取和鑒定等知識,要求考生識記衰老細(xì)胞的主要特征和DNA的粗
提取和鑒定的實驗操作原理和方法,能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。
20.下圖為利用雞血細(xì)胞進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實驗的部分操作示意圖,請分析回答:
95%酒市
紗布
過濾
含DNL^
含DNA的
濃NaCl溶液的濃NaCl溶液
③④
(1)上述圖示中,該實驗的正確操作順序是(用序號與箭頭表示)
(2)在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是。
(3)步驟①的目的是析出并獲得DNA,其依據(jù)原理是。
(4)DNA可用試劑鑒定,沸水浴后的顏色反應(yīng)為。
(5)實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA,利用植物組織提取DNA時,須先破碎細(xì)胞,破碎細(xì)胞
時需添加食鹽和進(jìn)行研磨,添加該物質(zhì)的目的是,而加入食鹽的目的是
【答案】③一②一⑤一④一①利用溶解度不同,把DNA和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)進(jìn)行分離DNA不溶于酒
精二苯胺藍(lán)色洗滌劑瓦解細(xì)胞膜溶解并提取DNA
【分析】
分析題圖,①表示用95%的酒精析出DNA,獲得DNA的粗提取物,②表示過濾,獲取含DNA的濾液,③
表示破碎雞血細(xì)胞,獲取DNA溶液,④表示用2moi/L的NaCl溶液溶解DNA粗提取物,⑤表示較低濃度
的NaCl溶液(0.14mol/L)使DNA析出,目的是去除濾液中的雜質(zhì)。
【詳解】
(1)進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實驗,應(yīng)先選材,獲取DNA溶液(③),然后,過濾掉細(xì)胞膜等物質(zhì),得到
DNA濾
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