慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期中醫(yī)痰證素與氣道炎癥的相關(guān)性研究

慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期中醫(yī)痰證素與氣道炎癥的相關(guān)性研究

慢性阻塞性肺疾?。╟opd）是一種以氣流限制為特征的慢性呼吸道炎癥疾病。有學(xué)者認(rèn)為“宿痰伏肺”是COPD發(fā)作的基本病理基礎(chǔ)。本研究采用證素辨證和積分的方法,提取COPD病性證素痰,探討證素痰的嚴(yán)重度與誘導(dǎo)痰白細(xì)胞總數(shù)及其分類的相關(guān)性,以闡明COPD穩(wěn)定期患者中醫(yī)病性痰的病理實(shí)質(zhì)。病情、病例納入及排除標(biāo)準(zhǔn)1.研究對(duì)象選擇2010年4月至2012年4月在福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬漳州市中醫(yī)院就診的慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者103例,其中男90例,女13例;年齡50-80歲,平均(69.57±8.59)歲;病程3-43年,平均(14.05±11.53)年。2.納入標(biāo)準(zhǔn)(1)年齡40-80歲,男女不限;(2)診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)慢性阻塞性肺疾病學(xué)組制定的慢性阻性肺疾病診治指南(2007修訂版);(3)用支氣管舒張劑后肺功能FEV1/FVC<70%,臨床屬于穩(wěn)定期。3.排除標(biāo)準(zhǔn)(1)近2周發(fā)生過上呼吸道感染者;(2)COPD急性發(fā)作期患者;(3)近1個(gè)月全身使用過糖皮質(zhì)激素者;(4)雖有氣流阻塞,但臨床診斷支氣管哮喘、肺結(jié)核、囊性纖維化、彌漫性泛細(xì)支氣管炎、閉塞性細(xì)支氣管炎者;(5)合并有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病;(6)不愿意配合和完全不能交流者。病理變化及數(shù)據(jù)收集1.中醫(yī)辨證方法在四診基礎(chǔ)上,采用證素辨證方法進(jìn)行辨證。參照“600常見癥狀的辨證意義”,制定四診信息采集表。參照楊敏等辨證方法,根據(jù)四診信息在診斷中的權(quán)重,以加權(quán)閾值法確定病理要素和證素。各辨證要素的診斷確定,以100作為通用閾值,各癥狀對(duì)各辨證要素貢獻(xiàn)度之和達(dá)到或超過100時(shí),即可診斷為這些辨證要素。辨證要素貢獻(xiàn)度之和<70歸為0級(jí),說明基本無病理變化;積分70-100歸為1級(jí),說明存在輕度病理變化;積分100-150歸為2級(jí),說明存在中度病理變化;積分≥150歸為3級(jí),說明存在嚴(yán)重病理變化。每一癥狀的輕重,以中等程度為準(zhǔn),若該癥狀重時(shí),其定量診斷值乘1.5,若該癥狀輕時(shí),乘0.7。2.誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)檢查2.1痰的誘導(dǎo)方法參照洪春霖等誘導(dǎo)痰實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法,受試者吸入200μg沙丁胺醇15min后,超聲霧化吸入3.5%高滲鹽水15min,每隔5min以及任何時(shí)間患者自覺有痰時(shí)囑其擤鼻涕、漱口后用力深咳,用帶有刻度的無菌干燥杯留取痰立即送實(shí)驗(yàn)室處理(或在4℃冰箱保存不超過2h)。2.2誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)痰標(biāo)本中加入等倍體積含有0.1%二硫蘇糖醇(DTT)的磷酸鹽緩沖液(PBS),渦旋振蕩混勻。待痰完全液化后,記錄痰液的容量。然后1500r/min離心10min,留取上清液待測(cè)。PBS溶液50mL懸浮沉淀,經(jīng)48μm篩網(wǎng)過濾雜質(zhì),再次離心棄去上清液,留取沉渣1mL。計(jì)數(shù)炎性細(xì)胞總數(shù)和鱗狀上皮細(xì)胞數(shù),用涂片離心機(jī)制作細(xì)胞涂片,瑞氏染色,油鏡下分類計(jì)數(shù)400個(gè)非鱗狀上皮細(xì)胞。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)痰積分用表示,多組間比較用單因素方差分析(One-wayANOVA),組間兩兩比較用LSD;誘導(dǎo)痰白細(xì)胞及其分類用中位數(shù)(四分位數(shù))表示,各組組間比較用KruskalWallisH,組間兩兩比較用Mann-WhitneyUtest。痰證素積分與誘導(dǎo)痰白細(xì)胞總數(shù)及其分類之間的相關(guān)性采用等級(jí)相關(guān)(Spearman)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。痰證素積分與誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)的關(guān)系1.痰證素積分與誘導(dǎo)痰白細(xì)胞總數(shù)及其分類見表1。3個(gè)級(jí)別痰證素積分比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);且不同級(jí)別之間誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)中中性粒細(xì)胞百分比、巨噬細(xì)胞百分比各組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而嗜酸性粒細(xì)胞百分比各組間比較1、2級(jí)顯著性高于3級(jí),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);淋巴細(xì)胞百分比各組間比較3級(jí)低于1、2級(jí),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01)。2.痰證素積分與誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)之間的相關(guān)性本研究中發(fā)現(xiàn)103例COPD穩(wěn)定期患者痰證素積分與誘導(dǎo)痰中性粒細(xì)胞百分比呈高度正相關(guān)(r=0.992,P=0.000<0.01);與巨噬細(xì)胞百分比、嗜酸性粒細(xì)胞百分比呈負(fù)相關(guān)(r=-0.779,P=0.000<0.01;r=-0.309,P=0.002<0.01),與淋巴細(xì)胞百分比無相關(guān)(r=-0.250,P=0.11>0.01),見圖1。copd穩(wěn)定期病理生理指標(biāo)及與誘導(dǎo)痰證素積分的關(guān)系痰是一種黏稠狀的病理產(chǎn)物,又是一種有形的致病因子。COPD以肺、脾、腎三臟虛損為主,為痰的產(chǎn)生提供了病理基礎(chǔ)。肺為水之上源,主通調(diào)水道,若外感六淫邪氣或他臟病變影響及肺,或久病肺虛,均可使肺失清肅,通調(diào)水道失司,水液不行,停聚為痰;脾主運(yùn)化水濕,子病及母,脾失健運(yùn)則水液不能布散而停滯為痰濁,痰濁上乘,蘊(yùn)貯于肺;久病腎虛不能溫化水濕,聚成痰濁。痰既為病理產(chǎn)物又為內(nèi)源性致病因素,“宿痰伏肺”是導(dǎo)致COPD反復(fù)發(fā)作,病程纏綿難愈的根本原因。本研究采用朱文鋒教授創(chuàng)立的“證素辨證”方法,朱教授認(rèn)為:證素為證的要素,指辨證所要辨別的位置和性質(zhì),證素是通過對(duì)癥候的辨識(shí)而確定的病理本質(zhì),是對(duì)“證”認(rèn)識(shí)的具體化,是構(gòu)成證名的基本要素,“證素辨證”是繼承傳統(tǒng)的各種辨證方法的精華,把握辨證的關(guān)鍵——病位、病性等證素,從而形成新的辨證方法。采用證素辨證和積分的方法研究疾病可以使病位和病性更客觀化和量化。本文研究COPD中醫(yī)病性證素痰的嚴(yán)重程度,并探討其與誘導(dǎo)痰中炎癥細(xì)胞的相關(guān)性。結(jié)果顯示103例COPD穩(wěn)定期患者100%均有病性證素痰,且積分均處于1級(jí)以上,而以2級(jí)所占比例最多,占總數(shù)的39.80%,這說明痰是穩(wěn)定期COPD重要的病理因素,并且存在不同程度的痰病理變化。相關(guān)研究表明,誘導(dǎo)痰在COPD氣道炎癥監(jiān)測(cè)中起著重要的作用,是一個(gè)較理想的指標(biāo)。本研究通過對(duì)COPD穩(wěn)定期患者進(jìn)行誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)檢查,結(jié)果顯示誘導(dǎo)痰細(xì)胞學(xué)中以中性粒細(xì)胞表現(xiàn)為主,占77.36%。中性粒細(xì)胞是COPD的主要?dú)獾姥装Y細(xì)胞,IL-8、LTB4等趨化因子可趨化中性粒細(xì)胞向肺組織浸潤(rùn),被活化的中性粒細(xì)胞通過釋放中性粒細(xì)胞彈性蛋白、MMPs和組織蛋白等而引起組織損傷和黏液高分泌,導(dǎo)致支氣管和肺實(shí)質(zhì)的多種病理改變,從而促進(jìn)COPD形成發(fā)展。本研究結(jié)果顯示,COPD穩(wěn)定期患者痰證素積分與誘導(dǎo)痰中的中性粒細(xì)胞呈正相關(guān),與巨噬細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)。這說明痰的病理程度越高,其氣道炎癥程度越嚴(yán)重,以指導(dǎo)臨床應(yīng)重視辨證化痰的治療以改善痰的病理機(jī)制,從而減輕氣道炎癥,為中醫(yī)從痰論治COPD提供理論依據(jù)。本研究結(jié)果還顯示痰證素積分1、2級(jí)組別中,嗜酸性粒細(xì)胞百分比顯著高于3級(jí)(P<0.05),且痰證素積分與誘導(dǎo)痰嗜酸性粒細(xì)胞之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.309,P<0.01)。K.Gorska等研究發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞不僅是支氣管哮喘的主要炎癥細(xì)胞,也存在于COPD患者中,在COPD疾病早期氣道炎癥中起著重要作用。PapiA等研究發(fā)現(xiàn)COPD穩(wěn)定