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文檔簡介

專題11DNA的粗提取與鑒定

知識梳理

i.實驗原理

(1)DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同

溶解規(guī)律2mol/LNaCl溶液0.14mol/LNaCl溶液

DNA溶解度

DNA溶解析出

NaCl

00.14mol/L濃度

NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從

部分發(fā)生鹽析沉

蛋白質(zhì)2mol/L逐漸降低的過程溶解

中,溶解度逐漸增大

(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)

進(jìn)一步分離。

(3)DNA與二苯胺沸水浴加熱,呈藍(lán)色。

2.操作流程

材料的選?。哼x用3區(qū)含量相對較高的生物組織”

破碎細(xì)胞以雞血為例):雞血細(xì)胞一加翎比f用玻璃棒攪拌用紗布過濾f收集濾液,

去除雜質(zhì):利用DNA在不同濃度的NaCl溶滿中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)f

DNA的析出:將處理后的溶滿過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液“

DNA的鑒定:在溶有DNA的溶灑中加入二菸胺試劑,混合均勻后將試管置于沸水中加熱5nun,'溶灑變成

3、DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、3、4”

①加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;②加到含DNA的2moi/L的

加蒸儲

NaCl溶液中,使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度稀釋到0.14mol/L,使DNA

水2次

析出

用紗布①過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;②過濾用2moi/L的

過濾4NaCl充分溶解的DNA,濾去溶液中的雜質(zhì);③濾取0.14mol/L的NaCl

次溶液中析出的DNA(黏稠物);④過濾溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液

用NaCl①加2mol/L的NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);②用0.14mol/L的

溶液4NaCl溶液使DNA析出:③用2mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA

次黏稠物;④用2moi/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA

實戰(zhàn)演練

一、選擇題

1.下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,錯誤的是()

A.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度

B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)

C.常溫下菜花勻漿中某些酶類會影響DNA的提取

D.用酒精進(jìn)行提純DNA是因為蛋白質(zhì)不溶于酒精,而DNA可溶解

【答案】ABD

【分析】

“DNA粗提取與鑒定實驗”的實驗原理有:DNA在氯化鈉溶液中溶解度不同,先減小后增大;DNA不溶于

酒精溶液,而細(xì)胞中某些物質(zhì)可以溶解于酒精;DNA遇二苯胺在沸水浴中會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。

【詳解】

A、DNA粗提取與鑒定實驗中,洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但對DNA的溶解度沒有影響,A錯誤;

B、將DNA絲狀物先溶解在2moi7L的NaOH溶液中,然后加入二苯胺試劑并進(jìn)行沸水浴,冷卻后變藍(lán),B

錯誤;

C、常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提取,C正確;

D、用冷酒精可提純DNA,因為DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,D錯誤。

故選ABDo

2.在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中,相關(guān)敘述正確的是()

A.用蒸儲水將NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度調(diào)至0.14mol/L,過濾去除析出物

B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì)

C.將絲狀物溶解在濃度為2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈紫色

D.用植物替代雞血作為實驗材料,其實驗操作步驟相同

【答案】B

【分析】

DNA的粗提取與鑒定的實驗原理:

①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為

0」4moi/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出;

②DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出

含雜質(zhì)較少的DNA;

③洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但是對DNA沒有影響:

④蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度,在80℃條件下會變性,而DNA對溫度的耐受性較高;

⑤蛋白酶能水解蛋白質(zhì),而對DNA沒有影響;

⑥D(zhuǎn)NA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,DNA存在于析出物中,不能去掉析出物,A錯誤;

B、利用DNA在不同濃度氯化鈉溶液中的溶解度不同,可以通過DNA的反復(fù)溶解和析出除去雜質(zhì),蛋白

酶能水解蛋白質(zhì),而對DNA沒有影響,因此可以利用木瓜蛋白酶除去雜蛋白,B正確;

C、用二苯胺試劑檢測DNA分子的條件是水浴加熱,C錯誤;

D、植物細(xì)胞有細(xì)胞壁,所以用植物做實驗材料時,需要研磨,加入食鹽和洗滌劑,D錯誤。

故選B。

3.以菜花為材料進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”的實驗中,下面操作與其目的錯誤的是()

ABCD

加入試劑加入蒸儲水加入食鹽加入洗滌劑95%冷卻的酒精

目的使細(xì)胞破裂溶解DNA瓦解細(xì)胞膜析出DNA

A.AB.BC.CD.D

【答案】A

【分析】

1、DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14

mol/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

2、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜

質(zhì)較少的DNA。

【詳解】

A、植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁,加入蒸飽水不會吸水漲破,A錯誤;

B、DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中溶解度不同,加入食鹽的作用是溶解DNA,B正確;

C、加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜,有利于DNA釋放,C正確;

D、DNA不溶于酒精,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精,故加入95%冷卻的酒精可析出DNA,D正

確。

故選Ao

4.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()

A.向菜花組織中加入蒸福水并攪拌可釋放核DNA

B.鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行加熱

C.利用雞血細(xì)胞提取DNA時,加入冷卻的酒精溶液靜止后出現(xiàn)的白色絲狀物,就是粗提取的DNA

D.向雞血細(xì)胞中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精,可以獲得無雜質(zhì)的DNA

【答案】C

【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理:

(l)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶

液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A、菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞,有細(xì)胞壁保護,因此加蒸儲水不會吸水脹破,A錯誤;

B、鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物先溶解到2moi/L的NaCl溶液中,然后再加入二苯胺試劑進(jìn)行沸水浴,B錯

誤;

C、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,向濾液中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的

酒精,靜置2?3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,就是粗提取的DNA,C正確;

D、DNA存在于血細(xì)胞中,血細(xì)胞沒有破壞,向雞血細(xì)胞中加入冷卻的95%的酒精,不能獲得DNA,D錯

誤。

故選C。

5.下列與利用NaCl溶液初步析出DNA黏稠物有關(guān)的敘述,不正確的是()

A.DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同

B.操作時用玻璃棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整

C.向2mol/L的NaCl溶液中加蒸儲水降低NaCl溶液濃度可以增加DNA的溶解度

D.當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時,NaCl溶液的濃度可認(rèn)為是0.14mol/L

【答案】C

【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解

度不同:DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A、根據(jù)分析,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,A正確:

B、在操作時,用玻璃棒輕緩攪拌,防止DNA斷裂,以保證DNA分子完整,B正確;

C、加蒸儲水可降低DNA的溶解度,C錯誤;

D、當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時,此時NaCl溶液的濃度相當(dāng)于0.14mol/L,此時DNA的溶解度最低,D正確。

故選C。

6.下列與DNA粗提取與鑒定過程有關(guān)的敘述中,錯誤的是()

A.將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中,紅細(xì)胞漲破后將DNA釋放出來

B.用2moi/L的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后,須保留上清液

C.在提取液中加入75%的冰酒精后蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出

D.DNA與二苯胺溶液在沸水浴加熱條件下會呈現(xiàn)藍(lán)色

【答案】C

【分析】

1、DNA的溶解性:

(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14moi/L溶解度最低),利用這一

特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的;

(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)

進(jìn)一步的分離。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能

忍受60-80C的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。

3、DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A、將雞的成熟紅細(xì)胞置于清水中,紅細(xì)胞破裂后將DNA釋放出來,A正確:

B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,氯化鈉溶液為2moi/L時,DNA溶解度最大,所以用2moi/L

的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后,須保留上清液,B正確;

C、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,在提取液中加入95%的

冷凍酒精后,蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出,C錯誤;

D、將提取的絲狀物加入2moi/L的NaCl溶液中溶解,再加入二苯胺試劑,混勻后將試管置于沸水中水浴

加熱5min,指示劑將變藍(lán),D正確。

故選Co

7.多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定,用香蕉也可以取得較好的實驗效果,下列操作正確的

是()

A.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸儲水并研磨,以釋放核DNA

B.經(jīng)研磨過濾后,將研磨液離心5分鐘,取沉淀物進(jìn)行下一步操作

C.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì),得到粗提取的DNA

D.將DNA溶于NaCl溶液后,加入現(xiàn)配的二苯胺試劑,混合均勻即可出現(xiàn)藍(lán)色

【答案】C

【分析】

根據(jù)DNA的溶解性提取DNA:

1、DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl中的溶解度不同。

2、DNA不溶于酒精,但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。

3、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

【詳解】

A、香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護,因此加蒸儲水?dāng)嚢璨粫茐募?xì)胞,不能將DNA釋放出來,A錯誤;

B、經(jīng)研磨過濾后,將研磨液離心5分鐘,取上清液進(jìn)行下一步操作,B錯誤;

C、DNA不溶于酒精,因此可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)析出DNA,獲得較純凈的DNA,C

正確;

D、在沸水中,DNA遇二苯胺會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng),D錯誤。

故選C。

8.下圖是“DNA的粗提取和鑒定”實驗中幾個重要操作的示意圖,下列敘述錯誤的是()

A.圖①的原理是DNA不溶于酒精,而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精

B.圖①和圖③都需要用玻棒沿一個方向輕緩攪拌,便于DNA的析出并保持結(jié)構(gòu)完整

C.若圖③操作后接圖②操作,則DNA會留在濾液中

D.若圖④操作后接圖②操作,則DNA會留在紗布上

【答案】B

【分析】

DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是:

①DNA的溶解性,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同,利用這一特點可以

選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出,從而達(dá)到分離的目的;

②DNA不容易酒精溶液,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精,利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一

步分離;

③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性,蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是不能水解DNA,蛋白質(zhì)不能耐受較高

溫度,DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜,但是對DNA沒有影響;

④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。

【詳解】

A、DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以圖①的原理是DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)可溶

于酒精,以便除去溶于酒精的雜質(zhì),提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA,A正確;

B、圖①玻璃棒逆時針方向攪拌,目的是提取出含雜質(zhì)較少的DNA,圖③玻璃棒順時針方向攪拌,目的是

加速細(xì)胞吸水破裂,B錯誤;

C、圖③操作是加入蒸儲水,破碎細(xì)胞,圖②操作是過濾,獲取含DNA的濾液,使DNA留在濾液中,C

正確;

D、圖④操作是去除濾液中雜質(zhì),析出DNA,圖②操作是過濾,將DNA留在紗布上,D正確。

故選B。

9.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述,正確的是()

A.用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近

B.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出

C.預(yù)冷的乙醉可用來溶解DNA

D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱

【答案】D

【分析】

1、DNA粗提取和鑒定的原理:

(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶

液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

2、DNA粗提取和鑒定的過程:

(1)實驗材料的選?。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,

成功的可能性更大。

(2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:動物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入

?定量的蒸儲水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑

溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研

磨,過濾后收集研磨液。

(3)去除濾液中的雜質(zhì):方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白

酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。方案二是利用蛋白酶分解

雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而

使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。

(4)DNA的析出與鑒定:①將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2?3min,

溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取

上面的水分。②取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2moi/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中

一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,

將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是

否變藍(lán)。

【詳解】

A、豬是哺乳動物,其成熟的紅細(xì)胞中沒有DNA,因此用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量不

可能相近的,A錯誤;

B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mol/L時,DNA溶解度最小,

因此改變NaCl溶液的濃度既能使DNA溶解也能使其析出,B錯誤;

C、在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的沉淀量最大,預(yù)冷的乙醇可用來進(jìn)一步純化粗提的

DNA,C錯誤;

D、用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱,D正確。

故選D。

10.不同儲藏條件對棉葉DNA純度及提取率(提取率越高,獲得的DNA越多)的影響,結(jié)果如圖所示。

3d3d7d7d7d

3d3d7d7d7d

A.利用NaCl溶液提取DNA時,NaCl溶液濃度越大,DNA的溶解度越小

B.新鮮棉葉的DNA純度最高,提取DNA的量也最多

C.冷凍保存3d組的DNA提取效果優(yōu)于冷鮮保存3d

D.用二苯胺試劑鑒定,藍(lán)色最淺的是冷凍3d處理后提取的DNA

【答案】C

【分析】

DNA的溶解性:

1、DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在O.I4mol/L的氯化鈉中溶解度最

低);

2、DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

【詳解】

A、DNA在0.14moi/L的氯化鈉中溶解度最低,在2moi/L的氯化鈉中溶解度最大,A錯誤;

B、新鮮棉葉提取的DNA純度最高,但提取率不高,因此新鮮棉葉提取DNA的量不是最多的,B錯誤;

C、結(jié)合題圖可知,冷凍保存3d組的DNA提取效果優(yōu)于冷鮮保存3d,提取DNA的純度不僅高而且提取率

也高,C正確;

D、冷凍3d處理提取的DNA量是最多的,因此用:苯胺試劑鑒定,顏色最深的是冷凍3d處理后提取的DNA,

D錯誤。

故選C。

11.下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗的部分操作,有關(guān)分析正確的是()

DNA濃鹽溶液

圖2

A.圖1中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入檸檬酸鈉加快DNA析出

B.圖1中完成過濾之后收集濾液

C.圖2中完成過濾之后收集濾液

D.圖1和2中加入蒸儲水的目的相同

【答案】B

【分析】

1、DNA的溶解性(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14mol/L溶解度

最低),利用這一特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離

目的。(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精.利用這一原理,可以將DNA與

蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響.大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍

受60-80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。

3、DNA的鑒定在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A、圖1中向雞血細(xì)胞液內(nèi)加入檸檬酸鈉防止血液凝固,A錯誤;

B、圖1中完成過濾之后收集濾液,濾液中含有DNA,B正確:

C、圖2中DNA在濃鹽溶液中會析出,完成過濾之后要收集不溶物,不溶物中含有大量的DNA,C錯誤;

D、圖1加入蒸儲水的目的是溶解DNA,圖2中加入蒸儲水的目的是析出DNA,D錯誤。

故選Bo

12.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定實驗”的敘述,正確的是()

A.新鮮的洋蔥和豬肝可作為實驗材料提取DNA,而菠菜不能用于提取DNA

B.DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度相同,可以用NaCl溶液溶解DNA

C.利用DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理可以初步分離DNA和蛋白質(zhì)

D.用95%的冷酒精處理,靜置后析出DNA,DNA加入二苯胺試劑,水浴加熱呈灰綠色

【答案】C

【分析】

DNA粗提取選材的標(biāo)準(zhǔn):DNA含量高,并且材料易得。由于哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,

因此不采用哺乳動物的血液。DNA粗提取和鑒定的原理:1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在

不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低):DNA不溶于酒精溶液,但

細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定:在沸水浴的

條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A、DNA含量高,并且材料易得的生物都可以作為提取DNA的材料,所以菠菜也可以作為提取DNA的材

料?,A錯誤;

B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不相同,在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低,B錯誤;

C、利用DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理可以初步分離DNA和蛋白質(zhì),C正確;

D、用95%的冷酒精處理,靜置后析出DNA,DNA加入二苯胺試劑,水浴加熱呈藍(lán)色,D錯誤。

故選Co

13.下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實驗的敘述,正確的是()

A.豬成熟的紅細(xì)胞不宜選作DNA粗提取材料

B.等體積雞(2n=78)的血液和鴨(2n=78)的血液提取的DNA量相等

C.切碎的洋蔥中,加入洗滌劑和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞壁

D.用棕色瓶收集并保存好剩余的二苯胺試劑,以備下一次實驗時繼續(xù)使用

【答案】A

【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理:

1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的

氯化鈉中溶解度最低):DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A、豬成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,不含DNA,不宜選作DNA粗提取材料,A正確;

B、等體積雞(2n=78)的血液和鴨(2n=78)的血液中所含血細(xì)胞的數(shù)量不同,所以提取到的DNA量不同,

B錯誤;

C、切碎的洋蔥中,加入洗滌劑有利于去除細(xì)胞膜,食鹽能溶解DNA,C錯誤;

D、二苯胺試劑應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,D錯誤。

故選A。

14.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()

A.用蒸儲水使家兔的紅細(xì)胞漲破,可獲取富含DNA的濾液

B.DNA不溶于95%的冷酒精,但可溶于2moi/L的NaCl溶液

C.植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水脹破,釋放DNA

D.鑒定DNA時,應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴

【答案】B

【分析】

1、DNA的溶解性:(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,

選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。(2)DNA不溶于

酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2、

DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍

受60-80C的高溫,而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。3、DNA

的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A、兔屬于哺乳動物,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,不能用于DNA的粗提取,A錯誤;

B、DNA不溶于95%的冷酒精,而溶于2moi/L的NaCl溶液,B正確;

C、洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響。植物材料需先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜,C錯誤;

D、鑒定DNA時,將絲狀物溶于2moi/L的NaCL溶液后加入二苯胺試劑,進(jìn)行沸水浴冷卻后呈藍(lán)色,D錯

誤。

故選B。

15.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗操作的說法中,正確的是()

A.該實驗中有兩次加入蒸饋水,均是為了析出DNA

B.該實驗中多次要求用玻璃棒單向攪拌,目的是攪拌均勻

C.該實驗中有3次過濾,過濾時使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān)

D.實驗3次加入NaCl溶液,第二次的目的是析出DNA

【答案】C

【分析】

1、DNA粗提取和鑒定實驗中三次加NaCl浴液的目的:

①第一次加入NaCl溶液后必須充分?jǐn)嚢?,加速染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離,使DNA充分游離并溶解在

NaCl溶液中。

②第二次加入NaCl溶液的目的是使DNA溶解。

③第三次(即DNA鑒定環(huán)節(jié))中加NaCl溶液的目的是溶解DNA。

2、攪拌的目的

第一次:攪拌加蒸儲水的雞血細(xì)胞液,加速細(xì)胞破裂;

第二次:攪拌含DNA的高濃度鹽溶液,加速DNA的溶解;

第三次:攪拌加蒸儲水的NaCl溶液,均勻稀釋以析出更多DNA;

第四次:攪拌含DNA的高濃度鹽溶液,加速DNA的溶解;

第五次:攪拌含DNA的酒精,提取含雜質(zhì)較少的DNA:

第六次:攪拌含DNA白色絲狀物的鹽溶液,加速DNA的溶解。

3、兩次加入蒸饋水的目的:第一次是使血細(xì)胞漲破;第二次降低NaCl溶液濃度使DNA析出。

【詳解】

A、整個DNA提取過程中,兩次加蒸鐳水的目的,第一次是使血細(xì)胞吸水漲破,第二次是為了降低溶液中

NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達(dá)到最低,析出DNA分子,A錯誤;

B、該實驗中多次要求用玻璃棒單向攪拌,目的不都是攪拌均勻,如加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后攪拌的

目的是提取出DNA分子,B錯誤;

C、該實驗中有3次過濾,過濾時使用尼龍布層數(shù)與DNA的存在狀態(tài)有關(guān),C正確;

D、實驗3次加入NaQ溶液,第二次的目的是溶解DNA,D錯誤。

故選C。

16.在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品分別是()

①0.Ig/mL的檸檬酸鈉溶液

②2.00mol/L的NaCl溶液

③0.14moi/L的NaCl溶液

④體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液

A.①③B.②③C.②④D.③④

【答案】D

【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理:

1、DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,

但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精:DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

2、DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色.

【詳解】

@0.1g/ml的檸檬酸鈉溶液是作為抗凝劑防止血液凝固的,沒有用于DNA的初步析出和提純,①錯誤:

②DNA可以溶于2.00mol/L的NaCl溶液,未用于DNA的初步析出和提純,②錯誤;

③DNA在O.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低,此時DNA會從溶液中析出,可用于初步析出DNA,③

正確;

④由于DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)可以溶于酒精,因此利用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,可提取較純凈

的DNA,④正確。

綜上正確的選項是③④,D正確,ABC錯誤。

故選D。

二、綜合題

17.依據(jù)以雞血為材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的有關(guān)實驗回答:

(1)實驗不用哺乳動物血液,以雞血為實驗材料,是因為雞血紅細(xì)胞___________,每100毫升的血液中

需要加入3克的,防止血液凝固。

(2)鑒定DNA的原理是:在___________條件,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)________色。

(3)調(diào)節(jié)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時,DNA將會(填“析出“或“溶解"),過濾棄去

(域'濾液"或“不容物

【答案】有細(xì)胞核,能獲取DNA檸檬酸鈉沸水浴藍(lán)析出濾液

【分析】

1、雞血分為血細(xì)胞和血漿,DNA存在于血細(xì)胞中,正常情況下,血漿中不含有DNA,因此用雞血為實驗

材料提取DNA,一般不用雞全血,用血細(xì)胞。

2、DNA存在于細(xì)胞內(nèi),提取DNA時,首先要破碎細(xì)胞,獲取含有DNA的濾液,具體操作方法是向雞血

細(xì)胞液中加入蒸儲水,使血細(xì)胞吸水漲破,釋放核DNA。

3、由于DNA在不同氯化鈉溶液中的溶解度不同,因此可以通過控制氯化鈉溶液的濃度使DNA析出或溶解。

4、在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色,因此二苯胺可以作用鑒定DNA的試劑。

【詳解】

(1)哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,而雞血紅細(xì)胞有細(xì)胞核,能獲取DNA。為了防止血液凝固,向

雞血細(xì)胞溶液中加入檸檬酸鈉。

(2)在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。

(3)向溶液中加入蒸鐲水調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L(此時DNA的溶解度最?。?,DNA

將會析出,過濾去除濾液中的雜質(zhì)。

【點睛】

本題考查DNA粗提取和分離的實驗,解答本題的關(guān)鍵是掌握DNA粗提取、提純和鑒定的原理,明確DNA

鑒定時需要水浴加熱。

18.真核生物細(xì)胞內(nèi),大量DNA和蛋白質(zhì)以及一些RNA等混雜在一起,難以分離。生物興趣小組的同學(xué)

為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究。

(1)分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法,根據(jù)圖示說明

該興趣小組是從各種物質(zhì)在不同飽和度的硫酸鏤溶液中的差異角度開展研究的:

①取雞血細(xì)胞懸液10mL,加蒸錨水20mL,同時用玻璃棒攪拌過濾,取濾液,轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中。

該步驟中加入蒸播水的作用是O

②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸鍍?nèi)芤?,用玻棒沿一個方向(填“輕輕攪拌”或“快速攪

拌”),同時不斷收集析出的物質(zhì)。

下圖是根據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線,請據(jù)圖分析:

質(zhì)

③如果只要收集纖維蛋白,可采取的措施是o

④先用飽和度40%的硫酸鏤溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白,再在飽和度約為的硫

酸核溶液中析出DNA(既保證DNA提取量較大又避免其他雜質(zhì)過多),與此同時析出的物質(zhì)還有

(2)如果要進(jìn)一步去掉雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,可采取以下方法:

a:將混有雜質(zhì)的DNA加入到濃度為的氯化鈉中,收集析出物。

b:將混有雜質(zhì)的DNA溶解到氯化鈉溶液中,然后加入酶去除雜質(zhì)。

c:將混有雜質(zhì)的DNA加入到體積分?jǐn)?shù)為的冷卻酒精中,然后收集析出物。

(3)對提取的DNA可以用試劑鑒定,經(jīng)沸水浴冷卻后呈________色。

【答案】溶解度使雞血細(xì)胞吸水脹破輕輕攪拌在硫酸錠濃度達(dá)到30%之前收集析出物50%

球蛋白0.14mol/L蛋白(酶)95%二苯胺藍(lán)

【分析】

1、分析圖解可知,不同物質(zhì)在不同飽和度硫酸核溶液中的溶解度不同,圖中看出,纖維蛋白在30%硫酸鉞

溶液中溶解度最小,球蛋白在40%硫酸鍍?nèi)芤褐腥芙舛茸钚?,DNA在飽和度約為50%的硫酸銹溶液中溶解

度最小。

2、DNA粗提取和鑒定的原理:①DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解

度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;②DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

【詳解】

(1)分析曲線圖可知,不同物質(zhì)在不同濃度的硫酸鍍中析出的相對量有所差別,即該興趣小組是從各種物

質(zhì)在不同飽和度的硫酸鏤溶液中溶解度的差異角度開展研究的。

①在蒸儲水中,雞紅細(xì)胞吸水脹破,此時可以用玻璃棒快速攪拌,以加速血細(xì)胞的破裂。

②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸鏤溶液,為了防止將DNA的絮狀物攪碎,此時應(yīng)用玻棒沿一個

方向輕輕攪拌,同時不斷收集析出的物質(zhì)。

③據(jù)圖可知,纖維蛋白在30%硫酸銹溶液中溶解度最小,如果只要收集纖維蛋白,可以在硫酸鏤濃度達(dá)到

30%之前收集析出物。

④由圖中看出,DNA在飽和度約為50%的硫酸鍍?nèi)芤褐腥芙舛茸钚?,故可在飽和度約為50%的硫酸鍍?nèi)芤?/p>

中析出DNA(既保證DNA提取量較大乂避免其他雜質(zhì)過多),與此同時析出的物質(zhì)還有球蛋白,只是球蛋

白析出量較少。

(2)由于提取的DNA中混有蛋白質(zhì),如果要進(jìn)一步去掉雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,a:可利用

DNA和蛋白質(zhì)溶解性的差異,將混有雜質(zhì)的DNA加入到濃度為0.14mol/L的氯化鈉中(DNA在此濃度的

氯化鈉溶液中溶解度最低,而蛋白質(zhì)可溶解),收集析出物。

b:將混有雜質(zhì)的DNA溶解到氯化鈉溶液中,然后加入蛋白酶去除雜質(zhì)(少量蛋白質(zhì))。

c:由于DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)可溶于酒精,將混有雜質(zhì)的DNA加入到體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精

中,然后收集析出物。

(3)對提取的DNA可以用二苯胺試劑鑒定,經(jīng)沸水浴冷卻后呈藍(lán)色。

【點睛】

本題考查了DNA的粗提取與鑒定的相關(guān)知識,包括實驗的原理、操作步驟等,意在考查考生的識記能力和

實驗操作能力,難度適中。

19.科研人員通過觀察老年(65歲~79歲)14例、高齡(80歲~89歲)16例及長壽老人(三90歲)12例,

肝、脾組織基因組DNA含量的變化及差異,探討衰老進(jìn)程中DNA含量變化的規(guī)律,并為今后的衰老相關(guān)

研究提供實驗數(shù)據(jù)。實驗的主要操作步驟如下:

步驟一、稱取組織100mg放入-80℃冰箱;

步驟二、將組織放入I.5ml離心管中,加入樣品裂解液,并用微量電動勻漿器充分勻漿;

步驟三、加入蛋白酶,56c消化48h,90℃高溫處理lh;

步驟四、加入①____和緩沖液,37℃水浴鍋中放置lh,以去除樣品中的RNA;

步驟五、加入等體積的冷乙醵,離心?、冢?/p>

步驟六、緩沖液溶解DNA,進(jìn)行DNA的含量和純度檢測。

實驗結(jié)果如下表:

肝組織脾組織

組別

DNA含量(mg/ml)OD260/OD280DNA含量(mg/ml)OD260/OD280

65-79歲1.4641.8581.7232.059

80-89歲0.3101.3990.9382.028

>90歲1.1471.7951.6881.973

(注:表中OD260反映溶液中核酸的濃度,OD280反映溶液中蛋白質(zhì)或氨基酸的濃度。理論上,純DNA

溶液的OD260/OD280為1.8。若比值大于1.8表示存在RNA殘留,若小于1.8表示存在蛋白質(zhì)污染。)

請據(jù)表回答:

(1)推測第二步中樣品裂解液的作用是,第三步中高溫處理的目的是:。

(2)補全實驗步驟①;②。

(3)與肝組織相比,從脾組織中提取的DNA中含有的雜質(zhì)更多,因此在提取脾組織中DNA時,上

述實驗步驟四可以怎樣改進(jìn):。

(4)無論肝組織還是脾組織中,高齡組DNA含量總比老年組少,說明在一定年齡范圍內(nèi),DNA含量隨

著年齡的增長逐漸減少,說明DNA含量減少可能是細(xì)胞的分子基礎(chǔ)。但長壽老人比高齡組的DNA含

量顯著增高,科學(xué)家推測可能長壽老人體內(nèi)存在長壽基因,保持了對DNA,減少了DNA的損傷,從

而延緩了細(xì)胞的衰老。

(5)本研究可能存在一些不足,請指出其中的一項是。

【答案】瓦解組織細(xì)胞的細(xì)胞膜使蛋白質(zhì)變性RNA酶沉淀物RNA加大RNA酶的量

(或者延長保溫時間)細(xì)胞衰老修復(fù)能力每一組人數(shù)偏少(各年齡組別人數(shù)偏少)

【分析】

衰老細(xì)胞的特征:(1)細(xì)胞內(nèi)水分減少,細(xì)胞萎縮,體積變小,但細(xì)胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加

深;(2)細(xì)胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運輸功能降低;(3)細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累枳;(4)有些酶

的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢.

【詳解】

(1)“樣品裂解液''是將組織裂解,能夠使DNA出來,所以作用是瓦解組織細(xì)胞膜;DNA比較穩(wěn)定,高溫

下也不會變性,但蛋白質(zhì)會變性,所以這一步目的是使部分蛋白質(zhì)變性。

(2)步驟四要去除RNA雜質(zhì),所以①處應(yīng)加入RNA酶;DNA不溶于酒精中,所以②處是沉淀物。

(3)讀表可知,肝組織OD260/OD280有大于1.8的,也有小于1.8的,說明RNA和蛋白質(zhì)都有污染,而

脾組織均大于1.8,只有RNA污染;因為步驟三的作用是去除RNA,因此可以增加步驟三中RNA酶的量

(或延長保溫時間)進(jìn)行改進(jìn)。

(4)無論肝組織還是脾組織中,高齡組DNA含量總比老年組少,說明在一定年齡范圍內(nèi),DNA含量隨著

年齡的增長逐漸減少,說明DNA含量減少可能是細(xì)胞衰老的分子基礎(chǔ)。但長壽老人比高齡組的DNA含量

顯著增高,科學(xué)家推測可能長壽老人體內(nèi)存在長壽基因,保持了對DNA修復(fù)能力,減少了DNA的損傷,

從而延緩了細(xì)胞的衰老。

(5)本研究可能存在一些不足比如每一組別的人數(shù)偏少(各年齡組別偏少)。

【點睛】

本題主要考查細(xì)胞衰老以及DNA的粗提取和鑒定等知識,要求考生識記衰老細(xì)胞的主要特征和DNA的粗

提取和鑒定的實驗操作原理和方法,能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。

20.下圖為利用雞血細(xì)胞進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實驗的部分操作示意圖,請分析回答:

95%酒市

紗布

過濾

含DNL^

含DNA的

濃NaCl溶液的濃NaCl溶液

③④

(1)上述圖示中,該實驗的正確操作順序是(用序號與箭頭表示)

(2)在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是。

(3)步驟①的目的是析出并獲得DNA,其依據(jù)原理是。

(4)DNA可用試劑鑒定,沸水浴后的顏色反應(yīng)為。

(5)實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA,利用植物組織提取DNA時,須先破碎細(xì)胞,破碎細(xì)胞

時需添加食鹽和進(jìn)行研磨,添加該物質(zhì)的目的是,而加入食鹽的目的是

【答案】③一②一⑤一④一①利用溶解度不同,把DNA和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)進(jìn)行分離DNA不溶于酒

精二苯胺藍(lán)色洗滌劑瓦解細(xì)胞膜溶解并提取DNA

【分析】

分析題圖,①表示用95%的酒精析出DNA,獲得DNA的粗提取物,②表示過濾,獲取含DNA的濾液,③

表示破碎雞血細(xì)胞,獲取DNA溶液,④表示用2moi/L的NaCl溶液溶解DNA粗提取物,⑤表示較低濃度

的NaCl溶液(0.14mol/L)使DNA析出,目的是去除濾液中的雜質(zhì)。

【詳解】

(1)進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實驗,應(yīng)先選材,獲取DNA溶液(③),然后,過濾掉細(xì)胞膜等物質(zhì),得到

DNA濾

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