優(yōu)化HPLC及使用注意事項(xiàng)

1HPLC維護(hù)21.在線脫氣機(jī)2.四元／二元/單元泵3.自動(dòng)進(jìn)樣器4.二極管陣列檢測(cè)器5.可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器3在線脫氣機(jī)-在線脫氣機(jī)4工作原理在線脫氣機(jī)5何時(shí)需要使用在線脫氣機(jī)在線脫氣機(jī)6在線脫氣機(jī)脫氣機(jī)的操作：操作泵之前，用至少兩個(gè)體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30ml，對(duì)微脫氣機(jī)10ml）沖洗真空脫氣機(jī)，特別是當(dāng)泵關(guān)閉了一段時(shí)間后（例如，過(guò)夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑時(shí)。標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)（G1322A).

標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)每個(gè)通道體積為12ml建議排液操作：5ml/min排液6min以上。微脫氣機(jī)（G1379A).微脫每個(gè)通道體積為1ml建議排液操作：2ml/min排液5min。切勿用5ml/min流速去排液。7溶劑

用棕色玻璃瓶裝水溶液，可以避免藻類的生長(zhǎng)。

過(guò)濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。避免使用下述可腐蝕鋼鐵的溶劑：

堿金屬鹵化物及其酸溶液(如：碘化鋰、氯化鉀等)。

高濃度無(wú)機(jī)酸，如硝酸、硫酸.

可能含有過(guò)氧化物的色譜純醚(如THF、二氧六環(huán)、二丙基乙醚)。這些在使用前必須用干燥氧化鋁過(guò)濾除去過(guò)氧化物。

含強(qiáng)絡(luò)合劑的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。

四氯化碳與2-異丙醇或四氫呋喃的混合液。8防止堵塞溶劑過(guò)濾器及真空腔

污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長(zhǎng)將會(huì)縮短溶劑過(guò)濾器的使用壽命，并且影響泵的運(yùn)行。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH

4至7)中尤其如此。下列建議將會(huì)延長(zhǎng)溶劑過(guò)濾器的使用壽命并維持泵的運(yùn)行。使用滅過(guò)菌的溶劑瓶來(lái)減緩藻類生長(zhǎng)。使用新鮮配制的流動(dòng)相，特別是水溶劑或鹽緩沖液（建議不超過(guò)兩天）。如果應(yīng)用許可，在溶劑中加人0.0001－0.001

M的疊氮化鈉。避免溶劑瓶暴露在直射陽(yáng)光下。用氬氣置換流動(dòng)相上層的空氣。長(zhǎng)期不用時(shí)用水清洗水溶液通道并置換為甲醇日常維護(hù),故障診斷9日常維護(hù),故障診斷檢查溶劑過(guò)濾器－擰開(kāi)脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口30cm；此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒?，脫氣機(jī)或溶劑過(guò)濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。－查看過(guò)濾器是否變色．－臨時(shí)取下過(guò)濾器，檢查柱前壓力是否正常．清潔溶劑過(guò)濾器將堵塞的溶劑過(guò)濾器從瓶頭組件中拿下。先用水沖洗殘留之溶劑，然后將過(guò)濾器放在裝有濃硝酸（35％）的燒杯里浸一小時(shí)。用二次蒸餾水徹底沖洗過(guò)濾器。建議不使用超聲波清洗機(jī)清洗。將過(guò)濾器重新裝好。建議定期清洗溶劑過(guò)濾器及溶劑瓶，每三個(gè)月至少清洗一次。注意：不要使用沒(méi)有安裝溶劑過(guò)濾器的系統(tǒng)．可能會(huì)嚴(yán)重堵塞系統(tǒng)10日常維護(hù)Question?1.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)脫氣是否正常？打開(kāi)Purge閥，設(shè)定泵的流速2ml/min，提起當(dāng)前所使用溶劑瓶?jī)?nèi)的溶劑過(guò)濾頭，使之脫離液面一小段時(shí)間，此時(shí)溶劑傳送管內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一小段氣泡，放下過(guò)濾頭，讓此段氣泡通過(guò)脫氣機(jī)，如果脫氣機(jī)正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。2.如何簡(jiǎn)單判斷脫氣機(jī)腔體或溶劑過(guò)濾頭是否堵塞？

關(guān)閉泵，擰開(kāi)脫氣機(jī)出口或比例閥入口管線,此時(shí)溶劑會(huì)因?yàn)橹亓α鞒?，脫氣機(jī)或溶劑過(guò)濾頭堵塞時(shí)，溶劑會(huì)流出不暢或不流出。11Agilent1100四元泵(G1311A)12Agilent1100四元泵工作原理13Agilent1100泵頭(PumpHead)結(jié)構(gòu)圖Agilent1100泵14嚴(yán)重污染的溶劑出口過(guò)濾芯Agilent四元／二元/單元泵日常維護(hù)15多通道梯度閥（MCGV）操作要點(diǎn)

當(dāng)鹽溶液和有機(jī)溶劑混合時(shí)，鹽溶液可能與有機(jī)溶劑完全混溶，而不會(huì)出現(xiàn)沉淀。但是在梯度閥的混合點(diǎn)，重力作用有可能使鹽顆粒沉淀下來(lái)。通常，閥的A通道用于水相/鹽溶液，而泵的B通道用于有機(jī)溶劑。如果使用的是這樣的配置，鹽將落回到鹽溶液中，并被溶解。當(dāng)泵使用的不同配置（例如，D-鹽溶液，A-有機(jī)溶劑）時(shí)，鹽可能會(huì)落到有機(jī)溶劑中，從而出現(xiàn)問(wèn)題。

Agilent1100四元泵中使用鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接到下面的口上，有機(jī)溶劑接到上面的梯度閥口上。有機(jī)溶劑通道最好直接在鹽溶液通道的上面。建議定期用水沖洗所有MCGV通道，以去除在閥口上可能出現(xiàn)的鹽沉淀。Agilent四元／二元/單元泵日常維護(hù)

16更好地使用四元泵

將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面(或較高處)。當(dāng)在四元泵上使用鹽溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接在底部的梯度閥口上，將有機(jī)溶劑接在上面的梯度閥口上。有機(jī)通道最好在鹽溶液通道的上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在閥口析出得鹽結(jié)晶。操作泵之前，用至少兩個(gè)體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30ml，對(duì)微脫氣機(jī)10ml）沖洗真空脫氣機(jī)，特別是當(dāng)泵關(guān)閉了一段時(shí)間后（例如，過(guò)夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑時(shí)。防止溶劑過(guò)濾器堵塞及長(zhǎng)菌。當(dāng)濾器表面有黑色或黃色污染層說(shuō)明濾器發(fā)生了堵塞，請(qǐng)立即清洗或更換之。定期檢查排液閥的濾芯。檢查方法：擰開(kāi)排液閥，以水作流動(dòng)相，流速5ml/min，若壓力大于10bar,則須立即更換。

Agilent四元／二元/單元泵日常維護(hù)

17Agilent1100系列泵的使用須知

更好地使用泵

當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件時(shí)，由于該附件中也有密封墊，這樣就會(huì)增加活塞桿運(yùn)動(dòng)時(shí)的阻力。所以開(kāi)泵前一定要用10％異丙醇，并將其流速調(diào)至約20滴/分鐘使這溶液流過(guò)沖洗裝置。10％異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。最好不要用其它溶劑代替。

當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不開(kāi)啟10％異丙醇，會(huì)使密封墊及活塞桿的壽命減短。18Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器使用須知19Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器使用須知使用自動(dòng)洗針功能自動(dòng)洗針功能可以把程序設(shè)置為“帶有洗針的進(jìn)樣”,或?qū)⒆詣?dòng)洗針功能包含在進(jìn)樣器程序中。當(dāng)使用自動(dòng)洗針功能時(shí)，進(jìn)樣針在取樣后會(huì)轉(zhuǎn)移到洗針步驟。造成攜留效應(yīng)的主要原因是殘留在進(jìn)樣針外的少量樣品。通過(guò)進(jìn)樣后的洗針功能可以立即洗去針外表面上殘留的樣品。當(dāng)進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)回到主流路時(shí)，定量管和針內(nèi)所有的樣品都被沖洗到色譜柱中。這種結(jié)合洗針和沖洗管路的設(shè)計(jì)可以把攜留效應(yīng)減低到最小的程度。去掉洗滌瓶蓋為了獲得最佳的分析結(jié)果，裝有溶劑的洗滌瓶是不加蓋的，而且洗滌瓶中的溶劑對(duì)樣品組分有較好的溶解作用。如果洗滌瓶有蓋將會(huì)有少量樣品留在密封墊上，這樣會(huì)把殘留的樣品帶到下一個(gè)樣品中。帶有洗針的進(jìn)樣程序進(jìn)樣程序中包括了NEEDLEWASH（洗針）命令，當(dāng)這一命令設(shè)置在進(jìn)樣程序中時(shí)，則在進(jìn)樣前會(huì)進(jìn)入指定的洗滌瓶中洗針。[例]

1DRAW5μL（抽取5μL樣品）

2NEEDLEWASHvial7（洗針到7號(hào)瓶）

3INJECT（進(jìn)樣）20Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器使用須知21Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器使用須知提高進(jìn)樣量的精度進(jìn)樣體積小于2

μL當(dāng)進(jìn)樣閥切換到BYPASS（旁路）位置時(shí)，在定量管內(nèi)的流動(dòng)相壓力降低。當(dāng)進(jìn)樣針抽取樣品時(shí)，流動(dòng)相進(jìn)一步降低壓力。如果流動(dòng)相沒(méi)有充分脫氣，在進(jìn)樣時(shí)定量管內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生小氣泡。在進(jìn)樣體積小于

2

μL時(shí)這些小氣泡就會(huì)影響到進(jìn)樣體積的精密度。為了使進(jìn)樣體積小于

2

μL時(shí)有最佳的進(jìn)樣精密度，建議使用Agilent

1100系列真空脫氣機(jī)，確保流動(dòng)相充分脫氣。也可以在進(jìn)樣間隙自動(dòng)洗針，從而進(jìn)一步提高進(jìn)樣體積的精密度。22Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器使用須知提高進(jìn)樣量精度抽樣速度對(duì)粘稠的樣品，計(jì)量部件從樣品瓶抽取樣品的速度會(huì)影響取樣體積的精密度。如取樣速度太快，在樣品塞中會(huì)帶有氣泡，從而影響進(jìn)樣體積。抽樣速度的默認(rèn)值是200

μL/min(范圍：10-1000

μL/min)，這一速度適合于大多數(shù)樣品的取樣要求。但是對(duì)于粘稠的樣品要得到最佳的結(jié)果，設(shè)定的抽樣速度要低于

200

μL/min。進(jìn)樣器程序中的“DRAW”命令行也用于抽樣速度的設(shè)定，這是為自動(dòng)進(jìn)樣器設(shè)置的。推樣速度默認(rèn)的推樣速度為200

μL/min(范圍：10-1000

μL/min)，當(dāng)進(jìn)行大體積進(jìn)樣時(shí)，就要設(shè)定為較大的推樣速度，加快進(jìn)樣周期。這就是縮短計(jì)量器具從進(jìn)樣周期開(kāi)始（當(dāng)注射器活塞回到起始位置時(shí)）到推出溶劑所需的時(shí)間。進(jìn)樣器程序中的“EJECT”命令行也用于推樣速度的設(shè)定，這是為自動(dòng)進(jìn)樣器設(shè)置的。較快的推樣速度可以加快進(jìn)樣器程序所需的時(shí)間。對(duì)于粘稠的樣品要避免使用過(guò)快的推樣速度。當(dāng)使用多次抽樣功能時(shí)，推樣速度控制著樣品進(jìn)入針座毛細(xì)管擴(kuò)大體積部分的速度，對(duì)粘稠的樣品要避免使用過(guò)快的推樣速度。23Question?1.樣品量太少（某些離心處理的樣品），無(wú)法過(guò)濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？

在自動(dòng)進(jìn)樣器設(shè)置中，適當(dāng)抬高進(jìn)樣針抽樣時(shí)的位置。Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)24Agilent1100自動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)Question?2.怎樣判斷自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損？

將第四號(hào)管（排液的細(xì)塑料管）提起，正常情況下應(yīng)沒(méi)有液體滴出，如有則轉(zhuǎn)子墊圈已磨損。色譜現(xiàn)象：壓力不穩(wěn)，保留時(shí)間、峰面積重復(fù)性差，殘留嚴(yán)重。25Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器（G1328A,G1328B)26Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器操作原理27Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器操作原理28Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器使用須知

為了防止虹吸應(yīng)注意使第五第六號(hào)放空管的出口與進(jìn)樣口保持在同一平面29Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器使用須知

為了更好的重現(xiàn)性，應(yīng)進(jìn)行滿閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積最好是樣品環(huán)的5~6倍。一定要使用合規(guī)格的進(jìn)樣器，規(guī)格為外徑0.028英寸，長(zhǎng)2英寸的平頭針。一定不能使用尖針！它會(huì)嚴(yán)重刮壞轉(zhuǎn)子墊圈。30Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)進(jìn)完樣后一定要及時(shí)沖洗進(jìn)樣器，特別是用鹽或緩沖液作流動(dòng)相。由于這些溶液會(huì)形成結(jié)晶從而磨損墊圈。沖洗方法：

A.將進(jìn)樣器轉(zhuǎn)至Inject位置，利用液相泵輸送高純水沖洗(這時(shí)是沖洗樣品環(huán)及溝槽）.

B.用閥清洗接頭和注射器沖洗。31Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)經(jīng)常用濕潤(rùn)的軟布清潔進(jìn)樣器，特別是進(jìn)樣口周圍。請(qǐng)仔細(xì)閱讀進(jìn)樣器說(shuō)明書(shū)，上面有詳細(xì)使用及其它信息。32Agilent1100手動(dòng)進(jìn)樣器日常維護(hù)Question.如何判斷手動(dòng)進(jìn)樣器的密封圈漏？通常結(jié)合兩方面：從進(jìn)樣器觀察，進(jìn)樣后將針拔出，若從進(jìn)樣口或排空管有液體冒出，顯示密封圈磨損。從結(jié)果看：通常有壓力不穩(wěn)定，峰面積或保留時(shí)間不穩(wěn)定和殘留嚴(yán)重。33Agilent1100柱溫箱器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)34Agilent1100柱溫箱器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)連接的管路盡量短，防止熱擴(kuò)散及峰增寬。如果使用小體積分析柱以及流速小于0.2ml/min時(shí)建議使用左邊的柱溫箱(左邊體積較少,3ul).除非特殊應(yīng)用，建議將兩邊溫度設(shè)置一樣。并確保關(guān)好前蓋。35Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器(G1315B)36Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器工作原理37Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器工作原理可變的光進(jìn)口狹縫系統(tǒng)這一微型狹縫系統(tǒng)是利用硅的機(jī)械性能和總體布局微型加工技術(shù)以及精確的制作功能加工而成，它把所需的光學(xué)性能－狹縫和光柵－集中組合到一起，成為一個(gè)簡(jiǎn)單、緊湊的元件。狹縫寬度直接由儀器上的微處理器來(lái)控制，并可用為設(shè)定分析方法的一個(gè)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。光柵用一個(gè)凹面全息光柵來(lái)實(shí)現(xiàn)分光和光譜成像，光柵把入射光束全部分散成組成它的波長(zhǎng)，然后把它反射到二極管陣列上。二極管陣列二極管陣列由1024個(gè)光電二極管和一個(gè)位于陶瓷基座上的電路組成，在190

---950

nm范圍內(nèi)取樣間隔<

1

nm。38Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化39Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化40Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化41Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化流通池光路長(zhǎng)度對(duì)信號(hào)值的影響

流通池加長(zhǎng)得到的信號(hào)值就高，盡管在流通池加長(zhǎng)時(shí)噪音略有增加，而信噪比有較大的增加。例如，見(jiàn)圖8，把流通池長(zhǎng)度由6

mm增加到10

mm，噪音增加10

%，而信號(hào)增加70

%。

流通池加長(zhǎng)會(huì)使池體積也有所增加在我們的例子中為5μL

13

μL，這時(shí)峰寬也會(huì)增加，如圖8所示，在此例的梯度洗脫中對(duì)分離度沒(méi)有影響。

經(jīng)驗(yàn)表明，池體積應(yīng)為半峰高處峰體積的1/3。要測(cè)定峰體積，把積分后的峰寬乘以流速再除以3。

圖842Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化使用較寬的帶寬有降低噪聲的優(yōu)點(diǎn)，能在整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)降低噪聲－和使用4

nm帶寬相比采用30

nm帶寬，基線噪聲降低約2.5倍。而信號(hào)值是4-nm帶寬的75%，在此例中信噪比增大2倍。43Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化44Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化45Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化46Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化峰寬（響應(yīng)時(shí)間）響應(yīng)時(shí)間是說(shuō)明在流通池中光吸收產(chǎn)生突變后出現(xiàn)檢測(cè)器信號(hào)的快慢，檢測(cè)器采用數(shù)值濾波器使響應(yīng)時(shí)間與色譜圖中峰寬相適應(yīng)，這一濾波器不影響峰面積和峰的對(duì)稱性，正確設(shè)定此濾波器會(huì)大大減小基線噪聲（見(jiàn)圖9），但會(huì)使峰高略有下降。另外這一濾波器能降低數(shù)據(jù)的速度，優(yōu)化色譜的積分和顯示，能最大限度地減少存儲(chǔ)色譜和光譜的磁盤空間。47Agilent1100二極管陣列檢測(cè)器性能優(yōu)化表6列出檢測(cè)器對(duì)濾波器的選擇。為獲得最佳效果，把峰寬設(shè)定為接近于色譜圖中窄峰的寬度，此時(shí)響應(yīng)時(shí)間約為峰寬的1/3，這樣會(huì)使峰高降低<5

%，峰的加寬不到5

%。在檢測(cè)器中峰寬設(shè)定減小會(huì)引起峰高增加<5

%，但是基線噪聲增大1.4倍，響應(yīng)時(shí)間增大2倍。把峰寬（響應(yīng)時(shí)間）增大到推薦值的2倍（過(guò)度濾波），則峰高會(huì)降低20

%，基線噪聲降低1.4倍。這樣可能會(huì)得到最佳的信噪比，但也可能會(huì)影響分離度。48Question?1.基線噪音大可能由那些原因引起

泵壓不穩(wěn)，氣泡，色譜柱污染，系統(tǒng)管路污染，流通池污染，燈強(qiáng)度不足，光學(xué)系統(tǒng)老化或污染，參數(shù)設(shè)置不合理Agilent1100檢測(cè)器日常維護(hù)49Agilent1100其它檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)熒光檢測(cè)器：PMTGAIN:放大因子，該值大則信號(hào)高，但噪音也會(huì)隨之增高，所以需優(yōu)化。LAMP:有兩種模式，standard和economy。RESPONSETIME:通常用4S。由于水性流動(dòng)相長(zhǎng)時(shí)間留在流動(dòng)池會(huì)有藻類生長(zhǎng)，而藻類會(huì)產(chǎn)生熒光，所以可添加有機(jī)溶劑如5％的乙腈或甲醇。

熒光檢測(cè)器流通池不耐壓，切勿堵塞或彎折出口廢液管！50Agilent1100其它檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)示差折光檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù).溶液瓶和廢液瓶應(yīng)高于泵和檢測(cè)器，這樣使流動(dòng)池產(chǎn)生輕微壓力有助于提高檢測(cè)器的性能。RID的耐受壓力最高只有5bar,所以如要串聯(lián)其它檢測(cè)器時(shí)務(wù)必將RID放在最后。一定要使用控溫功能令光路恒溫，為了防止結(jié)晶應(yīng)將溫度設(shè)置至少高于室溫5℃以上。使用合適的responsetime通常用4S。一定要預(yù)先混合好流動(dòng)相，如果是四元泵，請(qǐng)使用轉(zhuǎn)接頭(P/N0100-1847)旁路比例閥。某些流動(dòng)相與柱配合時(shí)會(huì)造成基線噪音。如乙腈/水作流動(dòng)相與含氨丙基柱。51Agilent1100其它檢測(cè)器使用注意事項(xiàng)及日常維護(hù)

RID基線漂移通常是溶劑變化引起的，如乙腈/水混合溶劑乙腈會(huì)揮發(fā)。四氫呋喃(THF)會(huì)形成過(guò)氧化物。某些吸水溶劑等，這些變化都會(huì)引起基線的變化從而造成基線漂移。

52Agilent1100HPLC日常維護(hù)－總結(jié)1·、定期清洗溶劑過(guò)濾頭（35％濃硝酸浸泡1小時(shí)，不要使用超聲波清洗）2、流動(dòng)相應(yīng)經(jīng)過(guò)0.45um或更小孔徑的濾器過(guò)濾，如果使用濾膜，注意有機(jī)膜與水膜的區(qū)別(聚四氟乙烯能適用于所有溶劑)3、根據(jù)情況更換Purge閥內(nèi)的在線過(guò)濾頭（Purge閥打開(kāi)，純水5ml/min，壓力超過(guò)10bar時(shí)需更換）4、注意清洗在線脫氣機(jī)及比例閥，尤其是長(zhǎng)期使用水相或緩沖鹽的通路，使用純水沖洗后，再使用甲醇沖洗，可以打開(kāi)Purge閥，使用5ml/min的流速。污染比較嚴(yán)重時(shí)，可以使用IPA清洗。

一般的流程，例如

A：BufferB:MeOHC:WaterD:CH3CN

分析：A:B:D=20:30:50

清洗：C100%30min，B100%30min53安如裝有sealwash組件的，無(wú)論是否使用緩沖鹽，開(kāi)泵之前都應(yīng)該使之充滿流動(dòng)的液體（10%IPA水溶液）并調(diào)流速為20滴/分鐘。正相色譜、反相色譜切換時(shí)應(yīng)使用IPA過(guò)渡，長(zhǎng)期使用正相，應(yīng)更換正相柱塞密封墊樣品進(jìn)樣之前最好過(guò)濾，如果樣品量太少，可以適當(dāng)抬高進(jìn)樣針的位置流動(dòng)相pH大于9.5或小于2.3時(shí)，進(jìn)樣閥應(yīng)更換tefzel

轉(zhuǎn)子密封圈注意不同檢測(cè)器流通池耐壓?jiǎn)栴}，盡量避免使用pH>9.5的流動(dòng)相，以防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動(dòng)相，防止流通池堵塞

VWD40bar；DAD120bar；MWD120bar；FLD20bar

；RID5bar

RID、FLD永遠(yuǎn)是最后一個(gè)檢測(cè)器注意不同廠家接頭問(wèn)題，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭

Agilent1100HPLC日常維護(hù)54HPLC常用的色譜柱接頭0.090in.0.130in.0.090in.0.170in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090in.0.080in.TroubleshootingLCFittings,PartII.J.W.DolanandP.Upchurch.LC/GCMagazine6:788(1988)Agilent1100HPLC日常維護(hù)－總結(jié)55Agilent1100HPLC日常維護(hù)－總結(jié)毛細(xì)管的區(qū)分

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